CONTENIDOS

Tema 16: Cocos Gram positivo:• Familia Micrococcaceae• Familia Enterococcaceae• Familia Streptococcaceae• Familia Staphylococcaceae

Tema 17: Cocos y cocobacilos Gram negativo:• Familia Neisseriaceae• Familia Moraxellaceae

Tema 18: Bacilos y cocobacilos aeróbicos Gram negativo:

• Familia Pseudomonadaceae• Familia Burkholderiaceae• Familia Alcaligenaceae

TEMA 16. COCOS GRAM POSITIVOS

FAMILIA: Streptococcaceae

Géneros: Streptococcus y Lactococcus

Género: Streptococcus

CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS Y DE CULTIVO:

Morfología celular

Morfología colonial

Características de cultivo

Existen especies patógenos potenciales para el hombre y animales. Pueden

estar en piel, mucosas de vías genitales, digestivas y respiratorias superiores.

CLASIFICACIÓN:

1) Propiedades hemolíticas:

HÁBITAT

Hemólisis Alfa

Hemólisis Beta

Hemólisis Gamma

COCOS GRAMPOSITIVOS BETAHEMOLÍTICOS

FENÓMENO DE CAMP (Cristie, Atkins y Munch-Peterson)

S. agalactiae

Staphylococcus aureus

Otros

2) Características antigénicas y serológicas:

Lancefield (1933) Carbohidratos de superficie Proteína M Es el más difundido No incluye algunas especies, Ej.: estreptococos viridans y S. pneumoniae

3) Basada en la capacidad de crecimiento a temperaturas de 10º y 45º C se

diferencia en los siguientes grupos:

a) Estreptococos piógenos: crecen entre 10º y 45º C y se asocia a la

formación de pus; su habitad natural es la cavidad bucal y las vías

respiratorias superiores de humanos y animales. Incluye las siguientes

especies: S. agalactiae, S. canis, S. dysgalactiae, subespecies dysgalactiae y

equisimilis, S. equi subsp. equi, S. equi subsp. zooepidemicus, S. iniae, S.

porcinus, S. pyogenes y S. suis.

b) Estreptococos orales: El hábitat natural es la cavidad

bucal y las vías respiratorias superiores de humanos y

animales, donde se encuentran las especies: S. downei, S.

gordonii, S. mitis, S. mutans, S. oralis, S. pnemoniae, S.

salivarius.

c) Estreptococos anaerobios: S. hansenii, S. morbillorum, S.

parvulus y S. pleomorfus.

d) Otros estreptococos: no crecen a 10º C pero si a 45º C. S.

bovis, S. equinus, S. hyointestinalis, S. thermophilus, S. uberis.

MODO DE INFECCIÓN Y TRANSMISIÓN:

Las infecciones pueden ser endógenas o exógenas (inhalación o

ingestión). La afección puede propagarse por aerosol, contacto directo

o fómites.

FACTOR ES DE VIRULENCIA:

Cápsula (S. equi, S. suis, y S. pyogenes); estructuras de adhesión

(fimbrias), proteínas de la pared celular (M, T y R de S. pyogenes). Los

estreptococos de los grupos A, C y G liberan las siguientes sustancias,

enzimas y productos tóxicos, que favorecen la invasión de los tejidos

del hospedador: estreptoquinasa (actividad fibrinolítica); hemolisinas

(estreptolisina S y O); lipasas, esterasas, lisozimas y neuraminidasas.

ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATÓGENO:

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A:

Streptococcus pyogenes :

Presenta antígeno de pared celular del grupo A esta formado por

ramnosa y β-N-acetilglucosamida y antígenos específicos de tipo:

M, T y R.

La capsula esta formada por acido hialurónico.

Solo tiene importancia en medicina humana, asociado a

septicemias, faringoamigdalitis, impétigo, glomerulonefritis y

fiebre reumática.

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO B:

Presenta antígeno del grupo B, un carbohidrato compuesto de L-

ramnosa, N-acetilglucosamida, galactosa y glucitol, oligosacaridos

unidos mediante enlaces fosfato.

Son m.o. capsulados.

Streptococcus agalactiae:

• Es uno de los principales agentes productos de mastitis bovina, junto con

S. dysgalactiae y S. uberis.

• También se asocia a procesos septicémicos, pielonefritis y neumonía en

perros.

• A peritonitis, septicemia y placentitis en gato, siendo reservorios del

m.o. el aparato urogenital de los animales sanos.

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C:

El antígeno especifico del grupo C esta compuesto por los

olisacaridos ramnosa y α-N-acetilglucosamida.

Presentan una cápsula de ácido hialurónico, no inmunógena.

Streptococcus dysgalactiae:

Subespecies dysgalactiae y equisimilis

Mastitis bovina.

