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PRÁCTICA DE LABORATORIO “ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA EN HÍGADO” KLASSE: 11 IB FECHA: ENERO ___ DE 2016. PROFESORES: ISABEL BOHÓRQUEZ, FRANZ VON GILGENHEIMB, LILIBETH MARTÍNEZ 1. INTRODUCCIÓN La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima catalasa. En la industria, también se utiliza la enzima catalasa, para diferentes fines. Por ejemplo, se usa en la industria textil, para eliminar residuos de peróxido de hidrógeno. La reacción catalizada por esta enzima, se puede sintetizar en la siguiente reacción: 2 H 2 O 2 2 H 2 O + O 2 La presencia de la enzima catalasa en los tejidos de los organismos, se puede demostrar en un sencillo experimento de laboratorio. Tomamos un trocito de hígado, y lo colocamos en el fondo de un tubo de ensayo. Luego añadimos 5 ml de agua oxigenada (que es lo mismo que peróxido de hidrógeno). Inmediatamente observaremos un intenso burbujeo, que se debe al desprendimiento de oxígeno de la reacción catalizada por la enzima catalasa. Este sencillo experimento puede repetirse con distintos tejidos animales y vegetales, en los cuales encontraremos diferentes intensidades de burbujeo, dependiendo de la cantidad de catalasa presente en el tejido. Hay dos enzimas que catalizan esta reacción: catalasa en animales y protistas, y peroxidasa en planta. Incluso sin enzimas, esta reacción se llevará a cabo, pero las enzimas acelerar la reacción es muy fuerte. La catalasa se encuentra principalmente en las células del hígado. La actividad de la enzima se puede medir por diferentes indicadores: • La presión de gas que se eleva a través de la producción de oxígeno. • La concentración de oxígeno MATERIALES: LabQuest Sensor de presión de gas con manguera y enchufe Mortero Vaso de precipitados o beakers (1000 ml, 200 ml, 40 ml) CH 2 O 2 (4%) Sensor de gas Sensor de temperatura Calentadores. Balanza Caja de Petri Gradillas Mortero con mango. Pipeta gotero hígado bovino 1 – 2 g. 5 tubos de ensayo Agua Hielo USB (Por grupo) PROCEDIMIENTO: Tabla 1: Tubo de ensayo Cantidad de H 2 O 2 al 4 % (ml) Volumen de agua destilada (ml) 1 3 3 2 3 3 3 3 3 4 3 3 5 3 3 Autopista al Mar, Carrera 46, Poste 89 Electricaribe Teléfono: (57 – 5) 3598520 – Fax:(57 – 5) 3599924 [email protected] – www.colegioaleman.edu.co

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PRÁCTICA DE LABORATORIO “ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA CATALASA EN HÍGADO”

KLASSE: 11 IB FECHA: ENERO ___ DE 2016.

PROFESORES: ISABEL BOHÓRQUEZ, FRANZ VON GILGENHEIMB, LILIBETH MARTÍNEZ

1. INTRODUCCIÓN

La catalasa en una enzima que la podemos encontrar en muchos organismos vivos, y cataliza la reacción de descomposición del peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El peróxido de hidrógeno es uno de los productos del metabolismo celular en diversos organismos, pero dada su potencial toxicidad, es transformado enseguida por la enzima catalasa.En la industria, también se utiliza la enzima catalasa, para diferentes fines. Por ejemplo, se usa en la industria textil, para eliminar residuos de peróxido de hidrógeno.La reacción catalizada por esta enzima, se puede sintetizar en la siguiente reacción:

2 H2O2 2 H2O + O2

La presencia de la enzima catalasa en los tejidos de los organismos, se puede demostrar en un sencillo experimento de laboratorio. Tomamos un trocito de hígado, y lo colocamos en el fondo de un tubo de ensayo. Luego añadimos 5 ml de agua oxigenada (que es lo mismo que peróxido de hidrógeno). Inmediatamente observaremos un intenso burbujeo, que se debe al desprendimiento de oxígeno de la reacción catalizada por la enzima catalasa.

