Octubre 2012UNAM FES-C

Farmacología 2

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

C-1Av. 1º de Mayo s/n, colonia Sta. María las Torres,

Cuautitlán Izcalli, Estado. De México. SECCIÓN DE BIOQUÍMICA Y FARMACOLOGÍA HUMANA

LABORATORIO FARMACOLOGÍA II

EVALUACIÓN DE LA Equisetum hyemale (COLA DE CABALLO) RESPECTO A UN FÁRMACO DE

REFERENCIA (FUROSEMIDA) POR MEDIO DEL TEST DE LIPSCHITZ EN RATAS WISTAR HEMBRA

M. en C. Rangel Trujano Lidia, Q.F.I. Koizumi Castro María Guadalupe

Cárdenas Montero. A., González Rodríguez. J., Isidro Morales M., Lozano García L., Nava Maldonado C. Ramírez Lynn Rodrigo

Octubre 2012

Palabras Clave.Diuréticos, Extractos Digestivo, Equisetum Hyemale (Cola de caballo), Equisetonina, Flavonoides, Furosemida, Plantas medicinales.ResumenSe realizó un estudio experimental en ratas línea Wistar, con el objetivo de valorar el posible efecto diurético del extracto obtenido por digestión de cola de caballo (Equisetum Hyemale). Los resultados fueron comparados con los obtenidos por la furosemida (diurético de referencia), en la dosis de

5 mg/kg de peso y con agua común utilizada como control. La excreción urinaria se midió en un lapso de 2.5 horas, para determinar en el volumen final la concentración de Na+, Cl-. Comprobando así la acción diurética del extracto digestivo, y a su vez comparándolo con el efecto de la furosemida.Tras la investigación con extractos a dosis de 100 mg/kg y 200 mg/kg, obtenidos por digestión, se comprueba mayor efectividad de la primera dosis por la presencia de flavonas glucosidicas como la

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equisetonina, y las saponinas. Sin embargo a dosis elevadas puede causar un efecto toxico, provocando efectos irritativos en el sistema urinarioi, además de que la especie Equisetum Hyemale contiene una enzima (tiaminasa) que desnaturaliza proteínas.Keywords.Diuretics, abstract digestive Hyemale Equisetum (horsetail), equisetonin, Flavonoids, Furosemide, Medicinal plants.

AbstractWe conducted an experimental study on Wistar rats, with the aim of assessing the potential diuretic effect of the extract obtained by digestion of horsetail (Equisetum Hyemale).The results were compared with those obtained by furosemide (diuretic reference) at the dose of 5 mg / kg and with common water used as control. Urinary excretion was measured over a period of 2.5 hours, to determine the final volume concentration of Na +, Cl-. Checking the diuretic and digestive extract, and in turn compared with the effect of furosemide.After investigation of extracts with a dose of 100 mg / kg and 200 mg / kg, obtained by digestion is checked mayir

effectiveness of the first dose by the presence of glycosidic as equisetonin flavones, and saponins. But high doses can cause a toxic effect, causing irritating effects into the urinary system, and that the species Equisetum Hyemale contains an enzyme (thiaminase) that denatures proteins.

INTRODUCCIÓN

Por definición los diuréticos son fármacos que estimulan la excreción renal de agua y de electrolitos por lo que son utilizados para regular tanto el volumen como la composición del medio interno en diferentes afecciones, lo que los hace un objeto de investigación dentro de la rama de la farmacoterapia. Los trabajos de investigación, dividen a estos fármacos en una clasificación que ha sido variada, considerándose en ello: el sitio de acción (diuréticos de asa), eficiencia (diuréticos de techo alto), estructura química (diuréticos tiazida), similitud de acción con otros diuréticos (diuréticos parecidos a tiazidas), efectos sobre la excreción de potasio (diuréticos ahorradores de potasio) osmóticos y otros.

