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. Virus, Viroides . Virus, Viroides y Priones y Priones . . MicroscopíaMicroscopía

. Virus, Viroides . Virus, Viroides y Priones y Priones . . MicroscopíaMicroscopía

EL PRESENTE MATERIAL ES UNA SÍNTESIS QUE NO REEMPLAZA, SINO QUE COMPLEMENTA, AL RESTO DE LOS MATERIALES

EL PRESENTE MATERIAL ES UNA SÍNTESIS QUE NO REEMPLAZA, SINO QUE COMPLEMENTA, AL RESTO DE LOS MATERIALES

Unidad 2Unidad 2

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Diversidad de VirusDiversidad de Virus

HIV entre glóbulos rojos

Bacteriófago

Virus del Ebola

Virus de la Hepatitis B

Adenovirus aviar

Los virus son complejos de macromoléculas. Están formados por una cápsula proteica, una molécula de ADN ó ARN y, en ocasiones, una cubierta membranosa

33

REPLICACIÓN VIRALREPLICACIÓN VIRALCiclo LíticoCiclo Lítico

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Ciclo Ciclo LisogénicoLisogénico

El ADN del virus queda integrado en el ADN de la bacteria. El virus queda en

forma de profago. Los genes del profago no se expresan, replicándose

junto al ADN de la bacteria. Luego, estos profagos pueden, desencadenar

un ciclo lítico, ante determinados estímulos, produciendo la lisis de la

célula hospedadora.

55

VIROIDES y PRIONESVIROIDES y PRIONES

Los viroides son moléculas de ARN circular desnudo que se encuentran en las plantas. El

PSTV, que causa la enfermedad tubérculo

fusiforme en la papa provoca que la papa infectada forme

tubérculos alargados y retorcidos. Este viroide

también puede afectar a las plantas de tomate,

produciendo atrofia en su crecimiento y hojas retorcidas.

La proteína normal posee una estructura muy rica en hélices alfa, en cambio, la proteína patógena posee mayor cantidad de láminas beta. La proteína alterada interacciona con otra proteína normal cambiando su conformación a un estado alterado o prión, manifestando de esta forma su poder infectivo

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MICROSCOPÍAMICROSCOPÍAMICROSCOPÍAMICROSCOPÍA

77

Microscopía Óptica

• M. O.

Requiere Técnica Histológica

Microscopía Electrónica

• M.E.T.• M.E.B.

El Estudio de las CélulasEl Estudio de las Células

88

MICROSCOPIA: MICROSCOPIA: GeneralidadesGeneralidades

Resolución: capacidad de un microscopio para distinguir objetos separados por pequeñas distancias.

Limite de resolución: mínima distancia entre dos puntos para que se vean separados. Los microscopios difieren en sus limites de resolución.

-Limite de Resolución del M.O.= 0.25 m

-Limite de Resolución del M.E.= 0.20 nm (óptimo) y

1 a 2 nm (en la práctica)

-Ojo Humano = 100 mm = 0,1 mm

1 m = 0.001mm = 1 x 10-6 m

1 nm = 1 x 10-9 m

99

MICROSCOPIO ÓPTICOMICROSCOPIO ÓPTICO

Microscopioóptico clásico

1010

Observación al M.O. Observación al M.O.

Microorganismos presentes en una gota de agua de charco. El M.O. permite observarlos vivos.

1111

Técnica HistológicaTécnica Histológica

a) Obtención de la muestra

b) Fijación con formol

c) Deshidratación con alcoholes

d) Aclaración con solventes no acuosos

e) Inclusión en parafina

f) Corte con micrótomo

g) Rehidratación

h) Coloración

i) Montaje: colocación del corte en un portaobjetos

La observación al M.O. requiere del empleo de una técnica específica, la técnica histológica, que consta de los siguientes pasos:

1212

Observación de PreparadoObservación de Preparado

acino (cavidad glandular)

núcleo de célula epitelial glandular

Biopsia de glándula salival humana 40X

Los núcleos se observan en color azulado y los citoplasmas en pardo.

1313

MICROSCOPÍA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICAELECTRÓNICA

DE TRANSMISION (MET)DE TRANSMISION (MET) DE BARRIDO (MEB)DE BARRIDO (MEB)

- Imágenes planas de Imágenes planas de estructuras celulareestructuras celularess

- Permite observar hasta Permite observar hasta macromoleculasmacromoleculas

- Imágenes tridimensionalesImágenes tridimensionales

- Células completas Células completas únicamente (limite de únicamente (limite de resolución 10 nm) resolución 10 nm)

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MICROSCOPIOSMICROSCOPIOS

M.O.M.O. M.E.M.E.

