Análisis Toxicológico

Análisis Toxicológico

1.-Gisbert Jua () Medicina Legal y Toxicología pp.786-824. España. 2.-Patiño Nan(2003) El Laboratorio de Toxicología pp 48-51. Rev de la Universidad Nacional de Colombia.vol.51 . Autor Presentación: Espinoza Miranda

por M.C María Luisa Espinoza Miranda

Universidad de Guadalajara/Centro Universitario de Ciencias Exáctas e Ingenierías/Toxicología General FB216 / Sección D04

Unidad 1


• Proceso cuyo objetivo es la detección, identificación y cuantificación de todo tipo de sustancias químicas, en una muestra (biológicas o no biológicas), teniendo en cuenta sus propiedades fisicoquímicas.

Análisis Toxicológico Tipos de Laboratorio

•El laboratorio de toxicología ambiental

•El laboratorio de toxicología industrial u ocupacional

•Investiga sustancias tóxicas presentes en un ecosistema que puedan directa o indirectamente ocasionar riesgo a las personas, involucra análisis de aguas, alimentos, suelos y aire

•Investiga las sustancias potencialmente tóxicas involucradas en procesos de producción de empresas formales o informales, que de forma directa o indirecta puedan producir lesiones al individuo o afectar a la comunidad.


Análisis Toxicológico Tipos de Laboratorio

•Laboratorio de toxicología forense

•El laboratorio de toxicología clínica

•Investiga la sustancias tóxicas que causan la muerte , o investiga los hechos legales donde se involucran sustancias Tóxicas.

•Análisis básicos Análisis de sustancias químicas que causan intoxicación aguda; permite hacer un pronto diagnóstico para lograr detectar el mayor numero de intoxicaciones.


Análisis Toxicológico QFB

¿Cuales son mis actividades en el laboratorio de Toxicología? •Asesoramiento en recolección de muestras, manejo de sustancias químicas. •Orientación de las pruebas de laboratorio a realizar de acuerdo a las sospechas clínica y además. •Correlacionar la Historia Clínica con los posibles Tóxicos Solicitados .


•Manejo, utilización y calibración de los equipos del área. •Procesamiento y análisis de las muestras recibidas para los estudios solicitados. •Investigación y Desarrollo de nuevas metodologías para la cuantificación •Interpretación de resultados y entrega de informes.

•Entre otras….

Análisis Toxicológico QFB


Análisis Toxicológico Datos que son convenientes conocer

•Relativos a la persona intoxicada: eventos anteriores a la intoxicación o a la muerte : estado de salud, ambiente de trabajo.

•Síntomas: si aparecieron después de haber tomado alimento o bebida y cuánto tiempo después de la ingestión.


Análisis Toxicológico Datos que son convenientes conocer

•Tipo de intoxicación: Si se trata de intoxicaciones colectivas, debe comprobarse si todos los afectados tomaron de los alimentos o bebidas o solo algunos de ellos; Intencionales o accidentales.

•Vía de Entrada del Tóxico para conocer el tiempo aproximado entre la ingestión y la aparición de síntomas.

•Toxicocinética y Mecanismo de acción.


Análisis Toxicológico Cáracter del análisis

•URGENTES: el análisis no es superior a 4hrs, sus reportes son inmediatos, se dirigen a médicos o instituciones de salud que manejan pacientes de intoxicaciones agudas. •MONITOREO O DIAGNÓSTICO: El tiempo de análisis es de 1 a 5 días, son análisis de mayor complejidad y se realizan como apoyo de diagnóstico diferencial, de control terapéutico o investigación de campo.


Análisis Toxicológico Requerimientos de las muestras

•Muestra: Base Fundamental para obtener un resultado confiable. •La naturaleza de las muestras puede ser biológica o no biológica. •El tipo de muestra varia de acuerdo a la naturaleza de los tóxicos. •El análisis toxicológico es personalizado y único.


Análisis Toxicológico Requerimientos de las muestras

•Cualquier muestra deben ser identificada correctamente, en el análisis forense se debe seguir la cadena de custodia.

•Cadena de Custodia: su objetivo es evitar los errores que no están relacionados con el método analítico, comienza en el momento en que se toma la muestra e incluye la preparación y el transporte. •Todo lo que le ocurra a la muestra desde que entra en el laboratorio, antes, durante y después de su análisis debe estar perfectamente documentado.


