ANALISIS DE CONOCIDOS MEDIANTE GC Y LC … · Muestra Informe Extracción ... Celda de colisión...

ANALISIS DE CONOCIDOS MEDIANTE

GC Y LC ACOPLADA A

ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Jose Juan Rivero Especialista de Producto

[email protected]

AGILENT TECHNOLOGIES

901.11.68.90

Seminario Alimentación

20-Octubre-2011

AGENDA 1.- Soluciones Agilent

• La extensión de una filosofía

•Agilent Kits de aplicaciones

•Agilent analizadores

2.- Algunos ejemplos de Kits/Analizadores

disponibles aplicados al mercado de la

alimentación.

Estrategias en el análisis de trazas de residuos en

alimentación

Superar las limitaciones actuales de muchas metodologías (FDA/EPA/EU) con los últimos desarrollos en

GC/MS/MS:

Mayor productividad, sensibilidad y calidad de resultados

Extender la aplicación de los análisis multiresiduos a compuestos más polares mediante LC/MS/MS:

Mayor robustez, sensibilidad y productividad con LC/MS/MS

Desarrollo de estrategias eficaces mediante análisis por GC/MS/MS y LC/MS/MS

Cuantificación, identificación y confirmación simultáneas

Aumentar el número de residuos analizados

Aumentar la productividad con un software MS intuitivo y potente

Revisión rápida de resultados e informes: más datos con menos recursos

Cumplimiento de las normativas Comunitaritas e Internacionales

Aplicaciones y las técnicas existentes GC/MS, LC/MS, GC/QQQ, LC/QQQ, LC/Q-TOF, LC/TOF, ICP/MS

Medicinas animales

• Identificación/cuantificación de antibióticos, esteroides, y

otras hormonas de crecimiento

El desafio está en aumentar rapidez y sensibilidad mientras disminuyen costes

Pesticidas

• Cuantificación de pesticidas conocidos

• Identificación/cuantificación de nuevos pesticidas y metabolitos

Metales traza

• Identificación/cuantificación de metales como plomo y mercurio

La “solución” al problema tiene un significado

diferente en función del usuario y su entorno

TRATAR DE DAR RESPUESTA A TODO ELLO NO SIEMPRE ES SENCILLO

¿Se trata de algo nuevo para Agilent?

Se trata de extender la filosofía de trabajo ya existente hacia

campos en los que el TIEMPO DE PUESTA A PUNTO es

esencial para el usuario

+ 60 analizadores y mas de 300

configuraciones de instrumentos

SOLUCIONES DEDICADAS

Agilent Application Kits

Agilent Analyzers

Agilent Analyzers: ¿En qué consisten?

Facilitar la instalación de sistemas

preconfigurados para una aplicación

determinada en un sistema chequeado en

fábrica para tal fin. Incluye columnas,

dispositivos de flujo capilar preinstalados,

columnas, etc…

Guía para un inicio rápido que además

incluye una muestra de test

Videos incluyendo las demostraciones

necesarias

Un ingeniero especialmente entrenado

en la aplicación, instala el sistema y

chequea que se encuentra totalmente apto

para trabajar

Agilent Application Kits: ¿Qué son?

Sistema instrumental

Pedido de forma separada o pre-existente en

el Laboratorio

Aportaciones:

Consumibles específicos de la

aplicación

Documentos específicos para la

aplicación

Librerías/Bases de Datos para

aplicación

Muestras de test específica de la

aplicación

Método disponible en un CD

Servicios de consultoría y formación disponibles de modo adicional

Analyzer/Applications Kits disponibles en FOOD

Applications Kits

Pesticide screening for LCTOF/LCQTOF

Pesticide screening for LCQQQ

Marine Biotoxines for LCQQQ Nueva Leg. Jul-2011

Fast Track Analyzers

Japanese list Pesticide GCMSD screening

Nitrosamine Analyzer on GC and Chemiluminescence detector

GCMSMS Pesticide Analyzer (BKF, PC, FC)

GCMSMS PAH Analyzer

(+backflush)

Muestra

Extracción

Purificacion

SIM/Scan GC/MSD Analyzer – para Conocidos/Desconocidos

256

83

401 Informe Final S

C

Q

Deconvolucion

Busqueda en

librería (+backflush)

