Bacilo Koch
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7/23/2019 Bacilo Koch
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CARACTERISTICAS MORFOLGICAS Y ESTRUCTURALES DEMycobacterium tuberculosis.
Las mycobacterias en general pueden variar mucho en su morfologa, desde formas
cocoides pequeas a largos filamentos, M. tuberculosis suele tener una morfologacaracterstica, bacilo delgado de forma recta o ligeramente curvada en frotis teidos, y su
tamao suele ser de 1-4 micras de largo por 0,3-0, micras de ancho! "casionalmente,
forma ramificaciones verdaderas que se observan en cultivos enriquecidos y en frotis deganglios linf#ticos gaseosos!
$on bacilos no formadores de esporas, sin flagelos ni c#psula! La estructura celular de M.
tuberculosisconsta de una gruesa pared, separada de la membrana celular por el espacioperipl#smico, con cuatro capas! La m#s interna es el glicop%ptido o peptidoglicano con
mol%culas de &-acetilglucosamina y #cido-&-glucolilmur#mico 'en lugar del habitual &-
acetilmur#mico( con cortas cadenas de alanina! )sta capa es el esqueleto de la bacteria quele da forma y rigide*! )+ternamente, hay otras 3 capas compuestas, una por polmeros dearabinosa y galactosa, otra formada por #cidos miclicos 'que son #cidos grasos derivados(
y otra superficial formada por lpidos como los sulfolpidos, el cord factor,llamado as por
su aparente asociacin con la forma acordonada con que se agrupan las mycobacteriasvirulentas, y los micsidos que son al igual que el anterior glicolpidos! &o difiere del resto
de las bacterias en cuanto al citoplasma y el .& nuclear! Las mycobacterias son aerobios
estrictos y no crecen en ausencia de o+geno!La M. tuberculosisse desarrolla de forma adecuada en medios simples que contienen una
fuente de carbono, una de nitrgeno e iones de metales esenciales entre ellos hierro y
magnesio! /ara su cultivo, se requiere un medio m#s compleo que contenga una base de
patata-huevo o una base de agar-suero! Los bacilos tuberculosos tienen un crecimiento muylento incluso en condiciones ptimas y requiere de 10 a 0 das de incubacin a 32!
unque la proliferacin puede tener lugar a un p5 que oscila entre 6 a 2!6, el p5 ptimo de
crecimiento es de 2!
Las mycobacterias son muy resistentes a la desecacin! )l medio ambiente en el que se
encuentran constituye un factor muy importante para su viabilidad! /or eemplo, cuando see+ponen a la lu* solar directa, los bacilos tuberculosos de los cultivos son destruidos en
horas, pero si estos est#n presentes en el esputo, pueden permanecer viables durante
periodos m#s largos!
http://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/caracteristicas-morfologicas-y_03.htmlhttp://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/caracteristicas-morfologicas-y_03.htmlhttp://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/caracteristicas-morfologicas-y_03.htmlhttp://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/caracteristicas-morfologicas-y_03.html -
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Las mycobacterias son m#s resistentes a la desinfeccin con productos qumicos que otros
microorganismos no formadores de esporas, probablemente como consecuencia de sucontenido en lpidos! $on sensibles al calor h7medo y son destruidos por las temperaturas
de pasteuri*acin!
MTODO DE COLORACI! DE "IE#L !EELSE!
La tincin de 8iehl &eelsen fue desarrollada inicialmente por /aul )hrlich para poner de
manifiesto la presencia de los bacilos causantes de la tuberculosis en muestras clnicas de
pacientes!
)sta t%cnica es capa* de diferenciar los bacilos cido lcohol 9esistentes ':9(!
La t%cnica de 8-& fuer*a la penetracin de la fucsina b#sica en la pared celular mediante la
accin combinada del fenol y el calor, que aumentan la fluide* de la capa de #cidos
miclicos; el calor o se elimina el e+ceso de fenol mediante un
lavado con agua, la pared recupera su consistencia cerosa, pero las mol%culas de fucsina
quedan atrapadas en su espesor!
on la coloracin de 8iehl &eelsen se observan como bastoncitos delgados, ligeramente
curvos, roo fucsia, destac#ndose claramente contra el fondo a*ul!
