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MICOTOXINAS ES PLURAL, PORQUÉ PENSAMOS

EN SINGULAR?Lisboa, 27 de junio de 2.017

Nick Adams

Antonio GonzálezGestión Integral de Micotoxinas

ALLTECH SPAIN

[email protected]

Son metabolitos secundarios del crecimiento de los hongos

toxigénicos: antibióticos, antifúngicos, insecticidas y micotoxinas(Fink-Gremmels, 2005)

Efectos negativos en la salud de mamíferos: hombre y animales

por ingestión, inhalación o por contacto a través de la piel.

Grupo heterogéneo sustancias (>300):

- Toxicidad

- Resistencia

- Bajo peso molecular

o Aflatoxinas: termorresistentes 185º C y estables en medio ácido

o Zearalenona: termorresistentes 165º C y estables en medio alcalino

o DON, T2, DAS: termorresistente 150º, 120º y 120º C

MICOTOXINAS - EL PRINCIPIO

HONGOS TOXIGÉNICOS

30-40% mohos

El crecimiento visible del hongo no implica necesariamente

contaminación por micotoxinas y viceversa.

(Fink-Gremmels, 1999)

Habitualmente varias especies de hongos afectan a una

misma materia prima. (D´Mello y Macdonald, 1997)

Una especie suele producir más de un tipo de micotoxina.

(EFSA, 2004)

‘REGLAS DE ORO’ Profesor Antonio J. Ramos

UNIVERSIDAD LÉRIDA

mailto:[email protected]

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HONGO & MICOTOXINA

Resultado NEGATIVO (análisis de aflatoxinas de las zonas afectadas por el hongo)

*FACTOR CAMPO

➢Siembra directao Contaminación endémica - Fusarium

➢Gestión de suelos:o Laboreos no adecuados

o Rotaciones de cultivos

o Fitosanitarios

o Compactación/ Erosión

➢Degradación de sueloso Desaparición de la diversidad microbiológica

o Desequilibrio del Agrobioma

*FACTOR CAMBIO CLIMATICO

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+ 2º C + 5º CTª habitual

Riesgo de contaminación por Aflatoxina B1 en el maíz en función del

escenario climático (+2 ó +5 ºC)

*CAMBIOS CLIMA Y MICOTOXINAS

Previsión enero 2.012

*FACTOR CAMBIO CLIMATICO

* ESTRÉS PRODUCCIÓN ≠ SENSIBILIDAD GENÉTICA

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*NUEVAS TECNOLOGIAS EN LA DETECCION DE MICOTOXINAS

*RESULTADOS TODOS 2012-2015

*RESULTADOS ESPAÑA 2.016

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*RESULTADOS PORTUGAL 2.017

5 MICOTOXINAS – 1º TRIMESTRE 2.017

5 MICOTOXINAS – 1º TRIMESTRE 2.017

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EFECTOS I - ENTRADA CADENA

ALIMENTACIÓN

- Aflatoxina M1 → LECHE

- Aflatoxina M1 → CARNE

- Ocratoxina A → CARNE

- Fumonisina B1 → CARNE

PROTOCOLO DE ACTUACION - GRANJA

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EFECTOS II – PRESENTACIÓN CLÍNICA

➢ Intoxicaciones agudas (poco frecuente)

➢ Intoxicaciones crónicas en las que se

acumulan los efectos tóxicos por la ingesta

de niveles continuados y relativamente

bajos de varias micotoxinas.

➢ Bajo consumo de pienso, descenso del

peso, mala respuesta a vacunas y hasta

problemas patológicos recurrentes sin

causa concreta.