LC/QQQ MRM App. kit – para Comp Conocidos

S

C

Q

GC/QQQ Analyzer – para Comp Conocidos S

C

Q

MS

C16 H19 N3 P Cl

C15 H25 O P S Cl

C18 H21 O P Cl

LC/QTOF or TOF App. Kits – para Comp Desconocidos

S

Accurate Mass

Database Search

Generación

Formula Molecular

Mass Hunter

MFE

MS

MS/MS

Fragmentacion Q C

LC-QQQ app. kit

Soluciones para el Screening de Pesticidas

Screenning , Confirmacion Cuantificacion C Q S

AGENDA 1.- Agilent Fast Track Solutions

• La extension de una filosofia





alimentación. (GCMS)

Analizadores/Kits

basados en espectrometría de

masas

Portfolio de Agilent en GC/MS

PRECIO

RE

ND

IMIE

NT

O

240 IT

7000 TQ

5975C SQ

220 IT

5975E SQ 7820 GC

with Tray support

GC Q-TOF 5975T SQ

Técnicas básicas para los analizadores GCMS

-Nuevo Inyector Multimodo para alto contenido en matriz (MMI)

-Tecnologia de flujo capilar (CFT)

-Bases de datos RTL

-Sistema Triple Cuadrupolo (MRM)

-Fungibles necesarios preparación muestra (QuEChERS)

Inyector Multimodo (MMI)

Capacidad de programación de temperatura

Hot/Cold S/SL (modo pulso), PTV, Solvent vent

Flexibilidad en los volúmenes de inyección

Análisis de muestras termolábiles y mínima discriminación en la inyección para compuestos de alto peso molecular

Mayor sensibilidad en inyecciones de grandes volúmenes

Compatible con la tecnología de flujo capilar

Venteo de disolventes y uso de Backflush

Tecnología de Flujo Capilar. División Multiplicar la información desde una única inyección

Divisor purgado de tres vías

Column in

Aux EPC in Det1 out

Det2 out Det3 out

Placas de difusión desactivadas

Alineamiento perfecto gracias a una

tecnología patentada

Sellado perfecto desde vacío a altas

presiones proporcionando un sistema

totalmente libre de fugas

La tecnología de flujo capilar usa un tipo de union que evita la presencia de colas con un mínimo volumen muerto

1.1 1.15 1.2 1.25 1.3

0

1

2

3

4

5

6 Poliimida

Unión Directa

Ultimate Union

MS-Tee QQQ

EPC Aux MMI Pres Alta

1.0 ml/min

Flujo Constante

Pres = 0 Presión RESIDUAL Presión ALTA

Backflush y análisis simultáneos: Funcionamiento

9.00 9.50 10.00 10.50 11.00 11.50 12.00

9.00 9.50 10.00 10.50 11.00 11.50 12.00

9.00 9.50 10.00 10.50 11.00 11.50 12.00

a b

Backflush (BF) con la union purgada

a = comienza el backflush

(el ultimo pico sale de la columna 1)

b = incrementa el flujo a 4 mL/min

Muestra – sin backflush

Muestra – con backflush

Blanco de disolvente - sin backflush

Retention Time Locking (RTL)

¿Qué es y para que sirve?

• El tiempo de retención es el parámetro fundamental en cromatografía.

¡Es más fácil identificar los picos si el tiempo de retención se mantiene constante!

• Retention Time Locking (RTL) permite mantener de forma muy precisa los tiempos de retención de los analitos en cualquier GC Agilent 6890/7890 que emplee la misma columna y programa de temperaturas.

• RTL permite crear Librerías de Tiempos de Retención para hacer más fácil la identificación.

• Agilent ha desarrollado un método GCMS RTL que incluye 926 pesticidas y disruptores endocrinos generando una librería de espectros de masas RTL/DRS.

• Esta base de datos contiene los espectros de masas y los tiempos de retención de los compuestos y utiliza la herramienta de screening proporcionada por el software Chemstation.

• La base de datos puede ampliarse libremente con compuestos incluidos por los usuarios.

¿Cómo Funciona el RTL?

Ajustando la presion en cabeza de columna a través del

Software de la Chemstation/MassHunter gracias a la

extraordinaria Precisión de ajuste del EPC (Controlador Electrónico

de Presión) del Cromatógrafo Agilent 7890N (0.001 psi)

0

50

100

Presión original del método RTL : 16.0 psi

16.50 min.

