Post on 14-Jan-2017
CETIS 62
PRÁCTICA NO. 4
IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
MATERIA
BIOQUÍMICA
DOCENTE
IBQ Marta Gabriela Aceves Morales
ESPECIALIDAD
LABORATORIO CLÍNICO
GRADO: 6° SEMESTRE GRUPO: “E”
EQUIPO
NUM.7
INTEGRANTES
Isaías Ojeda Arlette Guadalupe
Muñoz Gutiérrez Abigail del Rosario
Silva Lerma Sanjuana Ivette
Vázquez Celio Andrea
OBJETIVO: Realizar pruebas de identificación de lípidos y grasas. Así como algunas de las principales reacciones de las grasas.
FUNDAMENTO: Se llama lípidos a un conjunto de moléculas orgánicas, la mayoría biomoléculas, compuestas principalmente por carbono e hidrógeno y en menor medida oxígeno, aunque también pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno. Tienen como característica principal ser insolubles en agua y sí en disolventes orgánicos como el benceno. A los lípidos se les llama incorrectamente grasas, cuando las grasas son sólo un tipo de lípidos, aunque el más conocido.
Los lípidos forman un grupo de sustancias de estructura química muy heterogénea, siendo la clasificación más aceptada la siguiente:
Lípidos saponificables: Los lípidos saponificables son los lípidos que contienen ácidos grasos en su molécula y producen reacciones químicas de saponificación. A su vez los lípidos saponificables se dividen en:
Lípidos simples: Son aquellos lípidos que sólo contienen carbono, hidrógeno y oxígeno. Estos lípidos simples se subdividen a su vez en: Acilglicéridos o grasas (cuando los acilglicéridos son sólidos se les llama grasas y cuando son líquidos a temperatura ambiente se llaman aceites) y Céridos o ceras.
Lípidos complejos: Son los lípidos que además de contener en su molécula carbono, hidrógeno y oxígeno, también contienen otros elementos como nitrógeno, fósforo, azufre u otra biomolécula como un glúcido. A los lípidos complejos también se les llama lípidos de membrana pues son las principales moléculas que forman las membranas celulares: Fosfolípidos y Glicolípidos.
Lípidos insaponificables: Son los lípidos que no poseen ácidos grasos en su estructura y no producen reacciones de saponificación. Entre los lípidos insaponificables encontramos a: Terpenos, Esteroides y Prostaglandinas.
¿Qué función desempeñan los lípidos en el organismo? Principalmente las tres siguientes:
Función de reserva energética: Los lípidos son la principal fuente de energía de los animales ya que un gramo de grasa produce 9,4 kilocalorías en las reacciones metabólicas de oxidación, mientras que las proteínas y los glúcidos sólo producen 4,1 kilocalorías por gramo.
Función estructural: Los lípidos forman las bicapas lipídicas de las membranas celulares. Además, recubren y proporcionan consistencia a los órganos y protegen mecánicamente estructuras o son aislantes térmicos como el tejido adiposo.
Función catalizadora, hormonal o de mensajeros químicos: Los lípidos facilitan determinadas reacciones químicas y los esteroides cumplen funciones hormonales.
¿Qué tipos de grasas intervienen en la alimentación?Recordemos, las grasas son lípidos saponificables simples, sólidos a temperatura ambiente o líquidos en cuyo caso se llaman aceites. Puede ser:
Grasas saturadas: Son aquellas grasas que están formadas por ácidos grasos saturados (tienen todos los enlaces completos por H). Aparecen por ejemplo en el tocino, en el sebo, etcétera. Este tipo de grasas es sólido a temperatura ambiente. Son las grasas más perjudiciales para el organismo.
Grasas insaturadas: Son grasas formadas por ácidos grasos insaturados (tienen uno o más enlaces sin completar con H) como el oleico o el palmítico. Son líquidas a temperatura ambiente y comúnmente se les conoce como aceites. Pueden ser por ejemplo el aceite de oliva o el de girasol. Son las más beneficiosas para el cuerpo humano.
