7/24/2019 Protocolo de Tesis A

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Q. Vanessa Monserrat Aldana Castolo

Q. Tabata Karewit Prez Contreras

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PROTOCOLO DE TESIS

Titulo

Crecimiento y capacidad de biorremediacin de Chlorella vulgaris cultivada en

auas residuales con e!luentes de orien domstico" industrial y ar#cola en el lao

de C$apala.

Introduccin

%n los pa#ses en v#a de desarrollo" e&iste un crecimiento sin control ni planeacin

tanto de industrias como de asentamientos $umanos" oriinando entre otros el

problema de alteracin de la calidad del aua en los ecosistemas acu'ticos" ya (ue

se utilizan como un sistema de eliminacin muy cmodo" en donde los r#os tienen

un papel !undamental" dada su naturaleza ltica. %l deterioro de la calidad del aua"

supone un rave problema medioambiental y socioeconmico" (ue se acent)a en

zonas de escasos recursos. %l uso del aua potable para abastecimiento urbano e

industrial" debe ir acompa*ado de una correcta depuracin (ue permita su

reutilizacin para rieo ar#cola" de 'reas verdes" auas recreativas" reutilizacin

industrial" piscicultura" o bien como elemento (ue no perturbe el e(uilibrio biolico

de la zona de vertido y (ue evite la contaminacin de acu#!eros subterr'neos y

masas super!iciales de auas continentales o marinas+.

%n el caso del lao de C$apala" el r#o ,erma constituye la principal !uente de

contaminacin debido a (ue todos los desec$os (ue son vertidos en l

desembocan en el lao-.

%l ,ao de C$apala $a estado e&puesto a diversas !uentes y niveles de

contaminacin" como descaras municipales de di!erentes comunidades" auas de

retorno ar#cola y auas residuales provenientes del r#o ,erma" vertidas porindustrias.

,a inmensa mayor#a de los usuarios no tratan el aua una vez (ue la utilizan" y m's

bien la aprovec$an como ve$#culo para eliminar desec$os. %/emplo de ello $a sido

la escasa in!raestructura de saneamiento para tratar las descaras de las industrias

m's importantes de la cuenca" el incumplimiento de relamentos y condiciones de

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descara" las ba/as tari!as por uso de aua" as# como el incremento en el volumen

de los e!luentes urbanos y de los retornos ar#colas de zonas de rieo.

%n ambientes acu'ticos naturales o arti!iciales" marinos o de aua dulce" las

microalas est'n siempre asociadas a bacterias ya sea como promotoras de

crecimiento" simbiontes o bien contaminantes0. ,as microalas" oranismos

auttro!os (ue ocupan el primer eslabn en la cadena tr!ica" $an recibido muc$a

atencin en los )ltimos a*os" especialmente en las reiones tropicales y

subtropicales" en donde se emplean como un biosistema alternativo para la

remocin de nutrientes de este tipo de auas. %stos microoranismos incorporan

nitreno en !orma de amonio (ue es utilizado para !ormar amino'cidos1 aun(ue

tienen la capacidad de incorporarlo en !orma de nitrato2.

%l uso de las microalas" como biosistema alternativo" en el tratamiento de las

auas residuales" $a sido el ob/eto de numerosas investiaciones debido a su

capacidad de remover cantidades sini!icativas de 3 y P durante su crecimiento"

absorber metales y acelerar la inactivacin de bacterias patenas4. Adem's la

biomasa alal producida" durante el procesamiento de estos e!luentes" representa

una !uente potencial de alimentos" (u#micos y pimentos" entre otras importantes

aplicaciones5.

%l nero Chlorellaas# como alunas especies del rupo de las cianobacterias" se

$an descrito en el tratamiento de di!erentes tipos de auas residuales" destacando

las provenientes de plantas de tratamiento convencionales6" de orien industrial"

urbano y las derivadas de e&cretas animales. %l ob/etivo de la presente

investiacin es evaluar el uso de Chlorellavulgarispara la remocin de nitreno"

!s!oro y 7Q8 del lao de C$apala.

Antecedentes

%l tratamiento de las auas residuales es solo una parte del sistema de limpieza del

aua" la produccin de lodos y el mane/o del aua tratada es otro aspecto de esta

actividad. %&isten varios mtodos para el tratamiento de auas residuales. 7e

acuerdo con el rado de comple/idad y del espectro de sustancias" materiales y

oranismos eliminados" se dividen en los siuientes niveles9 primario" el cual

elimina el 4: ; de los slidos suspendidos" un : ; de materia or'nica y entre un

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2 a un +2 ; de nutrientes1 secundario" elimina el

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son todav#a descarados sin nin)n tratamiento previo. ,a concentracin e&istente

de nutrientes en el lao enera eutro!icacin asociada por el crecimiento de

veetacin acu'tica !lotante (ue podr#an causar problemas de sabor y olor en aua

para abastecimiento urbano y a!ectar la sanidad del ecosistema.

i!tesis

%s el razonamiento ordenado para e&plicar" demostrar y !undamentar el

planteamiento terico.

,a realidad de uno de los problemas (ue se plantea en el lao C$apala es la ran

cantidad de sedimentos (ue recibe de sus a!luentes. Cada a*o el lao recibe

acteriolica"por las auas residuales urbanas y de centros de

produccin porcina" y" (u#mica" de orien tambin urbano pero !undamentalmente

en las 'reas industriales. %l aua est' altamente contaminada con 77T" (u#micos

ar#colas" cobre" plomo" cromo" zinc" cianuro" auas neras y !s!oro. ?n estudio

de las descaras de nueve plantas de tratamiento (ue vac#an directamente en ellao encontr niveles de !s!oro 50 veces m's elevado (ue la norma de ?=%PA. %l

40; del aua (ue llea al lao est' sin tratar y se considera (ue se necesitar#an

unas +: plantas de tratamiento de auas neras para me/orar la calidad del lao.

