Análisis genéticos

María Asunción López ArízteguiUnidad de Genética

Hospital Universitario Cruces

SÍNDROME DE DOWN Y OTRAS CROMOSOMOPATÍAS

JORNADA

DIAGNOSTICO

PRENATAL

JORNADA

DIAGNOSTICO

PRENATAL

1.- Analizar la situación actual de los métodos de d iagnóstico genético en el cribado

2.- Valorar las nuevas técnicas de laboratorio intr oducidas en el diagnóstico prenatal, desde la planificación del pr ograma en 2008

Objetivos

Hipótesis

La incorporación de nuevas técnicas de laboratorio a la práctica rutinaria del diagnóstico prenatal, pued e ofrecer una mayor precisión diagnóstica y permite aumentar el porcentaje de detección de alteraciones genéticas c on significado clínico.

JORNADA

DIAGNOSTICO

PRENATAL

EL LABORATORIO DE ANÁLISIS EN EL DIAGNÓSTICO DE LAS ENFERMEDADES GENÉTICAS

Innovación tecnológicaen el diagnóstico prenatal

Población de riesgo detectada a través del cribado

Diagnóstico de laboratorio en el momento actual

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

POBLACIÓN DE RIESGO DETECTADA A TRAVÉS DEL CRIBADO

• Historia clínica familiar

• Biomarcadores

• Ecografía fetal

Cribado en el 1er trimestre: nivel evidencia (A)

Riesgo mayor de 1/270

Riesgo de transmisión de enfermedades genéticas

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

Diagnóstico de laboratorio en el momento actual

Vellosidad corialLíquido amniótico

Muestras obtenidas con técnicas invasivas

QF-PCR y FISHTécnicas de diagnóstico rápido

Detectan aneuploidías cromosomas 13, 18, 21, X e Y

Cariotipo Detecta anomalíascromosómicas

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

QF-PCR

•Electroferograma de cuatro cromosomas específicos por multiplex PCR cuantitativa fluorecente (QF-PCR).

•Multiplex PCR para el cromosoma 21 detectando síndrome Down's (trisomía 21),

•Multiplex PCR para el cromosoma 13 detectando síndrome Patau (trisomía 13),

•Multiplex PCR para el cromosoma 18 detectando síndrome Edward's (trisomía 18)

•Multiplex PCRpara el cromosoma X detectando síndrome Turner's (45,X).

Diagnóstico de laboratorio en el momento actual

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

FISH

Diagnóstico de laboratorio en el momento actual

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

CARIOTIPO Diagnóstico de laboratorio en el momento actual

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PRENATAL

Consideraciones a los métodos actuales de diagnósti co genético

¿Realizar solo QF-PCR ó FISH?Ventajas

Menor dotación de infraestructura y recursos humano s y menor coste económico

InconvenientePérdida de:

diagnósticos fetalesanomalías cromosómicas equilibradas mosaicos

La QF-PCR ó FISH podrían ser recomendadas como técnicas diagnósti cas exclusivas y de elección en la indicaciones más comunes de amniocentesis

- Ansiedad y- Alto riesgo en el cribado de Síndrome de Down

Recomendación de CARIOTIPO convencional en indicaciones específicas

- TN aumentada, - Anomalía cromosómica parental equilibrada y/o - Anomalía detectada en la ecografía.

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

POBLACIÓN DE RIESGO DETECTADA A TRAVÉS DEL CRIBADO

• Historia clínica familiar

• Biomarcadores

• Ecografía fetal

Cribado en el 1er trimestre: nivel evidencia (A)

Riesgo mayor de 1/270

Ventajas del cribado en el diagnóstico de enfermedades genéticas

“Captar precozmente a las embarazadas, nos ha permitido detectar mujeres con riesgo de transmitir enfermedades genéticas, lo que ha hecho posible

mejorar el diagnóstico fetal”

