1. Los radicales libres y su papel en el equilibrio oxidativo celular.2. Patologías asociadas al estrés oxidativo.3. Efectos beneficiosos de los compuestos antioxidantes (Aox).4. Squalene, sus acciones Aox.

Dra. Felicia L. Rivera Megret

Master en Farmacología Experimental

PhD. en Ciencias Biológicas (Neurociencias)

PAPEL DE LOS ANTIOXIDANTES EN LASPATOLOGIAS HEMATOLOGICAS

DESEQUILIBRIO OXIDATIVO

Estrés oxidativo

RL = Aox.

Estado fisiológico

RL = Aox.

PATOLOGIAS ASOCIADAS AL ESTRÉS OXIDATIVO

•Psoriasis •Diabetes tipo I y II •Insuficiencia cardíaca crónica •Cancer•Patologías neurodegenerativas•Asma•Accidentes cerebrovasculares

Sistema de Defensas Antioxidantes (Aox)

Sistema de vitaminas (C,E, D y carotenos) y minerales (Mg, Zn, Mn, Se)

Glutatión

Enzimas Aox (SOD,CAT, la familia de glutation, á-tocoferol, ac. ascórbico

Compuestos Tioles (albúmina,Glutation, ac. Lipoico)

CitosolMembranacelular

Vit. E y D

Carotenos

AlbúminaGlutationAc. Lipoico

Mg, Zn, Mn, Se

Acciones de los antioxidantes

•Antioxidante scavenger de RL

•Antitumorales

•Antitrombòticos

•Antinflamatorios

•Antiapoptòticos

•Inhibidores de la agregaciòn plaquetaria

•Inhibidores de la lipoperoxidaciòn

•Quelantes de metales pesados

La capacidad antioxidante total del plasmaaumenta luego de la ingesta de:

•Dieta rica en frutas y vegetales•Frutilllas (240 g), espinaca (300g).•Dieta vegetariana•Dieta mediterránea (pescados)•Aceite de oliva•Vino tinto(1 copa pequeña diaria)•Tomate•Cebolla•Té verde

IMPORTANCIA DEL DOBLE ENLACE EN LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE

Scavenger:-catecol

-doble enlace (2-3)-OH (3)-oxo (4)

4’

OH3’

OH

7 5’

6’

2’

1’B

8

6

A C

1

oOH

3

2

OH5 4

oOH

O

O

H O

O H

O H

O H

OH

Estructura del flavonoide quercetina

QUERCETINA INDUCE APOPTOSIS EN CELULAS LEUCEMICAS HUMANAS

Células (HL60) leucémicas humanas yuna sub-linea resistente (HL60VCR)QUERCETINA

-Fragmentación de DNA-Estimulación de factores pro-apóptoticos (Bax)-Fosforilación del factor antiapoptótico (Bcl-2)

Muerte apóptotica

Quercetina es un potente regulador de la apoptosis, a través dela modulación de diversas moléculas de señalización intracelular.

Duraj y cols., (2005): Neoplasma Vol 4:273-279

PAPEL DEL GLUTATION (GSH) EN LA SENSIBILIDAD A LA APOPTOSIS

Células leucémicas humanasen cultivo, con bajos niveles de GSH

Muerte por Apoptosis

RL4-HPR

Agente antineoplásicosintético

(+)

(-)

Niveles de GSH intracelulares utilizando el ATRA (ácido retinoico trans-all)

Protegió el cultivo de célulasde la muerte por apoptosis

Terapia basada en inhibidores de GSH (+)4-HPR RL

Muerte apoptóticade las células leucémicas humanas

Morales y cols., 2005: Anticancer Research Vol 38:1945-1951

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y CITOTOXICA DE UN EXTRACTO LIOFILIZADO DE CERVEZA SOBRE UNA LINEA CELULAR LEUCEMICA

Liofilizado Mrt-HPContenido de polifenolesCapacidad antioxidante

Liofilizado Trt-LPContenido de polifenolesCapacidad antioxidante

Células LeucémicasHumanas (HL-60)

Citotóxica

No Citotóxica

Citometría de flujo evidenció la muerte apoptótica celular

Mrt-HP

Trt-LP

-Quercetina-Resveratrol

Tedesco y cols., (2005): Nutrition Cancer 52(1):74-83

EFECTO DE UN ANTIOXIDANTE SOBRE LA PROLIFERACIONY LA APOPTOSIS DE CELULAS LEUCEMICAS

AntioxidanteAn7845

(en forma dependientede la dosis)

provocó -Inhibición de la proliferación-Inducción de la apoptosis

Métodos de cuantificación:-Ensayo de MTT-Ensayo de formación de colonias

Células leucémicas humanas (K562) en cultivo

Song y He,( 2004): Zhong Nan Da Vol 3:257-260

ESTRUCTURA DEL SQUALENE

ACTIVIDAD ANTILEUCEMICA DE INHIBIDORES DE HMG-CoA

Lovastatina HMG-CoA(-)

HMG-CoAPrincipalenzima regulatoria

Ruta Mevalonato

Esteroides

Isoprenoides

Estructuramembranas

Funcionesproteínas

Ruta Mevalonato

ColesterolSqualeneLanosterolDesmosterol

Xia y cols., (2001): Leukemia Vol 15(9):1398-1407

ACTIVIDAD ANTILEUCEMICA DE INHIBIDORES DE HMG-CoA

Lovastatinaproduce Apoptosis de células de

Leucemia Mieloide AgudaHumana

HMG-CoA Papel limitante en el control de la Ruta Mevalonato

Inhibición

provoca

Esteroides

Respuestacompensatoriaprotectora

desencadena

ApoptosisInhibir

- Inhibición de GGPP, factor principal en provocar la apoptosis en la ruta- Colesterol y Squalene no afectaron la apoptosis

Xia y cols., (2001): Leukemia Vol 15(9):1398-1407

HIPOTESIS SOBRE EL MECANISMO ANTI-TUMORAL DEL SQUALENE

Consumo aceite de oliva

Ingestión dietaria Squalene

Sistema enzimático FPP(Farnesyl Pyrophosphate)

CrecimientoTumoral

Activaciónoncogenes

RASTumores dependientes del oncogenes RAS:-Colon- Mamaparticularmente el Adenocarcinoma pancreático

Kato, (1992): Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:6403-6407

RESULTAN POTENCIALES BLANCOS DEL SQUALENE

Newmark (1997): Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention, Vol 6:1101-1103

ONCOGENES RAS

citosol

oncogenesRAS

RAS(+)

traslocación Sistema enzimático FPP

- Destacar la vinculación del estrés oxidativo con la fisiopatología de algunas patologías

- Resaltar el papel de los compuestos antioxidantes como potenciales blancos terapéuticos, en las patologías relacionadas con el cáncer.

-Motivar el uso del antioxidante Squalene para preveniry tratar algunas patologías.

-Estimular el desarrollo de investigaciones clínicasencaminadas a estudiar nuevas posibilidades terapéuticas con la utilización del Squalene, quese traduzcan en beneficios para la salud humana.