BIOQUÍMICA CLÍNICA Y DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO I

TECNOLOGÍA MÉDICA

DOCENTE: TM Mg CLAUDIA CASTILLO K

2011

OBJETIVOS DE APRENDIZAJEOBJETIVOS DE APRENDIZAJE

-Conocer las etapas del procedimiento de un examen en el laboratorio.

- Comprender la importancia de la toma de muestras.- Relacionar los conceptos de la etapa pre-analítica con

resultado obtenido.- Distinguir cuales son los puntos básicos en la etapa

Pre-analítica.

Función del Tecnólogo Función del Tecnólogo MédicoMédico

PREVENCIÓPREVENCIÓNN

INTERPRETAINTERPRETACIÓN DE LA CIÓN DE LA

INFORMACIÓINFORMACIÓNN

EVOLUCIÓNEVOLUCIÓN PRONÓSTICPRONÓSTICOO

DIAGNÓSTICDIAGNÓSTICOO

ETAPAS DE UN PROCESO

SISTEMAS DE GESTIÓN DE SISTEMAS DE GESTIÓN DE CALIDAD EN LOS PROCESOS CALIDAD EN LOS PROCESOS

DEL LABORATORIODEL LABORATORIO

RECEPCIÓN PACIENTE

TOMA DE MUESTRA

EQUIPAMIENTO

ARCHIVOS

INFORME DE RESULTADO

TRATAMIENTO DE MUESTRAS

ENSAYO

ELEMENTO DE ELEMENTO DE ENTRADAENTRADA

PACIENTE

PRODUCTOPRODUCTO

MUESTRA

La fase preanalítica es la que

ha mostrado

ser la mayor

fuente de errores en

el laboratori

o.

IMPORTANCIA EN LOS IMPORTANCIA EN LOS PROCEDIMIETOSPROCEDIMIETOS

ALTO IMPACTO EN LA CALIDAD DE ALTO IMPACTO EN LA CALIDAD DE LOS RESULTADOS.LOS RESULTADOS.PREPARACIÓN

CORRECTA DEL PACIENTE

OBTENCIÓN CORRECTA DE LA MUESTRA

SOLICITUD EXAMEN

CORRECTOTRANSPORTE

DE LA MUESTRA

MUESTRA PARA

ANÁLISIS IDENTIFICACIÓN CORRECTA

DE LA MUESTRA

ETAPAS DE CALIDADETAPAS DE CALIDAD

ETAPA ANALÍTICAETAPA ANALÍTICA

Carga de solicitudes

Lectura de código de barras

Dispensación de muestras

Dispensación de reactivos

Proceso analítico

Validación de resultados

ETAPA POST-ETAPA POST-ANALÍTICAANALÍTICA

Elaboración del informe

Verificación de resultados

Impresión del informe

Archivo de resultados

Almacenamiento de la muestra

La muestra en la etapa pre-analítica debe:

-Ser confiable en su identidad.

-Representativa.

-En condiciones analíticas para su ensayo.

PRE-ANALÍTICA:

-¿Cómo se obtiene una muestra correcta?

-¿Cómo identificamos inequívocamente la muestra?

-¿Cómo logramos la trazabilidad de las muestras en todo el proceso del laboratorio?

-¿Cuáles son los distintos tipos de muestras según los analitos a ensayar?

-¿Cuál es el uso correcto de anticoagulantes?

-¿Cuáles son los volúmenes correctos para cada caso?

-¿Qué recipientes se deben usar?

-¿Cuáles son los criterios para aceptar o rechazar una muestra?

-¿Cuál es la bioseguridad en el manejo de las muestras?

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

1.- ADMINISTRACIÓN1.- ADMINISTRACIÓN

2.- TOMA DE MUESTRA2.- TOMA DE MUESTRA

3.- MANEJO Y CONDICIONES DE LA 3.- MANEJO Y CONDICIONES DE LA MUESTRA MUESTRA

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

1.- ADMINISTRACIÓN1.- ADMINISTRACIÓN

a.-Recepción del paciente

b.-Preparación del paciente

c.-Indicaciones al paciente

d.-Identificación del paciente

PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-Condiciones administrativas y cumplimiento del pedido de análisis.