Existe una regla en la dieta para el consumo de las grasas: “Las de origen vegetal son más beneficiosas que las de origen animal, y las poliinsaturadas son más beneficiosas que las saturadas”. Hay unas grasas beneficiosas para el organismo porque disminuyen el nivel del llamado “colesterol malo”. El colesterol es un lípido presente en el plasma sanguíneo y en los tejidos de los vertebrados, su exceso se asocia con enfermedades cardiovasculares. Es transportado por dos proteínas LDL (Lipoproteína de baja densidad) y HDL (Lipoproteína de alta densidad). Nos referimos a los aceites llamados “omega-3” y “omega-6”. El efecto beneficioso es debido a que con su ingesta disminuye la concentración de LDL y aumenta la de HDL (con las grasas saturadas se produce el efecto contrario). Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) pueden retirar el colesterol de las arterias y transportarlo al hígado para su excreción. Las lipoproteínas de baja densidad (LDL) transportan el colesterol a las arterias, si su nivel es más alto que el de HDL el colesterol tenderá a fijarse en las arterias, de ahí que se les conozca como “colesterol bueno” al HDL y “colesterol malo” al LDL.
SOLUBILIDAD
Solubilidad es una medida de la capacidad de disolverse de una determinada sustancia (soluto) en un determinado medio (disolvente). Implícitamente se corresponde con la máxima cantidad de soluto que se puede disolver en una cantidad determinada de disolvente, a determinadas condiciones de temperatura, e incluso presión (en caso de un soluto gaseoso).
PROCEDIMIENTO
Coloque en cada tubo de ensayo 0.5 ml de aceite ó grasa.Añadir 1ml de las sustancias indicadas arriba (una sustancia diferente a cada tubo)Evítese inflamación de los solventes.Hágase en frío y caliente.
OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO
La yema de huevo es una fuente importante de lípidos, además de grasas simples contiene esteroles y fosfolípidos estas sustancias pueden ser separadas unas de otras por su diferencia de solubilidad y es relativamente sencillo obtener colesterol en forma de cristales en una de las fracciones.
PROCEDIMIENTO
Separar con mucho cuidado la yema de la clara. Colocar 2 gramos de la yema en un vaso de precipitado
Añadir 2 ml de alcohol metílico y 2 ml de éter.Colocar la muestra en un matraz, taparlo y agitarlo por 1 minuto.Dejar reposar la mezcla por 10 minutos y después filtrar (usar papel filtro).Lavar el residuo con 2 ml de la solución de éter – etanol.
ACIDEZ
El índice de acidez se define como el número de miligramos de hidróxido de potasio necesarios para neutralizar los ácidos libres de un gramo de grasa. Su fórmula es:
I.A= n x 28 P
Dónde: n = No. de ml de solución 0.5 N de KOH gastados en la titulación P = peso de la muestra
PROCEDIMIENTO1.- Colocar 5 g de muestra en un matraz Erlenmeyer y agregar 3 gotas de fenolftaleína (si es necesario disuelva la muestra en un poco de etanol).2.- Titular con solución de KOH 0.5 N hasta obtener neutralización2.- Calcular el índice de acidez.
RANCIDEZ
El enranciamiento es un proceso por el cual un alimento con alto contenido en grasas o aceites se altera con el tiempo adquiriendo un sabor desagradable.
PROCEDIMIENTOColocar 5ml de aceite de olivo en buen estado en un tubo de ensayo y en el otro 5ml de aceite rancio.A los dos tubos añadir 1 ml de alcohol y calentar.Enfriar y colocar una gota de solución en el papel indicador de pH.
Los valores normales son:Aceite rancio: pH = 6.7 Aceite de Olivo (Oleico): pH = 6.1
SAPONIFICACIÓN
La saponificación es un proceso químico por el cual un cuerpo graso, unido a un álcali y agua, da como resultado jabón y glicerina.
grasa + sosa cáustica → jabón + glicerina
Este proceso químico igualmente es utilizado como un parámetro de medición de la composición y calidad de los ácidos grasos presentes en los aceites y grasas de origen animal o vegetal, denominándose este análisis como Índice de saponificación; el cual es un método de medida para calcular el peso molecular promedio de todos los ácidos grasos presentes. Igualmente, este parámetro es utilizado para determinar el porcentaje de materias insaponificables en los cuerpos grasos.Un método de saponificación común en el aspecto industrial consiste en hervir la grasa en grandes calderas, añadir lentamente hidróxido de sodio (NaOH) y agitarlo continuamente hasta que la mezcla comienza a ponerse pastosa.
