Post on 30-Apr-2020
PRINCIPIOS EXPERIMENTALES EN PRODUCCIÓN ANIMAL
1. Conceptos básicos
2. Replicar y aleatorizar
3. Fases de un experimento
4. Planificación de la investigación
5. Prevención y seguridad
6. Principios éticos
Planificación de la investigación
Proyecto de investigación:
- Esfuerzo organizado de un grupo de científicos para adquirir conocimientos sobre un fenómeno natural o artificial.
- El proyecto completo requiere de muchos estudios individuales, cada uno con objetivos específicos.
- Cada estudio individual responde a preguntas y proporciona piezas que en su conjunto satisfacen las metas del proyecto.
planificación de la investigación
Conceptos básicos
Experimento:
- Aplicación controlada de un conjunto particular de circunstancias a un conjunto de unidades muestrales.
Experimento comparativo:
- Se aplica más de un conjunto de circunstancias.
- Se comparan las respuestas de las unidades muestrales.
Tratamientos:
- Son el conjunto de circunstancias creadas para el experimento.
- Responden a la hipótesis de investigación.
conceptos básicos
Unidad experimental:
- La entidad física, el sujeto, el animal, etc. expuesto al tratamiento.
- La unidad experimental constituye una sola réplica del experimento.
- Pueden ser caracoles, cajas de caracoles, cultivos celulares, explotaciones, etc.
Error experimental:
- Describe la variación entre las unidades experimentales tratadas de manera idéntica e independiente.
conceptos básicos
Error experimental:
- Describe la variación entre las unidades experimentales tratadas de manera idéntica e independiente.
- Origen de error:
- Variación natural entre las unidades experimentales
- Variabilidad en la medición de la respuesta
- Imposibilidad de reproducir exactamente las mismas condiciones en las unidades experimentales
- Interacción entre el tratamiento y las unidades
- Cualquier otro factor que incida en las variables medidas
conceptos básicos
Estudios por observación (encuestas):
- No se puede hacer un experimento por razones éticas o prácticas.
- P.e.: No se puede analizar experimentalmente el efecto del cinturón de seguridad sobre la gravedad de las lesiones en adultos.
- P.e.: No se puede analizar el efecto del cese de las ayudas sobre la producción ecológica de leche de vaca.
- Las unidades experimentales existen en sus circunstancias particulares.
- El investigador se limita a asociar las relaciones entre las respuestas y las condiciones de las unidades experimentales.
conceptos básicos
La hipótesis de investigación- Establece un conjunto de circunstancias y sus consecuencias.
- Los tratamientos reproducen las diferentes circunstancias de la hipótesis y su aplicación permite conocer las consecuencias.
P. e.: Hipótesis: La temperatura de almacenamiento no afecta la conservación del ensilado de maíz.
Tratamientos: Se estudia la estabilidad química-nutricional del ensilado de maíz a 0ºC, 10ºC, 20ºC, 30ºC y 40ºC.
P.e.: Hipótesis: Los caracoles prefieren descansar en zonas iluminadas.
Tratamientos: Se estudia la preferencia en zonas iluminadas frente a iluminadas, oscuras frente a iluminadas y oscuras frente a oscuras.
conceptos básicos
Tratamientos de control:
- Es un punto necesario para evaluar el efecto de los tratamientosexperimentales.
- No siempre es útil y necesario.
- Se utilizan cuando las condiciones experimentales son un obstáculo para demostrar la efectividad de los tratamientos.
- Control blanco:
- Las unidades experimentales se someten a las condiciones experimentales pero no reciben tratamiento.
- Se usan para determinar niveles basales con los que comparar los tratamientos (p.e. fertilizantes, antibióticos, etc.)
- Se usan para indicar el efecto de manipular la unidad experimental (p.e. preferencias, vacunas, etc.)
conceptos básicos
- Control positivo:
- Las unidades experimentales se someten a las condiciones que precisamente provocan el efecto deseado.
- Se usan para demostrar el no efecto mediante comparación con los tratamientos.
- P. e. Evaluación de un antibiótico
conceptos básicos
Factores y niveles:
- Un factor es un grupo específico de tratamientos
- Las diversas categorías de cada factor se denomina niveles
- P.e.