16.34 min.

RE-LOCK

Después de cortar la columna…

0

50

100

Nueva Presión: 15.7 psi

0

50

100

16.50 min.

Re-lock method

Ventajas RTL

Transferencia rápida de métodos (GC a GC o GCMS)

No se requiere actualizar los tiempos en las tablas de

calibración o de iones (Fácil mantenimiento de las

calibraciones y métodos de adquisición)

Identificación de compuestos desconocidos gracias a

las librerías RTL (Identifica isómeros, la identificación solo

es confirmada si coincide el tiempo de retención)

Base de datos generales para la puesta a punto de una

manera fácil de cualquier analito.

Revisión de resultados rápida y completa

Agilent 7000B Triple Quadrupole GC/MS

Especificaciones

Parámetros Especificaciones Agilent 7000B

EI MRM Sensibilidad (*)

EI Scan Sensibilidad (*)

100 fg OFN > 500:1 RMS S/N, 272 → 241

1 pg OFN scan desde 50 a 300 amu para ion 272 > 300:1 S/N

Resolución de masas Unidad de masas ajustable por tune, 0.7 a 2.5 Daltons

MRM Velocidad de scan (transitions/sec)

Minimo dwell time en MRM

500

1 ms

Rango dinámico 106

Rango de masas (m/z)

10 a 1050

Velocidad de scan Hasta 6,250 µ/s

Celda de colisión Hexapolo lineal con aceleración lineal

(*) Demostrado en cliente

Analizador GC-MS/MS Lineal

Inerte, fuente

de alta

temperatura (Igual que 5975)

Detector de Triple eje (igual que 5975)

Dos cuadrupolos de

cuarzo, monolitico,

hipoerbólico recubierto

de oro (igual que 5975)

Nuevo desarrollo, Celda

de colisión hexapolar

patentada

Bomba Turbo Edwards

Celda de colisión con Quenching por He

Celda de Colisión

Iones

Precursores He* + Disociación por colisión inducida

1.5 ml/min N2

Gas de Colisión

La transmisión de

Helio metaestable hacia el detector

es altamente

reducido; El detector de Triple

Eje reduce el ruido de neutros.

Fuente Detector de

Triple Eje

1erCuadrupolo 3er Cuadrupolo

Gas He Buffer

He* + He → 2 He + Calor

Iones

Productos + He*

Efecto del “Helium Quench” en el sistema 7000B

S/N 1294:1 Helium Quench Gas ON

S/N 341:1 Helium Quench Gas OFF

Tested with 1pg Hexachlorobenzene

Comparación del ruido

El incremento de la relación

S/N es debida a la reducción del ruido.

Detector de Triple Eje (Elimina el ruido en tres direcciones)

Cuarzo

Hiperbolico

Transmisión

Cuadrupolo

Analizador

Multiplicador de

electrones de

triple canal

Dinodo

de alta

energía

Barra de dirección

Haz de iones

Offset X

Offset Y

Offset

Z Pantalla para

partículas

secundarias

Contiene 7000 MRMs optimizados de 1000 pesticidas

-- basados en más de 1000 inyecciones

Máxima Flexibilidad permitiendo la optimización de métodos

• Promedio de 7 transiciones MRM por componente con sus

intensidades relativas

-- Muy util para evitar interferencias proveniente de la matriz

• Clasificado por compuestos, numero CAS etc. En formato excel

-- Permite busquedas y ordenación fácil para realizar métodos

• Tres métodos cromatográficos con RTs y RI

-- Permite máxima liberta para seguir flujo de trabajo del cliente

• Intensidades absolutas por cada transición MRM

-- Permite una semi- cuantificación sin el uso de estandares

La más completa base de datos MRMs con la máxima flexibilidad

Analyzer 2.0 Update – No sólo pesticidas

Hasta 1100 compuestos con mas de 8000 transiciones MRM

• Pesticidas

• Ftalatos

• PBDEs

• PAHs

• PCB congeneres

• EPA 8270 target compounds

Industrias Target: Alimentación y Medioambiente

Peso

molecular

promedio

y masa

exacta

Cada pesticida es

clasificad con hasta dos

categorias

Base de datos con RTs (y RIs) para ser usado

con hasta tres metodos de GC diferentes(CP,

CF-target, and CF-screening).

