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Disertante: Dr. Atilio Pedro Castagnaro. “Aproximaciones biotecnológicas para contribuir a incrementar la sostenibilidad agroindustrial” Panel Foro XX Congreso de Técnicos Azucareros de Centro América XIII Congreso de Técnicos Azucareros de Guatemala Antigua de Guatemala, 10-14 de Agosto de 2015.

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Disertante: Dr. Atilio Pedro Castagnaro.

“Aproximaciones biotecnológicas para contribuir a incrementar la sostenibilidad agroindustrial”

Panel Foro

XX Congreso de Técnicos Azucareros de Centro América

XIII Congreso de Técnicos Azucareros de Guatemala

Antigua de Guatemala, 10-14 de Agosto de 2015.

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Generación de nuevos cultivares: el Programa de Mejoramiento Genético de la Caña de Azúcar de la EEAOC y el Proyecto Biotecnología:

Producción de caña semilla saneada de alta calidad: el Proyecto Vitroplantas. El desafío de producir cultivares transgénicos. Bioinsumos para el manejo fitosanitario y la promoción del crecimiento.

Caña de azúcar:

INVESTIGACIÓN – INNOVACIÓN - MEJORA DE LA SOSTENIBILIDAD

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S. officinarum (x=8) X S. spontaneum (x=10) 2n=100-130

Variedad Comercial Caña de Azúcar 70-80% S. officinarum 10-15% S. spontaneum 10-15% combinación

Cromosoma S. officinarum

Cromosoma S. spontaneum

Cromosoma recombinante

La Genética de Caña

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Inducción de floración

Cruzamientos dirigidos

Producción de semilla botánica

Obtención semilla botánica, siembra y crianza de plantines de caña de azúcar

Siembra de semilla

Crianza de plantines

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Colección de germoplasma

Selección de progenitores, inducción de floración y cruzamientos.

Siembra de semilla botánica y crianza de poblaciones de plantines iniciales.

Plantines Individuales (genotipos distintos). Etapas de selección clonal intermedias. Ensayos Variedades Internos y Regionales.

Difusión comercial de variedades

Programa de Mejoramiento Genético de

la Caña de Azúcar (EEAOC)

Multiplicación de semilla saneada de nuevas variedades (Proyecto Vitroplantas)

Selección a campo de

clones superiores

Tiem

po

: 11 a 15 año

s

Área de cámaras e

invernaderos

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Esquema de selección a campo a través de etapas

clonales: Etapa I: 80.000 clones

Etapa II: 7.000 clones

Etapa III: 700 clones

Etapa IV: 80 clones (dos sitios)

Etapa V: 20 clones

(seis sitios)

Tiem

po

: al me

no

s 11

año

s

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LCP 85-384 TUC 95-10 TUC 77-42

TUC 95-10

TUC 95-10 LCP 85-384

TUC 95-10 supera en promedio a la variedad más cultivada (Tucumán) en:

13 % de toneladas de caña / ha,

10 % de toneladas de azúcar / ha,

23 % de toneladas de fibra / ha.

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Generación, multiplicación y difusión

acelerada de cultivares de caña de

azúcar. El Programa de Mejoramiento

Genético produce germoplasma

comercial, que es saneado, multiplicado

masivamente y distribuido

aceleradamente a través del Proyecto

Vitroplantas, asegurando sanidad, vigor

e identidad genética, lo que impacta

directamente en la productividad.

Implantación de meristemas

Enraizamiento

Multiplicación masiva

Aclimatación en invernadero

Campos semilleros

Semilleros en la provincia

1

2

3

4

5

6

Proyecto Vitroplantas de la EEAOC

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Sistema de micropropagación optimizado + método de evaluación de la variación somaclonal y epigenética

Garantiza pureza y calidad genética

Estudios genéticos mediante AFLP, SSRs, MSAPs y TRAPs:

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Estado Sanitario 2005-2010

Porcentaje de incidencia de RSD en los semilleros Registrados en el período 2005-2010. Promedio general ponderado por el número de surcos.