MECANISMOMECANISMO Dispersión luzDispersión luz Dispersión de e-Dispersión de e-

UTILIZAUTILIZA LentesLentes Bobinas Bobinas electromagnéticaselectromagnéticas

AUMENTOSAUMENTOS Hasta 1000 vecesHasta 1000 veces Un millón de vecesUn millón de veces

COLORACIÓNCOLORACIÓN SíSí NoNo

FIJACIÓNFIJACIÓN FormolFormol GlutaraldehídoGlutaraldehído

INCLUSIÓNINCLUSIÓN ParafinaParafina ResinasResinas

CORTECORTE MicrótomoMicrótomo UltramicrótomoUltramicrótomo

COLORANTESCOLORANTES DiversosDiversos ContrastantesContrastantes

MONTAJEMONTAJE Porta y cubre de Porta y cubre de vidriovidrio

Grillas de metal o Grillas de metal o plásticoplástico

1515

E. coli

Células de Escherichia coli, bacteria habitante del tracto intestinal.

Escherichia coliEscherichia coli al microscopio al microscopio ópticoóptico

Células intestinales

1616

Escherichia coliEscherichia coli al microscopio al microscopio electrónico de transmisiónelectrónico de transmisión

1717

Escherichia coliEscherichia coli al microscopio al microscopio electrónico de barrido (scanner)electrónico de barrido (scanner)

1818

Cultivo Cultivo CelularCelular

El cultivo celular es el proceso mediante el que células procariontes o eucariontes, pueden cultivarse en condiciones controladas.

El término "cultivo celular" se usa, normalmente, en referencia al cultivo de células aisladas de eucariontes pluricelulares.

El cultivo celular es el proceso mediante el que células procariontes o eucariontes, pueden cultivarse en condiciones controladas.

El término "cultivo celular" se usa, normalmente, en referencia al cultivo de células aisladas de eucariontes pluricelulares.

1919

Fraccionamiento Celular Fraccionamiento Celular

Mediante el fraccionamiento celular se consigue separar estructuras celulares a partir de un conjunto de células.

Mediante el fraccionamiento celular se consigue separar estructuras celulares a partir de un conjunto de células.

2020

CélulasCélulas

ProcariontesProcariontes

2121

BacteriasBacterias

Lactobacillus sp.

Echerichia coli

Leptospira sp.

Vibrion cholerae

2222

Células ProcariontesCélulas Procariontes

2323

CompartimientCompartimientosos

CelularesCelulares

Células EucariontesCélulas Eucariontes

2424

CompartimientosCompartimientosLas células eucariontes poseen, además del núcleo, diversos compartimientos

delimitados por membrana. En cada uno de ellos, se realizan funciones metabólicas diferentes.

Las células eucariontes poseen, además del núcleo, diversos compartimientos delimitados por membrana. En cada uno de ellos, se realizan funciones

metabólicas diferentes.

Golgi

Peroxisomas

Amiloplastos

Cloroplasto

Mitocondria

Núcleo y R. E.

2525

Célula Animal y VegetalCélula Animal y Vegetal

2626

TIPO TIPO CELULARCELULAR

CARACTERISTICASCARACTERISTICAS REINOREINO EJEMPLOEJEMPLO

ProcarionteProcariontess

ADN desnudo y ubicado en el ADN desnudo y ubicado en el citoplasma.citoplasma.

Ausencia de núcleo, de Ausencia de núcleo, de sistema de endomembranas y sistema de endomembranas y de compartimientos.de compartimientos.

Aeróbicos o anaeróbicos.Aeróbicos o anaeróbicos.

Autótrofos o heterótrofos.Autótrofos o heterótrofos.

MoneraMonerass

EucariontesEucariontes

ADN asociado a proteínas ADN asociado a proteínas llamadas histonas y ubicado llamadas histonas y ubicado en el núcleo celular.en el núcleo celular.

Con endomembranas que Con endomembranas que producen producen compartimentalización celular compartimentalización celular y división de funciones.y división de funciones.

AeróbicosAeróbicos

Autótrofos o heterótrofos.Autótrofos o heterótrofos.

ProtistaProtistass

HongosHongos

PlantasPlantas

AnimaleAnimaless

CCAARRAACCTTEERRIISSTTIICCAASS