Flexibilidad: 7 transiciones; clasificaciones; 3 RTs y RIs

(Color Scales): Red denotes strong intensity and blue

denotes weak intensity among ALL transitions.

35

The Flexibility: Excel format, relative and absolute intensity

Excel MassHunter

Format

Un Ion de Cuantificacion y varios

cualificadores por compuesto

Las intensidades

absolutas y relativas

36

Click para ordenar,

esconder y mostrar los

cualificadores

37

Ordenar para rápidamente

seleccionar un Quant (Q0) y

seleccionar los tres cualificadores

(construccion sencilla de metodos)!

38

Click en el boton de ordenacion para

seleccionar/mostrar los compuestos que serán

añadidos al metodo de adquisición.

AGENDA 1.- Agilent Fast Track Solutions

• La extension de una filosofia





alimentación. (LCMS)

AGILENT LC/MS Portfolio

•6100 Simple Cuadrupolos

•6200 TOF

•iFunnel

•6400 Triple Quadrupoles

•DMRM, tMRM

•6500 QTOF

Agilent 1290 Infinity LC

El mejor sistema de

cromatografía líquida para

LC/MS – de la HISTORIA!

i-Funnel 6490 Triple Cuadrupolo LC/MS

Máxima sensibilidad,

Rápido, robusto.

Acomplamientos HPLC-Chip

i-Funnel 6550 UHD Accurate Mass Q-TOF LC/MS


Datos de ultra-alta definición,

resultados de investigación

en un sistema de sobremesa


• El mayor rango de potencia entre los

UHPLC disponibles

• Nuevo DAD de mayor sensibilidad

• Permite conversión de cualquier

método LC (ISET)

• Ultra-Rápido cambio de polaridad

• MRM más rápidos

• Dynamic MRM, Triggered MRM

• Cuantificación y Confirmación para análisis

complejos multi-compuesto.

• Sistema cualitativo de última generación

• Ultra alta resolución

• Exactitud de masa sub-ppm

• Excelente sensibilidad y rango dinámico

Clearly Better LC / LC/MS Nuevos Productos

Agilent 1290 Infinity LC

El mejor sistema de

cromatografía líquida para

LC/MS – de la HISTORIA!

i-Funnel 6490 Triple Cuadrupolo LC/MS


Rápido, robusto.


i-Funnel 6550 UHD Accurate Mass Q-TOF LC/MS


Datos de ultra-alta definición,


• El mayor rango de potencia entre los

UHPLC disponibles

• Nuevo DAD de mayor sensibilidad

• Permite conversión de cualquier

método LC (ISET)

• Ultra-Rápido cambio de polaridad

• MRM más rápidos

• Dynamic MRM, Triggered MRM

• Cuantificación y Confirmación para análisis

complejos multi-compuesto.

• Sistema cuant/cual de última generación

• Ultra alta resolución

• Exactitud de masa sub-ppm

• Excelente sensibilidad y rango dinámico

•Alta velocidad + Alta resolución

Clearly Better LC / LC/MS Nuevos Productos

Nueva serie

LC Agilent

1200 Infinity

Presentación de los instrumentos LC de la nueva plataforma

Agilent – 1220, 1260 y 1290

Nueva Serie Agilent 1200 Infinity Elevando el Estandard en HPLC – UHPLC para el Laboratorio

1260

Infinity LC

Modular

600 bar

80 Hz

2x ó 10x Sensivilidad UV

100% HPLC Compatible

Precio HPLC

Capacidades UHPLC

1220

Infinity LC

Integrado

600 bar

80 Hz

El más económico

HPLC y UHPLC

Tecnologia 1260/1290

1290

Infinity LC

Modular

1200 bar

160 Hz

Máximo rendimiento UHPLC

Máxima Flexibilidad

Coste Servicio HPLC

Nueva Serie Agilent 1200 Infinity - Rangos de Potencia

0

200

400

600

800

1000

1200

0 2 4 6 8 10

Toda Columna analítica

Transferencia de método

Mayor Resolución

Análisis más rápidos

Disolventes más viscosos

Bajas Temperaturas

Semi-preparativo

1290 Infinity LC

1260 Infinity Quat./Iso LC

1220 Infinity LC

Presión (bar)