Los diuréticos osmóticos aumentan la osmolaridad de la orina. Son filtrados por el glomérulo, no son secretados y no son reabsorbidos, actúan en todo el Nerón pero principalmente en TCP y en asa de Henle delgada). Son diuréticos potentes usados para diuresis forzada en intoxicaciones. Preventivos de insuficiencia renal aguda. Edema cerebral. Glicerina o isosorbida vía oral: reducción de la presión intraocular previa a intervenciones oftalmológicas. Los efectos que tienen son el de extraer agua del liquido intracelular; expandir el liquido extracelular, mientras que disminuyen la viscosidad sanguínea y aumentan el FSR,

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para así producir "lavado osmótico", diuresis acuosa que impide la reabsorción en lugares permeables al agua y disminuyen el volumen tisular.

A pesar del gran desarrollo alcanzado por la síntesis química, en la actualidad las plantas llamadas medicinales continúan siendo un valioso arsenal de sustancias o de precursores de las mismas, ya sea en forma de medicamento vegetal o de materia prima para la industria farmacéutica. Las posibilidades de encontrar nuevos medicamentos que alivien las diferentes enfermedades, han hecho que las plantas constituyan uno de los recursos terapéuticos de mayor uso. Hoy nos vemos beneficiados con esta experiencia que ha contribuido al desarrollo de la actual fitoterapia, sin embargo no existe la suficiente evidencia documentada de la eficacia de estos productos naturales, esperando cumplir un importante papel en la terapéutica del futuro.

Entre las plantas usadas en los tratamientos médicos como remedios herbolarios encontramos la Equisetum Hyemale (cola de caballo), la cual pertenece a una clase propia, la Equisetacae, que no tiene afinidad directa con ningún otro grupo de plantas. Son una especie cercana a los Helechos, pero con muy distintas propiedades fotoquímicas. La clase incluye únicamente un solo género, Equisetum, cuyo nombre deriva de la palabra latina equus (un caballo) y seta (una cerda), de la cual se conoce la peculiar apariencia notable de los tallos articulados.

La especie E. hyemale, perteneciente al genero Equisetum, es una hierba de origen americano, habita en climas semisecos, seco y templado entre los 1000 a los 2600m sobre la superficie del mar, normalmente se encuentra asociada a la vegetación acuática, a la orilla de los ríos, o en las barrancas de bosque mesófilo de montaña y bosques de pino. En México se localiza en los climas correspondientes en los Estados de: Nayarit, Jalisco, Aguascalientes, Michoacán, Estado de México, Querétaro, Distrito Federal.

Sus características fisiológicas la hacen ver como una hierba erecta en forma de junco, generalmente no ramificada, de tallos acanalados, de hasta 10 mm de diámetro; los tallos se encuentran unidos en la base formando una vaina tan larga como ancha que presenta un anillo oscuro en la base; presenta articulaciones llamadas estróbilos (partes donde se producen esporas; no tiene flores) terminados en una puntita negra. El anillo oscuro en la base de las vainas es característico de esta especie, pero a veces este es irregular o no se presenta.

La cola de caballo (Equisetum Hyemale) constituye una de las plantas mas diuréticas usadas en la actualidad, pues posee una gran capacidad para eliminar agua del cuerpo en grandes cantidades, al extremo de aumentar en un 30% el volumen de orina. Esta propiedad se debe a la acción de varios componentes; es rica en sales minerales, taninos y flavonoides, que contribuyen al mantenimiento del colágeno, y aumentan la elasticidad de los tejidos, así como las defensas inespecíficas del organismo. También contiene equisetonina y saponinas que son responsables de su efecto diurético moderado, pues éstos tienen la capacidad de aumentar la circulación sanguínea a nivel renal, con lo que la filtración glomerular se ve aumentada y, por tanto, se da un efecto diurético, haciendo que la planta se use para enfermedades relacionadas con problemas de retención de líquidos. Además de Vitamina C, potasio, calcio, silicio, lo que la hace un remedio diurético y astringente, antidiarreico, depurativo y cicatrizante.

Sin embargo pese a su efectividad como diurético, se ha reportado que esta planta es tóxica. Entre los síntomas que se le atribuyen están los de pérdida de condición física, afectaciones en el ritmo del pulso que se torna débil y rápido, así como decaimiento, pues contiene alcaloides que llegan a ser tóxicos, tales como la palustrina, palustrinina y nicotina.

