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RESOLUCIÓN No. 003361 DE 30 DICIEMBRE 2004 MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
PROCESO DE PROTECCIÓN Y REGULACIÓN PECUARIA
2004.05.13 MP-AT-2.6.7
GRUPO CONTROL Y ERRADICACIÓN RIESGOS ZOOSANITARIOS. RABIA SILVESTRE
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
2. TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA1.
Este procedimiento describe el método a seguir para la toma y el envió de muestras
destinadas a la detección del virus rábico en el laboratorio.
La detección del virus rábico se realiza mediante las técnicas de Inmunofluorescencia
Directa (IFD) y Prueba Biológica, descritos en el Manual de Técnicas Analíticas. Para llevar
acabo los procedimientos, se requiere de la toma y el envío de muestras encefálicas de
animales con sintomatología neurológica debidamente conservadas.
2.1 TOMA DE MUESTRA EN ANIMALES GRANDES
Se refiere a la toma de muestras en animales como son las especies bovina, porcina,
equina, canina, silvestres (zorros, zorrillos) u otras en las que se puedan diferenciar las
partes del encéfalo. Se debe seleccionar principalmente la corteza cerebral, el cuerno o
asta de amón y cerebelo, como complemento la médula oblonga.
A continuación como ejemplo se ilustra el procedimiento de toma de muestra para bovinos:
⇛ Llevar la cabeza o el animal completo
sospechoso que presentaba
sintomatología neurológica o que se
haya encontrado muerto al centro de
diagnóstico ICA o de zoonosis más
cercano para realizar la necropsia.
⇛ Alistar en el lugar de recepción los implementos de protección (overol y tapabocas
desechables, botas, guantes de hule y de cirugía, careta facial o gafas), instrumental
1 Tomado de: Manual de Procedimientos. Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario. Laboratorio de Zoonosis. POE: 2.6.8-
MP-Zo-01
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
autoclavable para reutilizar (cuchillo o machete, hacha o hachuela, sierra o serrucho,
bisturí, tijeras rectas y curvas, pinzas de disección con y sin garra), recipientes de
desecho en acero inoxidable, bolsas plásticas de bioseguridad, recipientes para
recolección de las muestras (bolsas plásticas tipo nasco, frascos con formalina al 10%)
y un soporte o mesón de piedra para colocar la cabeza.
⇛ Lavar el cadáver antes de iniciar la necropsia con abundante agua y jabón para
eliminar suciedad, piojos, parásitos, etc.
⇛ Cortar la cabeza y ubicarla sobre un mesón o soporte.
⇛ Sujetar firmemente la cabeza y con un bisturí grande, cuchillo, hachuela o sierra,
realizar un corte a lo largo de la línea media del cráneo que atraviese la piel y los
músculos de ojos hasta la base, separar la piel, los tejidos y levantar hasta exponer el
hueso del cráneo.
⇛ Hacer dos cortes longitudinales a cada lado, con la
sierra, desde el hueso occipital hasta el hueso frontal
y dos cortes transversales por la lámina del hueso
frontal y parietal
⇛ Levantar por encima de los ojos con una
palanca o espátula plana el hueso cortado,
disertar las meninges y dejar expuesto el
encéfalo.
⇛ Extraer de la cavidad craneal el encéfalo completo con una espátula, pinza y tijera.
Verificar que se extraiga el cerebro, el cerebelo y la medula.
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
4
3
⇛ Hacer cortes de aproximadamente 1 cm de corteza cerebral (1), hipocampo o cuerno
de amón (2) y cerebelo (3). Para poder extraer el hipocampo, es importante realizar un
corte transversal a 1 cm de distancia a la línea media (4) de cada uno de los
hemisferios cerebrales con tijera, separar los tejidos con pinza y evidenciar en el fondo
el hipocampo para su extracción.
2
1
⇛ Depositar las porciones en bolsas plásticas tipo nasco para realizar IFD y prueba
biológica, y en frasco con formalina al 10% para histotecnia. Es importante tomar otras
porciones como obex, base de cráneo, puente del tálamo y médula oblonga, para
realizar diagnostico diferencial, tanto tejidos en fresco como en formalina.
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
⇛ Marcar los recipientes y empacar las muestras teniendo en cuenta las especificaciones
del numeral 3.
⇛ Depositar:
↝ El material reutilizable (Tijeras, pinzas, etc.) en un recipiente de acero inoxidable
que contenga solución desinfectante (Hipoclorito de sodio al 2% ó Extran al 4%) y
llevar al autoclave para su esterilización y posterior lavado.