EFECTOS II

PRESENTACIÓN SUBCLÍNICA

RESULTADOS FERTILIDAD

23,0029,00

11,00

85,00

20,00

50,00

27,00

39,00

60,00

25,00

50,00

25,0029,00

23,00

66,00

52,00

38,00

83,00

60,0056,00

71,00

46,00

63,00

80,00

50,0046,00

88,00

58,00

84,00

47,00

0,00

10,00

20,00

30,00

40,00

50,00

60,00

70,00

80,00

90,00

100,00

%

Procenta zabřezávání

42 %62 %

GRUPO MYCOSORBGRUPO CONTROL

Los casos de mamitis descendieron en el grupo Mycosorb

Hulik, Zeman, MZLU, 2014

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CAUSAS DEL EFECTO MULTITÓXICO

1. AUMENTO DE LA PERMEABILIDAD INTESTINAL

→ AUMENTO DE LA ABSORCIÓN DE OTRAS MICOTOXINAS

2. EFECTOS SUMATORIO O SINERGICO DE EFECTOS TÓXICOS

3. INMUNOSUPREPRESIÓN Y COMBINACIÓN CON PATÓGENOS

DONDON ↑↑↑ PERMEABILIDAD PARACELULAR

1.- AUMENTO DE LA PERMEABILIDAD INTESTINAL

76 ppb Micotoxina T-2 → NO efecto

700 ppb Zearalenona → NO efecto

76 ppb T-2 + 700 ppb ZEA →

→ HECES SANGUINOLENTAS

2.- SINERGIA DE EFECTOS TÓXICOS

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2.- SINERGIAS ESTUDIADAS

Varias fuentes

Aflatoxina

Ocratoxina

Zearalenona

Vomitoxina

Toxina T-2

Ocratoxina

Zearalenona

Vomitoxina

Toxina T-2

DAS

Acido Fusárico

A. Weaver

Sólo 50% cerdos desarrollan AC

específicos frente a PRRS

A 2.500 ppb DON…

Sólo 17% cerdos desarrollan AC

específicos frente a PRRS

At 3,500 ppb DON…

(Savard et al 2015)

3- Dietas contaminadas naturalmente con DON afectan

a la respuesta inmune inducida mediante la vacunación

con el virus del PRRS vivo atenuado

(p <0.05)

Adaptado Peter Surai European Mycotoxin Seminar Series, 2005

Yaroshenco et al., 2003

Micotoxina Inmunidad

humoral

Inmunidad

celular

Susceptibilidad a

patógenos

Aflatoxina B1 ↓ ↓ ↑

Ocratoxina A ↓ ↓ ↑

Vomitoxina ↓ ↓ ↑

Micotoxina T-2 ↓ ↓ ↑

Fumonisina ↓ ↓ ↑

3.- REDUCCIÓN DE LA CAPACIDAD DE RESPUESTA INMUNE

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VISION MONOTOXINAAflatoxinsAflatoxicolAflatoxin B1,B2,B2αAflatoxin G1,G2,G2αAflatoxin M1Austocystin AAverufin5-MethoxysterigmatocystinDihydroxysterigmatocystinMethoxysterigmatocystinSterigmatocystinNorsolorinic acidParasiticol

TrichothecenesNivalenolFusarenone XDeoxynivalenol3-Acetyldeoxynivalenol15-O-Acetyl-4-DONScirpentriol

15-AcetoxyscirpenolDiacetoxyscirpenol3α -DASNeosolaniolT-2 TriolHT-2 ToxinT-2 ToxinIso-T-2 toxinAcetyl-T-2 toxinTrichoderminTrichodermol7-a-HydroxytrichodermolVerrucarol4,15-DiacetylverrucarolTrichothecinTrichothecolone

Macrocyclic trichothecensIsosatratoxin FRoridin A,E,H,L-2Satratoxin G,HTrichoverrin A,BTrichoverrol A,BVerrucarin A,J

OchratoxinsOchratoxin A,B,αOchratoxin A,B,α-ethyl esterOchratoxin A,B,α-methyl ester