Como fármaco de comparación de la actividad de la Equisetum Hyemale se usa la Furosemida que es un diurético de asa, cuya efectividad puede ser medida en gran escala,

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por lo que es usado para reducir la inflamación y retención de liquido causados por diversos problemas a nivel de corazón e hígado. También se usa para tratar la hipertensión, insuficiencia cardíaca congestiva, hipertensión y edema. Funciona al hacer que los riñones eliminen el agua mediante la salida de iones a través de la orina. Junto con otros muchos diuréticos, la furosemida está incluida dentro de la lista de sustancias prohibidas de la Agencia Mundial Antidopaje, debido a que puede enmascarar la presencia de otras sustancias en el organismo.

Para el motivo de experimentación: La actividad diurética de los fármacos y sustancias que se pueden tener esta acción, se puede proceder a evaluación a través de diferentes métodos, los que permiten de una forma u otra, determinar las potencialidades que tiene una sustancia de estimular la eliminación renal de agua y electrólitos.

Para nuestro estudio se utiliza uno de estos métodos, el Test de Lipschitz, pues se ha considerado hasta ahora como el modelo estándar, que ha sido ampliamente utilizado en el tamizaje de fármacos con potencial actividad diurética. Este método se basa en la comparación de la excreción de agua y electrólitos, usando como blanco de estudio a ratas previamente tratadas con la sustancia en experimentación, que para este caso es la Equisetum Hyemale tratada a dos diferentes dosis, la primera de 100mg/Kg y la segunda de 200mg/Kg, en contraste con una sustancia de referencia o control positivo que en el ensayo es la Furosemida a 5mg/Kg. Algunos de los parámetros que se evalúan en la experimentación son la Acción Diurética, que es el grado de efectividad de cada tratamiento. Y la Actividad Diurética, que es un comparativo entre los tratamientos a prueba contra el fármaco de referencia.

HIPÓTESIS.

Si se administra Equisetum Hyemale (cola de caballo) a dosis de 100mg/Kg y 200mg/Kg, en presencia de un testigo (Furosemida) a

ratas wistar, entonces se obtendrá un efecto diurético dependiente de las dosis, manifestado por el aumento en el volumen de orina de los animales.

METODOLOGÍA.

En primer lugar se seleccionaron los medicamentos y las plantas medicinales sobre los que centrar la búsqueda bibliográfica: diuréticos habitualmente empleados en la práctica clínica y plantas medicinales relacionados con ellos. Como fuente de información básica se utilizaron artículos científicos de la revista Scielo, fuentes informatizadas de la red peruana de alimentación y nutrición y el Vademécum en Español.

La muestra se colecto en el mercado del bosque, ubicado en Xochimilco, Mex. D.F. la identificación taxonómica de la planta se realizo en la FES-Iztacala por la M en C. MA. Edit Lopes Villafranco, responsable del herbario Iztacala, el ejemplar de la taxonomía se almacenó en la colección del herbario con número de referencia 2132IZTA avalado por el Herbario de la Facultad de Estudios Superiores Iztacala (UNAM) (ANEXO 1).

Se utilizaron tallos estériles para realizar la digestión de la E. hyemale (cola de caballo), los cuales fueron fraccionados mecánicamente empleando tijeras y cortándolos en pedazos muy pequeños. Se llevaron a cabo 4 extracciones, donde se peso inicialmente 1.6 g de planta que se colocaron en un vaso de precipitados y se les adicionó 20ml de agua destilada y se procedió a calentar con el mechero sobre un tripé, manejándose una temperatura de 70°C a 80°C, durante un periodo de 15 minutos; el extracto obtenido se filtro y se almacenó en un frasco ámbar. Se adicionó de nueva cuenta 20mL de agua destilada al vaso que contenía los restos de planta y se procedió de la misma manera hasta completar las 4 extracciones obteniéndose un volumen final de 40ml con una concentración de 200mg/mL. Posterior

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mente se hace una dilución (1:1) tomando 20mL del extracto digestivo colocándolos en un matraz y aforando a 40 mL con H2O destilada, para así tener una concentración de 100mg/mL.