- Temperatura de almacenamiento del ensilado de maíz
- Factor: temperatura
- Niveles: 10, 20, 30 y 40 ºC
- Tratamientos: 10, 20, 30 y 40ºC
- En los sistemas naturales es difícil aislar unos factores de otros.
- Además, los factores suelen interactuar unos con otros.
- P.e. Hipótesis: La bacteria Rizobium fija nitrógeno de modo diferente según el suelo sea salino, sódico o normal.
conceptos básicos
Factores y niveles:
- P.e. Hipótesis: La bacteria Rizobium fija nitrógeno de modo diferente según el suelo sea salino, sódico o normal.
- Podemos plantear un factor (salinidad)
- Tres niveles (salino, sódico y normal)
- Tres tratamientos (salino, sódico, normal)
- Sabemos que hay otros factores con efecto sobre el nitrógeno fijado, entre los que destaca la humedad del suelo y la temperatura.
- Diseño factorial:
- Dos factores (salinidad y temperatura)
- Tres niveles (salino, sódico y normal) x (20, 30, 40ºC)
- 9 tratamientos (sa20, sa30, sa40, no20, no30, no40, so20, so30, so40).
conceptos básicos
Control de errores experimentales:- Los objetivos experimentales suelen ser conseguir comparaciones
claras y exactas entre tratamientos.
- Para su consecución es fundamental:
- Medir las variables con precisión
- Aplicar poderosas pruebas estadísticas
- Reducir la varianza del error experimental (controlando o reduciendo el error)
- Control de la técnica
- Selección de las unidades experimentales
- Uniformidad de todos los tratamientos (bloquización)
- Selección del diseño experimental
- Medición de covariables
conceptos básicos
Control de la técnica:- Todas las técnicas a utilizar en el experimento (mediciones,
preparación de alimento, soluciones, reactivos, etc.) incrementan el error.
- La aplicación de las técnicas debe ser uniforme.
- Para minimizar el error hay que utilizar el menor número posible de técnicas y las más precisas, dentro del presupuesto de la investigación.
- Idem con las personas que aplican las técnicas.
- Si el error es aleatorio el problema es menor que si el error sigue un patrón.
- Por ejemplo, la digestibilidad in vivo es más precisa que la digestibilidad por marcadores, pero requiere la recolección del total de heces.
conceptos básicos
Selección de unidades experimentales uniformes:- Las unidades experimentales heterogéneas incrementan el error
experimental.
- Es necesario utilizar unidades experimentales lo más homogéneas posible, pero representativas del colectivo a inferenciar.
- Por ejemplo, para estudiar la digestibilidad de un alimento en vacas lecheras, habrá que seleccionar:
- Raza - Holstein frisian
- Número de lactaciones - 2º lactación
- Estado fisiológico - secas y vacías
- Perfil genético - medio hermanas de padre
conceptos básicos
Bloquización:- Proporciona control local del ambiente para reducir el error
experimental.
- Las unidades experimentales se agrupan para que su variabilidad dentro de los grupos sea menor que entre las unidades antes de agruparlas.
- Por ejemplo: medir la productividad de tres variedades de trigo:
conceptos básicos
Bloquización:- Proporciona control local del ambiente para reducir el error
experimental.
- Las unidades experimentales se agrupan para que su variabilidad dentro de los grupos sea menor que entre las unidades antes de agruparlas.
- Por ejemplo: medir la productividad de tres variedades de trigo:
conceptos básicos
Bloquización:- Proporciona control local del ambiente para reducir el error
experimental.
- Las unidades experimentales se agrupan para que su variabilidad dentro de los grupos sea menor que entre las unidades antes de agruparlas.
- Por ejemplo: medir la productividad de tres variedades de trigo:
conceptos básicos
A
A
A
B
B
B
C
C
C
Bloquización:- Proporciona control local del ambiente para reducir el error
experimental.
- Las unidades experimentales se agrupan para que su variabilidad dentro de los grupos sea menor que entre las unidades antes de agruparlas.
- Por ejemplo: medir la productividad de tres variedades de trigo:
conceptos básicos
A
B
C
A
B
C
A
B
C
Bloquización:- Identificar todas las posibles variables no controlables que
incrementen el error (factores de bloqueo) y bloquear con ellas.
- El número de unidades experimentales crece con los factores de bloqueo.
