10.QAI.Cromatografìa

7/25/2019 10.QAI.Cromatografa

1/31

CROMATOGRAFA

Mtodos de separacindonde una mezcla de solutosdisueltos en un solvente son separados por distribucindiferencialentre dos fases .Equilibrio continuo de un soluto entre dos fases

na fase! el solvente! es mvil" lleva a los solutos a travsde otra fase fi#a estacionaria.

$a fase mvil% l&'uido o (as. $a fase estacionaria% n slidocomo )o#as de papel de

celulosa! capilares de tubos de vidrio rellenos conpol&meros or(*nicos comple#os+ o un $&'uido. ,-iste una interaccinde solutos con la fase estacionaria%

Adsorcin! particin! e-clusin por tamao e interacciones

electrost*ticas.


2/31

RAMA/ 0, $A CROMATOGRAFA

1 0e acuerdo con la fase mvil " los aparatos f&sicos

CROMATOFRAFA

Cromatografa lquida (CL) Cromatografa gaseosa (CG)

Mtodos planos Mtodos de olumnas

Cromatografaen papel (C!)

Cromatografa enapa delgada (CC")

Cromatografaen plaa delgadade alta resolui#n

(C!"AR)

CL de olumnaa$ierta

CL de alta!resi#n(%!LC)

Columnaempaquetada

Columna de paredreu$ierta (apilar)


3/31

1 0e acuerdo con el mecanismo de separacin de la faseestacionaria.

CROMATOFRAFA

Cromatografa lquida Cromatografa gaseosa

Lquido&s#lido(adsorcinL/S) Lquido&Lquido(particin L/L)

Intercambio inico

(interam$io i#nioeletrost'tio)

Gas&s#lido(AdsorcinG/S)

Gas&lquido(ParticinG/L)

Cati#n Ani#n

Exclusin por tamao

(filtrai#n moleular FM)o filtrai#n por gel (FG)


4/31

PRINCIPIOS GENERALES

Bases fisicoqumicas del proceso de separacin!

Se describen dos equilibrios diferentes"

Equilibrio de fase " entre slido# lquido $ %as!

1 Sublimacin# destilaciones!

Equilibrio de distribucin" &iferencia de solubilidad $adsorcin de los Solutos entre dos fases inmiscibles!

1 Las t'cnicas cromato%r(ficas! )undamento )* " La termodin(mica $ la interaccin

molecular!


5/31

1 COEFICIENTE DE DISTRIBUCIN DECONCENTRACIONES EN EQUILIBRIO Kd.

La distribucin es un r!ces! ter"!din#"ic!.

Ce C!ncentracin "!$ar en $a %ase estaci!nariaKd&

C" C!ncentracin "!$ar en $a %ase "'i$.

1 ISOTER(A DE ADSORCIN )DISTRIBUCINE$ e*ui$ibri! de distribucin de un s!$ut! *ue est# siend! searad! en unsiste"a cr!"at!+r#%ic! a te"eratura c!nstante ,is!t-r"ica se +ra%ica /

C"%rente a Ce/ / 0"1 $a endiente es & a Kd.

La %!r"a de $a +r#%ica deende de2La Entr!3a S!4 $a Enta$3a 5!durante e$ r!ces! de interaccin deS!$ut! 4 Fase estaci!naria 4 s!$ut! 4 s!$'ente.


6/31


7/31

)AC+OR CAPACI&A& ,-1 Indica la forma en que interact.a el analito indi/idual

entre las dos fases 0estasionaria $ m/il 1!2e 3 2o tr 3 to

4- 5 5 2o to

2o 5 2olumen muerto! 2ol!de fase m/il en la columna!2e 5 2olumen de elusin de un soluto desde la in$eccin

6asta la m(7ima concentracin 0 pico14- peque8o5 Los componentes son poco retenidos por )E!4-52alores altos indican que son bien retenidos $ posible demora en

su deteccin!Pueden ensanc6ar el pico# elusin difusa# POCA SENSIBILI&Adifcil deteccin!No /ara con /elocidad de flu9o ni con la lon%itudde la columna!


8/31

SELEC+I2I&A& :

1 )actor de separacin! Capacidad de separar dossolutos! Grado de resolucin obtenida en la separacin!: 5 4-; < 4-=: 5 02; 3 2o1 < 0 2=3 2o1

: no depende de la fuer>a de elusin si no de la afinidaddel soluto con la fase m/il $ fase estacionaria!

: puede ser /ariado modificando el componente acti/ode la fase m/il # modificando el p? o empleandoaditi/os o cambio de fase estacionaria!