Teniendo el extracto, se procede a la búsqueda de los metabolitos que puedan estar presentes en la planta, a los que se atribuyen las propiedades diuréticas, como por ejemplo los saponósidos, cuya principal propiedad física es que en solución acuosa son agentes tensoactivos, es decir, son capaces de formar espuma (poder afrógeno) y formar emulsiones; Así, para identificar aceites esenciales se calienta el extracto a ebullición en un vaso de precipitados tapado con un vidrio de reloj, si hay presencia de gotas de consistencia aceitosa, se considera positiva la prueba. Para identificar la presencia de flavonoides se llevó a cabo la reacción de Shinoda; en el caso de alcaloides se probó el extracto con los reactivos de Mayer, Wagner y Dragendorf respectivamente, en cuyo caso un cambio de coloración variado y la formación de un precipitado, denota una prueba positiva. Se empleo una agitación vigorosa del extracto en un tubo de ensaye para la observación de espuma producida por saponinas, en cuyo caso, si se observa la presencia de espuma, la prueba es positiva. Por último, para identificar la presencia de esteroides y triterpenos, el extracto digestivo de Equisetum hyemale se pone a reaccionar con el reactivo de Liebermann-burchard, en cuyo cambio de coloración del naranja claro l verde azulado, dan un resultado positivo.

Por su parte, la furosemida se trato a partir de tabletas de 40mg que fueron trituradas en un mortero para obtener un polvo fino de donde se pesaron 25mg que se aforaron a 25ml con agua destilada, obteniendo una solución concentración de 1mg/mL.

Tras distribuir 19 ratas de la línea Wistar hembra procedentes del Bioterio de la Facultad de Estudios Superiores Cuautilán Campo Cuatro (UNAM) en 4 lotes, de 5 animales para el lote control, el lote 1 (E. hyemale 100mg/Kg) y el lote 2 (E. hyemale 200mg/Kg); y 4 animales para el lote testigo

de Furosemida; se dejó en ayuno y sin líquidos al total de los animales durante 24 horas antes del tratamiento experimental.

DOSIS ADMINISTRADAS DE LOS DIFERENTES TRATAMIENTOS::

Lote control 5.7mg/KgLote 1 100mg/KgLote 2 200mg/Kg

Lote testigo 5mg/Kg

Tras la administración y dejar un tiempo de espera de 30 min, se hace recolección de la orina con una jeringa y cuantificacion del volumen de orina por lote, repitiendo esta cuantificacion cada 30 minutos, hasta los 150min y recolectando toda la orina en un vaso de precipitados para su cuantificación final.

Del volumen final de orina se realizan pruebas de identificación usando tiras reactivas para humano y así llevar a cabo el examen general de orina y la identificación de los metabolitos presentes. También se realizaron cuantificaciones de los iones sodio y cloro; para lo cual se tomó 1mL de cada lote y se colocó en un tubo de ensaye respectivamente a cada tuvo se agregó 2 gotas de Dicromato de potasio y gota a gota se adicionó nitrato de plata hasta un cambio de coloración marrón, se reportan el número de gotas gastadas y se procede a calcular los mg de sodio presentes. Dado que la relación entre sodio y cloro es de 1:1, la concentración de Cl- sera la misma que la de Na+.

Al final se procedio a sacrificar a los animales por sobredosis de anestesia con cloroformo.

RESULTADOS

Resultados del volumen de orina obtenido en los diferentes tratamientos.

Vol a 30mi

n (mL)

Vol a 60mi

n (mL)

Vol a 90mi

n (mL)

Vol a 120min (mL)

Vol a 150min (mL)

Vol fina

l (mL

)

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control 7.5 3.6 0 1.4 1.2 13.7

testigo 3.5 2.8 0.7 0 0 7100mg/

Kg6.3 8.7 1.7 0.2 0 16.

9200mg/

Kg1.4 2.15 0 0 0..1 3.6

5

Resultados del volumen promedio de orina obtenido en los diferentes tratamientos.

