03 Quimica Organica Trabajo Colaborativo Unidad 3 YULY

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TUTOR DE CURSO: DIEGO BALLESTEROS. PRESENTADA POR: ANA MARA LUNA CARVAJAL

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNADEscuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente

TUTOR DE CURSO:ANGELI ARIASPRESENTADA POR:YULY ROCIO PEDRAZA GONZALEZ

QUIMICA ORGANICA PRACTICA No. 6 AMINOCIDOS Y PROTENASMayo/ 2014Duitama- Boyac

Los aminocidos (aa) son molculas orgnicas pequeas con un grupo amino (NH2) y un grupo carboxilo (COOH) en su estructura. La gran cantidad de protenas que se conocen estn formadas nicamente por 20 aa diferentes. Se conocen otros 150 que no forman parte de las protenas. La formula general de un aminocido es HNH2 C COOH Rtomo carbono grupo carboxilogrupo cadena lateralgrupo aminoR es uno de los 20 diferentes cadenas laterales.A pH 7 tanto el grupo amino como el carboxilo estn ionizados HNH3 C COO R+AMINOCIDOSClasificacin AminocidosSegn su obtencinEsenciales:No pueden ser sintetizados de novo a partir de glucosa u otros AADeben ser ingeridos para obtenerlosNo Esenciales:Si pueden ser sintetizados de novo a partir de glucosa u otros AA

Aminocidos EsencialesDiez: 1.- Arginina 6.- Metionina 2.- Histidina 7.- Fenilalanina 3.- Isoleucina 8.- Treonina 4.- Leucina 9.- Triptofano 5.- Lisina 10.- Valina

Estos aminocidos no pueden ser sintetizados por las clulas animales y deben ser suministrados por la dieta.Aminocidos No EsencialesAlaninaAsparginaAcido AsparticoAcido GlutamicoGlutaminaGlicinaProlinaSerina

Aminocidos Semi-EsencialesSolo sintetizados a partir de AAECisteniaMetionina + SerinaTirosinaFenilanina

Experimento #3Pruebas cualitativas para aminocidos y protenas

Objetivos. Aplicar pruebas cualitativas y especficas que permitan reconocer grupos qumicos de los aminocidos y protenas.Someter soluciones de protenas a desnaturalizacin con agentes fsicos y qumicos.

PROTENAS

Introduccin.

Las protenas son las biomoleculas ms abundantes despus del agua y desempean un gran de funciones, que las caracterizan como componentes esenciales e indispensables para la vida.

Sus propiedades qumicas y fisiolgicas dependen no solo de su tamao, formas y propiedades de los aminocidos que las componen. Por la estructura peptdica y la presencia de determinados grupos las protenas pueden reaccionar con una variedad de agentes originndose productos coloreados. Estas reacciones reacciones son las bases para la determinacin cuantitativa y cualitativa de las protenas.

Todos los aminocidos que presentan al menos un grupo amino y uno carboxilo libre, reaccionan con las diferentes pruebas de caracterizacin.

Tipos de reacciones que nos permiten identificar una protena:

Materiales y reactivos.1. Gotero

2. Probeta de 10 ML

3. Vasos de precipitados

4. Tubos de Ensayo

5. Clara de huevo

6. Gradilla

7. Mechero

8. Pipetas

1. Reaccin con la ninhidrina:Los grupos amino libres de los aminocidos, de los pptidos y las protenas reaccionan con la ninhidrina a un pH entre 4 y 8, para dar un compuesto de intenso color azul prpura. La prueba tambin es positiva con aminas primarias y amonaco pero sin desprendimiento de CO2 . Los aminocidos prolina e hidroxiprolina dan un color amarillo en lugar del color prpura con la ninhidrina.La reaccin es muy sensible y es ideal para la deteccin de aminocidos en cromatogramas y para su cuantificacin mediante tcnicas espectrofotomtricas de las fracciones que se obtienen de columnas cromatogrficas.Esquema experimental.