0

1

2

3

4

5

6

7

2005 2006 2007 2008 2009 2010

6.75

0.85 0.77 0.4 0.03 0.65

% Incidencia RSD

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• Achaparramiento RSD (Leifsonia xyli subsp. xyli)

• Escaldadura LS (Xanthomonas albilineans)

•Estría roja (Acidovorax avenae)

• Mosaico de la Caña de Azúcar (SCMV y SrMV)

•Amarillamiento de la hoja (SYLV)

•Roya marrón (Puccinia melanocephala)

•Roya naranja (Puccinia kuenhii).

RSD LS SCMV

Roya marrón SCYLV

Diagnóstico molecular de los siguientes patógenos:

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3942 43

46

52 51 52 53

63 63 6562 61

3940

54

5251

69

5152

0

10

20

30

40

50

60

70

80

1990

1991

1992

1993

1994

1995

1996

1997

1998

1999

2000

2001

2002

2003

2004

2005

2006

2007

2008

2009

2010

t/ha

Tucumán: rendimientos culturales

(1990-2010)

Incremento de la productividad

Datos: CAA

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Mejoramiento convencional de caña de azúcar:

El mejoramiento clásico en caña de azúcar es una tarea de Sísifo:

La gran cantidad de los logros anteriores se pierden cada vez que se buscan introducir nuevos caracteres.

Lleva mucho tiempo obtener una nueva variedad (11-15 años).

Es un cultivo con una genética extremamente compleja, con varias copias de cada gen (5-14) y con una herencia asimétrica y con efectos epistáticos para algunos caracteres.

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Saccharum officinarum 2n=80

Saccharum spontaneum 2n=40-128

F1 2n=100-144

BC1 2n=130-152

2n=80 n=20-64

2n=80 n=50-72

2n=80

BC2

Cultivares modernos

Transmisión cromosómica asimétrica

NOBILIZACIÓN

S. o.

S. o.

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La transgénesis en caña de azúcar: Oportunidades: Aproximación enfocada a mejorar uno o pocos caracteres sin cambiar el progreso genético (chasis) conseguido por mejoramiento clásico.

Rápido: 1-2 años para obtener un prototipo (tiempos)

Se necesita analizar entre mil y 10 mil veces menos individuos (costos).

Obtención de variedades elite instantáneamente.

Solamente se desregula donde se cultiva.

Cultivo que mayor biomasa produce: potencial energético.

Biorrefinerías.

Amenasas: Opinión pública (información engañosa, aceptación del azúcar)

Desregulación comercial (trabajo arduo y costoso)

Pocos caracteres (tolerancia a herbicidas y resistencia a plagas)

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Objetivo:

Conseguir un transgénico comercial para contribuir con el

crecimiento económico de Tucumán, desarrollando una

producción sucro-alcoholera ambientalmente más

sostenible y con equidad social, posibilitando la producción

en áreas convencionalmente marginales y optimizando

nichos productivos agroecológicamente diferenciados para

alimento y bioenergía.

El Proyecto Transgénesis de la Caña de

Azúcar de la EEAOC

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Los pasos para comercializar un evento transgénico en Argentina

Desarrollo del vector propio

Desarrollo del sistema de transformación genética

Definir característica de interés:

• Tolerancia a glifosato • Resistencia a Diatraea • Tolerancia a sequía

Estudio de la PI

Generar líneas transformadas • 50-100 eventos • Seleccionar candidatos

Verificación molecular

Ensayos de invernáculo

Ensayos de campo

Estudios químicos

Estudios agronómicos

Estudios impacto medio ambiente

Estudios impacto salud humana y

animal

Estudios sobre efectos económicos

FASE I FASE II FASE III

SENASA CONABIA CONABIA

La Dirección Nacional de Mercados Agroalimentarios

Propagación variedad Comercialización

A

B

C

Prueba de concepto

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Teníamos que elegir un carácter que: •Aumente la sostenibilidad al ser biodegradable y menos tóxico que los que se usan en el cultivo. •Que sea fácil de desregular porque ya se haya hecho en otro cultivo. •Que no se infrinja ninguna patente.Que aumente la rentabilidad. •Que pueda ser usado como

¡Prueba de concepto para el proceso de desregulación!