- Todos los tratamientos deben ocurrir el mismo número de veces en cada bloque.
- El bloqueo aisla la variación entre tratamientos de la variación entre ambientes.
- Posibles factores de bloqueo:
- Investigadores: unos son más precisos y constantes que otros.
- Camadas: hay animales que nacen con más peso que otros.
- Animales: estado fisiológico, edad, peso, etc.
- Temperatura: hay zonas del laboratorio con mayo temperatura.
- Etc, etc.
conceptos básicos
Selección del diseño:- El diseño es el modo de disponer las unidades experimentales para
controlar el error experimental y acomodar los tratamientos.
- El objetivo debe ser lograr la máxima información y exactitud con el uso más eficiente de los recursos disponibles.
- Diseño totalmente aletorizado: los tratamientos asignan a las unidades experimentales al azar.
- P.e. Efecto de un probiótico en el pienso de lechones ibéricos:
conceptos básicos
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2 Lechón 3 Lechón 4 Lechón 5 Lechón 6
Lechón 7 Lechón 8
- Diseño totalmente aletorizado: los tratamientos asignan a las unidades experimentales al azar.
- Este diseño proporciona poco control sobre el error, en el caso de trabajar con animales.
conceptos básicos
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2 Lechón 3 Lechón 4 Lechón 5 Lechón 6
Lechón 7 Lechón 8
- Bloquización totalmente aleatoria: Aisla el efecto del animal y el efecto del probiótico.
- Por ejemplo: Idem que el caso anterior pero con el peso al nacimiento como factor de bloqueo:
conceptos básicos
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2 Lechón 3 Lechón 4 Lechón 5 Lechón 6
Lechón 7 Lechón 8
conceptos básicos
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2
Lechón 3 Lechón 4
Lechón 5Lechón 6
Peso mayor
Peso menor
Lechón 7
Lechón 8
conceptos básicos
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2
Lechón 3 Lechón 4
Lechón 5Lechón 6
Lechón 7
Lechón 8
Replicar para obtener experimentos válidos- La replica de un experimento es el primer requisito para obtener
resultados válidos.
- Replicar es aplicar de manera independiente a dos o más unidades experimentales el mismo tratamiento.
- Por ejemplo:
replicar y aleatorizar
Lechón 1
A (probi.) B (control)
Lechón 2 Lechón 3 Lechón 4 Lechón 5 Lechón 6
Lechón 7 Lechón 8
¿Por qué replicar?- Demuestra que, al menos en las condiciones experimentales, se
pueden reproducir los resultados.
- Proporciona seguridad en los resultados frente a accidentes no previstos.
- Proporciona la información para estimar la varianza del error experimental.
- Aumenta la precisión en la estimación de las medias de cada tratamiento.
replicar y aleatorizar
Unidades experimentales vs unidades de observación- La unidad de observación puede no equivaler a la unidad experimental.
- Por ejemplo, la unidad de observación puede ser una muestra de la unidad experimental:
- Plasma, si analizamos el nivel sanguíneo de colesterol.
- Muestras de plantas si analizamos la productividad de tres variedades de trigo:
replicar y aleatorizar
A
B
C
A
B
C
A
B
C
Unidades experimentales vs unidades de observación- La varianza de las unidades de observación son una medida válida de
la varianza del error experimental.
- OJO muchas veces se utiliza las múltiples observaciones de la misma unidad experimental como medida del error experimental de modo incorrecto.
- Por ejemplo: Efecto de dos piensos sobre el crecimiento de lechones ibéricos
replicar y aleatorizar
- Por ejemplo: Efecto de dos piensos sobre el crecimiento de lechones ibéricos
Lechonera 1 (Pienso A) Lechonera 2 (Pienso B)
Factor: Pienso
Niveles: 2 (A y B)
Tratamientos: 2 (A y B)
Unidades experimentales: 12 lechones (6A x 6B)
Variable de respuesta: Incremento de peso (P2 –P1)
replicar y aleatorizar
3
6
2
5
1
4
9
12
8
11
7
10
Lechonera 1 (Pienso A) Lechonera 2 (Pienso B)
Prueba t para comparar ambas medias (incremento de peso con A y con B)
A = 100 B = 250
¿Hay forma de descartar el error por el efecto de la lechonera?