-Datos a preguntar al paciente según los análisis solicitados

- edad

- sexo

- diagnóstico

- medicación recibida

- fecha de última menstruación

- estudios previos

- Fecha de entrega de los resultados

Variabilidad biológica

RESULTANTE DE TODOS RESULTANTE DE TODOS LOS FACTORES QUE LOS FACTORES QUE

INTERACTÚAN EN Y ENTRE LOS INTERACTÚAN EN Y ENTRE LOS INDIVIDUOS Y DE ESTA INDIVIDUOS Y DE ESTA

MANERA CONDICIONAN EL MANERA CONDICIONAN EL ESTADO DE SALUD O ESTADO DE SALUD O

ENFERMEDAD.ENFERMEDAD.

Variabilidad biológica

Variabilidad analítica

RESULTANTE DE TODOS LOS RESULTANTE DE TODOS LOS FACTORES ANALÍTICOS QUE FACTORES ANALÍTICOS QUE

HACEN UN RESULTADO DIFERENTE HACEN UN RESULTADO DIFERENTE DE OTRO.DE OTRO.

VARIABILIDAD

BIOLÓGICA

INTRAINDIVIDUAL

INTERINDIVIDUAL

SISTEMÁTICO

ALEATORIO

•RITMOS BIOLÓGICOS•EDAD

•DIETA•CLIMA•ESTRÉS•METABOLISMO

POBLACIONAL

•EDAD-RAZA•CICLO MENSTRUAL•GESTACIÓN•LACTANCIA•MENOPAUSIA•ALIMENTACIÓN-OBESIDAD•EJERCICIO FÍSICO

Variabilidad biológica

- Hereditaria: factores congénitos

- Fisiológica: factores ambientales

- Reactiva: respuesta a la agresión

- Iatrogénica: secundaria a intervención médica.

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-EDAD: grupo etario.

RN

NIÑOS

ANCIANOS

ADULTOS

BT

Crea CHO

horm

horm

GliFA

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-SEXO

femenino masculino

Antes de la pubertad:FA,CK, GOT, GPT, Testosterona

Después de la pubertad:Fe, ferritina, CA, Mg, Crea

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-EMBARAZO

DILUCIÓN

Producido por un aumento del volumen plasmático

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-ESTACIÓN

Vitamina D

Aumento de la concentración en verano

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-ALTURA

Hemoglobina

Aumenta con la altura

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

a.- Recepción del paciente:

-ESTILO DE VIDA

- Dieta- Consumo de café

- Consumo de alcohol- Tabaco

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:Medicamentos:

- interferencia in vivo

interferencia biológica

- interferencia en vitro

interferencia analítica

AYUNO

MEDICAMENTOS

DIETAEJERCICIO

HORMONAS STRESS

POSTURA

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

- Niveles Plasmáticos De Drogas

- Preparación previa del paciente: Ayuna de la droga a medir

- Instrucción Niveles Mínimos Y Máximo De Acido Valproico

 1.-Tomar una muestra de sangre venosa con el paciente en ayunas (08:00 – 09:00 hrs)

2.-Administrar la droga en la dosis que corresponda al paciente

Esperar 2 a 3 horas como máximo, manteniendo al paciente en total ayuno, y tomar una nueva muestra de sangre venosa (10:00 a 11:00 hrs)

VARIABILIDAD PRE-ANALÍTICA:

b.- Preparación del paciente:

-Punto crítico en la calidad del resultado del análisis

-Se debe determinar por escrito y claramente las condiciones especiales y la forma en que se entregará al paciente las indicaciones de preparación.

AYUNO:

Se recomienda ayuno 8 horas previo a la extracción de sangre.

Para el perfil lipídico se requiere entre 12 a 14 horas de ayuno.

Algunas determinaciones necesitan dieta especial previo a la toma de los exámenes.