¿Por qué una caña de azúcar tolerante

a glifosato?

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Transformación genética:

Etapa de Laboratorio

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Multiplicación y prueba de concepto en invernadero

RA 87-3

Susceptible Tolerante CONABIA resolución Nº 200/2008

43 sobrevivieron el proceso in vitro 17 alta tolerancia a glifosato 5 tolerancia moderada 21 susceptibles

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30 días posteriores a la aplicación

Multiplicación y prueba de

concepto a campo

Antes tratamiento de glifosato

CONABIA Resolución Nº 114/2009

17 tolerantes a glifosato 6 mostraron fenotipo y modo de crecimiento parecido a la variedad parental RA 87-3 (líneas 15; 18; 22; 27; 28 y 37)

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1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

23

36

29

6

27

15

TUC 95-24

LCP 85-384

18

22

28

37

RA 87-3*

RA 87-3

TUC 97-7

Figure: Genotypic evaluation of transformed lines using molecular markers: a) TRAP fragments generated using SuPS2 + Arbi 2

primers. 1: LCP85-384; 2: TUC97-7; 3: TUC95-24; 4: RA87-3 micropropagated control; 5-10 transgenic lines(15; 18; 22; 27; 28 and 37

respectively); 11: RA87-3 conventional propagated control; 12-15 transformed lines (6; 29; 36 and 23 respectively) with a distinct growth

phenotype. b) Dendrogram of the four sugarcane genotypes and the transgenic lines of RA87-3 based on 339 allele analysis from 9

TRAP primer combinations when using Jaccard coefficient and UPGMA clustering method with InfoStat, presented as distance (1-S, S:

similarity). Lines represented similarity of 0.99; 0.78 and 0.68.

Caracterización genética

con marcadores TRAP

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Ensayos de campo Fase II

2011-2014

Ambiente 1 La Chacra

Exp. S01: 0190521/2011

Planta 2012

Planta 2012

Soca 1 2013

Soca 1 2013

Ambiente 2 EEAOC

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El camino para la desregulación:

2012: La Chacra y EEAOC miembros de CONABIA.

2012: Primera consulta previa en CONABIA para liberar un evento transgénico.

2013: Reunión de la CONABIA en Salta y Tucumán (EEAOC). Primera reunión

de CONABIA fuera de Buenos Aires.

2013: Resolución 318. Sistema simplificado para la evaluación de nuevas

variedades en un cultivo, que contengan construcciones genéticas

esencialmente equivalentes a las incorporadas en eventos ya liberados.

2013: Resolución 661. Permiso para multiplicar agámicamente caña de azúcar

OVGM en proceso de desregulación para la producción de caña bajo

condiciones reguladas (no liberada todavía).

2015: Resolución 97. Definición de criterios para priorizar entre eventos

transgénicos en desregulación comercial en Argentina.

2015: Presentación de la documentación de Fase II (CONABIA y SENASA).

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Genetic characterization and field evaluation to recover parental phenotype in transgenic sugarcane: a step toward

commercial release

Aldo Noguera . Ramo´n Enrique . Marı´a Francisca Perera . Santiago Ostengo . Josefina Racedo . Diego Costilla . Silvia Zossi . Marı´a Ine´s Cuenya .

Marı´a Paula Filippone . Bjo¨rn Welin . Atilio Pedro Castagnaro

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¿Por qué la transgénesis en

caña de azúcar?

Cambio climático (mitigación, resiliencia, etc.)

Incremento de la sostenibilidad

Aumento de la productividad vertical

Bioenergía (expansión del cultivo hacia ambientes marginales)

Bioetanol de segunda generación (degradación lignocelulosa)

Nuevos productos (biorrefinería)

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Conclusión:

¡La transgénesis manejada y regulada responsablemente por los Estados, es una oportunidad para aumentar la sostenibilidad de una agroindustria clave para el DESARROLLO LATINOAMERICANO!