↝ El material orgánico (Cadáver, tejidos), gasas, y material desechable, en bolsas
(Rojas) o papel comino, para su esterilización en autoclave y posterior incineración.
⇛ Llevar a incinerar el resto de cadáver, tejidos y material desechable.
⇛ Limpiar y desinfectar la sala de necropsias.
⇛ Diligenciar la forma 3-106, Información inicial de ocurrencia de enfermedad en un
predio y/o 3-877, Formato único de recepción de muestras, para el caso de bovinos u
otros animales grandes y formatos de centros de zoonosis o historia clínica del caso
sospechoso a rabia urbana (perros y gatos) para otras instituciones.
⇛ Proceder al envió de las muestras en recipientes herméticos a el lugar en donde se va
ha realizar el procedimiento de detección viral.
2.2 TOMA DE MUESTRA EN ANIMALES PEQUEÑOS Se refiere a la toma de muestra de animales como los quirópteros, roedores (ratones,
hamsters, ratas), etc. Para esto, se extrae el encéfalo completo del animal de la siguiente
forma:
⇛ Llevar el animal a el centro de diagnostico ICA mas cercano. Para el caso de lo
quirópteros se recolectan únicamente si se realizan capturas programadas o por
sospecha de ataque.
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⇛ Alistar en el lugar en donde se va a llevar acabo la extracción (sala de necropsias o
cabina de flujo laminar en el laboratorio): instrumental reutilizable (tijeras rectas y
pinzas de disección con garra); implementos de protección, (overol o blusa, tapabocas
desechables, guantes de cirugía, gafas), recipientes de desecho en acero inoxidable,
bolsas plásticas de bioseguridad, recipientes para recolección de las muestras (bolsas
plásticas tipo nasco o viales de vidrio o plásticos).
⇛ Clasificar el animal en el caso de los quirópteros según el tipo de alimentación
(hematófago, frugívoro, insectívoro, etc.) o si es posible determinar el nombre de la
especie.
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⇛ Ubicar todo el material sobre el mesón o superficie de la cabina para realizar la
extracción del encéfalo.
⇛ Limpiar con una gasa impregnada de agua la cabeza del animal, para retirar suciedad.
⇛ Estirar la piel de la cabeza hacia arriba con una pinza y contar con tijera, para lograr
despejar el cráneo.
⇛ Limpiar las tijeras con una gasa estéril. Si son varios animales de un mismo lote o
predio, se pueden utilizar la misma pinza y tijera para la extracción.
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⇛ Sostener la cabeza del animal con la pinza, hacer con la tijera un corte transversal del
hueso parietal arriba de los ojos.
⇛ Exponer el encéfalo, levantando el hueso del cráneo con la tijera, sujetando
fuertemente la cabeza del animal con la pinza.
⇛ Inclinar la cabeza hacia un lado sujetando el cuello y con la punta de las tijeras extraer
con cuidado el encéfalo.
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⇛ Depositar el encéfalo completo sobre un papel estéril o una caja de petri.
⇛ Recolectar los encéfalos en bolsas plásticas tipo nasco o en viales, para su transporte
o almacenamiento.
⇛ Identificar los recipientes que contiene las muestras con el número de recepción y la
fecha de recolección.
⇛ Empacar las muestras en recipientes herméticos y enviar al laboratorio que va ha
realizar el procedimiento de detección viral (Laboratorio autorizado para realizar
análisis - Anexo 1) teniendo en cuenta las especificaciones del numeral 3.
⇛ Depositar:
↝ El material reutilizable (Tijeras, pinzas, etc.) en un recipiente de acero inoxidable
que contenga solución desinfectante (Hipoclorito de sodio al 2% ó Extran al 4%) y
llevar al autoclave para su esterilización y posterior lavado.
↝ El material orgánico (Cadáver, tejidos), gasas, y material desechable, en bolsas
(Rojas) o papel comino, para su esterilización en autoclave y posterior incineración.
⇛ Limpiar y desinfectar con solución de hipoclorito y alcohol el lugar en donde se realizó
el procedimiento.
⇛ Diligenciar al envío de las muestras las formas 3-106, Información inicial de ocurrencia
de enfermedad en un predio y 3-913, Control de vampiros con uso de mallas de
niebla, para los casos enviados por los centros de diagnóstico del ICA.