¿qué está pasando?
replicar y aleatorizar
3
6
2
5
1
4
9
12
8
11
7
10
Lechonera 1 (Pienso A) Lechonera 2 (Pienso B)
Factor: Pienso
Niveles: 2 (A y B)
Tratamientos: 2 (A y B)
Unidades experimentales: 12 lechones (6A x 6B)
Variable de respuesta: Incremento de peso (P2 –P1)
replicar y aleatorizar
3
6
2
5
1
4
9
12
8
11
7
10
Lechonera 1 (Pienso A) Lechonera 2 (Pienso B)
Factor: Pienso
Niveles: 2 (A y B)
Tratamientos: 2 (A y B)
Unidades experimentales: 2 unidades (Lechonera 1 y Lechonera 2)
Variable de respuesta: Incremento de peso (P2 –P1)
Los lechones son unidades de observación en este caso
replicar y aleatorizar
3
6
2
5
1
4
9
12
8
11
7
10
¿Cuál sería el diseño correcto?
Lechonera 1 Lechonera 2 Lechonera 3 Lechonera 4
(Pienso A) (Pienso B) (Pienso A) (Pienso B)
Factor: Pienso
Niveles: 2 (A y B)
Tratamientos: 2 (A y B)
Unidades experimentales: 4 lechoneras (2A x 2B)
12 unidades de observación (12 lechones)
Variable de respuesta: Incremento de peso (P2 –P1)
replicar y aleatorizar
21
35
4
68
7
911
10
12
¿Cuántas réplicas?
- Mientras más mejor; siempre que sean completas.
- Depende de 4 factores:
- La varianza (lo incrementa)
- El tamaño de la diferencia entre las medias a separar (lo disminuye)
- En nivel de significación (a < 0,05) (lo incrementa)
- La potencia de la prueba (1 – b) (lo incrementa)
replicar y aleatorizar
Aleatorizar para tener inferencias válidas- Alatorizar es la asignación al azar de los tratamientos a las unidades
experimentales.
- La aleatorización proporciona estimaciones válidas de la varianza del error.
- Cualquier tipo de proximidad puede producir respuestas correlacionadas: por la localización física, por el desempeño de las tareas experimentales, etc.
- Por ejemplo: Una prueba de digestibilidad: si no se aleatoriza, se pueden obtener respuestas correlacionadas con un patrón sistemático:
- Recogida de heces
- Suministro de alimento
- Etc.
replicar y aleatorizar
Fases de un experimento.1. Planteamiento de la hipótesis
2. Diseño del experimento
3. Protocolo del experimento
4. Realización del experimento
- Seguimiento del protocolo
- Recogida de la información
5. Análisis de los resultados
6. Interpretación y discusión de los resultados
7. Extracción de las conclusiones
8. Difusión de los resultados y conclusiones
fases de un experimento
Planificación de la investigación
Proyecto de investigación.
- Esfuerzo organizado de un grupo de científicos para adquirir conocimientos sobre un fenómeno natural o artificial.
- El proyecto completo requiere de muchos estudios individuales, cada uno con objetivos específicos.
- Cada estudio individual responde a preguntas y proporciona piezas que en su conjunto satisfacen las metas del proyecto.
- La buena planificación es fundamental para organizar las tareas que requiere cada estudio individual.
- Facilita la toma de decisiones críticas.
planificación de la investigación
Por ejemplo:
- Un científico quiere mejorar el método normal para evaluar el crecimiento de los caracoles terrestres.
- Aunque existía un método estándar aceptable, planteado por sus colegas y definido de forma rígida
- Planteó la hipótesis de que la medición por fotogrametría era más eficiente en términos de tiempo, precisión y bienestar
- Un examen de la hipótesis requiere un estudio para determinar si la medición fotogramétrica es más eficiente que la medición estándar.
- Decisiones críticas: número de caracoles a medir con ambas técnicas, tamaño de los caracoles, número de personas que van a efectuar las mediciones, número de replicaciones, quévariables registrar (además del tamaño) y qué análisis efectuar.
planificación de la investigación
Planes documentados (Protocolo)
- Desarrollar un plan por escrito es fundamental.
- Previene omisiones graves.
- Permite insertar o eliminar información relacionada con los detalles específicos.
- Clarifica el papel que cada investigador debe cumplir
- Seguir el protocolo minimiza errores humanos.