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PROSPECCIÓN FITOPATOLÓGICA PARA

INDUCIR UNA RESPUESTA DEFENSIVA EN

FRUTILLA MEDIADA POR UN PATÓGENO

AVIRULENTO

Facultad de Bioquímica Química y Farmacia de la Universidad Nacional de Tucumán (UNT)

Instituto Superior de Investigaciones Biológicas INSIBIO

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VISITA A CAMPOS

FRUTILLEROS Y TOMA DE

MUESTRAS DE DIFERENTES

ÓRGANOS CON SÍNTOMAS

DE LA ENFERMEDAD

AISLAMIENTO EN

LABORATORIO DEL

AGENTE ETIOLÓGICO

CARACTERIZACIÓN

MICROBIOLÓGICA Y

CULTURAL DE LOS

DIFERENTES AISLADOS

ELEGIDOS CARACTERIZACIÓN

FITOPATOLÓGICA FRENTE A

DISTINTOS GENOTIPOS DE

FRUTILLA BAJO

CONDICIONES

CONTROLADAS

PRUEBAS DE INDUCCIÓN

DE RESPUESTAS

DEFENSIVAS EN PLANTAS

EVALUACIÓN DE LOS

RESULTADOS Y SELECCIÓN

DE CEPAS VIRULENTAS Y

AVIRULENTAS PARA UN

MISMO GENOTIPO

EVALUACIÓN FENOTIPICA

QUE IMPLIQUEN LA

ACTIVACIÓN DEL

MECANISMO DE DEFENSA

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EVALUACIÓN FENOTÍPICA DE LOS NIVELES DE RESISTENCIA DE DISTINTOS GENOTIPOS DE FRUTILLA

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Microscopía Electrónica de Barrido (MEB)

h h a

p

c

o

a

c a

c

Salazar et al., 2007. “INDUCTION OF A DEFENSE RESPONSE IN STRAWBERRY MEDIATED BY AN

AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM”. Eur. J. Plant Pathol. 117, 109-122.

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INDUCCIÓN DE UNA RESPUESTA

DEFENSIVA EN FRUTILLA

MEDIADA POR UN AISLADO

AVIRULENTO

Salazar et al., 2007. “INDUCTION OF A DEFENSE

RESPONSE IN STRAWBERRY MEDIATED BY AN

AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM”.

Eur. J. Plant Pathol. 117, 109-122.

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0

1

2

3

4

5

T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7

ISE

(m

ed

ias)

a a a

b

c c c

Resistencia Tiempo-dependiente

Salazar et al., 2007. “INDUCTION OF A DEFENSE RESPONSE IN STRAWBERRY MEDIATED BY AN

AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM”. Eur. J. Plant Pathol. 117, 109-122.

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ep

me me pi

ep ep

cr es

cr

es

ox

Planta

control

Protección

cruzada

Respuesta de Protección Cruzada

Salazar et al., 2007. “INDUCTION OF A DEFENSE RESPONSE IN STRAWBERRY MEDIATED BY AN

AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM”. Eur. J. Plant Pathol. 117, 109-122.

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Inducción de Resistencia Sistémica

Salazar et al., 2013. “AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM INDUCES A SYSTEMIC

RESISTANCE IN STRAWBERRY”. Eur. J. Plant Pathol.

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HIJO

serie

MADRE

HIJO

serie

Resultados

MADRE

HIJO

1º serie

MADRE

Salazar et al., 2013. “AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM INDUCES A SYSTEMIC

RESISTANCE IN STRAWBERRY”. Eur. J. Plant Pathol.

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B A C

Protección contra Botrytis cinerea

Salazar et al., 2013. “AVIRULENT STRAIN OF COLLETOTRICHUM INDUCES A

SYSTEMIC RESISTANCE IN STRAWBERRY”. Eur. J. Plant Pathol.

