PROGRAMA DE POSTGRADO PARA DOCENTES DE EDUCACIÓN MEDIA Y TERCER CICLO, ESPECIALIDAD BIOLOGÍA

PROCESO DE DIAFANIZACIÓN

SEDE SANTA ANA BIOLOGÍA

EXPOCIENCIA DEL POSTGRADO EN BIOLOGÍA SANTA TECLA, 10 DE DICIEMBRE

DIAFANIZACIÓN

PECES

ANFIBIOS

REPTILES

AVES

MAMIFEROS

ENTRE OTROS

ACLARAR LOS TEJIDOS DE UN ORGANISMO VERTEBRADO

PROCESO DURANTE UN PERIODO DETERMINADO,

QUE INCLUYE DIFERENTES ETAPAS

INTRODUCCIÓN

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OBJETIVO GENERAL

• Promover el interés, en los participantes sobre técnicas de laboratorio referidas a diafanización

OBJETIVO ESPECÌFICO

• Conocer los procesos que se siguen para colorear los huesos de un animal, sin utilizarla cirugía

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ESPECIMENES

• Conejos, ratones, murciélago, lagartija

• De 2-3 días de haber nacido

MATERIALES

• Envases de vidrio, según el tamaño del animal

• Pipeta, probeta, jeringas descartables, goteros

• guantes quirúrgicos

EQUIPO

• Equipo de disección (tijeras, pinza, estilete, bisturí,

• Balanza científica

MATERIALES

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PASOS

1-Preservación

o fijación

2-Clarificación o

diafanización 3-Coloración

4-Aplicación de soluciones de glicerina y

timol

PROCEDIMIENTO

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FIJACIÓN

• Formalina al 10%

• Formalina pura

CLARIFICACIÓN

• KOH al 3%.

• Agua destilada, agua oxigenada

COLORACION

• ROJO DE ALIZARINA

• Glicerina A,B,C y D, timol

REACTIVOS

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PRIMERA PARTE

PRESERVACION O FIJACION

SE SACRIFICA EL ANIMAL CON

FORMALINA

SE INYECTA FORMALINA AL

ANIMAL PARA SACRIFICARLO

MURCIELAGO POSA EN

SOLUCION DE FORMALINA AL

10%

EN DONDE PERMANECERÁ 2

SEMANAS

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EL RATONCITO POSA EN

FORMALINA AL 10% RATON TIERNO

Conejo permanece en solución

de HOK al 3% + 3 ml. de agua

oxigenada. Cada semana se

cambia la solución hasta

esclarecer los músculos y

observar los huesos

TERCERA PARTE

COLORACIÓN DE LOS ESPECIMENES

• Se colocan los especímenes en solución de

KOH al 3 % con UNAS GOTAS de Rojo de

Alizarina hasta obtener una coloración de

vino tinto-morado),

• esta solución se dejan durante 24- 48

horas, hasta que los huesos estén

coloreados.

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• 2-CLARIFICACIÓN DIAFANIZACIÓN

* El organismo previamente fijado, se deja durante 2 horas en agua corrida O SE ENJUAGA VARIAS VECES para después diafanizarlo.

• Luego se coloca el animal en la solucion de HOK al 3% agregar 3 ml. de agua oxigenada hasta esclarecer los músculos, ver los huesos

• Esta preparación se lleva varias semanas, según el animal. La solucion se cambia cada semana.

• Conejo- murciélago -lagartija = 5 a 6 semanas

• Ratón tierno 2 semanas

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INICIA DIAFANIZACION CONEJO TIERNO DE 2 DIAS DE HABER NACIDO

EN LA SOLUCION DE KOH AL 3 % + 3 ML. DE AGUA OXIGENADA

CONEJITO POSA EN LA SOLUCION DE KOH + H202 CUARTA VEZ QUE SE LE CAMBIA LA SOLUCION

EN LA SOLUCION DE KOH + ARIZALINA

SE ENJUAGO CON AGUA DESTILADA VARIAS VECES LUEGO SE INTRODUCE EN LA SOLUCION DE KOH, PARA ESCLARECER LOS MUSCULOS

EN LA SOLUCION DE

KOH, PARA

ESCLARECER LOS

MUSCULOS

VISTA SUPERIOR EN EL FRASCO

CASO MURCIELAGO EN SOLUCION DE

KOH+ ALISARINA

MURCIELAGO DENTRO DE LA

SOLUCION DE KOH+ ALIZARINA

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SE ENJUAGA EL ESPÉCIMEN CON AGUA DESTILADA Y SE COLOCAN EN LA

PRIMERA DE LAS 4 SERIES DE SOLUCIÓN DE GLICERINA, DONDE DEBEN ESTAR UNA SEMANA EN CADA UNA DE LAS SOLUCIONES.

CUARTA PARTE

SOLUCIÓN

A

B

C

D

GLICERINA

20ml

50ml

75ml

100 ml

KOH

3 ml

3ml

0 ml

0 ml

AGUADEST ILADA

77ml

47ml

25 ml.

0ml

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SOLUCION A

GLICERINA 20 ML

KOH 3 ML

AGUA DESTILADA 77 ML

SOLUCION B

GLICERINA 50 ML

KOH 3 ML

ADUA DESTILADA 47 ML

SOLUCION C

GLICERINA 75 ML

KOH O ML

AGUA DESTILADA 25 ML

MURCIELAGO EN

SOLUCION DE KOH AL 3%

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MURCIELAGO VISTA DE

PERFIL

MURCIELAGO VISTA DE

PERFIL 100 % GLICERINA

MURCIELAGO VISTA

SUPERIOR

RATON POSA EN LA SOLUCION DE

KOH 3% +3 ML DE AGUA OXIGENADA

AHORA EL RATONCITO SE ENJUAGA VARIAS

VECES CON AGUA DESTILADA

LUEGO SE APLICARAN LOS PROCESOS DE LAS

PARTES A, B, C Y D DE GLICERINA KOH, MÁS

AGUA DESTILADA

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SOLUCION A CASO RATONCITO

GLICERINA 20 ML

KOH 3 ML

AGUA DESTILADA 77 ML

SOLUCION B

GLICERINA 50 ML

VISTA SUPERFICIAL

KOH 3ML

ADUA DESTILADA 47 ML

RATONCITO 100 % GLICERINA

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RATONCITO 100%

GLICERINA

VISTA SUPERIOR RATONCITO 100% GLICERINA

RATONCITO 100% GLICERINA

VISTA SUPERIOR

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CONEJITO EN LA GLICERINA VISTA SUPERIOR

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LAGARTIJA EN LA GLICERINA VISTA SUPERIOR

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CONEJITO POSA EN LA SOLUCION DE 100% DE GLICERINA

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CARLOS GRANIELO Y

CARLO CABRERA

ESTUDIANTES DE LA ESMA OBSERVAN EL

RESULTADO FINAL DE LA DIAFANIZACION

CONEJITO EN LA GLICERINA

ADOLFO JEDUVEL RODRIGUEZ,

ESTUDIANTE DE LA ESMA

DA POR TERMINADO EL TRABAJO

DE INVESTIGACION CIENTIFICA

DIAFANIZACION

TRABAJO FINALIZADO

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ESTUDIANTES DE LA ESMA SANTA ANA