Este sencillo experimento puede repetirse con distintos tejidos animales y vegetales, en los cuales encontraremos diferentes intensidades de burbujeo, dependiendo de la cantidad de catalasa presente en el tejido. Hay dos enzimas que catalizan esta reacción: catalasa en animales y protistas, y peroxidasa en planta. Incluso sin enzimas, esta reacción se llevará a cabo, pero las enzimas acelerar la reacción es muy fuerte. La catalasa se encuentra principalmente en las células del hígado. La actividad de la enzima se puede medir por diferentes indicadores:

• La presión de gas que se eleva a través de la producción de oxígeno.• La concentración de oxígeno

MATERIALES:  LabQuest Sensor de presión de gas con manguera y

enchufe Mortero Vaso de precipitados o beakers (1000 ml,

200 ml, 40 ml) CH2O2 (4%) Sensor de gas Sensor de temperatura Calentadores. Balanza

Caja de Petri Gradillas Mortero con mango. Pipeta gotero hígado bovino 1 – 2 g. 5 tubos de ensayo Agua Hielo USB (Por grupo)

 PROCEDIMIENTO:

Tabla 1:Tubo de ensayo Cantidad de H2O2 al 4 %

(ml)Volumen de agua

destilada (ml)1 3 32 3 33 3 34 3 35 3 3

1. Ponga un pedazo pequeño de hígado (1 – 2 g) en el mortero y tritura la carne (Ayúdese con un poquito de agua).

2. Disuelva la pasta de carne en 100 ml de agua hasta que se forme una mezcla homogénea.3. Prepara los tubos de ensayo como se muestra en la Tabla 1. 4. Seleccione una variable independiente para completar el experimento (se va a trabajar con

temperatura variable 2)5. Medir y controlar la temperatura, según la tabla 3.6. Coloca el tubo de ensayo en el beaker donde controlaste el respectivo rango de temperatura.7. Saca el tubo de ensayo, agrega una gota de la solución de la enzima y tapa el tubo de ensayo con

el sensor de gas. (Agita el tubo de ensayo)8. Prepara el LabQuest para la toma de datos en un tiempo de tres minutos y 10 segundos.9. Inicia la toma de datos.10. Registra las lecturas en una USB.

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Tener en cuenta que son cinco repeticiones con las diferentes temperaturas para cada tubo de ensayo.

Tabla 2: concentración de la enzima variable 1

Tubo de ensayo

Cantidad de H2O2 al 4 % (ml)

Volumen de agua (ml)

cantidad de solución enzimática

( gotas)

1 3 3 02 3 3 13 3 3 24 3 3 35 3 3 4

Tabla 3: Temperatura Variable 2

Tubo de ensayo

Cantidad de H2O2 al 4 % (ml)

Volumen de agua (ml)

Cantidad de solución

enzimática (gotas)

Temperatura(C)

1 3 3 1 0-52 3 3 1 20-253 3 3 1 30-354 3 3 1 50-55

Tabla 4: pH Variable 3

Tubo de ensayo

Cantidad de H2O2 al 4 % (ml)

Volumen de agua (ml)

Cantidad de solución

enzimática (gotas)

Valor de pH

1 3 3 2 52 3 3 2 63 3 3 2 74 3 3 2 85 3 3 2 9

Tabla 5: concentración de sustrato variable 4

Tubo de ensayo

Cantidad de H2O2 al 4 % (ml)

Volumen de agua (ml)

cantidad de agua (ml)

1 0 2 62 1 2 53 2 2 44 3 2 35 4 2 2

La Guía de Química: http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/enzima-catalasa#ixzz2wHbD1GVg

“CONSERVA LAS NORMAS DE SEGURIDAD EN EL LABORATORIO”

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