Vx a 30mi

n (mL)

Vx a 60mi

n (mL)

Vx a 90mi

n (mL)

Vx a 120mi

n (mL)

Vx a 150mi

n (mL)

Vx fina

l (mL)

control 1.5 0.72 0 0.28 0.24 2.74

testigo 0.875 0.7 0.175 0 0 1.75

100mg/Kg

1.26 1.74 0.34 0.04 0 3.38

200mg/Kg

0.28 0.43 0 0 0.02 0.73

0 20 40 60 80 100 120 140 1600

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

Volumen promedio de orina obtenida por tiempo de expe-rimentacion

control

testigo

100 mg/Kg

200mg/Kg

Tiempo (min)

Volu

men

de

orin

a (m

L)

Figura 1: en esta figura se pueden observar las eliminaciones de orina de cada uno de los lotes experimentados de acuerdo al tiempo de experimentación transcurrido, observando que el lote 1 tiene mayor eliminación de orina al minuto 60 al igual que el lote 2, sin embargo el lote 2 elimina una cantidad mucho menor de orina en el mismo tiempo. Por su parte el lote control y el testigo obtienen mayor excreción de orina en el minuto 30.

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control testigo 100 mg/Kg 200mg/Kg0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

Volumen total promedio de orina obtenida al final de la experimentación

Lote

Volu

men

(mL)

Figura 2: se puede observar que hay un incremento notable de el volumen de eliminación de orina en el lote 1 que fue administrado con 100mg/Kg de E. Hyemale, incluso en mayor cantidad que el lote testigo administrado con Furosemida (5mg/Kg), por su parte en el lote 2 (200 mg/Kg de E. Hyemale), en lugar de obtener un incrementos en la eliminación, se logra observar que disminuye el volumen de orina respecto incluso al lote control.

CÁLCULOS DE EFICIENCIA RENAL POR PARÁMETROS DE LIPSCHITZ

Excresionurinario

¿Orina producida (mL)

vol de aguaosol . administrado (mL)×100

Acciondiurética

¿Excresión urinariodel grupo(%)

Excresiónurinariadel grupocontrol(%)

Actividad diurética(AD)

¿ Acción diurética deltratamientoAcción diurética deltestigo

Escala:Alta: AD > 0,90,

Moderada: AD (0,70 -, 0.87),Baja: AD (0.50 -,0.69),

Nula: AD<0.50

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RESULTADOS DE PARÁMETROS DE ACCIÓN Y ACTIVIDAD DIURÉTICA DE LOS TRATAMIENTOS

Lote ControlTratamiento

testigo Furosemida

Lote 1 100mg/Kg

Lote 2 200mg/Kg

Vol.Final (ml)

2.74 1.75 3.3 0.73

Excreción urinaria

(%)54.48 35 66 14.6

Acción diurética

0.64 1.21 0.27

Actividad diurética

1.89 0.42

furosemida 100mg/Kg 200mg/Kg0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

Acción Diurética de los tratamientos

Tratamiento

Grad

os d

e ac

ción

Figura 3: en este histograma podemos observar que el tratamiento con mayor acción diurética es el de E. Hyemale a una dosis de 100mg/Kg aun por encima del tratamiento con Furosemida. Por su parte se puede observar que la E. Hyemale a dosis

de 200mg/Kg tiene una acción muy pobre; debido a la toxicidad de la planta.

100mg/Kg 200mg/Kg0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

1.4

1.6

1.8

2

Actividad diuretica de la E. Hyemale respecto ala Furosemida.

Dosis de E. HyemaleGr

ado

de A

ctivi

dad

diur

etica

Figura 4: En éste histograma se observa que el tratamiento con mayor actividad diurética de E. Hyemale a 100 mg/kg está por encima del tratamiento de furosemida. En la dosis de 200 mg/kg de E. Hyemale, tiene una acción muy baja.