Flujo (ml/min)

1260 Infinity Binary LC

Un nuevo rango de potencias capaz de proporcionar el máximo

rendimiento, flexibilidad, compatibilidad y protección de la inversión

LC/MS Portfolio

Triple Cuadrupolos

Serie 6400

La herramienta definitiva en

cuantificación / confirmación

Agilent ha desarrollado un

nuevo LC Triple Quad cada

año desde 2007

6460

Triple

Quad

6430

Triple

Quad

6420

Triple

Quad

6490

Triple

Quad

6460

Triple

Quad

Ren

dim

ien

to

La última tecnología en LC Triple Quads

6420

Easy Choice – Rango medio

Análisis de trazas en

rutina

6430

6460

Cuantificación Rutinaria

Tecnología

iFunnel

Análisis de Ultra-

trazas y alta

velocidad

6490

6460

Triple

Quad

LC/MS

6430

Triple

Quad

LC/MS

Escalabilidad….

6420

Triple

Quad

LC/MS

x 2

S/N

x 4

Técnicas básicas para los analizadores LCMS

-Tecnología iFUNNEL

-Herramientas de Cuantificación, barrido e identificación

-Sistema Triple Cuadrupolo (MRM,tMRM)

-Fungibles necesarios preparación muestra (QuEChERS)

Nuevo 6490 Triple Quadrupole ¡Sensibilidad a niveles de Zeptomol!

Zeptmole Sensitivity • microdosis

• analisis en gota de sangre

• analysis hormonal

• contaminantes emergentes en agua

• pesticidas – diluir e inyectar

Rango Dinámico de 6 ordenes de linealidad • elimina la dilución en serie de muestras

• analiza impurezas a nivel de trazas en una sola

inyección

Triggered MRM (tMRM) • búsqueda en librerías

• NIST data base

• librerias propias

10-21

T EC NOLOGÍA IF UNNE L C U A N T I F I C A C I Ó N - S E N S I B I L I D A D

“…sólamente somos capaces de detectar

1 de cada 103 a 105 iones

generados por electrospray (ESI) a presión

atmosférica con los diseños instrumentales

actuales.”

(Page, Smith, et al; JASMS, 2007, 18, 1582-1590)

iFunnel Technology Captura x10 veces más Iones

Hexabore Capillary

• Capilar con 6 entradas.

• Muestrea x10 más gas

rico en iones de la fuente.

• Captura la mayor parte del gas de la región de la

fuente.

Agilent Jet Stream

• Confinamiento térmico de la pluma de ESI.

• Muy eficiente

desolvatación para crear

iones en fase gaseosa.

• Crea una zona rica en iones.

Dual Ion Funnel

• Elimina el gas, pero

captura los iones

• Elimina el ruido de

neutros

• Prolonga la vida útil de

la bomba turbo

Nuevo: Agilent Jet Stream. Thermal Gradient Focusing Technology

Elevada mejora en Sensibilidad.

Mejora en la Nebulización.

Mejora en la Desolvatación.

Iones Focalizados en una zona colimada por contención térmica y muy rica en iones.

Mejora en la Eficiencia de la Ionización y Muestreo.

Gas de

nebulización

Gas de

secado

Entrada LC

Sheath gas

calentado (hasta 400ºC)

La ganancias en muestreo de iones es mayor con la

combinación de las tecnologías de Agilent Jet

Stream y el “Hexabore Capillary”.

Hexabore Sampling Capillary: Capilar de Muestreo

con 6 Conductos

* Capilar 18cm 9cm

• El muestreo con un capilar de 6 conductos aumenta

la eficiencia de muestreo de iones hasta x10 veces en

comparación con un capilar de un solo

orificio.

• Longitud capilar reducida en un 50%*:

• minimiza la pérdida de iones de alta movilidad.

• aspira más gas rico iones.