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Búsqueda del poder inductor

Facultad de Bioquímica Química y Farmacia de la Universidad Nacional de Tucumán (UNT)

Instituto Superior de Investigaciones Biológicas INSIBIO

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0

1

2

3

4

5

ECS EMS ALM EMS SN SN CP CV

SS71 en APG SS71 en PG M11 Controles

DS

R (

med

ia)

a

b

a

b

c

a

d d

Actividad de Protección de Extractos del Aislado Avirulento

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Susceptibilidad a Temperaturas y Proteasas

0

1

2

3

4

5

50ºC 72 h 70ºC 24 h 95ºC 15´ 120ºC 15´ 1 h 12 h SN CP CV

Trat. Térmicos Trat. Proteolítico Controles

DS

R (

med

ia)

21 dpi

40 dpi

a a a

b

a

b

b

b b

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RESISTENCIA

SISTÉMICA FRENTE A

LA ANTRACNOSIS

Ctr.

DSR=1

DESARROLLO DE LA

ANTRACNOSIS

DSR=5

TRATAMIENTO DE

INDUCCIÓN EN UNA UNICA

HOJA DE LA PLANTA

SOBRENADANTE del

patógeno avirulento

7 días

INOCULACIÓN

DESAFÍO

PATOGENO VIRULENTO

Estallido Oxidativo

NBT +

DAB +

Lignificación

Safranina +

Acumulación de calosa

Azul de anilina +

Chalfoun et al., 2011. “INDUCED RESISTANCE ACTIVATED BY A CULTURE FILTRATE DERIVED FROM AN AVIRULENT

PATHOGEN AS A MECHANISM OF BIOLOGICAL CONTROL OF ANTHRACNOSE IN STRAWBERRY”. Biol. Control 58, 319-

329.

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0 1 2 3 4 5

W+B1

AsES+B1

AsES

DSR (mean)

Protección contra Botrytis cinerea

Chalfoun et al., 2013.“Purification and Characterization of AsES: a Subtilisin Secreted by

Acremonium strictum is a Novel Plant Defense Elicitor”. Journal of Biological Chemistry.

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0

1

2

3

4

5

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 SN 1X CV

Pooles PS pH 7,5 (2,5 µg prot/ ml) Controles

DS

R (

med

ia)

c c

b

c c c c

a

c

a

c c

Protección

sistémica contra la

Antracnosis

0 20 40 60 80 100

0,00

0,01

0,02

0,05

0,06

Volumen (ml)A

bs

28

0 n

m

0

20

40

60

80

100

NH

4 (SO

4 )2 1

,5 M

0,08

0,10

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

1 M

0,9 M

0,45 M

1,17 M

0,75 M

0,15 M

0,3 M

0 M

1,5 M

Purificación de la PROTEÍNA ELICITORA

Cromatografía de

Interacción Hidrofóbica

PS-HP en sistema FPLC

Buffer A: Tris HCl 50 mM, pH=7,5 +

EDTA 1 mM + (NH4)2SO4 1,5 M

Buffer B: idem sin sal

Velocidad flujo: 1ml/min

Carga proteica: 2 mg

O2.-

H2O2

- - - + + + ++ + ++ + ++ -

- - - + + + ++ - ++ + ++ -

Estallido Oxidativo

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IEF

SDS-PAGE

200

116,25

66,2

45

31

21,5

14,4

pI 3 4 5 6 7 8 9 10

kDa

2D-PAGE 12 %

Pool 7 (PS-

HP)

H2Odd

Mr=34 kDa

pI=8,8

Resistencia contra

Antracnosis

Se logró purificar a homogeneidad la proteína inductora de resistencia contra antracnosis en frutilla,

que presenta un pI experimental de 8,8 y una masa molecular experimental de 34 kDa.