,as consecuencias ambientales y econmicas a)n se desconocen" pero se advierte

un !uerte deterioro ambiental y" con ello" la deradacin del medio ambiente a laro

plazo. =alvar el ,ao de C$apala ser#a conruente con una pol#tica sustentable"

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para lo cual se propone probar la capacidad y crecimiento de la ala verde

Chlorella vulgaris en dic$as auas para su biorremediacin.

Ob"eti#os

8b/etivo eneral9

7esarrollar tecnolo#as e!icientes y de ba/o costo para el tratamiento de

auas residuales de uso domstico.

8b/etivo espec#!ico particular9

%valuar el crecimiento y la e!icacia de remocin de nutrientes de Chlorella

vulgaris en e!luentes enerados por poblacin /alisciense de orien

domstico" industrial y ar#colaen el lao de C$apala.

$etodolo%&a

%mpleando sepas de Chlorella vulgaris, aisladas. para el medio de cultivo se

utilizara aua residual proveniente del lao de C$apala. Por lo tanto el aua (ue

analizaremos solo ser' sometida a un tratamiento preliminar de cribado" por lo (ue

contendr' mayor concentracin de nutrientes. Tomando dos muestras m's1 una

sometida a esterilizacin durante -:minutos a +-+@C y +2 libras de presin"mientras (ue la otra al#cuota solamente ser' !iltrada usando dos veces papel

$atman 3@ 0-. ,as muestras ser'n rotuladas como9

Aua con contaminacin inicial.

Aua esterilizada.

Aua !iltrada.

,os tratamientos controles se prepararon con aua destilada esterilizada y medio

de Cultivo A,BA,+

a una concentracin e(uivalente a 4": mM de 3a38 y :" mMde 3aP80 como )nicas !uentes de nitreno y !os!ato.

,os bioensayos se iniciaran con un inculo de :.40&+:4 de Chlorella vulgaris, el

cual proven#an de cultivo en !ase e&ponencial y desarrollado en medio A,BA, a 4":

mM de 3a38. ,os e&perimentos se desarrollaron" por triplicado" en recipientes de

vidrio con un volumen de -:: m," se mantuvieron con una radiacin de +5

Dmol.(.mE-.sE+" ba/o ciclos de luz9oscuridad de

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+-9+- $oras" a una temperatura promedio de -6F-@C y sin aireacin por un per#odo

de -5 d#as.

DE'SIDAD CELLAR CO'TE'IDO DE PI*$E'TOS + DE PROTE,'AS

%l crecimiento de cada microala se determin mediante el conteo celular de los

cultivos cada d#as" utilizando una c'mara de 3eubaGer. %l contenido de cloro!ila

total y de carotenoides se cuanti!ic a partir del e&tracto metanlico de la biomasa

alal !resca cada d#as. ,os e&tractos obtenidos se clari!icaron por centri!uacin y

la concentracin de los pimentos se determin mediante espectro!otometr#a.

A'-LISIS .,SICO/,$ICOS

%l contenido de !os!ato HPIP80EJ" nitreno amoniacal H3I30 J y 7Q8. %stos

an'lisis se realizaron en9

aJ Aua residual cruda9 aua residual sin nin)n tratamiento.

bJ Aua residual para el cultivo de las microalas9 aua residual esterilizada y aua

residual !iltrada no esterilizada" y lueo de inocular la microala a las -0 $ y a los -5

d#as de iniciado el e&perimento.

%n estos an'lisis se utilizaron los sobrenadantes de los cultivos por rplica de cada

tratamiento" lueo de una centri!uacin de : m, de cada cultivo durante +2

minutos a +::: rpm.

A'-LISIS ESTAD,STICO

,os resultados se e&presaron como los promedios de los triplicados de cada

tratamiento.

Crono%rama De Acti#idades

Actividades Lec$as

nicio de protocolo de tesis -5 de aosto de -:+2

ndaar al)n tema de inters I+2 de septiembre de -:+2

Nedaccin del titulo +5 de septiembre de -:+2An'lisis e investiacin del tema -0 de septiembreI+5 de octubre de

-:+2ntroduccin del tema +

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Mtodos a utilizar < de noviembre

Necoleccin y procesamiento de

datos

++ de noviembre de -:+2

7ise*o de presentacin de

diapositivas

+ de noviembre de -:+2

Nevisin y correccin del traba/o !inal +4I-: de noviembre de -:+2%ntrea de protocolo de tesis

Htraba/o !inalJ

-: de noviembre de -:+2

0iblio%raf&a

+. ArandaICirerol" 3." erreraI=ilveira" O.A." Com#n" L.A. -::4. 'utrient

1ater 2ualit3 in a tro!ical coastal 4one 1it5 %round 1ater

disc5ar%e nort51est +ucat6n $e7ico8 Estuar Coast Shelf Scien

469002E020.-. ,imn O." Oaramillo" O." ,edesma" N." est" ,." lvarez" =. y Nu#z" N."

H+

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5. >8N8TSKA M.A. y ,.O. >8N8TSKA. + 0oro1it4=a L8J8

$icroal%al 0iotec5nolo%38Cambride ?niversity Press" Cambride

+2I+urlion 3. +.A.,." Cardenas" ,.C.." MoralesIAvenda*o"

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