Sphinganin myotoxinsAAL toxin TA1,TA2AAL toxin TB1,TB2Fumonisin B1,B2,B3,B29

CytochalasinsChaetoglobosin A,C CytochalasinA,B,C,D,E,H,JDihydrocytochalasin BDihydrocytohalasin B γlactone

Zeralenonsα,β-ZearalanolZearalanoneα,β-ZearalenolZearalenone

Roquefortines, ergot amines and alkaloidsAgroclavine-IAuranthineAurantiamine (alkaloid 302)AurantioclavineChanoclavine-ICostaclavineCyclopeninCyclopenolCyclopeptinDihydroergotaminElymoclavineEpoxyagroclavine-IErgocristineErgometrinErgotaminFumigaclavine B,CMarcfortine A,BMeleagrinOxalinPyroclavineRoquefortine A,B,C,DRugulosuvineRugulovasine A,BSecoclavineα-Ergocryptin C

Atranone & precursorsAtranone A,B,E,F,H,J6-Hydroxydolaballa-3,7,12--trien-14-one3,4-Epoxy-6-hydroxy-dolabella--7,12-diene-one

TremorgensFumitremorgen BLolitrem BLolitriolTerritrem A,B,CPenitrem APenitremone A19-AcetoxypaxillinDeoxypaxillinPaxillina-Paxitriolb-Paxitriol CJanthitrem B

PeptidesAlamethicinα-AmanitinAntimycin A1,A2,A3,A4,A5ApicidinCyclo(Phe-Ser)Cyclosporin

Distamycin AEnniatin A1,A2,B,B1Malformin A1,A2,B1,B2,CPhalloidinValinomycin

Others2-(4-Hydroxyazobenzene)-benzoic acid2,4,6-Trihydroxytoluene2,5-Dihydroxybenzoic acid3,5-Dihydrotoluene3,7-Dimethyl-8-hydroxy-6-methoxy-isochroman3-Methylsalicylic acid5-Methylbenzene-1,2,3 triol6-MethylcitreoisocumarinAbscisic acid2-Acetyl-4(3H)-quinazoloneα-Acetyl-g-methyltetronicacidAflatremAlizarinAltenueneAlternariolAlternariol-methyl etherAltersolanol AAltertoxin IAmphotericin BAnacineAnhydrofusarubinp-AnisaldehydeAntibiotic YArabenoic acid (Verrucolone)Aurofusarine

AscochitineAspergillic acidAspergillic acid-polymerAsperthecinAsteltoxinAsterric acidAustamideAustdiolBaccatin IIIBarnolBeauvericin1,3-BenzendiolBenzoic acidBikaverinBis-dethio-bis(methylthio)-gliotoxin BostrycinBostrycoidinBrassicasterolBrefeldin ABrevianamide AButenolideByssochlamic acidCaffeic acidCaffeineCalphostin CCanadensolideCandidusin CCanescinCarlosic acidCarolic acidCatenarinChaetocinChetominChromanol 1, 2, 3ChrysazinChrysogineChrysophanol

Cinnamic acidCircumdatin A, B, CCitreoisocumarinCitreomontaninCitreoviridin A, XCitrininCitromycetinCladofulvinCladosporinClerocidinCommunesin A, BCompactinCulmorinCurvularinCyclochlorotineCyclopaldic acidCyclopiazonic acidCynodontinDaldinin D

Bis-dechlorogeodinDechlorogriseofulvinDehydrocarolic acidDehydrocurvularinDeoxybostrycinDermoglaucinDes-acetylpebrolideDesertorin A,B, CDes-methoxyviridiolDesmosterolDethiosecoemestrinDiaporthinDiaportin acidDiaportinolDichlorodiaportincis-Dihydrofusarubintrans-DihydrofusarubinDihydrojasmonic acid29,39-DihydrosorbicillinDihydroxyaflavinine3,5-Dimethyl-6-hydroxyphthalideDimethylphthalateDipicolinic acidDithiosilvatinDuclauxinDustaninEchinulinEmestrinEmestrin BEmindole DA,DBEmodinEpicorazine AEpi-dechlorogriseofulvinEpoxysuccinic acidEquisetinErgosterol