Streptococcus equi subsp. equi:

En équidos es responsable de la papera, adenitis, gurma o

moquillo equino.

Streptococcus equi subsp. zooepidemicus:

Implicados en distintos cuadros clínicos en las especies

domesticas.

Equinos: infecciones neonatales, formación de abscesos,

endometritis y mastitis.

Porcinos: procesos septicémicos y artríticos (animales jóvenes),

endocarditis (cerdos de engorde), infertilidad y abortos en

hembras gestantes.

Perros: neumonía purulenta y septicemias.

CUADRO 1. PRINCIPALES DIFERENCIAS ENTRE ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C.

Especies Hemólisis Lactosa Trehalosa Sorbitol

S. dysgalactiae

α + + +/-

S. dysgalactiae

subsp. equisimilis

ß + + _

S. equi subsp.

equi

ß _ _ _

S. equi subsp. zooepidemicus

ß + _ +

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO D:

El antígeno especifico esta compuesto de ácido teicoico.

Entre los estreptococos que forman este grupo se pueden citar: S.

bovis, S. equinus y S. suis.

Streptococcus suis:

Muy importante en medicina veterinaria.

Son m.o capsulados.

En porcinos produce: endocarditis, neumonía, septicemias y

trastornos de la reproducción.

En humanos: septicemia, meningitis, endocarditis, se considera

una enfermedad laboral.

Artritis

Meningitis

Abscesos

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO E:

Causan fundamentalmente septicemias, infecciones del tracto

respiratorio y otros procesos clínicos en humanos y animales.

En porcinos se consideran los causantes de la linfadenitis

estreptocócica.

Streptococcus uberis:

Puede o no ser alfa-hemólitico.

Esta implicado en mastitis subclínicas.

Streptococcus porcinus:

Son beta-hemóliticos.

En cerdos se asocia a la producción de abscesos mandibulares,

faríngeos (linfadenitis maxilar).

DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO

1. Muestras: varían con la enfermedad; pus (paperas), liquido

articular (artritis), leche (mastitis), órganos-sangre (septicemias) o

exudados meníngeos (infecciones por S. suis).

2. Examen directo: frotis teñidos de Gram.

3. Aislamiento y cultivo: tomar en cuenta las características de

crecimiento y cultivo del m. o en estudio.

4. Identificación (ver cuadro).

Historia Naturaleza de la muestra Patógeno Examen directo en

clínica (tejido, leche, orina, etc.) sospechoso frasco, frotis teñido

1. Selección e inoculación de medios primarios Tinción de

anticuerpo fluorescente

Incubación aerobio, microaerófilo

o anaerobio

2. Estudio de la morfología colonial en los medios y morfología celular

por frotis teñidos por Gram de colonias seleccionadas.

3. Iniciación de cultivos puros en medios sólidos o en caldo

prueba de suscetibilidad a

antimicrobianos (si urge)

4. Estudios de tinciones de Gram en agar inclinado; pruebas de

catalasa, oxidasa, etc.

5. Selección e inoculación de medios diferenciales

Incubación Pruebas de susceptibilidad a

antimicrobianos

6. Lecturas de pruebas diferenciales: pruebas serológicas si esta indicado

7. Identificación final del microorganismo (s)

Figura 1. Pasos seguidos en general en el aislamiento e identificación de bacterias de muestras biológicas.

Coloración de Gram: Cocos

Gram – positivos en cadenas

ALFA

S.pneumoniae Optoquina sensible

Grupo D (enterococo) crece

en NaCl

Grupo Viridans Identificación por reacciones bioquímicas

Grupo Viridans – Identificación por reacciones bioquímicas

Tipo de hemólisis

Grupo D (enterococo)Crece en NaCl

Agar sangre cordero 35º - C x 18

– 24 hrs.Aerobiosis y/o CO

Grupo A Sensible - a -

bacitracina

Grupon B Prueba CAMP

Positiva

Grupo D (enterococo)Crece en NaCl

Muestras clínicasAbscesos

HemocultivosL.C.R.

OTROS

Colonias aisladas observar hemólisis

Beta

GAMMA

Frotis directo coloreado con Gram: cocos

Gram - positivosPrueba de Catalasa

NEGATIVA

CUADRO 9 – 1. CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES DE ESTREPTOCOCOS IMPORTANTES EN LOS ANIMALES.