PROCEDIMIENTOEn dos matraces respectivamente colocar 1.5 mg de grasa o aceite Añadir 25ml de solución de potasa alcohólica Colocar en el matraz un tapón con un tubo de vidrio que actué como refrigeranteCalentar a baño maría de 15 a 30 minutos hasta que haya sido totalmente saponificada (apariencia de clara uniforme)También utilizar un blanco el aceite problema, usar 25ml de potasa alcohólica y calentar no usar aceite. Enfriar los matraces y titular usando una solución estándar (HCl 5N). Usar 3 gotas de fenolftaleína hasta cambio de color y después agregar dos más.
COLORACIÓN
Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado con el colorante Sudán III.
PROCEDIMIENTO1. Disponer en una gradilla con tubos de ensayo colocando en ambos
2ml de diferentes aceites2. Añadir a uno de los tubos 4-5 gotas de solución alcohólica de Sudán
III.3. A los otros tubos añadir 4-5 gotas de tinta roja.4. Agitar ambos tubos y dejar reposar5. Observar los resultados: en el tubo con Sudan III todo el aceite tiene
que aparecer teñido, mientras que, en el tubo con tinta, esta se irá al fondo y el aceite no estará teñido.
SOLUBILIDAD
MATERIAL
5 tubos de ensayo 5 pipetas de 1ml
1 baño maría
REACTIVOS
Alcohol etílico Cloroformo
Tetracloruro de Carbono Benceno
Aceite de olivo Aceite rancio
Aceite de almendras
OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVO
MATERIAL
2 vasos de precipitado 1 matraz con tapón
1 embudo 1 papel filtro
REACTIVOS
Alcohol metílico Éter – etanol
ACIDEZ
MATERIAL
2 matraz Erlenmeyer 250 1 soporte universal
1 bureta 1 pinzas para bureta
REACTIVOS
Fenolftaleína KOH 0.5 N
RANCIDEZ
MATERIAL
2 tubos de ensayo 1 baño maría
1 bureta 2 matraz erlenmeyer 250 ml
1 soporte universal 1 pinzas para bureta
REACTIVOS
HCl 5N Potasa alcohólica
Fenolftaleína
SAPONIFICACIÓN
MATERIAL
3 matraces 1 baño maría
1 bureta
REACTIVOS
HCl 5N Potasa alcohólica
Fenolftaleína
COLORACIÓN
MATERIAL
1 Gradilla 10 tubos de ensayo
5 pipetas
REACTIVOS
Colorante Sudán III Tinta roja
RESULTADOS
SOLUBILIDAD
SOLUBILIDAD EN CALOR
TIPO DE GRASA O ACEITE
ALCOHOL ETÍLICO
CLOROFORMO TETRACLORURO DE CARBONO
BENCENO
MANTEQUILLA Separación Separación Separación SeparaciónMANTECA VEGETAL
Separación No Separación Separación
ACEITE DE ALMENDRAS
Separación No No No
ACEITE DE OLIVA Separación No Separación SeparaciónACEITE RANCÍO separación No Separación Separación
SOLUBILIDAD EN frío
TIPO DE GRASA O ACEITE
ALCOHOL ETÍLICO
CLOROFORMO TETRACLORURO DE CARBONO
BENCENO
MANTEQUILLA Separación Separación Separación SeparaciónMANTECA VEGETAL
Separación No Separación Separación
ACEITE DE ALMENDRAS
Separación No No No
ACEITE DE OLIVA Separación No Separación SeparaciónACEITE RANCÍO separación No Separación Separación
Durante el proceso de esta práctica se observó que si hay separación de materia al reaccionar con un determinado reactivo es todo se debe a su composición química y también a la diferente densidad que contiene, también identificamos que tanto en caliente para después pasar a frio va permanecer separada.Imágenes anexadas:
OBTENCIÓN DE LÍPIDOS A PARTIR DE LA YEMA DE HUEVOYEMA DE HUEVO
Se formaron cristales en las paredes, esto se debe a que el colesterol se separó de la yema de huevo esto gracias a la diferencia de solubilidad