ErythroglaucinEthisolideExpansolideFerulic acidFlavoglaucinFormyl-xanthocillin XFrequentinFructigenineFucosterolFulvic acidFumagillinFumagillolFumiguinazoline FFusaproliferinFusaric acidFusarin CFusarochromanone CFusarubinFusicoccinFusidic acid

FusoxysporoneGallic acidGentisylalcoholGibberellic acidGibepyrone A,FGliotoxinGliovirinGriseofulvinGriseophenone CHelminthosporinHelvolic acidHistamin59-Hydroxyasperentinp-Hydroxybenzoic acidp-Hydroxycinnamic acid5-Hydroxymaltol4-Hydroxymelleinω-Hydroxypachybasinp-Hydroxyphenylacetic acidIndolacetic acidInsulicolide A,B

Insulicolide BIodinineIslandicinIsoemodinIsomarticinItalicic acidItalicic acid-methyl esterItalinic acidJasmonic acidJasmonic acid-methyl esterJavanicinKojic acidKotaninLactone 1,2LambertellinLanosterolAscorbic acidLeucyltryptophanyldiketopiperazineLichexanthoneL-PhenylalaninL-tyrosinLuteoskyrinMacrosporinMaculosinMarticin3-Methoxyviridicatin6-Methylsalicylic acidMevinolinMitomycin CMitorubrinMitorubrinic acidMitorubrinolMitorubrinol acetate CMizoribine

MollisinMoniliforminMonordenMycophenolic acidMyriocinNectriafuroneNidulinNigragillin3-Nitropropionic acidNominineNorjavanicinNorlichexanthoneNortryptoquivalineOleic acidOosporeinOphiobolin GOrsellinic acidOxalic acidPachybasic acidPachybasinPalitantin

ParacelsinPaspalinePaspalininPenicillic acidPenicillin GPhaseic acidPhoenicinPhomarinPhyscionPI-3PR-1635PreechinulinPR-iminePropyl-3,4,5-trihydroxybenzoatePR Toxin

PuberulinePuberulonic acidPurpurinPurpurogenonePyrogallol2-PyruvoylaminobenzamideQuestinQuestinolRadicininRavenelinRiboflavinRoseopurpurinRubratoxin A,BRugulosinSalicin

Salicyclic acidSclerotigeninScytalidineScytalone

Secalonic acid DShikimic acidSkyrinSMTP-6,-7,-8SolaniolSoranjidiolSorbicillinSpinulosinStaplabinSteckiinStemphoneStipitatic acidSulochrinTaxolTentoxinTenuazonic acidTerreinTerrestric acidTerretoninThiamin, hydrochlorideToluhydroquinone

TomatineTorreyol3,4,5-Trihydroxy-7-methoxy-2-methylanthraquinoneTrisdechloronornidulinTrypacidinTryptophanTryprostatin BTyramineUsnic acidVermiculinVerrucine A,BVerrucofortineVerrucosidinVerrucosineVerruculogenVerruculotoxin10-Epi-verruculotoxinVertinolideViolaceic acidViomelleinVioxanthinViridamineViridicatic acidViridicatinViridicatumtoxinViridiolViriditoxinVisoltricinWalleminolWalleminone

WortmanninXanthocillin XXanthomegnin

1. Gestion en Campo (siembra y cultivo)

2. Gestión en Cosecha (estado y momento)

3. Gestión en Secado y Almacenamiento

4. Gestión en Transporte

5. Manejo de la materia prima

6. Gestión en Fábricas de Pienso

7. Manejo y Monitorización en Distribución

8. Establecimiento de Límites del Riesgo

9. Elección ADSORBENTE

10. Gestión en Producto Final

PROGRAMA GESTION INTEGRAL DE MICOTOXINAS

*GESTIÓN EN CAMPO – PROYECTO MICOCAT

➢ Gestión de restos de siembra

➢ Fecha de Siembra

➢ Variedad del Grano (NO Existen Variedades Resistentes)o Ciclo

o Susceptibilidad a Fusarium

o Resistencia parásitos (Barrenadores, Helicoverpa spp)

➢ PREFLORACIÓN - Estrés hídrico

➢ FLORACIÓN - Pluviometría

➢ POSTFLORACIÓN - Tª, Humedad

➢ ATAQUE INSECTOS - Barrenadores y Helicoverpa spp.