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3. ENVIO DE MUESTRAS
Las muestras deben ser enviadas tan pronto sean tomadas en un recipiente de triple
empaque, que consiste en:
Remitente
Segundo recipiente
Tercer recipiente
Primer Recipiente
Hielo o Gelatina
↝ Primer recipiente: de material irrompible como frasco plástico, vénula, bolsa plástica
tipo nasco, tubo, vial, etc., en el cual se deposita la muestra encefálica extraída o el
animal completo para el caso de quirópteros principalmente. Sellar herméticamente y
rotular con datos generales, número de asignación registrado en el lugar de recepción,
procedencia y tipo de muestra enviada.
↝ Segundo recipiente: de material irrompible como frasco, caja de cartón o bolsa
plástica, en el cual se debe colocar el refrigerante (hielo o gelatina congelante) para la
conservación de la muestra. En el momento del empaque, rellenar los espacios libres
entre los dos recipientes con trozos de icopor, viruta, pedazos de papel, etc.
↝ Tercer recipiente: nevera de icopor o similar, en el cual se deposita los recipientes y
un sobre con los originales de las 3-106 y/o 3-913 ó la historia clínica dada por el
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Centro de Zoonosis. En la parte exterior del recipiente, marcar legiblemente los datos
del remitente y a quien se le remite.
Recomendaciones para el envío:
↝ La muestra no debe ser enviada en un tiempo mayor de 24 horas después de haber
realizado la toma de muestra.
↝ Verificar que la muestra llegue bien refrigerada hasta el lugar del envío.
↝ Si el envío se realiza vía aérea, se recomienda que se haga aeropuerto- aeropuerto
para que el traslado sea mas rápido y no colocar hielo seco.
↝ Si el envío es vía terrestre cerciorarse de depositar buena cantidad de refrigerante para
evitar el deterioro de la muestra.
↝ Verificar siempre que se envíen las formas y formatos respectivos, el caso que no se le
relacionen estos no será procesada la muestra por el laboratorio.
↝ Es importante pegar un adhesivo con el aviso de peligro biológico y delicado en el
exterior del recipiente final de envío.
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Diagrama 2. Toma y envío de muestras para el diagnostico de la Encefalitis Rábica
Animales grandes
Animales pequeños
Alistar materiales y elementos
Limpiar la cabeza antes de iniciar la necropsia
Inicio
Lavar el cadáver antes de iniciar la necropsia
Realizar cortes trasversales y longitudinales del hueso que
recubre el cráneo
Retirar la piel de la cabeza
Levantar el hueso cortado y extraer el encéfalo completo
Realizar corte trasversal al hueso frontal
Hacer cortes de 1 cm de corteza cerebral, hipocampo y cerebelo
Exponer el encéfalo levantando el hueso que recubre el cráneo
2
Extraer el encéfalo completo
1
Depositar las porciones en bolsas plásticas y frascos con formalina
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1
2
Identificar los recipientes
Depositar sobre papel estéril o en una caja de petri
Desinfectar y esterilizar en autotoclave el material reutilizable
Recolectar los encefalos en bolsas plásticas para su trasporte o
almacenamiento
Identificar los recipientes y empacar
Incinerar el resto de cadáver, tejidos y material desechable
Formas: 3-106 3-877 3-913
Diligenciar formatos según sea el caso
Limpiar y desinfectar la sala de necropsias
Fin
Enviar muestras y formas diligenciadas a un laboratorio autorizado (Anexo 1) para su
procesamiento
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ANEXO 1 LABORATORIOS ICA AUTORIZADOS PARA EL DIAGNÓSTICO DE RABIA
Laboratorio Nacional de Diagnóstico Veterinario. ICA Bogota. Laboratorio de
Zoonosis.
Centros de Diagnóstico Seccionales:
ICA Medellín
ICA Montería
ICA Cúcuta
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FORMA 3-106 Versión 00
No. _______
LABORATORIO DE ENFERMEDADES VESICULARES
IIINNNFFFOOORRRMMMAAACCCIIIÓÓÓNN IIINNNIIICCCIIAAALLL DDDEEE OOOCCCUUURRRRRREEENNNCCCIIIAAA DDDEEE EEENNNFFFEEERRRMMMEEEDDDAAADDD EEENNN UUNNN PPPRRREEEDDDIIIOOO
N I U
USO DIAGNÓSTICO Y PROCEDIMIENTO
FECHA DE ELABORACIÓN ___________________________________________
1. UNIDAD LOCAL DE VIGILANCIA
ICA
OTRA
2. IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN Nombre del propietario: Nombre del predio Departamento Municipio Vereda Cuadrante Latitud Longitud Teléfono o Fax
3.TIPO DE EXPLOTACIÓN BOVINOS AVES PORCINOS EQUINOS OVINOS-
CAPRINOS
Leche Comercial postura Comercial cría Labor Comercial
Carne Comercial engorde Comercial engorde Deporte Urbano
Doble propósito Comercial reproducción Comercial completo Paso fino Rural
Comercial postura-engorde Urbana
Traspatio Rural
OTROS (¿Cuáles?)