De la yema de huevo se obtuvo tanto la lecitina como la separación de colesterol debido a la diferencia de solubilidades, la lecitina es de gran importancia para el metabolismo celular de los animales en este caso en la gallina.Imágenes anexadas
ACIDEZ
ÁCIDO/GRASA
VOLUMEN ML PESO DE MUESTRA
PESO TOTAL
PROMEDIO
MANTECA 0.2 15GR. 15GR 0.20.3 2
0.1 3ACEITE DE OLIVA
1.1 1 5GR.5GR. 0.56660.3 2
0.3 3
INDICE DE ACIDEZ MANTECA:I.A = n x 28 P
I.A = 0.2 X 28 = 0.3733 15GR
INDICE DE ACIDEZ DEL ACEITE DE OLIVAI.A = n x 28 P
I.A = 0.5666 X 28 = 3.17296 5GR
ACEITE O GRASA INDICE DE ACIDEZ
MANTECA 0.3733
ACEITE DE OLIVA 3.17296
En la realización de esta técnica aprendimos e identificamos que la acidez es aquella que se define del número de miligramos de hidróxido de potasio y que la obtenemos de una formula, es muy importante tener cuidado al momento de hacer la titulación ya que en este paso se debe tener mucho cuidado y sobre todo paciencia, ya que se toma en cuenta los mililitros y si nos excedemos con un poco nuestro índice de pH será erróneo.
IMÁGENES ANEXADAS
RANCIDEZ
ACEITE O GRASA VALOR OBTENIDO DE PH
VALOR DE REFERENCIA
ACEITE DE OLIVA 6.0 6.1
ACEITE RANCÍO 6.5 6.7
Los valores obtenidos en esta técnica casi fueron proporcionales a los de valores de referencia, a lo mejor lo que pudo haber disminuido el factor de pH fue al momento de tomar las concentraciones, pues debemos tener mucho cuidado y sobre todo ser precisos al momento de hacerlo en cuanto a cantidades nos refiramos.
IMÁGENES ANEXADAS
COLORACIÓN
ACEITE O GRASA SUDAN III COLORANTE DETINTA ROJA
ACEITE DE OLIVA Anaranjado rojizoSe formaron burbujas al Reaccionar el aceite con el reactivo de Sudan III
Anulado
ACEITE RANCÍO Anulado Coloración rojo intensoAl reaccionar se formaron grumos en toda la superficie
ACEITE DE ALMENDRA
Anulado Coloración roja a naranjadoSe formó en la parte de abajo un precipitado en forma de grumo
En la elaboración de esta técnica es muy importante que al momento de realizar cada muestra en cada tuvo seamos lo más exacto en cuanto a cantidades a utilizar porque un exceso de estas puede alterar nuestra coloración arrojándonos un resultado erróneo.Hay que ser muy observadores en cuento a la coloración que vaya a tomar porque muchas de las veces no hay mucho cambio. IMÁGENES ANEXADAS
OBSERVACIONES
Durante la realización de la práctica se pudieron observar diferentes comportamientos que se presentaba en los lípidos utilizados que fueron la mantequilla, la grasa vegetal, el aceite de oliva, de almendras y el aceite rancio a través de las siguientes técnica denotamos algunas separaciones y otras no ya que unos son insolubles y otros solubles en diferentes medios o disolventes orgánicos.
También se observó que con diferentes reactivos al mezclarlos presentaban un cambio de color y aspecto.
Observamos también la composición química de los diferentes lípidos que consumimos frecuentemente.
También observamos que la yema de huevo la pudimos sepáralo gracias a las diferentes solubilidades y porque este contiene esterol y fosfolípido así pudimos obtener el colesterol.
Por ultimo también pudimos observar el pH de algunas grasas.