Ion Funnel de 2 Etapas Desalineadas

1ª Etapa: 8-12 Torr 2ª Etapa: 1-3 Torr

• Elimina una elevada carga de gas

• Reduce neutros

• Mejora la robustez

• Transmite iones muy

eficientemente hacia óptica de Q1

2 etapas desalineadas -----: favorece la transmisión de sólo iones

Innovaciones Instrumentales Triple Cuadrupolos

LC/MS: 6460 vs 6490

6460 LC/MS (Skimmer Configuration)

6490 LC/MS (iFunnel Configuration)

HB Cap Dual Ion Guía de Q1

Funnel Iones por RF

Curved Collision cell

Q3

Ion Detector

Ion Detector

Cap Guía de Q1 Celda Q3

Iones Colisión por RF

AJS

AJS

con

Aceleración Lineal

Axial

Conica con

Aceleración Lineal Axial

Skimmer

MRM dinámico (DMRM)

Mejora de la sensibilidad basado en la

especificidad de la transición a su tiempo

tMRM Confirmación espectral de los target sin barrido

ni perdida de sensibilidad

Optimizer

Si no se dispone de Kits de Agilent permite

buscar los valores de adquisición óptimos

para la cuantificación

Counts vs. Acquisition Time (min)

x105

1

2

3

4

5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

Segmento 1 Segmento 2

Segmento 3

Segmento 4

Análisis por segmentos vs. MRM dinámico

MRM Dinámico: No hay segmentos de tiempo

La lista de MRM se confecciona de modo dinámico basándose en el RT de los compuestos de interés

Menor tiempo de ciclo/Mejor definición de pico

Time (min) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

Compounds (10/block)

Cycle Time (sec)

Max Coincident

Cycle Time (sec)

MRM

50 80

0.4 0.4 0.4 0.4

20 40 40

Dynamic MRM

0.5 0.8 1

30

Time Segment 1 Time Segment 2 Time Segment 3 Time Segment 4

0.7

100 70

Ciclos 2 x menores permiten manejar picos cromatográficos más estrechos,

más analitos y dwell times mayores por compuesto

Principios de funcionamiento de Dynamic

MRM

Fragmentor Voltage Collision Energy

QQQ Analyte Optimizer: Máxima Sensibilidad

Optimización Automática de 2 Settings clave

Aflatoxin B1

220 V 200 V

180 V 160 V 100 V 80 V 60 V 40 V 140 V 120 V

Maximum transmission of AFL B1 [M+H]+ = 130 V Fragmentor Voltage Optimization

25 eV

20 eV

35 eV

30 eV

40 eV

15 eV

10 eV

5 eV

Product Ion Spectra Overlaid;

(All Collision Energies)

Collision Energy = 20 eV

5 eV

15 eV

10 eV

25 eV

20 eV

FIA TIC – AFL B1

Collision Energy Optimization

“Triggered MRM (tMRM) Data Dependent”: ~“Scan”

Especifico con la Sensibilidad y Rapidez de un MRM

Cuantificar e Identificar con la sensibilidad y rapidez de un MRM

1 MRM de monitorización por compuesto dispara hasta 8 MRM de

confirmación de cada uno de los compuestos detectados

Muy útil para cuantificación y confirmación masiva de analitos con Triple

Cuadrupolo: análisis multiresiduos, metabolitos …

Threshold

Secondary MRM

Transitions are “Triggered”

Primary cycle (below threshold)

Triggered cycle (above threshold)

tMRM Product Ion Spectrum

x103

8

7

6

5

4

3

2

1

0 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340

334.2 171.1

145.0

132.1

117.0

105.1 91.1 76.0

tMRM Product Ion

Spectrum

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80

76.0

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80 100

91.1

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80 100 120

105.1

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80 100 120

117.0

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 100 140

132.1

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80 100 120

119.0

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 100 140 180

145.0 x103

8

7

6

5

4 3

2

1

0 100 140 180

147.0

x103 8

7

6

5

4 3

2

1

0 80 100 120 140 160 180

171.1

334 > 76 334 > 91 334 > 105 334 > 117 334 > 119

334 > 132 334 > 145 334 > 147 334 > 171

tMRM Library Searching

Tebufenpyrad Standard 50 ppb

Library match score: 96.75

Control de 300 Pesticidas en matriz de manzana niveles de ppb cuantificados en 15 min con 1290 LC/6460 QQQ