Análisis Toxicológico Muestras biológicas

•Sangre

• Muestra más común , útil en investigación de tóxicos gaseosos, volátiles; tóxicos ácidos y neutros, así como en el análisis de alteraciones bioquímicas como metahemoglobinemia . Recomendaciones. •En el análisis clínico se recomienda solicitar 5mL de sangre cuando se conoce la naturaleza y hasta 10mL cuando es desconocida. En cadáveres se recomienda enviar máximo 100mL de sangre. •Al tomar la muestra procurar no obstruir el flujo normal de sangre, conservar a bajas temperaturas , evitar hemólisis. • utilizar EDTA 5% (proporción 1ml EDTA/ 9mL sangre) para evitar que la sangre coagule.


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•Sangre

Recomendaciones. •Utilizar sangre total o plasma para el análisis de tóxicos, si se requiere estudio enzimático se deberá utilizar suero. •Cuando la sangre sea putrefacta se deberá agitar para romper coágulos o utilizar ultrasonido (15-20seg) •En el análisis postmorten no es útil la sangre de cavidades abiertas (la toma de sangre es por punción cardiaca) •En la investigación de disolventes orgánicos (benceno, éter, alcoholes etc;) y gases (cianhídrico, monóxido de carbono etc) el frasco que contenga la sangre deberá estar totalmente lleno y cerrado herméticamente y se utilizará conservador fluoruro sódico.

1.-Gisbert Jua () Medicina Legal y Toxicología pp.786-824. España. 2.-Patiño Nan(2003) El Laboratorio de Toxicología pp 48-51. Rev de

la Universidad Nacional de Colombia.vol.51 . Autor Presentación: Espinoza Miranda

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•Orina

•Muestra común, menor interferencia, •Útil en el análisis de alcaloides, barbitúricos, arsénico, plomo, mercurio, cobre etc. •La concentración de un tóxico en este fluido puede llegar a ser hasta 100 veces mayor que en sangre. •Si la muerte ocurre rápidamente la detección de una sustancia en este fluido será imposible. Recomendaciones •En el análisis clínico se solicitan 30mL de orina de 24h, en el análisis postmorten mínimo 100mL de muestra. •Conservar a bajas temperaturas


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•Contenido gástrico, Vómitos y Lavados estomacales. Muestra de mayor importancia cuando la vía de ingreso del tóxico fue oral, o cuando el tóxico aún no se ha absorbido es decir que no hayan pasado 5-6 h después de la intoxicación. •Útil en el análisis de tóxicos orgánicos, minerales, líquidos corrosivos etc. •En ella se encuentra el tóxico sin biotransformar. Recomendaciones •En caso de lavados es necesario indicar el agente empleado y enviar la primera y última porciones de lavado Un resultado negativo en el análisis significa: que el tóxico no ingreso por la vía oral o que ya ha transcurrido mucho tiempo desde la ingesta.



Análisis Toxicológico Muestras biológicas.

Aire espirado

•Muestra fácil de obtener.

•Es útil para el análisis de sustancias volátiles : alcoholes.

•Utilizar contenedores herméticos.

•Tomar la muestra cuando la persona se encuentre en reposo.

Como cuidado general para todo tipo de muestras se deberá utilizar

contenedores limpios y que estén libres del tóxico a determinar.


Análisis Toxicológico cadáveres Hígado •Órgano de gran tamaño, las concentraciones de un tóxico en este son mayores a las encontradas en sangre. •Enviar para el análisis hasta 100g. •Útil en casos en que no sea posible obtener muestras de sangre Y en estudios postmorten. •Conservar a bajas temperaturas. Cerebro •Útil en el análisis de disolventes orgánicos (Cloroformo Tolueno etc.) y de alcohol cuando no se dispone de muestra de sangre. •Enviar para el análisis hasta 100g. •Resistente a la putrefacción, útil en estudios postmorten.


Análisis Toxicológico Muestras Biológicas

Riñón •Tejido de elección en intoxicaciones por metales u otros tóxicos que se acumulen en el, para el análisis se debe enviar hasta 100g . Bilis •En tóxicos de elevado peso molecular y aquellos que son muy liposolubles cuya eliminación es por vía biliar ej. Opiáceos, debe extraerse la vesícula intacta y remitirse por separado. Pelo, Uñas y Huesos •Útil en el análisis toxicológico de tóxicos minerales(Arsénico, Plomo, Talio, Fluór) y drogas de abuso en consumidores crónicos.