- En algunas instituciones es necesario aprobar el protocolo por el comité competente (promotor, director de la institución, etc.).
- Las modificaciones o desviaciones del protocolo deben ser identificadas, fechadas, documentadas y conservadas junto con los datos del estudio.
planificación de la investigación
Protocolo- Objetivo del estudio
- Identificación, teléfono y correo del director y de todos los investigadores participantes.
- Diseño experimental
- Identificación de los factores que influyen: cuales son variables y cuales son constantes
- Variables e medir
- Desarrollo cronológico
- Todos los métodos y sus materiales
- Frecuencia y condiciones de la toma de datos
- Plan de trabajo
- Instrumento para la recolección de datos e instrucciones
planificación de la investigación
Por ejemplo:- Objetivo: Validación de una metodología fotogramétrica para la
medición de caracoles terrestres
- Lugar de trabajo: Módulo de helicicultura de la Granja Universitaria de Rabanales
- Investigadores:
- José Perea (665321283 pa2pemuj@uco.es) Director del estudio
- Antón García (600616686 pa1gamaa@uco.es)
- Francisco Peña (654234542 pa1peblf@uco.es)
- Diseño experimental:
- Animales:
- A partir de 3,000 caracoles recién nacidos
- Selección aleatoria de 600
- Distribución aleatoria en 10 cajas de 60 caracoles
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Cajas: de plástico traslúcido de 30x15x15
- Condiciones ambientales y de manejo:
- Condiciones controladas de laboratorio con dos fases
- Fase diurna: de 8 a.m. a 8 p.m.
- Iluminación
- Humedad relativa entorno a 80%
- Temperatura entorno a 25 ºC
- Fase nocturna: de 8 p.m. a 8 a.m.
- Oscuridad
- Humedad relativa entorno a 95%
- Temperatura entorno a 19 ºC
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Manejo:
- 8 a.m.:
- Encender luces laboratorio
- Retirar el alimento sobrante
- Limpiar las cajas con agua y jabón
- Revisar las cajas y eliminar los muertos
- Humidificar las cajas
- Apagar el humidificador
- Cambiar el termostato a 25 ºC
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Manejo:
- 8 p.m.:
- Apagar luces laboratorio
- Suministrar y humidificar el alimento
- Encender el humidificador
- Cambiar el termostato a 19 ºC
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Cronograma:
- La experiencia tendrá una duración de 7 semanas, desde el día … al día ….
- EXACTITUD: Cada viernes se van a medir todos los caracoles:
- Con escalímetro (mm), metodología estándar
- Con fotogrametría (mm), medición a validar
- Las mediciones las hace José Perea
- Descripción del proceso de medición con escalímetro
- Materiales para la medición: escalímetro, hoja de datos
- Descripción del proceso de medición con fotogrametría
- Materiales para la medición: cámara de fotos, ordenador, regla, AutoCAD
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Cronograma:
- PRECISIÓN: Cada lunes se van a medir 5 caracoles de cada caja, 5 veces, por 3 personas diferentes:
- Con escalímetro (mm), metodología estándar
- Con fotogrametría (mm), medición a validar
- Las mediciones las hacen José Perea, Antón García y Francisco Peña
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Variables a registrar:
- Diariamente a las 8 a.m.:
- Humedad mínima, media, máxima (%), temperatura mínima, media, máxima (ºC) y mortalidad (número de muertos)
- Reiniciar la estación meteorológica
- Semanalmente:
- Lunes: diámetro con foto y con escalímetro (mm) 5x5x5x20 + 5x5x5x20
- Viernes: diámetro con foto y con escalímetro (mm) 20x60 + 20x60
planificación de la investigación
- Diseño experimental:
- Plan de trabajo:
- José Perea: mantenimiento de los caracoles durante la 1, 3, y 5 semana; mediciones todos los viernes y todos los lunes; responsable del alimento de los caracoles y de procesar la información.
- Antón García: mantenimiento de los caracoles durante la semanas 2 y 4; mediciones todos los lunes; responsable de los análisis estadísticos.
- Francisco Peña: mantenimiento de los caracoles durante las semanas 6 y 7; mediciones todos los lunes.
planificación de la investigación
- Hipótesis de partida:
- La medición fotogramétrica es más exacta que la medición estándar, especialmente en animales más pequeños, porque no entraña riesgos para el animal.