Preparación del paciente:

Dieta

- Colesterol

- Glicemia

- Bilirrubina

- Dieta vegetariana: perfil lipídico, vitamina B12

TIEMPO DE APLICACIÓN DEL TRONIQUETE:

Se recomienda 1 a 2 minutos.

Tiempos prolongados pueden producir hemoconcentración.

PACIENTES CON VÍAS:

Extraer en el brazo opuesto de la vía.

Si se extrae con catéter, eliminar 2 mL.

EJERCICIO INTENSO:

Pueden aumentar valores de.

-Creatinina quinasa (CK)

-Lactato deshidrogenasa (LDH)

-Aspartato aminotransferasa (AST)

-Activa la coagulación

-Fibrinólisis

-Plaquetas

ANTICOAGULANTES:

Tipo de tubo a utilizar en la toma de muestras.

Interferencias con algunas determinaciones.

Relación de anticoagulante/volumen.

INTERFERENCIAS EN LAS INTERFERENCIAS EN LAS DETERMINACIONESDETERMINACIONES

HEMÓLISIS

ICTERICIALIPEMIA

ANTICUERPOS

HETERÓFILOS

FÁRMACOS

Ritmos biológicos:

- ritmos circadianos

- ritmos menstruales

- otros ritmos biológicos

Variación diurna: CORTISOL- PROLACTINA-

HORMONA DEL CRECIMIENTO

Variación mensual: FSH- LH- progesterona.

Variación estacional: vitamina D- calcio.

Cortisol > 4-6AM;<8 que 12 AM;50% más bajo 8 PM que 8 AM

Hormona Adrenocorticotrófica (ACTH)

Incrementa con el stress, más bajo en la noche

Actividad renina plasmática Más alto parado que en posición supino, más bajo en la noche

Aldosterona más bajo en la noche

Insulina más bajo en la noche

Hormona del crecimiento Más alto en la mañana

Fosfatasa ácida Más alto en la mañana

Tiroxina (T4) Aumenta con el ejercicio

Prolactina Aumenta con el stress, aumenta los niveles a las 4 y 8 AM,y a las 8 y 10 PM

Preparación del paciente:

Stress:

- Induce la producción de ACTH, catecolaminas, cortisol.

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

c.-Indicación al paciente:

- toma de muestras

- protocolo de indicación

- dar por escrito

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

c.-Identificación del paciente:

- La identificación de este procedimiento debe ser con un 0% de 0% de error.error.

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

c.-Identificación del paciente:

- Informático

- Escrito

CON EL FIN DE EVITAR ERRORES EN LA TRANSCRIPCIÓN DEL NOMBRE

DEL PACIENTE.

c.-Identificación del paciente:

- NOMBRES

- APELLIDOS

- RUT

- FECHA DE NACIMIENTO

- EDAD

- SEXO

- FECHA Y HORA DE INGRESO

- FIRMA DE CONSENTIMIENTO

- CONFIDENCIALIDAD

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

2.- Toma de muestra:2.- Toma de muestra:

-Sangre

-Identificación

-Técnicas de extracción

-Normas de bioseguridad

-Otras muestras

- identificación

- Formas de recolección

- Indicaciones al paciente

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

2.- Toma de muestra:2.- Toma de muestra:

- Técnicas de extracción sanguínea:

-Jeringa

-Venoject

-Aguja

-Mariposa

necesidades

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

2.- Toma de muestra:2.- Toma de muestra:

- Técnicas de extracción sanguínea:

-Muestra venosa

-Muestra arterial

-Muestra pediátrica

-Muestra RN

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

2.- Toma de muestra:2.- Toma de muestra:

- Normas de bioseguridad

- OMS

- OSHA (Occuptional Safety and Health Administration)

http://www.osha.gov/pls/oshaweb/owadisp.show_document?p_table=NEWS_RELEASES&p_id=17064

Qué tubos utiliza para tomar una muestra cuyos examen solicitados son:

-- Perfil Bioquímico

- Perfil Lipídico

- Perfil Tiroideo

- Perfil hepático

- Hemograma

- Tiempo de Protrombina

- Tiempo de Tromboplastina

- Grupo y Rh

Soporte o adaptador para

agujas

Tapa color Indicador

Sistema Vacío

SISTEMA AL VACÍO

Aguja parapunción al vacío

Válvula de seguridad

Etiqueta

Tubo estéril

CÓDIGO INTERNACIONALCÓDIGO INTERNACIONAL

CÓDIGO INTERNACIONALCÓDIGO INTERNACIONAL

Stopper color

Anticoagulant/additive Specimen type/useMechanism of action

Red (glass) None Serum/chemistry and serology

N/A

Red (plastic/Hemogard)

Clot activator Serum/chemistry and serology

Silica clot activator

Lavender (glass)

K3EDTA in liquid form Plasma/hematology Chelates (binds) calcium

Pink Spray-dried K2EDTA Plasma/blood bank Chelates (binds) calcium

White EDTA and gel Plasma/molecular diagnostics

Chelates (binds) calcium

Light blue Sodium citrate Plasma/coagulation Chelates (binds) calcium

Light green/black

Lithium heparin and gel Plasma/chemistry Inhibits thrombin formation

Green Sodium heparin, lithium heparin

Plasma/chemistry Inhibits thrombin formation

Royal blue Sodium heparin, Na2EDTA Plasma/chemistry/toxicology

Heparin inhibits thrombin formation

Na2EDTA binds

calciumGray Sodium fluoride and lithium

iodoacetatePlasma/glucose testing Inhibits glycolysis

Yellow/gray and orange

Thrombin Serum/chemistry Clot activator

Red/gray and gold

Clot activator separation gel

Serum/chemistry Silica clot activator

Anticoagulantes

EDTA (ácido etilen-diamino-tetra-EDTA (ácido etilen-diamino-tetra-acético)acético)

Sal de presentación disódica (Na2 EDTA) o Tripotásica (K3 EDTA)Su acción a través de un efecto quelante sobre el calcio. De preferencia se utiliza K3 EDTA ya que es más soluble.Este anticoagulante es utilizado principalmente para estudios de células sanguíneas (hematología). La concentración utilizada en hematología es de 1-2 mg/ml de sangre.También se utiliza para el estudio fisicoquímico de líquidos (sinovial, cefalorraquídeo, pleural, etc.) y Hemoglobina Glicosilada (Hb A1C).

AnticoagulantesCitrato de Sodio Citrato de Sodio

Actúa a través de la precipitación de calcio. Se emplea en forma de solución de citrato trisódico 0.106 M (31.3 g/lt de 6H5O7 Na3 x 2H2O o 38 g/lt de C6H5O7 Na3 x 11 H2O).La proporción de anticoagulante: sangre depende de la prueba que se va a realizar:

Estudios de coagulación: 1:9 (1 mL de citrato de sodio: 9 mL de sangre).Determinación de VHS (velocidad de sedimentación): 1:4 (1 ml de citrato de sodio: 4 ml de sangre).

AnticoagulantesHeparinaHeparina

Es una antitrombina.Tiene el inconveniente de que si no se mezcla uniforme e inmediatamente con la sangre extraída pueden formarse microcoágulos. La concentración utilizada es de 5 – 10 UI/ml (1 mg =130 UI= mantienen 5 a 10 ml de sangre sin coagular).Su presentación puede ser de sodio o litio.La heparina de litio se utiliza para estudios en bioquímica clínica.

AnticoagulantesFluoruro de sodio – oxalato de Fluoruro de sodio – oxalato de

potasiopotasio

El fluoruro de sodio se utiliza como inhibidor de la glicólisis y se combina con el oxalato de potasio por la acción anticoagulante (precipita el calcio). Este anticoagulante se utiliza para la determinación de glicemia, cuando la muestra no puede ser procesada dentro de un plazo prudente (1-2 horas) y también para la determinación de lactato y alcoholemia. Oxalato de potasioOxalato de potasioOcasionalmente se utiliza para la determinación de glucosa.