4. NOTIFICACIÓN 5. CRONOLOGÍA Propietario o administrador Día Mes Año
Terceros Primer enfermo
Vigilancia activa Notificación
Primera visita Med. Vet..
6. Extensión del episodio: Área del predio Ha. Área del predio afectada Ha.
Población susceptible: (Fincas vecinas a predios afectados).
Predios vecinos afectados (Diligenciar una forma 3-106 y 3-108 en cada predio afectado) Especie No.
Si No ¿Cuántos? Especie No. Especie No. 7. SIGNOS 8. LESIONES EN LA NECROPSIA
9. Cuadro clínico Diagnóstico presuntivo
10. ULTIMA VACUNACIÓN CONTRA LA ENFERMEDAD SOSPECHADA ANTES DEL INICIO (VERIFIQUE)
Día Mes Año Nº de lote Tipo de vacuna Laboratorio
No. Registro único de vacunación
11. TOMA DE MUESTRA Si Tipo de muestra Día Mes Año
No Lugar y nombre laboratorio de envío Toma Día Mes Año
Análisis solicitado (s) Envío
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
12. POBLACIÓN, ENFERMOS Y MUERTOS DESDE EL INICIO HASTA LA FECHA DE ESTA VISITA POBLACIÓN ENFERMOS MUERTOS (1)
ESPECIE Vacunados No
Vacunados Total Vacunados No Vacunados Total Vacunados No
Vacunados Total
Terneros (as) < 1 año Hembras 1 - 2 años Hembras 2 - 3 años Hembras > 3 años Machos 1 - 2 años Machos 2 - 3 años Machos > 3 años
BO
VIN
OS
TOTAL Lactantes < 2 meses Machos 2 - 6 meses Hembras 2 - 6 meses Machos > 6 meses Hembras > 6 meses PO
RC
INO
S
TOTAL Ovinos Caprinos Equinos < 1 año 1 - 2 año > 2 año
TOTAL > 4 semanas 4 - 7 semanas 7 - 22 semanas > 22 semanas A
VE
S
TOTAL
(1) Los muertos se consideran que enfermaron, inclúyalos en los enfermos
13. Hubo ingreso de animales y/o posibles “vehículos” de la enfermedad en los 30 días antes del inicio Si No
Enfermaron los animales introducidos? Si No De primeros? Si No
FECHA IDENTIFICACIÓN DEL DESTINO (NOMBRES) INGRESO DE Nº
Día Mes Año Finca-Feria-etc. Propietario Municipio Departamento
14. Hubo egreso de animales y/o posibles “vehículos” de la enfermedad en el lapso comprendido entre 30 días antes de la enfermedad
y el momento actual? Si No
FECHA IDENTIFICACIÓN DEL DESTINO (NOMBRES) EGRESOS DE Nº
Día Mes Año Finca-Feria-etc. Propietario Municipio Departamento
15. Origen probable de la enfermedad
Limpieza y desinfección Tratamiento médico Sacrificio de animales Vacunación en predios vecinos no afectados
Vacunación en el predio afectado nmovilización de enfermos y contactos cuarentena del predio (No incluya animales enfermos o sus contactos)
Comunicación a la Unidad de Sanidad animal hacia la cual hubo egresos del (os) predio (s) afectado (s)
Cuarentena del área Otras ¿Cuál (es)? ____________________________________________________________
17. OBSERVACIONES Nombre Medico Veterinario Firma Médico Veterinario Dirección respuesta
Forma 3-106
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FORMA 3-877 Versión 00
SERVICIO NACIONAL DE DIAGNÓSTICO VETERINARIO
FFFOOORRRMMMAAATTTOOO ÚÚÚNNNIIICCCOOO DDDEEE RRREEECCCEEEPPPCCCIIIÓÓÓNNN DDDEEE MMMUUUEEESSSTTTRRRAAASSS
NNNooo _____________________________________________
Uso diagnóstico y procesamiento
1. OFICINA RECEPTORA
FECHA D M A
2. IDENTIFICACIÓN Y LOCALIZACIÓN
Propietario:
Predio:
Teléfono:
Municipio:
Vereda:
Departamento:
Medico veterinario:
Teléfono:
3. MOTIVO DE SOLICITUD
Diagnóstico Movilización Cuarentena Compraventa Otro Cual?