- La medición fotogramétrica es más precisa que la estándar porque requiere menos tiempo y menos entrenamiento.
- Análisis estadísticos a desarrollar:
- EXACTITUD: ANOVA simple y test SNK en cada semana para comparar la medición con foto vs con escalímetro.
- PRECISIÓN: Diseño G&G para determinar la repetibilidad y reproducibilidad de ambas técnicas.
planificación de la investigación
Prevención y seguridad.- El nivel de riesgos en experimentación animal es muy elevado.
- La seguridad es un problema colectivo, más que individual.
- La seguridad no representa una restricción a la investigación.
- Hay que conocer qué se puede hacer con los medios disponibles y,
- Qué medio se necesitan para desarrollar de forma segura lo que se pretende
- La prevención y la seguridad deben condicionar el día a día del investigador:
- Conocer los riesgos.
- Desarrollar procedimientos para su control y para el tratamiento adecuado de los residuos.
prevención y seguridad
Programa de prevención y seguridad- El programa debe condicionar el día a día del investigador.
- Intervienen todos los elementos de la institución o laboratorio.
- Contempla:
- Los riesgos generales y los riesgos específicos de cada elemento del mismo (experimento, laboratorio, animalario, etc.)
- Diseño de instalaciones y equipos
- Rutinas de trabajo que eviten la exposición a los agentes de riesgo
- Rutinas de trabajo que garanticen el buen funcionamiento de las barreras
- Procedimientos de emergencia
- Eliminación de residuos
prevención y seguridad
Elementos principales en el control de riesgos:- Legislación.
- Personal.
- Procedimientos de trabajo.
- Instalaciones y equipos.
prevención y seguridad
Legislación:- Cualquier programa de prevención se sustenta en:
- Marco legal europeo, nacional y autonómico.
- Normativa y recomendaciones internacionales.
- España: Ley 31/95
- Europa: Normas UNE, Directivas 89/656, 89/686, 90/679
prevención y seguridad
Personal:- Todas las personas implicadas en el experimento son responsables de
su propia seguridad y la de los demás.
- Formación
- Motivación
- Información
- En España no hay programas docentes reglados sobre prevención, salvo en materia radiactiva.
prevención y seguridad
Procedimientos de trabajo:- Trabajar con rigor, tanto por seguridad como por el experimento en sí.
- Evitar las prisas y la improvisación.
- Protocolo: qué hacer, cuándo hacer, cómo hacer, quién lo ejecuta
- Además, protocolo, protocolo, protocolo...
prevención y seguridad
Instalaciones y equipos:- Los elementos utilizados para la contención de riesgos se denominan
barreras o mecanismos de barrera.
- Barreras primarias: Protección individual y del ambiente del laboratorio.
- Barreras secundarias: Protección del medio exterior del laboratorio.
- Todas las barreras deben estar homologadas por e fabricante (CEE –UNE)
- Debe existir un programa de mantenimiento y control del buen funcionamiento de las barreras.
prevención y seguridad
Barreras primarias:- Indumentaria
- Diferentes tejidos: PVC, vinilo, etc.
- Batas, monos, camisas, pantalones, delantales, gorros y calzas.
- Cambio total de la ropa de calle por vestuario especial.
- Elección: equilibro entre los riesgos a evitar y la pérdida de pericia.
- Legislación establece 6 tipos de prendas de protección
- 1. Máxima protección, impermeables a gases
- 2. Alta protección, pero no impermeable a gases
- 3. Impermeable a líquidos
- 4. Impermeable a pulverizados
- 5. Impermeable a partículas
- 6. Impermeable a salpicaduras
prevención y seguridad
Barreras primarias:- Indumentaria
- Perfil de rendimiento del tejido:
- Pruebas físicas: resistencia al calentamiento, rotura por flexión, estallido, perforación, ignición.
- Pruebas de barrera: permeabilidad, penetrabilidad, resistencia a la alteración química.
- Nivel de liberación de partículas por parte del tejido
prevención y seguridad
Barreras primarias:- Guantes
- La barrera más común y peor utilizada
- Guante de latex sólo sirve para evitar riesgos biológicos
- Todos los guantes son permeables, por lo que siempre hay que lavarse las manos
- No se debe olvidar que el guante es el vehículo del agente del que nos protege.
