´´Recuento globular, hematocrito, dosaje de hemoglobina, constantes corpusculares y velocidad de sedimentación en vertebrados´´

Trujillo – Perú

Alumna: Roman Reyes Cinthia Natali

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

INTRODUCCIÓN

El volumen de sangre de los adultos se correlaciona con la masa corporal (libre

de grasa) y representa en las mujeres 3.5 L y en los hombres 4.5 L. La sangre

está formada por una parte corpuscular (células sanguíneas) y una parte

líquida (plasma). De la parte corpuscular aproximadamente el 90%

corresponde a glóbulos rojos (Rodak, 2004).

Entre las funciones de la sangre destacan entre otras el transporte de

numerosas sustancias (O2, CO2, nutrientes, productos del metabolismo,

vitaminas, electrólitos, etc.), el transporte de calor (calentamiento,

enfriamiento), la transmisión de señales (hormonas), el amortiguamiento y

defensa frente a las sustancias extrañas y microrganismos (Silbernagl y

Despopoulus, 2000).

Estas funciones son realizadas por las células sanguíneas, de las que las más

numerosas son los eritrocitos encargados del transporte de O2 y de parte del

taponamiento del pH. Entre los leucocitos, los granulocitos neutrófilos se

encargan de la defensa inmunitaria inespecífica y los monocitos y linfocitos de

las reacciones inmunitarias específicas. Las plaquetas (o trombocitos)

intervienen de forma decisiva en la coagulación de la sangre (Silbernagl y

Despopoulus, 2000).

Debido a la importancia de estas funciones y a la cantidad de células

sanguíneas que participan en estos procesos, se toman medidas que nos

indican valores normales de parámetros como: Tiempo de coagulación,

velocidad de sedimentación, hematocrito, hemoglobina, recuento de glóbulos

rojos, recuento de glóbulos blancos, volumen corpuscular medio, etc.

Por eso decidimos realizar esta práctica de laboratorio, donde determinaremos

el valor de las siguientes constantes corpusculares: Tiempo de coagulación,

velocidad de sedimentación, hematocrito, hemoglobina, recuento de glóbulos

rojos, recuento de glóbulos blancos, volumen corpuscular medio, hemoglobina

corpuscular media, concentración media de hemoglobina corpuscular. Y como

objetivo comparar los resultados obtenidos con los parámetros normales.

II. MATERIAL Y MÉTODOS

Obtención de la muestra

La sangre se extrajo típicamente de una vena, de la parte interior

del codo. El sitio se limpia con un desinfectante (alcohol). Se

envolvió una banda elástica alrededor de la parte superior del

brazo con el fin de aplicar presión en el área y hacer que la vena

se llene de sangre. Luego, se introdujo suavemente una aguja en

la vena y se recogió la sangre en un frasco conteniendo

anticoagulante. La banda elástica se retiró del brazo. Una vez

recogida la muestra de sangre, se retiró la aguja y se cubrió el

sitio de punción para detener cualquier sangrado.

Tiempo de coagulación:

Se coloca una gota de sangre en una lámina porta objeto, con un

alfiler se mueve lentamente la gota de sangre hasta observar la

formación de un delgado hilo en la punta del alfiler que vendría a

ser la fibrina formada producto de la transformación del fibrogeno.

Calculando el tiempo desde que se coloco la gota de sangre hasta

la aparición de dicho hilo. El cual seria el tiempo de coagulación.

Velocidad de sedimentación:

Colocamos el tubo de Wintrobe en la gradilla de sedimentación

cuidando que esté perfectamente bien nivelada. Con la ayuda de

la pipeta Pasteur llenamos el tubo de Wintrobe hasta la marca de

10 ó 1 con sangre previamente homogenizada. Dejamos reposar

durante una hora evitando cualquier movimiento. Hicimos la

lectura de los milímetros (mm) sedimentados en una hora.

Hematocrito:

Según el Método de Wintrobe, la sangre con anticoagulante debe

ser llevada mediante una pipeta Pasteur, hacia el tubo de

Wintrobe, co0menzando desde el fondo hasta la marca de

100mm. , teniendo cuidado de no formar espuma.

Tapar el tubo con un tapón de goma para evitar evaporación.

Centrifugar a 3000rpm. por 30 minutos.

Transcurrido el tiempo observar y medir directamente el nivel de

la columna de glóbulos rojos.

Microhematocrito:

Tomar la muestra en capilares con anticoagulante.

Debe llenarse aproximadamente 70 – 80% del capilar.

Ocluir un extremo del capilar con plastilina.

Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una

centrifuga de microhematocrito, con el extremo ocluido, adherido

al reborde extremo de la plataforma.

Centrifugar por 5 minutos entre 10000 – 12000 rpm.

Hemoglobina:

La sangre tomada se diluye en 5ml de hidróxido de amonio el cual

causa hemolisis de los hematíes.

Por medio de la pipeta de Sahli se toma exactamente 0.02 ml de

sangre total, limpiar luego la punta con papel absorbente, y verter

en un tubo de ensayo el cual contiene el hidróxido de amonio.

Dejar en reposo por espacio de 5 a 15 minutos. Luego llevar a un

espectrofotómetro con filtro verde a 540 nm. y leer la

absorbancia.

Realizar los cálculos, multiplicando la absorbancia por el factor

que es 0.1063, y así obtener la concentración de hemoglobina por

unidad de volumen (gr/dL).

Cantidad de Glóbulos rojos:

Llenar la pipeta de Thoma para eritrocitos (roja) con sangre hasta

la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de

sangre con una gasa limpia.

Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el líquido

diluyente de Hayem hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.

Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma

durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una

gota en la cámara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.

Contar las células con el objetivo 40X en las cinco cuadrículas

secundarias con la ayuda de un contador mecánico. Calcular el

número de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por

10000

Cantidad de Glóbulos blancos:

Llenar la pipeta de Thoma para leucocitos (blanca) con sangre

hasta la marca de 0.5 con ayuda una boquilla. Secar el exceso de

sangre con una gasa limpia.

Sin dejar caer alguna gota de sangre, llenar con el líquido

diluyente de Turck hasta la marca de 101 sin pasar de la marca.

Mezclar el contenido en el agitador para pipetas de Thoma

durante 1 min. Desechar las primeras 3 gotas. Dejar caer una

gota en la cámara de NEUBAUER, cubrir con una laminilla.

Contar las células con el objetivo 40X en las cinco cuadrículas

secundarias con la ayuda de un contador mecánico. Calcular el

número de eritrocitos/mm3 multiplicando el valor obtenido por

10000

Volumen corpuscular medio (VCM):

Resulta de multiplicar el valor del hematocrito en porcentaje por

10, divido todo esto entre el número de Glóbulos Rojos contados

en millones por mm3. Arroja el volumen promedio de cada GR, en

micras cubicas o femtolitros (fL).

Hemoglobina Corpuscular Media (HCM):

Se determina mediante el cociente entre el valor de la

concentración de hemoglobina de sangre total (gr/dL) multiplicado

por 10 y el número de hematíes en un mm3. Se expresa en µg.

Concentración Corpuscular Media de hemoglobina (CMHC):

Se obtiene de la multiplicación de la concentración de la

hemoglobina de la sangre total por 100, todo esto divido entre el

valor del hematocrito en porcentaje.

III. RESULTADOS

Tabla Nº 1:

ANÁLISIS LECTURA

Tiempo de coagulación 4´2”

Velocidad de sedimentación 10mm/h

Hematocrito 48%

Microhematocrito 48%

Hemoglobina 15.48g/dL

Recuento de Glóbulos rojos 2410000 /mm3

Recuento de Glóbulos blancos 5560 mm3

Volumen corpuscular medio(VCM)

Hemoglobina corpuscular media(HCM)

Concentración media de Hb. Corpuscular(CMHC)

IV. DISCUSIÓN

El número de leucocitos depende de muchos factores como, edad, peso, etc.

Para adultos los valores de referencia oscilan entre 4 500 / mm3 y 11 500 /

mm3 (Ruiz, 2003). Los valores obtenidos para recuento de glóbulos blancos en

la tabla 1 dan un número de 5560 mm3 de sangre, encontrándose dentro de

los parámetros ideales.

La referencia para hemoglobina es variable y depende del sexo, altura del sitio

de residencia, etc. Las cifras inferiores normales de hemoglobina en adultos

sanos son de 12 g/dL para mujeres y de 14 g/dL para varones. Las

cuantificaciones de Hb inferiores a las mencionadas permiten establecer el

diagnóstico de anemia. Las cifras de hemoglobina superiores a 15 g/dL para

mujeres y 18 g/dL para varones permiten establecer el diagnóstico de

eritrocitosis o polisemia (Ruiz, 2003). Por lo tanto concentración de

hemoglobina en mujer, hallada en el laboratorio (15.48 g/dL), se encuentra por

encima del limite superior, lo que no indicaría el diagnóstico de eritrocitosis o

polisemia; sino debido a al error propio de la inexperiencia de los estudiantes

en estas pruebas.

El valor encontrado del Hto se encuentra en el rango dispuesto por Rodak,

2004, el cual oscila entre 35 y 49 % para mujeres.

El Tiempo de coagulación indica el estado de los factores plasmáticos que

intervienen en el mecanismo de la coagulación (globulina antihemofílica,

protrombina, fibrinógeno, etc.) o que la dificultan (antitrombina, etc), aunque

hay que resaltar su escaso valor, pues es normal en muchos casos en los que

estos factores están alterados (M. Donado, 2005). En la práctica este tiempo

fue de 4’ 2”, valor ligeramente bajo; ya que el tiempo de coagulación normal es

de 5 a 10 minutos. Sólo si es superior a 12’ puede considerarse patológico

(Rodak, 2004).

La velocidad de sedimentación globular (VSG) es útil para monitorizar la

evolución de una enfermedad inflamatoria o diferenciar enfermedades

similares. La VSG es afectada por los eritrocitos, el plasma y factores

mecánicos y técnicos. Los eritrocitos normalmente son pequeños, sedimentan

despacio y tienen una carga superficial neta negativa, por consiguiente tienden

a repelerse entre sí (Rodak, 2004). Caso que ocurre en la VSG hallada en el

laboratorio de práctica, el cual está dentro del rango establecido por Ruiz,

2003, el cual va desde los 15 mm/h a 20 mm/h.

V. CONCLUSIÓN

Los resultados obtenidos para las diferentes pruebas, dan resultados dentro de

los parámetros establecidos, por lo que se los puede considerar como

normales, con excepción de algunos valores que varían.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS

GANONG W. 1996. Fisiología médica. El Manual Moderno.

RODAK, F. 2004. HEMATOLOGÍA: Fundamentos y Aplicaciones Clínicas.

Editorial Médica Panamericana. España. pág. 155-168.

RUIZ ARGUELLES, G. J. 2003, FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGÍA,

Editorial Médica Panamericana S.A. España., pág. 45-60.

SILBERNAGL, S. DESPOPOULUS, A. 2000. Atlas de bolsillo de fisiología.

Ediciones Harcourt. España. pág. 88.