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

POBLACIÓN DE RIESGO DETECTADA A TRAVÉS DEL CRIBADO

ESPECÍFICAS

INESPECÍFICAMujer embarazada conmalformaciones fetalesdetectadas en la ecografía, con

sospecha de enfermedad genética

ANOMALÍAS GENÉTICAS

Mujer embarazada con historiafamiliar de enfermedad hereditaria

Árbol genealógico •Informes clínicos

•Estudio genético a progenitores si procede•Estudio genético fetal de la enfermedad

Sospecha diagnóstica Sin sospecha diagnóstica de cual es la enfermedad

Estudio genético específico

•Cariotipo: es eficaz en el 35% y en la mayoría de las anomalías cromosómicas de la línea germinal

•Panel de genes •Arrays

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PRENATAL

Arrays - CGH

Los análisis de microarrays cromosómicos:

•Son utilizados para analizar el genoma humano

•Proporcionan una prueba de alta resolución y rapidez

•Detectan y caracterizan detalles submicroscópicos de las variaciones en el número de copias (CNVs)

• Pueden ser implementados de forma automatizada

•Los CNVs pueden representar la causa de un fenotipo anormal

•Los cambios en el CNVs no son siempre patológicos, lo que constituye un desafío en la interpretación de sus resultados

Los arrays hibridación genómica comparada (aCGH) fueron introducidos en la práctica rutinaria para el diagnóstico clínico de los desequilibrios cromosómicos (Cheung , 2005 ; Roa , 2005 ; Lu , 2007 ; Shaffer, 2007

Innovación tecnológicaen el diagnóstico prenatal

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DIAGNOSTICO

PRENATAL • VOUS (alteraciones en el número de copias de ADN

de significado incierto)• No detección de reordenamientos equilibrados• No detección de mosaicos bajos ni poliploidías • Mayor coste

Son de utilidad en las anomalías ecográficas y cariotipo normal, beneficiándose entre un 1 y un 10 % de las embarazadas, según autores e indicaciones

Consideraciones a la innovación tecnológica en el diagnóstico prenatal

¿Debemos incorporar los Arrays- CGH al diagnóstico p renatal ?

Ventajas

Inconvenientes

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

Consenso implementación de Arrays (CGH y SNP ) e n Genética Clínica, 2012. www:institutoroche.es

COMPARACIÓN DE LAS TÉCNICAS GENÉTICAS PARA DETECTAR LOS DIFERENTES TIPOS DE ALTERACIONES

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

Armengol, Hum. Genet. 2012

a Number of alterations identified that are reported in the bibliography to have phenotypic effects. This column comprises the pathologic and clinically relevant categories. The percentage of alterations with phenotypic consequences from the total of cases from each indication is shown in bracketsb Bracketed values indicate the percentage of alterations with phenotypic consequences from each indication category that were detected by each methodc Includes multiplex pregnancy, viral infection, and other rare indications

INDICACIONES SEGÚN EL MÉTODO Y % DE ALTERACIONES

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DIAGNOSTICO

PRENATAL

¿DEBEMOS SEGUIR OBTENIENDO LAS MUESTRAS POR PROCEDIMIENTOS INVASIVOS?

DNA fetal en sangre materna

QF-PCR ARRAYS

Técnicas NO invasivas

Consideraciones a la innovación tecnológica en el diagnóstico prenatal

JORNADA

DIAGNOSTICO

PRENATAL

1.- Las nuevas técnicas de laboratorio pueden ofrece r una mayor precisión diagnóstica

2.- Captar precozmente a las embarazadas en el criba do nos permite detectar mujeres con riesgo de transmitir e nfermedades genéticas

3.- Los arrays-CGH y otras innovaciones tecnológicas deben ser evaluadas y estar bien indicadas para cada caso

4.- Mientras tanto, las técnicas de diagnóstico pren atal actuales y los arrays –CGH deben coexistir hasta su total v alidación y su reemplazo si procede

Conclusiones