Grupo

Hemólisis

T r ehalosa

Sorbitol

Manitol

Salicina

Lactosa

Rafinosa

Inulina

Esculina

H s i o p du i r c a ot o

Nacl

al 6,5%

Categria

S. pyogenes A ß + _ V + + _ _ _ _ _ Piógeno

S. agalactiaeB C, ß, y + _ _ (+) + _ + _ Piógeno

S. dysgalactiae C c, ß, y + _ _ _ + _ _ _ SIS

S. dysgalactiaesubesp. equisimilis C ß

+ _ _ (+) V _ _ _SIS

S. equi subesp. equi

C ß _ _ _ + _ _ _ _ Piógeno

S. equi subesp. equizooepidermicus

C ß_ + _ + + _ _ _

Piógeno

S. bovis D V _ V + + + + + _ _ Otros

Grupo

Hemólisis

T r ehalosa

Sorbitol

Manitol

Salicina

Lactosa

Rafinosa

Inulina

Esculina

H S i oP dU iR cA oTo

Nacl

al 6,5%

CategoriA

S. equinus D V Otros

S. uberis C,D,EP,V x, y

+ _ Otros

S. suis D,R,S + SIS

S. pnumoniae

+ Piógeno

S. porcinus ß + + SIS

RESISTENCIA:

Sensibles a los desinfectantes comunes y a la desecación. Todas las

especies se destruyen a 60 ºC 30 – 60 minutos. Muchas especies

sobreviven por semanas en el suelo, ropa de cama, alimentos,

corrales, equipos para ordeñar y en recipientes para leche.

IMPORTANCIA EN SALUD PÚBLICA:

Los estreptococos piógenos de animales pueden infectar al hombre.

ENTEROCOCOS (I)

Catalasa Oxidasa Crec. 10-45°C

Crec. NaCl 6,5%

Crec. 40% sales biliares

Crec. pH 9,6

ENTEROCOCOS (II)

Colonias

Hábitat

Importancia en ciencias veterinarias

Factores de

virulencia

Especies de importanci

a clínica

• Medio ambiente• Flora comensal en

mucosas de varias especies e intestinos

• Salud pública: indicadores de contaminación

fecal de alimentos

• Patógenos secundarios e

inmunosuprimidos

• Resistencia a antimicrobianos• Capacidades de

intercambio de material genético

ENTEROCOCOS (IV)Clasificación de los enterococos (Tomado y modificado de Hardie y Whiley, 1997)

Grupo Especies incluidasE. faecalis E. faecalis

E. duransE. faeciumE. hirae

E. faecium

E. mundtiiE. aviumE. pseudoaviumE. malodoratus

E. avium

E. raffinosusE. gallinariumE. casseliflavus

E. gallinarium

E. flavescensE. cecorumE. cecorumE. columbae

Especies misceláneas E. saccharolyticusE. sulfureusE. dispar

Situación taxonómica indefinida E. solitariusE. seriolicida

Importancia clínica

Importancia en salud pública: comensales en animales domésticos, pueden transmitir sus genes de resistencia a especies patógenas

2

FAMILIA: Staphylococcacea

GÉNERO: Staphylococcus

CARACTERISTICAS MORFOLÓGICAS Y DE CULTIVO:

Morfología Celular:

Morfología Colonial:

Doble hemólisisCaracterísticas de cultivo

Una característica especial es la zona doble de hemolisis. Para el

aislamiento de cepas patógenas en alimentos o heces se usan medios

de cultivos diferentes, como el Chapman – Stone.

HÁBITAT:

Piel y glándulas, mucosas (vías digestivas y respiratorias superiores)

del hombre y animales. También se encuentran contaminando

alimentos, aguas, plantas y suelo.

Doble hemólisis

CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES:

El género Staphylococcus se divide en varias especies según una

clasificación basada en:

La estructura de la pared celular (composición de

peptidoglucano, acido teicoico, presencia de proteína A).

Propiedades fisiológicas y bioquímicas (ver cuadro).

Características serológicas -------- Antígenos superficiales (no

veterinaria).

FACTORES DE VIRULENCIA:

1. Factores que interfieren la fagocitosis:

Capsula, Proteína A, Clumping factor, Coagulasa y leucocidina.

2. Hemolisinas.

3. Enzimas.

Además de la coagulasa y la leucocidina, son de importancia las

siguientes enzimas:

Estafilocinasa (fibrinolisina), Hialuronidasa,

Nucleasas (termonucleares o Dnasaa), otras enzimas (gelatinasa,

fosfatasa, lecitinasa, proteasa, lisozima, dehidrogenasa y catalasa).

4. Exotoxinas:

Enterotoxinas, Exotoxina tipo C (hasta ahora no demostrada en los

animales).

ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATÓGENO: Estafilococos coagulasa positivo (ECP)

S. aureusS. intermedius

S. hyicus Estafilococos coagulasa negativo (ECN)

S. capraeS. lugdunensisS. haemolyticusS. schleiferi

Staphylococcus aureus

Botriomicosis: lesiones granulomatosas crónicas poco comunes que afectan

la ubre de yeguas, vacas, marranas y el cordón espermático de los caballos.