RESULTADOS OBTENIDOS DEL EXAMEN GENERAL DE ORINA REALIZADO A LOS DIFERENTES LOTES:

ANALITOLOTE

CONTROLLOTE

TESTIGOLOTE 1 LOTE 2

Glucosa NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Bilirubina NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Cetonas. NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Gravedad específica

1.005 1.005 1.005 1.01

Sangre ALTO TRAZAS TRAZAS TRAZAS

pH 6.5 6 6 6.5

Proteínas NEGATIVO TRAZAS TRAZAS TRAZAS

Urobilinógen

NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NORMAL

Nitritos NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

Leucocitos NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO NEGATIVO

#NaCl 2 gotas 1 gotas 1 gotas 2 gotas

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10mg 5mg 5mg 10mg

Metabolito Prueba ResultadoAceites

esencialesVidrio de reloj Negativo

Flavonoides Reacción de shinoda Negativo

Alcaloides R.mayer PositivoR. Wagner Positivo

R. Dragendorf PositivoSaponinas Agitación Positivo

Esteriodes y triterpenos

R. Liebermann-burchard Positivo

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

La cola de caballo es una de las plantas más utilizadas en la medicina popular. Posee un rizoma central del cual salen dos clases de tallos: los fértiles, y los tallos estériles, que son de gran interés para la Fitoterapia, y por consiguiente para nuestra investigación, ya que en ellos se encuentran los principios activos que confieren a la planta sus propiedades medicinales.

Tas la experimentación, los resultados obtenidos por el Test de Lipschitz nos demuestran que la acción diurética de la E. Hyemale, no aumenta al aumentar la dosis administrada, sino por el contrario disminuye en un 80%, al duplicar la dosis. Respecto a nuestra evaluación en el fármaco de comparación se puede observar que la E. Hyemale es mas efectiva, a una dosis de 100mg/Kg que incluso la Furosemida a dosis terapéutica recomendada de 5mg/Kg. El segundo parámetro evaluado es la Actividad Diurética (AD) donde de acuerdo a la escala AD, el lote1 con tratamiento presento una AD catalogada como alta(1.89) en comparación con el lote2 que presento una AD catalogada como nula (0.42). Lo cual indica que la dosis en ratas más apropiada para poder ejercer su efecto diurético es la de 100mg/Kg, mientras que a dosis mas alta como la de 200mg/Kg llega a ser toxica. En estudios anteriores se ha encontrado que la dosis letal media es de 500mg/Kg.)ix.

Las modificaciones de la eliminación hídrica, sódica y de cloro constatadas en la rata, muestran los efectos sobre los iones urinarios, teniendo así un ligero pero notable aumento de la eliminación

hídrica. El efecto diurético del extracto acuoso quedó demostrado en el presente proyecto al existir una respuesta diurética positiva en la dosis ensayada: 100mg/kg, comparadas con el grupo control y con la furosemida. Se demostró que el extracto acuoso de 100mg/kg produjeron un mayor volumen de orina en 150minutos siendo a los 90 minutos cuando hubo una mayor excreción hídrica. Por lo tanto se puede constatar que se tiene un diurético, que entraría en la clasificación de osmótico pues aumenta la osmolaridad de la orina. También se demuestra que es un diurético potente, que por su rápida acción podría ser usado para diuresis forzada en intoxicaciones; ya que extraen agua del liquido intracelular, mientras que disminuyen la viscosidad sanguínea y aumentan el Flujo Sanguíneo Renal, para así producir "lavado osmótico", diuresis acuosa que impide la reabsorción en lugares permeables al agua y disminuyen el volumen tisular.

Por su parte la furosemida es un diurético de asa que incrementa notablemente la diuresis, especialmente por la excreción de Na+ y Cl- motivo de su elección para este estudio como control positivoii, cabe destacar, que este lote era el que tenia menor cantidad de ratas, por ello al momento de evaluar la cantidad de iones presentes, se relazó sobre el volumen final. De acuerdo a los resultados obtenidos, hay una menor eliminación de iones en la orina, explicando así que hay una menor concentración de iones en la orina. De acuerdo a los resultados obtenidos, hay una menor eliminación de iones en la orina en el lote 1 del tratamiento por la mayor cantidad de volumen de orina excretado. La excreción de sodio en orina para la mayoría de los grupos experimentales tratados con el extracto acuoso no superan la excreción que para este ión manifestaron los grupos experimentales control negativo y el control positivo furosemida. También se obtuvo un menor volumen de orina en este lote; sin embargo, tuvo una mayor rapidez en iniciar su efecto diurético a comparación del lote 1 y 2 (gráfico 2), al iniciar rápidamente significa que este fármaco es mas potente que el tratamiento herbolario.