- Pelo recogido
- No utilizar collares, piercings, pendientes, anillos, etc.
- No utilizar cosméticos.
- No comer, fumar, beber ni chicles en las zonas de trabajo.
- Uñas cortas
prevención y seguridad
Barreras primarias:- Protección acústica:
- La primera opción debe ser con instalaciones adecuadas (insonorización y aislamiento)
- Los auriculares son obligatorios, por ejemplo, con cerdos
- Protección ocular y respiratoria:
- Cuando se trabaje con aerosoles o salpicaduras
- Cabinas de contención y aisladores
- Gran variedad de mascarillas y gafas
- No utilizar lentillas
prevención y seguridad
Barreras primarias:- Equipos de control:
- Cabinas de bioseguridad
- Aisladores
- Armarios ventilados
- Racks ventilados
prevención y seguridad
Barreras secundarias:- Controlar los flujos entre la instalación exterior e interior (animales,
personas, materiales, gases, etc.).
- Personas: ducha, restricción de accesos, separación física entre áreas (laboratorios, corrales, despachos, etc.)
- Animales: control veterinario, cuarentenas, centinelas, etc.
- Animales externos: cercados perimetrales, trampas, plaguicidas, malla antipájaros, etc.
prevención y seguridad
Barreras secundarias:- Optimizar los procesos de limpieza, desinfección, esterilización y
eliminación de residuos.
- Materiales de construcción deben resistir la acción de los productos de limpieza y desinfección
- La construcción debe minimizar los recovecos
- Diseñar conjuntamente la construcción, con los equipos barrera y el diagrama de flujos:
- Autoclaves, lavaojos y duchas, cámaras de descontaminación, etc.
- Proporcionar autonomía a la instalación.
- Grupos de mantenimiento
- Generadores
- Depósitos de agua
- Depósitos de combustible
prevención y seguridad
Riesgos:- Riesgos físicos:
- Interacción con los animales
- Formación y manejo
- Inmovilización, anestesia y sedación
- Derivados de los equipos y materiales
- Objetos cortantes y punzantes (tijeras, agujas, etc.)
- Radiaciones ionizantes y UVA
- Asociados a las labores habituales
- Caídas, golpes, etc.
- Resbalones, movimiento de cargas pesadas, posturas, etc.
- Almacenar adecuadamente, utilizar calzado adecuado, pedir ayuda, etc
prevención y seguridad
Riesgos:- Riesgos químicos:
- Productos de limpieza, desinfección, plaguicidas
- Productos accesorios del proceso experimental (anestésicos, etc.)
- Productos del proceso experimental (fármacos, reactivos, etc.)
- Almacenamiento adecuado, utilización con las barreras necesarias, etc.
- Conocer sus síntomas y signos clínicos y tener un plan
prevención y seguridad
Riesgos:- Riesgos biológicos: (RD 664/97)
- Grupo I: poco probable que cause enfermedad en el hombre
- Grupo II: puede causar enfermedad en el hombre en condiciones especiales (inmunosupresión, grupos de riesgo, etc.), escasamente trasmisibles a la comunidad (cargas infectivas altas, se trasmite por ingestión o inoculación, etc.) y para las que existen medidas adecuadas de profilaxis y tratamientos.
- Grupo III: puede causar enfermedad grave en el hombre sano, es trasmisible a la comunidad pero sigue habiendo medidas de profilaxis y tratamientos.
- Grupo IV: no existen medidas adecuadas de profilaxis ni tratamientos.
prevención y seguridad
Limpieza, desinfección, esterilización:- En su ausencia, el ambiente se hace peligroso para las unidades
experimentales y hace inviable desarrollar experimentos de calidad.
- Los productos de L+D+E son un riesgo para animales y personas.
- Hay que elegir un plan de L+D+E acorde con los riesgos.
- Limpieza: Conjunto de operaciones para eliminar materia orgánica e inorgánica de las superficies.
- Se utilizan detergentes.
- Hay que tener en cuenta: temperatura, concentración, tiempo de contacto.
prevención y seguridad
- Desinfección: Procedimientos físicos o químicos para destruir microorganismos con capacidad patógena.
