Post on 10-Apr-2018
8/8/2019 Un Protocolo de to
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Un protocolo deUn protocolo deaislamientoaislamiento
Por Ariel Aptekmann y Francisco Dur
La historia de como gastamos 40 horas hombre paraaislar la bacteria ms comn sobre la faz de la tierra
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EnterobacteriasEnterobacterias PseudomonasPseudomonas BacilosBacilos LactobacilosLactobacilos
Toma de muestraToma de muestraParqueParqueCentenarioCentenario
ParqueParqueCentenarioCentenario
ArrozArroz YogurisimoYogurisimo
EnriquecimientoEnriquecimiento CaldoCaldoMcConkeyMcConkey
Caldo M9Caldo M9 Calor Calor de fabricade fabrica
AislamientoAislamiento AgarEMBAgarEMB Agar CetrimidaAgar CetrimidaAgarAgarMosselMossel
Agar MRSAgar MRS
PurificacinPurificacin Agar NutritivoAgar Nutritivo Agar NutritivoAgar Nutritivo AgarAgarNutritivoNutritivo
No realizadoNo realizado
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Enterobacterias Pseudomonas Bacilos Latobacilos
Caracterizacinmicroscopica
Cocobacilos GRAM - Bacilos GRAM -
Bacilos GRAM + conEspora
Subterminal NoDeformante
BacilosGRAM +
Catalasa+
+- +
Oxidasa - + NR NR
Agar HierroKligler Ac/Ac G+ SH- Alk/SC G- SH- NR NR
Amilasa- - - NR
Proteasa NR + + NR
LipasaNR + + NR
API 20 ESuspenso NR NR NR
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Parque CentenarioParque Centenario
Posible fuente de
enterobacterias yPseudomonas sp
Columba livia (Paloma)
Anas platyrhynchos (Pato)
Homo sapiens (Vagabundo)
Agua, Suelo?
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Bacillus y sus amigusBacillus y sus amigus
Fuente de Bacillus sp
Fuente de los lactobacilos
Contiene Lactobacillusbulgaricus, Streptococcus
termophilus, Lactobacillus
casseiy una bifidobacteria noespecificada
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AislamientoAislamiento
Enterobacterias AgarEMB:
- Lactosa + Peptona de carne +Azul de Metileno + Eosina
Yellow
Pseudomonas sp Agar Cetrimida:
- Cetrimida
Bacillus sp Agar Mossel:
- Peptona de carne +Manitol + Rojo de fenol
Lactobacilos Agar MRS:
-Tween 80
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EnterobacteriasEnterobacterias
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Pseudomonas spPseudomonas sp
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Bacillus spBacillus sp
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LactobacilosLactobacilos
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Catalasa y OxidasaCatalasa y Oxidasa
Reaccion de la Catalasa :Reaccion de la Catalasa :
2 H2 H22OO22 H H22O + OO + O22 ((burbujasburbujas))
OxidasaOxidasa::
ReactivoReactivo dede KovacsKovacs diclorhidratodiclorhidrato dede tetrametiltetrametil--pp--fenilendiaminafenilendiamina ( rojo( rojo eses positivo)positivo)
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Agar HierroAgar Hierro KliglerKligler
Enterobacterias: Ac/Ac G+ SH-Pseudomonas spAlk/SCG- SH-
1-Pico alcalino/fondo cido (picorojo/fondo amarillo): el microorganismosolamente fermenta la glucosa.2-Pico cido/fondo cido (picoamarillo/fondo amarillo): elmicroorganismo fermenta glucosa, ylactosa.3-Pico alcalino/fondo alcalino (picorojo/fondo rojo): el microorganismo es nofermentador de azcares.4-La presencia de burbujas, o ruptura delmedio de cultivo, indica que elmicroorganismo produce gas.5-El ennegrecimiento del medio indicaque el microorganismo produce cidosulfhdrico.
Como interpretarlo:
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Amilasa, Proteasa yAmilasa, Proteasa y
LipasaLipasa
Lo que se puede observar es el haloLo que se puede observar es el halo
de degradacin o su ausencia, parade degradacin o su ausencia, paraprotenas, almidn, o lipasas.protenas, almidn, o lipasas.
El halo es indicador de enzimas lticas.El halo es indicador de enzimas lticas.
lipasa
amilasaproteasa
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API 20 EAPI 20 E
NMERO DE IDENTIFICACIN 5 144 572 1
Escherichia colicon excelente nivel de identificacin
El API 20 E es una batera de pruebasidentificatorias, especifico para enterobacterias, seusa en conjunto con un manual que permite
identificar una especie en base a los resultados.
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SobreSobre BacillusBacillus,,
PseudomonasPseudomonas yy
LactobacillusLactobacillusAunque no hicimos una identificacion completa para estos ultimos,obtuvimos algunos datos, catalasa, oxidasa, recuento, etc
Pero no son suficientes para identificar a nivel de especie.
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MUCHAS GRACIASPORMUCHAS GRACIASPOR
NO TIRAR TOMATES!NO TIRAR TOMATES!
Y si lo hicieron, gracias por la salsa gratis!
Ecolini, mascota oficial del equipo
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