Los resultados obtenidos en los tratamientos de la planta se dan gracias a la composición de la planta de cola de caballo, entre las que se destacan el sílice, magnesio, calcio, fósforo, potasio, aluminio y cobalto, calcio, vitamina C y resina. Esteroles,

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incluyendo colesterol y otrosiii. Entre 5 y 10 % de ácido silícico.iv Sustancias diversas, incluyendo un equisitonino de la saponina, dimetil sulfona, tiaminasa y ácido aconítico.v

Los estudios en ratones indican que la cola de caballo puede cambiar la actividad de los riñones, con un control anormal de la cantidad de agua que se elimina, pues contiene alcaloides que llegan a ser tóxicos a dosis elevadas, como la palustrina, palustrinina y nicotinavi. Esto se observa en la dosis de 200mg/Kg, ya que al aumentar la misma, en lugar de causar un efecto diurético, provoca un efecto toxico. Se ha demostrado que sus flavonas glucosidicas como la isoquercetina, equisetonina y equicetrina,vii y las saponinas son responsables de su efecto diurético moderado.viii Por lo tanto uno de los componentes de la Cola de caballo (Equisetum Hyemale) al que se le atribuyen sus actividades diuréticas en la experimentación son los saponósidos (equisetonina); encontrados por la prueba física de formación de espuma. Los azúcares más frecuentes constituyentes de los dos tipos de saponósidos son la glucosa, arabinosa.ix Éstos tienen la capacidad de aumentar la circulación sanguínea a nivel renal, con lo que la filtración glomerular se ve aumentada y, por tanto, se da un efecto diurético. Esto se observa en el lote 1 con la menor dosis administrada (gráfico 2). Sin embargo, hay que tener en cuenta que, por vía oral y en dosis altas, las saponinas irritan la mucosa bucofaríngea y digestiva, causando dolor abdominal, vómitos y diarreaxviii. Puede provocar efectos irritativos, sobre todo en el sistema urinario. La especie Equisetum Hyemale contiene una enzima (tiaminasa) que destruye a la tiamina, un componente importante de muchas proteínas del cuerpo, por lo tanto puede causar toxicidad (solo en animales que no tienen rumen, p.ej. caballos, ratas

Por otra parte, los saponósidos en contacto con la sangre son hemolíticos, ya que interaccionan con el colesterol de la membrana de los eritrocitos. El poder hemolítico es característico de los saponósidos triterpénicos, pero es variable según

los sustituyentes de la estructura. Debido a su poder hemolítico resultan muy tóxicos si se administran por vía intravenosa, ya que de esta manera contactan directamente con la sangre, mientras que por vía oral su toxicidad es muy baja; por lo que son de elección en esta vía.x

Grandes cantidades de cola de caballo pueden producir los síntomas de sobredosis de la nicotina, entre los que se incluyen fiebre, manos y pies fríos, ritmo cardiaco anormal, dificultad para caminar, debilidad muscular y pérdida de peso. Las personas que fuman o quienes usan los parches de nicotina o goma de mascar de nicotina deben evitar la cola de caballo.xi

Experimentalmente en cuanto al el examen general de orina, cabe destacar que existió la presencia de sangre en la orina de todos los lotes y eliminación de proteínas en los lotes tratados tanto con el extracto de la planta como como en el lote testigo y por ende, el pH se ve alterado tratándose de un pH ácido, aunque se encuentra dentro de lo normal.

CONCLUSIONES

Se valoró el efecto diurético de la cola de caballo en dos dosis 100mg/Kg y 200 mg/Kg, comparándola con un diurético de asa (furosemida) obteniendo que la primera dosis tiene mayor actividad diurética (AD= 1.89) que la segunda (AD= 0.42), reflejado también en el volumen de excresión promedio. Siendo ésta de elección para su uso como diurético.