En CL se /ara la )@En CG se /ara la fase estacionaria!


9/31

Res

pu

estadeld

etector


10/31

R,/O$C234 R1 Ob9eti/o de la cromato%rafa" Separar en un tiempo

ra>onable!

1 Propsito" &etectar o cuantificar los componentes en formapura! Purificar $ dilucidar su estructura!

Capacidad de resol/er los componentes separando uno deotro $ el %rado de esta resolucin!Calidad de separacin!

R es la distancia d # entre el centro de ambos picos 0 tiempode retencin1# di/idido entre el anc6o promedio de la base#!

d; d= R 5

=


11/31


12/31

1 2alores adecuados " R 5 =#; o F

si R 5 #H o menos no muestra separacin!

1 El 2alor de R depende de dos factores" Anc6o de pico $ distancia entre dos picos! Para C en C! &i(metro de manc6as $ distancia entre ellas! C plana!

1 Son indicati/os de Eficiencia de un proceso

cromato%r(fico!Calidad de separacin entre dos picos!1 Aumento de anc6o de banda " ma$or tiempo deretencin en la fase estacionaria!

1 Causas para R5 o #H")ase estacionaria no uniforme#

desequilibrio en la tranferencias de masa del solutoentre fase m/il $ fase estacionaria!

1 Solucin " Jniformidad en la fase estacionaria!


13/31


14/31

PLA+OS +EKRICOS N

1 @E&I&A NJ@RICA &E LA E)ICIENCIA &E JNACOLJ@NA!

N 5 =M 0 tr 500.


15/31


16/31

AL+JRA E*JI2ALEN+E &E PLA+OS +EKRICOS!AEP+

A,5T 6 $ 7 4 A,5T lo m*s pe'ueo posible.$ 6 altura de la columna 8 mm9

4 6 n:mero de platos tericos.

4 depende % 0i*metro morfol(ico " calidad de part&culas. Calidad de empa'ue " enve#ecimiento. Tuber&as " celda de flu#o.

;elocidad de flu#o de la fase mvil 8u9u 6 $ 7 to

toes el tiempo 'ue tarda una porcin de fase mvil para fluir porla columna.


17/31


18/31

Ecuacin de /an &eemter

5ara una cromato(raf&a (aseosa %

A,5T 6 A < =7> < C > A!= " C constantes

A6 0ifusin en remolino.

=7>6 0ifusin lon(itudinal.

>6 ;elocidad de flu#o

C6 suma de la transferencia de masa de la fase estacionaria "

la fase mvil a la A,5T


19/31

1 5ara una cromato(raf&a l&'uida .

AEP+ 5 B seala la diferencia entrecromato(raf&a (aseosa " cromato(raf&a l&'uida.

$a difusin del soluto en la fase (aseosa es m*s 8?@Aa ?@Bveces


20/31


21/31

IN)LJENCIA &E LA POLARI&A&

1 Interacciones totales de las mol'culas del sol/entecon lasmol'culas de lamuestra$ de las mol'culas delsol/enteode lamuestracon la fase estacionaria!

1 )uer>a de atraccin entre mol'culas!

)uer>as dispersi/as! 2an der aals&ipolaresPuentes de 6idr%eno!&iel'ctricas o electrost(ticas!

La fuer>a de un sol/ente est( relacionado con su polaridad!Esto %enera la serie elutrpica 0 Constante diel'ctrica1A%rupacin por su selecti/idad!


22/31


23/31

M,CA42/MO/ 0, CROMATOGRAFA

A0/ORC234

2nteracciones del /O$TO o de la FM en la superficie de unapart&cula /$20A de la Fase ,stacionaria.

Tipos de adsorbentes% 5olares " no polares.

Adsorbentes 5O$AR,/ % /uperficie aceptora de electrones8*cidos9 o superficie dadora de electrones . ,#em% Gruposamino. Ciano " diol.

Adsorbentes 4O 5O$AR,/ % Tienen en el e-tremo cadenas)idrocarbonadas! octilo! butilo octadecilo! fenilo.


24/31


25/31


26/31


27/31

PAR+ICIKN

La cromato%rafa de particin est( basada en laseparacin de solutos por su diferente distribucinentre dos fases inmiscibles!

Cromato%rafa Liquida3 lquida# la fase estacionaria est(cubierta con una sustancia polar 0 )ase normal1 # o unasustancia no polar de naturale>a or%(nica 0 )asere/ersa1!


28/31


29/31


30/31


31/31

10.QAI.Cromatografìa

Documents

Transcript of 10.QAI.Cromatografìa