➢ Formación del Grano - Tª, Humedad

➢ Fecha de cosechao Cosechar a tiempo

o Eficacia del secado

➢ Gestión PREALMACENAMIENTO

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FECHA DE COSECHA

5 de mayo de 2.016







7. Manejo y Monitorización en granja





8 – ESTABLECIMIENTO DE LIMITES DE RIESGO PARA MICOTOXINAS

ALIMENTOS PARA ANIMALESOcratoxina A

Máx. ppm

Zearalenona

Máx. ppm

DON

Máx. ppm

Fumonisina B1+B2

Máx ppm

Piensos compuestos complementarios - - 5 -

Pienso complementarios y completos

para cerdos/as0,05 0,25 0,9 5

Piensos complementarios y completos

de lechones y nulíparas- 0,1 - -


para aves de corral0,1 - - 20


para caballos, conejos y animales de

compañía- - - 5


de rumiantes mayores de 4 meses y

visones- - - 50


para vacas y terneros, ovejas y

corderos, cabras y cabritos- 0,5 - -

Pienso complementarios y completos

terneros, corderos y cabritos- - 2 20

Piensos compuestos y

complementarios de peces- - - 10

Cereales y productos de cereales 0,25 2 8 -Subproductos de maíz 0,25 3 12 -

Maíz y productos a base de maíz - - - 60

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“Obviamente, el objetivo de analizar los alimentos alrededor del mundo paraestudiar la copresencia de múltiples micotoxinas debe ser iniciado y el peligro realde tal coocurrencia en la salud humana debe ser evaluado. Además, nuevos puntoscrítitos de control deben ser introducidos en los Sistemas APPCC dentro de la UE yglobalmente debiendo estos considerar las interacciones que existen entre variasmicotoxinas que pueden estar contaminando alimentos y productos alimenticios.”

Stoev, 2015

Valor Riesgo Equivalente (REQ) = Sumatorio (valor x factor de toxicidad) para cada micotoxina presente













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KIT RÁPIDOS – MATERIAS PRIMA Y LECHE

Reglamento Higiene Piensos 183/2005

Lo que entra en fábrica: RIESGO ALTO

Lo que se genera en fábrica: RIESGO BAJO

APPCC MICOTOXINAS PARA FABRICAS DE PIENSO: CONSIDERACIONES

PLAN DE FORMACION

GUIA DE BUENAS PRACTICAS

VALORACION - HOMOLOGACION DE PROVEEDORES

Trazabilidad, Control de temperaturas/residuos, Limpieza y Desinfección, DDD, Mantenimiento de equipos….

PROGRAMA DE PRERREQUISITOS

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7. Manejo y Monitorización en granja





SILOS GRANO/PIENSOS: ASPECTOS CLAVE

➢ Diferencias de temperatura y humedad (día/noche e invierno/verano)

➢ Limpieza de paredes en cada vaciado (golpeo)

➢ Uso de velas antifúngicas despues de la limpieza

➢ Revisión periódica del estado de las paredes

7 - PROTOCOLO DE ACTUACION - GRANJA












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MINA BENTONITA, PARAÍBA- BRASIL

ADSORBENTES MINERALES - INORGÁNICOS

ARCILLAS OBTENIDAS EN LA NATURALEZA

HSCA (Aluminosilicatos sódicos y cálcicos hidratatos)

Bentonita sódica son efectivos.