El método de Lipchitz tiene gran utilidad para poder evaluar el efecto diurético de el extracto de Equisetum hyemale, empleado en el presente trabajo experimental, ya que proporciona parámetros como la actividad diurética.

Es necesario realizar en estudios posteriores una evaluación del efecto tóxico de Equisetum hyemale, ya que en el presente trabajo experimental, no se encuentran bien definidos, ya que únicamente se evaluó su efecto diurético.

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i Alonso, Jorge R. Tratado de Fitomedicina. Bases Clínicas y Farmacológicas. ISIS Ediciones SRL. Buenos Aires, Argentina, 1973ii Jackson EK. Diuretics. In: Hardman JG, Limbird LE, Good-man GA, editors. Goodman & Gilman´s the Pharmacological Basis of Therapeutics. New York: McGraw- Hil; 2001.p. 755-88iii Pahlow, Mannfried. El Gran Libro de las Plantas Medicinales. Ed. Everest. León, España. 1982. 459 páginas.Página 166ivhttp://www.botanicalonline.com/medicinalsequiseto.htv Wren, R. C. Enciclopedia de Medicina Herbolaria y Preparados Botánicos. Grijalbo. México, 1994. II Tomos, 782 páginas. Referencia sobre E. arvense, en la página 200vihttp://www.conabio.gob.mx/malezasdemexico/equisetaceae/equisetumhyemale/fichas/ficha.hmvii Drogenkunde, 8a. ed. Heinz A., Hoppe (ed.), Berlín W. De Gryter, 1975. Ref. R.C. Wren. Op. cit. p: 200 y 741viiihttp://www.natureperu.com/product_info.php?products_id=176&language=esix LÓPEZ LUENGO, TRÁNSITO (2001)” Saponósidos” Fititerapia.OFFARM pág.124-125.x http://saludbio.com/articulo/plantas-medicinales/cola-de-caballoxi http://salud.univision.com/es/hierbas-y-suplementos-a-z/cola-de-caballo-equisetum-arvenselXviii Henderson JA, Evans EV, McIntosh RA. The antithiamine action of Equisetum. J Amer Vet Med Assoc 1952;120:375-378.Joksic G, Stankovic M, Novak A. Antibacterial medicinal plants Equiseti herba and Ononidis radix modulate micronucleus formation in human lymphocytes in vitro. J Environ Pathol Toxicol Oncol 2003;22(1):41-48.xixDos Santos JG Jr, Blanco MM, Do Monte FH, et al. Sedative and anticonvulsant effects of hydroalcoholic extract of Equisetum arvense. Fitoterapia 2005 Sep;76(6):508-13.xxFabre B, Geay B, Beaufils P. Thiaminase activity in Equisetum arvense and its extracts. Plant Med Phytother 1993;26:190-197.xxiGibelli C. The hemostatic action of Equisetum. Arch Intern Pharmacodynam 1931;41:419-429.xxiiGraefe EU, Veit M. Urinary metabolites of flavonoids and hydroxycinnamic acids in humans after application of a crude extract from Equisetum arvense. Phytomedicine 1999;6(4):239-246.xxiiiPérez Gutiérrez RM, Laguna GY, Walkowski A. Diuretic activity of Mexican Equisetum. J Ethnopharmacol. 1985 Nov-Dec;14(2-3):269-72. PubMed PMID: 4094471.xxivLÓPEZ LUENGO, TRÁNSITO (2001)” Saponósidos” Fititerapia.OFFARM pág.124-125.xxvHABIB INTERSIMONE, Natalia; DAUD THOENE, Adriana y SANCHEZ RIERA, Alicia. Efecto diurético de extractos acuosos y alcohólicos de flores de Phrygilanthus acutifolius (corpo) en ratas. Rev Cubana Plant Med [online]. 2005, vol.10, n.3-4 [citado 2012-11-08], pp. 0-0 . xxvi<http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1028-47962005000300003&lng=es&nrm=iso>. ISSN 1028-4796.