Purificación de la PROTEÍNA ELICITORA

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-30 TTCTTCACTCTTCCAACTCACTTCTTCACAATGCGTCTCTCTCTCGTCCTCGCTCTCCTC

M R L S L V L A L L 10

31 CCGGTTGCCTTCGGTGCTCCCACCAGGCGCGATGAGCCAGCTCCTCTGCACGTCCCCCGT

P V A F G A P T R R D E P A P L H V P R 30

91 GACGTCGACAGCTTGATCAAGGATACCTACATCGTCAAGTACAAGGACATCACCGCCTTC

D V D S L I K D T Y I V K Y K D I T A F 50

151 TCCGCCGTTGATGAGGGTCTCAAGCTCCTGTCTGGCAAGCCCAAGCACATCTACAAGGGT

S A V D E G L K L L S G K P K H I Y K G 70

211 GCCTTCAAGGGCTTCTCTGGCAAGATCGACGCCAAGACCCTTGAGCTCCTCCGTGACGAT

A F K G F S G K I D A K T L E L L R D D 90

271 CCCAGTGTCGACTTCATCGAGCAGGATGCTATCGTGACGCTCGCTGCGTACACCACCCAG

P S V D F I E Q D A I V T L A A Y T T Q 110

331 GCCAGTGCCCCCTGGGGTCTTGCCCGTATCTCTACTCGTCAGCGTGGCCCAACTGGCTAC

A S A P W G L A R I S T R Q R G P T G Y 130

391 ACCTACGACGACAGCGCCGGCGCAGGAACCTGCTCCTACATCATTGACACCGGCATCCAG

T Y D D S A G A G T C S Y I I D T G I Q 150

451 GCTAACCACCCCAACTTCGGTGGCCGTGCTTTCCAGCTTGTCTCCTACCAAGGCAGCAAC

A N H P N F G G R A F Q L V S Y Q G S N 170

511 GCCGACGGTAATGGCCACGGCACTCACGTTGCCGGTACCATCGGTTCTACCACCTACGGT

A D G N G H G T H V A G T I G S T T Y G 190

571 GTCGCCAAGCGCACCACCCTCCTCGGCGTCAAGGTCCTCAGCGACTCCGGCTCCGGTTCC

V A K R T T L L G V K V L S D S G S G S 210

631 ACCTCCGGTATCATCGCCGGCATCAACTACGTCGTCAGCGACTCTCGCTCCCGCAGCTGC

T S G I I A G I N Y V V S D S R S R S C 230

691 CCCAACGGTTCCGTCGCCAACATGTCGCTCGGCGGAGGCTACTCTGCTTCGCTCAACAGC

P N G S V A N M S L G G G Y S A S L N S 250

751 GCGGCCAAGTCCTTGATCGACAACAACATCTTCCTTGCCGTTGCTGCCGGTAACGAGAAC

A A K S L I D N N I F L A V A A G N E N 270

811 CAGAACGCCGCCAATGTCTCCCCTGCTTCTGAGCCGACTGTCTGCACTGTTGGTGCGACC

Q N A A N V S P A S E P T V C T V G A T 290

871 ACTTCTGCCGACGCCAAGGCTTCTTTCTCCAACTACGGCTCCGGTGTCGACATCTTCGCT

T S A D A K A S F S N Y G S G V D I F A 310

931 CCTGGTCAGAGCATTCTATCCACCTGGATTGGCAGCAGCACCAACACCATCTCTGGCACC

P G Q S I L S T W I G S S T N T I S G T 330

991 TCCATGGCTTCTCCCCACATCGCCGGTCTTGCTGCTTACCTTGCTGGTCTTGAGGGCTTC

S M A S P H I A G L A A Y L A G L E G F 350

1051 CCCGGTGCCCAGGCCCTGTGCAACCGCATCGTCGCCATCGCTACCACTGGTGTCATCACC

P G A Q A L C N R I V A I A T T G V I T 370

1111 GGTATCCCCAGCGGTACCCCCAACCGCCTTGCCTTCAACGGCAACCCCTCTGGTTAAATA

G I P S G T P N R L A F N G N P S G * 389

1171 ACTTGGAAACACTTTGATAAGTTATGATTTGGGTGACATATGATTAGAGTGGGACGCTGG

1231 GAGATGCATGAAGAGTTTTGGATATGTTGATGACTTACGTGCCATGTTTCTGGGTATATA

1291 GTAAAATGCAAGCGGTTGATGTCTTCTGAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA

Secuencia nucleotídica

completa del ADNc de

1167 pb que corresponde

al transcripto inmaduro

de la proteína elicitora y

secuencia aminoacídica

deducida de 388 aa

Secuenciación

aminoacídica de

novo de la proteína

elicitora del

patógeno

avirulento

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Inhibidor I9 Peptidasa S8

Predicción de Dominios Funcionales de la Proteína Elicitora

La proteína elicitora es sintetizada como una pro-enzima inmadura de 388 aminoácidos. Esta proteína inactiva sufre

un procesamiento post-traduccional que consiste en la escisión proteolítica de los primeros 105 aminoácidos del

extremo N-terminal, lo cual resulta en una proteína elicitora activa de 283 aminoácidos.