Coloraciones obtenidas para la reaccin de ninhidrina.2. Reaccin xantoproteicaLos aa, que contienen un ncleo aromtico forman nitroderivados de color amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado. Las sales de estos derivados son de color naranja intenso en medio alcalino. La fenilalanina, la tirosina y en cierto grado el Triptfano, as como todas las protenas que los contienen, dan positiva la prueba.Esquema experimental.

Coloraciones obtenidas en elensayo Xantoproteico.3. Reaccin del cido glioxlico para triptfano:El grupo indlico del triptfano reacciona con cido glioxlico en presencia de cido sulfrico concentrado dando un complejo de color prpura. El cido actico glacial que ha sido expuesto a la luz contiene cido glioxlico.

Esquema experimental.

4. Reaccin para el triptfano:Este aminocido se condensa fcilmente con varios aldehdos en presencia de cidos fuertes para dar compuestos coloreados. En la reaccin se utiliza el reactivo de Ehrlich (p-dimetilaminobenzaldehdo al 10% en HCL conc.) que reacciona con un buen nmero de compuestos orgnicos tales como indoles, aminas aromticas y compuestos ureicos para dar complejos coloreados.Esquema experimental.

5. Reacciones para cistena y cistina:Cuando los aa y las protenas que contienen grupos tilicos se calientan en medio fuertemente alcalino, el azufre presente reacciona para formar sulfuros. Este sulfuro puede detectarse por la formacin de un precipitado negro de sulfuro de plomo por adicin de acetato de plomo.

Los grupos tioles tambin reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de un exceso de amonaco para dar un complejo de color rojo.

Esquema experimental.

6. Prueba para Arginina:El aa. Arginina contiene un grupo guanidino en la cadena lateral, este grupo reacciona con el reactivo de Sakaguchi (a-naftol/agua de Bromo) en medio alcalino para dar un compuesto de color rojo.Esquema experimental.

Pruebas generales de las protenas:

Los compuestos que tienen dos grupos carbamidos (-CONH-), ya sea unidos directamente o a travs de un tomo de carbono o nitrgeno, dan un color violeta con el sulfato de cobre alcalino (Reactivo de Biureth). Los tripptidos son las molculas ms pequeas capaces de dar una prueba de Biureth positiva, mientras que esto no ocurre con los aminocidos.

La prueba de Biureth es una buena prueba general para las protenas y la intensidad del color violeta es una medida del nmero de enlaces peptdicos. Algunas sustancias como la oxamida pueden dar falsos resultados positivos en ensayos cualitativos de protenas.1. Prueba de Biureth:2. Desnaturalizacin por calor y pH extremos:La desnaturalizacin es cualquier proceso por el cual el arreglo espacial de una protena cambia de la estructura ordenada de la molcula nativa a una forma tridimensional desordenada. Durante la desnaturalizacin se pierden las estructuras de orden superior de las protenas, con prdida de la actividad biolgica. Las enzimas por ejemplo, que realizan trabajos catalticos en las clulas, tienen una temperatura y un pH ptimo en el cual presentan un mximo de actividad, pero la actividad disminuye significativamente hacia valores extremos de pH y a bajas o elevadas temperaturas.Esquema experimental.

3. Precipitacin con cationes y aniones pesados y sales concentradas:Los cationes de metales pesados y los aniones de elevado peso molecular son muy usados en la separacin de protenas y en la preparacin de filtrados libres de protenas. A pH neutro por lo general las protenas tienen carga neta negativa y se combinan fcilmente con iones de metales pesados que, al neutralizar la carga producen la precipitacin. A pH por debajo del punto isoelctrico en cambio, se combinan con aniones porque presentan carga neta positiva. Soluciones concentradas de sales, de sulfato de amonio, por ejemplo, reducen en gran medida la solubilidad de las protenas, porque compiten por las molculas de agua de disponibles para la solvatacin y las interacciones protena-protena se hacen ms importantes.

MUCHAS GRACIAS..