CONCLUSIONES
Conocer las principales características de los lípidos y las reacciones que pueden sufrir es de mucha importancia para la carrera de biotecnología, y como conocimiento general de la química. Reacciones como la esterificación, saponificación y acidez, ocurren comúnmente en los lípidos y ácidos grasos, y es vital conocer qué producto se obtiene de cada reacción.
A partir de las reacciones orgánicas podemos obtener compuestos necesarios en la industria, así como otros procesos químicos. Los compuestos que no se encuentran de manera natural, pueden ser sintetizados en laboratorio si se conocen todas las condiciones necesarias para su síntesis.
Los experimentos realizados en esta práctica requirieron de mucho cuidado y tiempo ya que se utilizaron dos sesiones para llevarla a cabo. Mediante las distintas pruebas, se comprobaron las propiedades de los lípidos, específicamente del aceite de oliva y la mantequilla.
Se presentaron dificultades en la primera titulación, pero se reafirmó la técnica adecuada para realizar esta acción. Se espera que, en prácticas futuras, se realicen las titulaciones de manera correcta para así garantizar resultados confiables.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué son los jabones?Los jabones son sales de ácidos grasos.
2. ¿Cómo se pueden obtener los jabones?
Mediante la saponificación, en el proceso de hidrólisis
3. Porque en la saponificación la glicerina aparece en la fase acuosa?Porque en la saponificación, se utilizan grasas y éstas están compuestas por ácidos grasos y glicerina. Como resultado se obtiene una fase semisólida que es la sal de sodio de los ácidos grasos (el jabón), por lo tanto, en la fase acuosa quedará el alcohol (glicerina) como subproducto de la elaboración del jabón puesto que es parcialmente soluble en agua, por lo que no hay razón para que no esté presente en esta forma
4. ¿Qué enzima logra en el aparato digestivo la hidrolisis de las grasas?En el estómago la enzima lipasa gástrica y en el intestino delgado la lipasa pancreática-colipasa.
5. Indica lo que ocurre con la mezcla aceite-Sudán III y aceite-tinta y explica a que se debe la diferencia entre ambos resultados.Cuando se mezcla el aceite con el Sudán III, todo el aceite se tiñe de rojo puesto que es un colorante lipofilo (soluble en grasas) y debido a esa afinidad se utiliza para revelar la presencia de grasas. Pero la tinta roja no es soluble en grasas, por esa razón, el aceite no se tiñe de rojo con la tinta china roja puesto que no se mezclan, y la tinta se deposita en el fondo.
6. ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo? ¿Y con la de bencenos y aceite? ¿A qué se deben las diferencias observadas entre ambas emulsiones?-Al pasar unos minutos de reposo, esa emulsión desaparece por la reagrupación de las gotitas de grasa en una capa, que por ser menos densa, se sitúa sobre el agua, de mayor densidad.-Aparece una disolución homogénea, puesto que el aceite se disuelve en el benceno, sustancia orgánica y apolar al igual que el aceite.
-Simplemente por la solubilidad de las grasas: insolubles en agua y por tanto no se mezcla con ella, y solubles en disolventes apolares como él, por eso si se mezclan.
7. Escribe las fórmulas de los lípidos utilizados en la prácticaTriglicéridos
Ácido graso monoinsaturado
BIBLIOGRAFIA MONOGRAFIAS: LIPIDOS:
http://www.monografias.com/trabajos16/lipidos/lipidos.shtml
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA; LIPIDOS;http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/tipos%20lipidos.html
PORFESOR EN LINEA; LIPIDOShttp://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/lipidos.htm
ZONA DIET; LÍPIDOS, GRASAS EN LA NUTRICIÓNhttp://www.zonadiet.com/nutricion/grasas.htm
UNAM; DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA; LIPIDOShttp://laguna.fmedic.unam.mx/~3dmolvis/lipido/index.html
AULA VIRTUAL DE BIOLOGÍA; FUNCIONES DE LOS LÍPIODOShttp://www.um.es/molecula/lipi07.htm
AULA TECNOLOGICA SIGLO XXIhttp://www.aula21.net/nutricion/grasas.htm