S. AUREUS Poder patógeno.

Síndrome del shock tóxico

Síndrome de la piel escaldada

Mastitis en varias especies

Intoxicaciones alimentarias

Pioderma profunda

Pioderma superficial

Infecciones supurativas de heridas y septicemia en todos los

animales.

Pioderma, en especial en perros (mas común S. intermedius) y

caballos.

Piemia en corderos.

Mastitis en porcino y ovino, las hembras de ganado vacuno,

caprino, porcino y ovino.

Varias infecciones piógenas de la piel de numerosos animales.

S. aureus

Abscesos subcutáneos y celulitis en caballos y diversas infecciones

piógenas en conejos.

Artritis y septicemia en pavos.

Infecciones urinarias en hombres y animales.

Enterocolitis, que se observan principalmente en el hombre después

de terapéutica antibiótica prolongada; por ejemplo, después de

cirugía intestinal.

En el hombre: osteomielitis, sinusitis, mastitis, furúnculos, carbunco,

endocarditis, síndrome de choque toxico, neumonía, amigdalitis.

Infecciones hospitalarias. Envenenamiento alimentario.

S. aureus

Staphylococcus intermedius

Causa pioderma, otitis externa, mastitis, infecciones oculares y de

vías urinarias, foliculitis y furunculosis en perros.

Mastitis en vacas.

Staphylococcus hyicus

Es un patógeno porcino importante, causando epidermitis

exudativa o eczema húmedo y artritis séptica.

Dermatitis seborreica en caprinos, asnos, caballos.

Infecciones en piel y ubre de bovino.

Staphylococcus gallinarum

Se ha aislado de las cavidades nasales y de la piel de la gallina.

Nueva especie.

Poder patógeno incierto y el m.o se haya emparentado con S.

epidermidis.

Resistentes a concentraciones salinas.

Staphylococcus caprae

Se ha encontrado en la leche de cabra; poder patógeno

desconocido.

Staphylococcus epidermidis

Comensal piel y mucosa del hombre y los animales, por lo general

no es patógeno, pero en ocasiones causa mastitis, abscesos e

infecciones cutáneas en animales.

Staphylococcus saprophyticus

Existe libre en la naturaleza y en general no es patógeno para los

animales y el hombre.

Causa infecciones de vías urinaria y de heridas en el hombre.

DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO:

1. Muestra.

2. Examen directo (frotis y coloración de Gram).

3. Aislamiento y cultivo. Características de crecimiento y cultivos.

4. Identificación. Propiedades bioquímicas.

RESISTENCIA:

Son sensibles a los desinfectantes comunes.

El pus los protege y pueden conservarse en pus desecado por

semanas.

Algunos estafilococos pueden sobrevivir a temperaturas de 60º por

30 min.

IDENTIFICACIÓN DE COCOS GRAM POSITIVOS

GRAM – STAIN

(+)

OF – GLUCOSE

OXIDATIVE FERMENTATIVE

CATALASE

(-) (+)

Micrococcu

s

Staphylococcu

s

Streptococcus

Cuadro 10 – 1. Características diferenciales de Estafilococos y Micrococos

S. aureus

S. epidermidi

s

S. intermediu

s

S. hycus

S. saprophyticu

sMicrococc

i

Oxidasa

Coagulasa

Hemólisis

(Beta)

Pigmento

Maltosa

Producción de

acido(PAB)

Manitol

DNA asa.

Novobiosina

Glucosa (O –

F)

_

+

+

+

A ²

+³

A

+

S

F

_

_

_

_

A

+

_

_

S

F

_

+

+

_

_

+

V

V

S

F

_

V ¹

_

_

_

_

_

+

S

F

_

_

_

V

A

N T

V

_

R 6

_

+

_

_

V

_

NT

NT

_

S

O

MICROCOCCUS (I) Hábitat: suelo, agua, productos lácteos y

derivados animales, residente comensal de superficie corporal y mucosas de diversas especies.

Características morfológicas y de cultivo.

Morfología microscópica

Morfología macroscópica

Tetradas

MICROCOCCUS (II)

Potencial patógeno: solo como oportunista y cuando se han descartado otros agentes infecciosos.

Catalasa Oxidasa

Metabolismo oxidativo

3

FAMILIA: Micrococcae

GÉNEROS: Micrococcus

IMPORTANCIA EN SALUD PUBLICA:

GENERO: Micrococcus

Existen nueve especies, morfológicamente parecidos a los

Staphylococcus pero bioquímicamente diferentes.

Son cocos Grampositivos a Gram variables.

Oxidasa positivos e inmóviles.