- La mejor forma es el calor, aunque no siempre se puede aplicar.
- Desinfectantes: biocidas, biostáticos, esporicidas.
- Elección del desinfectante:
- Composición química del desinfectante compatible con los materiales a desinfectar.
- Temperatura de acción del producto.
- Tiempo de contacto.
- Forma de aplicación.
- Tiempo de recuperación.
- Riesgos del experimento.
prevención y seguridad
- Esterilización: Eliminación total de la carga microbiana.
- Esterilización por calor seco.
- Tº 160 – 200 ºC.
- 1 a 2 horas.
- Útil para materiales que no toleran la humedad.
- Esterilización con vapor de agua (autoclave).
- Radiaciones ionizantes.
- Útil para materiales que no toleran el calor.
- Óxido de etileno y formaldehído
prevención y seguridad
Tratamiento y eliminación de residuos:- Los residuos contendrán aquellos agentes químicos, biológicos o
radiactivos que se hayan manipulado en el experimento o laboratorio.
- Acciones:
- Segregación.
- Transporte y almacenamiento en la instalación productora.
- Tratamiento previo a la eliminación.
- Eliminación de la instalación productora.
- Eliminación definitiva.
prevención y seguridad
- Residuo urbano convencional (papel, cartón, envases, etc.).
- No hay recogida selectiva específica
- El trasporte y el almacenamiento compete al personal auxiliar o de limpieza
- No hay tratamientos previos a la eliminación
- La eliminación corresponde a la empresa pública de residuos urbanos
- Residuo sanitario no específico (guantes, mascarillas, etc.).
- Recogida selectiva en bolsas termorresistentes.
- El trasporte y el almacenamiento compete al personal auxiliar hasta que quede estéril, después el personal de limpieza
- Tratamiento previo a la eliminación: autoclave
- La eliminación compete a la empresa pública de residuos urbanos
prevención y seguridad
- Residuo sanitario específico (material infeccioso: sangre, tejidos; material cortante o punzante).
- Recogida selectiva en contenedores rígidos de un solo uso.
- El trasporte requiere personal con formación y el almacenamiento debe ser a menos de 4ºC.
- Tratamiento previo a la eliminación: autoclave
- La eliminación compete a un gestor de residuos autorizado
- Residuo peligroso (fármacos, cadáveres, desinfectantes).
- Recogida selectiva en contenedores rígidos de un solo uso.
- El trasporte requiere personal con formación y el almacenamiento debe ser a menos de -18 ºC.
- Tratamiento previo a la eliminación: autoclave
- La eliminación compete a un gestor de residuos autorizado
prevención y seguridad
- Residuo radiactivo.
- Recogida selectiva en contenedores específicos.
- El trasporte requiere personal con formación y el almacenamiento debe ser según la normativa especial.
- Tratamiento previo a la eliminación: ninguno
- La eliminación compete a un gestor de residuos autorizado
prevención y seguridad
Principios éticos de la experimentación animal:- Nueva relación de responsabilidad social con los animales y con la
naturaleza.
- Que progresivamente se va incorporando en los códigos legislativos.
¿el fin justifica los medios?
el científico debe obedecer la legislación (comités de bioética) y debe examinar además la dimensión moral
principios éticos
Principios éticos de la experimentación animal:- Si hay posibilidad de reemplazar los animales por otros métodos,
deben ser sustituidos.
- Si la investigación puede causarles dolor o angustia, hay que valorar el beneficio potencial.
- Siempre hay que evitar causar dolor o angustia de modo injustificado.
- Reducir al mínimo el número de replicaciones.
principios éticos
Control social de la investigación:- Comités de ética en experimentación animal
- Reemplazar, reducir, refinar (3R)
- Directiva 86/609/CEE
- RD 214/1997
- RD 223/1988
principios éticos
BIBLIOGRAFÍA
1. Diseño de experimentos. 2000. Robert O. Kuehl. Editorial Thomson. ISBN: 9706860487
2. Ciencia y tecnología en protección y experimentación animal. 2001. Jesús Zúñiga, Josep Tur Marí, Silvana Milocco, Ramón Piñeiro. Editorial McGraw Hill. ISBN: 8448603109.
3. Técnicas estadísticas con SPSS. 2003. César Pérez. Editorial Prentice Hall. ISBN: 8420531677