Proteínas Homólogas Blast-P

Nº Accesión Descripción Organismo Score

(bits) Valor E

Ident.

(%)

Cobert.

(%)

EGR46243.1 proteína tipo proteinasa T Trichoderma reesei 488 2e-170 65 95

ABO32256.1 precursor de serin proteasa tipo

subtilisina Paecilomyces lilacinus 486 6e-170 64 100

ABN04079.1 SprT Hypocrea koningii 485 2e-169 64 96

ABD96101.1 serin proteasa alcalina Hirsutella rhossiliensis 480 2e-162 62 98

Proteínas Homólogas a la Proteína Elicitora

La subtilisina elicitora pertenece a la familia de las subtilisinas del tipo proteinasa K.

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Título de la Invención: “Polipéptido que tiene actividad inductora de la defensa contra estrés biótico en plantas,

secuencia de nucleótidos que lo codifica, microorganismo, composiciones y métodos”.

Inventores: Díaz Ricci Juan C., Chalfoun Nadia R., Racedo Josefina, Salazar Sergio M. y Castagnaro Atilio P. (2011)

Solicitada por: Universidad Nacional de Tucumán (UNT) y CONICET.

Registro de Patente de Invención en INPI. P2011 01 00 854. Trámite 11042911 PATENTE.

Solicitud en fase internacional PCT/ES2012/070173. Ref. del Exp. P 2275PC00.

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TRATAMIENTO CON

BIOPRODUCTO

DERIVADO DE UN

PATOGENO AVIRULENTO

TRATAMIENTO

CON VEHICULO

(TESTIGO)

RESISTENCIA

DESARROLLO DE

ENFERMEDADES

ACTIVACION del

SISTEMA de DEFENSA

VEGETAL por

INDUCTORES

Desafío con Patógeno

virulento que causa

ANTRACNOSIS

2. Requiere un intervalo de tiempo

1. Tiene carácter sistémico

4. Es acompañada de respuestas de defensa

3. No es dosis –dependiente (dilución 1/10)

5. Tiene efecto en diferentes especies de plantas

RESISTENCIA desarrollada por

BIOPRODUCTO

DESARROLLO BIOTECNOLÓGICO

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1-Evaluación como Promotor del crecimiento

El ISDV produjo un aumento en el número de semillas

Ensayos en condiciones controladas

0,0

0,5

1,0

1,5

2,0

2,5

3,0

3,5

4,0

Control (-) Control (+) ISDV

nu

mero

de v

ain

as/p

lan

ta

0,00

0,20

0,40

0,60

0,80

1,00

Control (-) Control (+) ISDV

peso

sem

illa

s (

g)

/ p

lan

ta

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I T A N O A

E E A O C

Biotecnología LATINOAMERICANA

“VACUNA VEGETAL”

“VACUNA VEGETAL”

- No viene de la química del petróleo.

-No tiene efecto biocida y por tanto no

afecta la salud humana ni ambiental.

-- No genera resistencia en los

organismos nocivos.

-- Es compatible con agroquímicos

convencionales.

-- Aumenta la sostenibilidad económica,

ambiental y social del agroecosistema.

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EMPRESAS BIAGRO

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Adler, Conrado Budeguer, Florencia Castagnaro, Atilio Pedro Chalfoun, Nadia Cuenya, María Inés Dantur, Karina Díaz, María Elena Enrique, Ramón Filippone, María Paula, Noguera, Aldo, Ostengo, Santiago Ovejero, Natalia Paz, Nora Perera, Francisca Racedo, Josefina Soria, María José Welin, Björn

¡ Muchísimas gracias!

Grupo Biotecnología de Caña