Humor vítreo •La ventaja que ofrece esta muestra es que posee pocas enzimas y es muy resistente a la putrefacción , se tiene alrededor de 2mL por cada ojo. •Es útil en el análisis de alcohol y drogas de abuso.

Análisis Toxicológico Análisis toxicológico de cadáveres


Toxico Sangre Orina Contenid

o gástrico

Cerebro Hígado Riñón Bilis Pelos Sustancia

Sospechos

a

Materiales

Drogas de

Abuso

X X X X X X X X

Alcohol

etilico

X

Disolventes

Organicos

X X X X X

Medicamentos X X X X X X X

Plaguicidas X X X X X X X X

Metales X X X X X X X X

CO y gases x

Análisis Toxicológico Muestras no biológicas

Muestras no Biológicas •Resto del producto causal de la intoxicación. •medicamentos, solventes. •Envase utilizado. Platos, vasos, botellas. •Alimentos, naturales o elaborados. •Prendas de vestir o dormir: en caso de fumigación o derramamientos de líquidos. •Plantas o preparaciones para uso medicinal(infusiones, cocimientos). •Aire , agua, suelo.

Comparar resultados vs los de muestras biológicas. El tóxico se encontrará sin biotransformar y en cantidades apreciables,

1.-Gisbert Jua () Medicina Legal y Toxicología pp.786-824. España. 2.-Patiño Nan(2003) El Laboratorio de Toxicología pp 48-51. Rev de la Universidad Nacional de Colombia.vol.51 .

Autor Presentación: Espinoza Miranda


Un dato analítico válido requiere •Muestra analítica especifica •Colección, Manejo y Transporte con extremo cuidado •Aplicación de técnicas analíticas reproducibles y precisas.


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Análisis Toxicológico Análisis de la muestra

•Se conoce la naturaleza de la sustancia tóxica

Proceder con un método especifico

Ahorro de tiempo, dinero y esfuerzo •No se conoce la naturaleza incluso no se sabe si este presente alguna Proceder al análisis riguroso


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Análisis Toxicológico Fundamentos

Investigación Toxicológica Procesos analíticos •Detección/Identificación •Cuantificación •Interpretación resultados

Muestras

•Diagnóstico de la intoxicación •Esclarecimiento de los hechos.

•Biológicas •No biológicas: ambiente, materiales

Propiedades Fisicoquímicas

•Manejo adecuado del paciente •Evolución del tratamiento


Análisis Toxicológico Fases del análisis toxicológico

•Separación o extracción del tóxico •Detección e Identificación

•Cuantificación


Aislamiento , purificación y concentración del tóxico.

Método Sensible que favorezca La detección e Identificación de variedad de tóxicos



Métodos de Extracción •Dependen de la naturaleza del Tóxico •Para su análisis los tóxicos se pueden clasificar

Tóxicos gaseosos

Tóxicos Volátiles

Tóxicos orgánicos

Tóxicos inorgánicos

Mas

numeroso



Continuación…. •Determinación analítica: si esta como tal o biotransformado •Cantidad de muestra y tipo •Posibilidades del Laboratorio



•Técnicas inmunoquímicas •Análisis directo por espectrometría de masas •Cromatografía de Líquidos (HPLC) •Espectrofotometría de Absorción Atómica



Extracción de Tóxicos gaseosos y volátiles •Destilación

Acida: Tóxicos minerales( Cloro, Yodo, Bromo Ácido Sulfhídrico, Sulfuro de Carbono, Fosforo) y tóxicos orgánicos (Acido cianhídrico, alcoholes, aldehídos, cetonas, ácidos orgánicos hidrocarburos aromáticos).

Básica: Anfetaminas, anilinas, alcaloides líquidos o volátiles

y gases solubles en agua.



Extracción de Tóxicos gaseosos y volátiles •Análisis por Cromatografía de gases (HS)

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Extracción de Tóxicos orgánicos •Extracción Líquido-Líquido o sólido-líquido •Análisis por HPLC o Espectrometría Masas •Ej. Pesticidas, medicamentos o Drogas Extracción de Tóxicos inorgánicos •Digestión en medio ácido •Análisis por Absorción atómica: Metales

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Variables que influyen en los resultados analíticos:

A. Momento de toma de la muestra.

B. Estabilidad del compuesto en la muestra y homogeneidad de esta.

C. Amplitud y reproducibilidad del método analítico.

D. Interferencias en el método analítico


Manuel Reppeto. Toxicología Fundamental. Pp. 337-374. 3ª.ed. Edit Diaz de santos.

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