UHPLC: Agilent 1290 Infinity LC System

1290 Infinity bomba con desgasificador integrado,

1290 Infinity Autosampler, 1290 Infinity Compartimento

termostatizado de columna con valvula de selección

Column: Aquity UPLC® BEH C18, 2.1 x 150mm, 1.7µm

VanguardTM 2.1 x 5mm BEH C18, 1.7µm pre-column

Column temperature: 70°C

Injection volume: 35µL (stacked injection, 5µL sample + 30 ul H2O)

Autosampler temp: Not controlled

Needle wash: flushport (75:25 MeOH/H2O + 0.01% formic), 10 seconds

Mobile phase: A = H2O w/5 mM ammonium formate + 0.01% formic

B = MeOH w/5 mM ammonium formate + 0.01% formic

LC flow rate: 0.5 ml/min

LC Gradient: 8%B (T=0) to 92%B (T=15 min), hold 3 min

MS: Agilent G6460A QQQ con Agilent Jet Stream

Sheath gas flow: 11 L/min

Sheath gas heater: 375ºC

Charging Electrode: 300 V (pos ion mode)

Capillary voltage: -4 kV (pos ion mode)

Nebulizer pressure: 35 psig

Drying gas temperature: 325ºC

Drying gas flow: 8 L/min

Analisis de 300 Pesticidas en una inyección de 15 min.

Nota: Con el Agilent Jet

Stream se es capaz de

analizar compuestos tipicos

de ESI y tambien

compuestos que se realizan

mejor por APCI

Agilent 1290 Infinity LC + 6460A Triple Quad con tecnología Agilent Jet Stream

~600 Transiciones en Dynamic MRM

9 replicados inyectados a nivel de 200 pg

Area %RSD = 3.2

Altura %RSD= 3.6

Analisis de 300 Pesticidas en 15 min.

ventana de 1

minuto ~ 40

Pesticidas

Avg. Signal Area: 572,160

Avg. Signal Height: 204,142

8 data points above FWHM

2.4 sec FWHM

6.0 sec @10% valley (14 data pts)

14.2 sec peak width baseline-to-

baseline (30 data points total)

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10% valley

2.4 sec FWHM

500 pg Atrazine on-column

Avg. Signal Area: 6,069

Avg. Signal Height: 2,371

7 data points above FWHM

2.2 sec FWHM

4.8 sec @10% valley (14 data pts)

10.2 sec peak width baseline-to-

baseline (27 data points total)

S/N: 119:1 (5*RMS noise)

Estimated LOQ: 500 fg or less

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2.2 sec FWHM

10%

valley

5 fg Atrazine on-column

Desisopropyl atrazine

10 pg 10 pg

Cymoxanil

Butylate

10 pg

Bromuconazol (diastereomers)

10 pg

R2= 0.99883

R2= 0.99830

R2= 0.99873

R2= 0.99859

Rectas de calibración con Dynamic MRM (10 pg – 1 ng)

5990-4254EN

Kits de Aplicaciones para

LC/MS-QQQ

Kits Base de Datos DMRM

• Adaptables a la cromatografía del usuario.

• Chequeo opcional de la aplicación on-site.

• Kit 600 pesticidas incluye:

– Columna y mezcla de test específica.

– QuEChERS Trial pack para preparación muestra.

– DVD con los parámetros del métodos/s (LC y MS).

– Nota de aplicación y guía de inicio rápido.

– Ejemplos con distintas configuraciones y HPLC’s.

• Kit 200 compuestos de interés Toxicológico incluye:

– Columna y mezcla de test específica.

– DVD con los parámetros del métodos/s.

– Nota de aplicación y guía de inicio rápido.

– Contiene esencialmente drogas de abuso y fármacos

5990-4253EN

Resumen: Aporte de Agilent al mercado de Alimentación

Extenso portfolio:

- Instrumentación, y

- Analizadores y Kits de aplicaciones.

Conocimiento

- Preparación de muestra (Kit Quechers, SPE…)

- Desarrollo de metodologías

- Resolución de problemas

Software potente

- MassHunter

MUCHAS GRACIAS

Jose Juan Rivero Especialista de Producto

[email protected]

AGILENT TECHNOLOGIES

901.11.68.90

mailto:[email protected]

ANALISIS DE CONOCIDOS MEDIANTE GC Y LC … · Muestra Informe Extracción ... Celda de colisión...

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