Alta capacidad de intercambio de cargas eléctricas

Sólo AFLATOXINA tiene una alta carga eléctrica.

Espectro de actividad muy reducido

Interaccionan también con antibióticos (tetraciclinas, macrólidos,

robenidina e ionóforos)

Interaccionan también con mierales (Zn, Cu) y vitaminas,por ello

RECOMIENDAN UN USO TEMPORAL

Variabilidad y contaminación

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9- ADSORBENTES MINERALES - INORGÁNICOS

Control (Normal liver tissues) Control + Aflatoxin B1 100 ppb (lesiones tej. hepático)

Control + Aflatoxin + Bentonite + Monensina 55ppm (Bentonita liga monensina, reduciéndose la adsorción de aflatoxina, dando como resultado las lesiones del tej. hepático nuevamente)

Control + Aflatoxin + Bentonite0.3% Bentonite liga aflatoxina, (reducción del daño hepático)

2011 Poultry Science 90:352-357, Magnoli et al.

Reglamento 1060/2013 autorización

bentonita

9 – ELECCION DEL ADSORBENTE - INCOMPATIBILIDADES

ADSORBENTE ORGÁNICO – GLUCOMANANOS DE PCL

Obtenido de la PARED INTERNA DE UNA CEPA NO OGM

Saccaromyces cerevisiae - ALLTECH INC.

Pared interna con una superficie de adsorción equivalente

1 g = 20 m2 → 1 kg = 2 Ha.

Superficie:1 g de PCL = 20 m2

1 kg de PCL = 2 hectareas

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OPTIONAL HEADER

A. Yiannikouris

El Dr. G. Devegowda demuestra la capacidad de Mycosorb® para actuar en 30 minutos

Comienza la investigación sistemática de Mycosorb® en el laboratorio del Dr. T.K. Smith, Guelph, Canadá

A. Yiannikouris y su grupo comienza a trabajar con múltiples variedades de algas en Nicholasville, Kentucky, EE.UU.

El Dr. A. Yiannikouris describe los mecanismos físicos y químicos que explican el modo de acción de Mycosorb®.

Mycosorb® sigue siendo la tecnología líder en el mundo con 13 tesis doctorales y más de 50 artículos (peer-review) publicados influyentes

Se crea Mycosorb® a través de modificaciones de los glucomananos de la pared celular interna de la levadura

1994 1995

MYCOSORB™by

Mycosorb® recibe una patente de la Oficina de patentes y marcas registradas de EE.UU.

El Dr. Karl Dawson y su grupo descubre las

condiciones óptimas necesarias para la máxima

eficacia de Mycosorb®

1999

20002002

2004

2007

2011

20132009

GLUCOMANANOS PCL ESPECÍFICA DESDE 1.994

2012

TMA. Yiannikouris y su grupo comienza a investigar las micotoxinas con técnicas

de CL-EM.

2008

Inicio de la producción de algas en Winchester, Kentucky, EE.UU.

Lanzamiento de Mycosorb A+® con mayor capacidad y afinidad para retener micotoxinas.

La extrema similitudgeométrica favorece la interacción

Interaction energy (kcal/mol)

Mycotoxins ZEA DON AFB1

Van der Waals - 44.6 - 16.5 - 35.7

Electrostatic - 12.3 - 14.7 - 3.5

Total - 55.9 - 31.2 - 39.2

Detalles moleculares del modo de acción Detoxificación

A. Yiannikouris et al, Biomacromolecules 2004; 2006

Trabajos Publicados IN VIVO

Mayores garantías

Trabajos Publicados IN VITRO

Ninguna garantía de

funcionamiento

ADSORBENTES

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GLUCOMANANOS PCL ESPECÍFICA

PORCINO

AVICULTURA

CATALOGO DE PUBLICACIONES

Los animales son su negocio. Protegerlos es el nuestro.

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