4. TIPO DE EXPLOTACIÓN
BOVINOS AVES PORCINOS EQUINOS OVINOS-
CAPRINOS OTRA
ESPECIE
Leche Comercial postura Comercial cría Labor Comercial Cual:
Carne Comercial engorde Comercial engorde Deporte Urbano
Doble propósito Comercial reproducción Comercial completo Paso fino Rural
Raza: Comercial postura-engorde Urbano Raza: Raza:
Traspatio Rural
Raza: Raza:
5. NOTIFICCIÓN 6. CRONOLOGÍA Predios Vecinos Afectados: Primer Enfermo Día Mes Año
Si No Notificación CUANTOS: Primer visita Médico Veterinario
7. SINTOMATOLOGÍA 6. LESIONES DE LA NECROPSIA
9. DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO:
_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________ ______________________________________________________________________________
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
10. IDENTIFICACIÓN MANEJO Identificación Sexo Edad
Meses Vacunas y fecha (Mes y año) SISTEMA DE ALIMENTACIÓN:
TRATAMIENTO:
11. TOMA DE MUESTRAS TIPO DE MUESTRAS: Día Mes Año Lugar y Nombre Laboratorio de Envío: TOMA
Edad: Sexo: ENVÍO
12. POBLACIÓN
POBLACIÓN ESPECIE POBLACIÓN ESPECIE
Enfermos Muertos Total Enfermos Muertos Total
Terneros (as) < 1 año Hembra 1 - 2 años Hembras 1 - 2 años Hembras > 2 años Hembras > 2 años Machos 1 - 2 años Machos 1 - 2 años Machos > 2 años Machos > 2 años
Can
inos
TOTAL Bov
inos
TOTAL Hembra 1 - 2 años Lactantes < 2 meses Hembras > 2 años Machos 2 - 6 meses Machos 1 - 2 años Hembras 2 - 6 años Machos > 2 años Machos > 6 meses
Felin
os
TOTAL Hembras > 6 meses Hembra 1 - 2 años P
orci
nos
TOTAL Hembras > 2 años Ovi-caprinos Machos 1 - 2 años Equinos Machos > 2 años
< 4 semanas
Silv
estre
TOTAL 4 - 7 semanas OTROS: 7 - 22 semanas > 22 semanas A
ves
TOTAL (1) Los muertos se consideran que enfermaron inclúyalos en los enfermos.
13. PRUEBAS SOLICITADAS VIROLOGIA TOXICOLOGÍA / QUÍMICA PARASITOLOGÍA BACTERIOLOGÍA HISTOPATOLO
GÍA
14. RESULTADOS
Forma 3-877
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2. POE PARA LA TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS PARA EL DIAGNOSTICO DE LA ENCEFALITIS RÁBICA
3-913
GRUPO CONTROL Y ERRADICACIÓN DE RIESGOS ZOOSANITARIOS
CCCOOONNNTTTRRROOOLLL DDDEEE VVVAAAMMMPPPIIIRRROOOSSS CCCOOONNN UUUSSSOOO DDDEEE MMMAAALLLLLLAAASSS DDDEEE
NNNIIIEEEBBBLLLAAA
Versión 00
Forma 3-913
PRIMERA PARTE
Municipio: _________________________ Vereda: ______________ Predio: _______________ Propietario: _________________________Cuadrante: ____________ Fecha: _______________ Latitud: ___________________ Longitud: ________________ Fase lunar: _______________ Numero de animales con mordeduras frescas: ____ Numero de mordeduras por animal: ______
Número de hembras preñadas Número de hembras vacías Número de machos Número de vampiros tratados con anticoagulante Tipo de anticoagulante usado Numero de vampiros enviados al laboratorio Número de mallas usadas 12 m. Número de mallas usadas 6 m.
Sitios de captura: Corral _____________Refugio_____________ Potrero _________ Tipo de refugio:______________________________________________________________ Cobertura total corral: SI: _____________________NO: ___________________________
Número de Murciélagos capturados por mallas. Malla 1. Malla 2. Malla 3. Malla 4 Malla 5. Malla 6. HEMATOFAGOS INSECTIVOROS FRUGIVOROS CARNIVOROS ICTIOFAGOS POLINIZADORES HORA DE LA CAPTURA Realice en el respaldo de la hoja un diagrama del corral con ubicación de mallas.
SEGUNDA PARTE Fecha: ______________
Numero de animales con mordeduras frescas : ____ Numero de mordeduras por animal: ________