Anticoagulantes

- EDTA (ácido etilen-diamino-tetra-acético)

- K2 EDTA (di-potásico)

- K3 EDTA (tri-potásico)

- Citrato de sodio

- 3.2%

- 3.8%

- Heparina

- de litio

- de sodio (terapia anticoagulante)

Quelantes

De calcio

Previene formación de fribina

Anticoagulantes

- Fluoruro de sodio

- Iodoacetato de litio

- Silica gel

Previenen glicólisis

-activador de coagulación

- separador

PRE-ANALÍTICA:PRE-ANALÍTICA:

3.- Manejo y condiciones de 3.- Manejo y condiciones de muestras:muestras:

-Tipo de muestras

-Criterios de aceptación y rechazo

-Traslado de muestras

-Conservación

Tipo de muestras:

- sangre

- orina

- deposición

- líquido cefaloraquídeo

- líquido sinovial

- líquido pleural

Tipo de muestras:

- orina

- química

- microscopía

- microbiología

Técnicas de recolección:

- 1° chorro - sonda

- 2° chorro - catéter

- aislada - recolector

- 12 horas

- 24 horas

Tipo de muestras:

- preservantes de orina

- fluoruro de sodio: glucosa

- ácido bórico: estrógeno, estradiol

- ácido clorhídrico: catecolaminas

None (refrigerate) Amino acids, amylase, chloride, copper, creatinine, delta ALA, glucose, heavy metals (arsenic, lead, mercury), histamine, immunoelectrophoresis, lysozyme, methylmalonic acid, microalbumin, mucopolysaccharides, porphobilinogen, porphyrins, potassium, prote

10 g boric acid Aldosterone, cortisol10 mL 6N HCL Calcium, catecholamines, citrate, cystine, 5-HIAA, homovanilic acid, hydroxyproline,

magnesium, metanephrines, oxalate, phosphorus, VMA

0.5 g sodium fluoride Glucose

Líquido cefaloraquídeo:

- tubos estériles

TUBO # 1: microbiología

TUBO # 2: química

TUBO # 3: citológico

Líquido sinovial:

- técnica de aspiración con jeringa

- anticoagulantes:

- heparina de sodio

TUBO # 1: microbiología

TUBO # 2: química

TUBO # 3: citológico

Líquido pleural:

- técnica aséptica

TUBO # 1: microbiología

TUBO # 2: química

TUBO # 3: citológico

CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS:CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS:

-HEMÓLISIS

-LIPEMIA

-COÁGULO PRESENTE EN UNA MUESTRA CON ANTICOAGULANTE

-AYUNO DEL PACIENTE

-TUBO INCORRECTO

-VOLUMEN DEL TUBO DE MUESTRA

-CONDICIONES DE TRANSPORTE INADECUADO

-DISCREPANCIAS ENTRE MUESTRA, DIAGNÓSTICO Y RESULTADO

Traslado de muestras:

- tiempo de traslado

- agitación de los tubos

- exposición a la luz

- temperatura de transporte

- stock

MUESTRA POTENCIALMENTE MUESTRA POTENCIALMENTE INFECCIOSAINFECCIOSA

Trasporte de muestras:

- tiempo

- agitación de los tubos

- temperatura de transporte

- medidas de seguridad

- señales de seguridad

Conservación de las muestras

- denaturan proteínas

- elementos volátiles

- evaporación

- hemoconcentración del suero o plasma

- actividad metabólica de células

La conservación depende del La conservación depende del analitoanalito

Conservación de las muestras

- Glicemia

- Colesterol, HDL-colesterol, LDL colesterol, albúmina, bicarbonato, cloro, proteínas totales, hierro.

- Actividad enzimática

PROCESAMIENTO DE LAS MUESTRAS

Pre-centrifugación

Centrifugación

Post-centrifugación

Pre-centrifugación

- entre 45 – 1 hora de la recolección

- alícuotas

- 5 minutos a 3.500 r.p.m.

- 10 minutos a 3.500 r.p.m.

- 15 minutos a 3.000 r.p.m.

- 5 minutos a 1.000 r.p.m.

Centrifugación

PRODUCTO

MUESTRA