Coloraci$%&
.isponer dos varillas de vidrio en forma paralela, a una distancia de apro+imadamente
cm entre una y otra, una sobre un soporte dentro del lavabo>pileta de coloracin!
?iltrar la cantidad de fucsina necesaria para las tinciones a reali*ar en la ornada! $i el
n7mero de baciloscopia a colorear es pequeo, se puede filtrar la fucsina directamente
cuando se la deposita sobre el e+tendido a trav%s de un pequeo embudo con papel de filtro!
olocar sobre el soporte las l#minas fiadas conservando el orden num%rico con el
e+tendido hacia arriba y manteniendo una separacin de al menos 1cm entre ellas!
ubrir totalmente la superficie del e+tendido con fucsina b#sica fenicada reci%n filtrada!
.ispensar el colorante con suavidad, sin salpicar y sin tocar con el gotero o con el embudo
los e+tendidos!
http://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/metodo-de-coloracion-de-ziehl-neelsen_03.htmlhttp://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/metodo-de-coloracion-de-ziehl-neelsen_03.html -
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on la llama de un hisopo embebido en alcohol calentar suavemente por debao de los
e+tendidos, con movimientos de vaiv%n, hasta que observe que se desprenden los primeros
vapores blancos! &o calentar con mechero!
)n caso de derrame del colorante, reponer la fucsina, no dear secar el preparado!
)n el t%rmino de apro+imadamente cinco minutos calentar tres veces hasta emisin de
vapores@ esto es suficiente para que la fucsina penetre adecuadamente en el bacilo y se fie a
sus lpidos! &o hervir la fucsina porque la pared de los bacilos puede destruirse y colorearsemal!
on una pin*a, levantar cuidadosamente la l#mina portaobetos desde el e+tremo m#s
cercano al operador! )nuagar con abundante agua a baa presin, con un frasco o un grifo!Lavar muy suave y cuidadosamente la superficie eliminando totalmente la solucin de
fucsina! Airar el e+tendido y lavar con cuidado tambi%n la parte posterior!
Bnclinar el portaobetos para eliminar el e+ceso de agua y as evitar diluir los reactivos quese utili*ar#n a continuacin!
Decoloraci$%&
ubrir la totalidad del e+tendido con solucin decolorante y dear actuar apro+imadamente
3 minutos!
)nuagar con abundante agua a baa presin!
Cerificar que el e+tendido se ha decolorado 'las partes m#s gruesas del e+tendido a lo
sumo conservan un leve tinte rosado(! $i se observan c7mulos roos o coloracin rosada
intensa, volver a cubrir con solucin decolorante, dearla actuar entre uno y tres minutos y
enuagar nuevamente!
)liminar el e+ceso de agua inclinando el portaobetos
Coloraci$% 'e (o%'o&
ubrir todo el e+tendido con solucin de a*ul de metileno!
.ear actuar durante un minuto!
)nuagar las l#minas en ambas caras con agua a baa presin y limpiar parte inferior con
un algodn si ha quedado coloreada!
"bservar si las l#minas conservan la numeracin clara y visible! $i no es as volver a
numerarlas!
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.ear secar las l#minas a temperatura ambiente, apoy#ndolas en posicin vertical en un
soporte sobre un papel absorbente! &o apoyar papel absorbente sobre el e+tendido!
)ACILOSCO*IA& O)SER+ACI! DE LOS )ACILOS TU)ERCULOSOS
La baciloscopia, es la t%cnica fundamental en toda investigacin bacteriolgica de la
tuberculosis, en la deteccin de casos y control de tratamiento, con un costo bao y de
r#pida eecucin!
La baciloscopia es una t%cnica que permite identificar al 20-D0E de los casos pulmonares
positivos, es decir, es muy bao el riesgo de equivocarse al diagnosticar tuberculosis!
La baciloscopia puede ser reali*ada en laboratorios de cualquier compleidad, que posean
un microscopio con lente de inmersin en buenas condiciones, algunos insumos de bao
costo e instalaciones simples en el laboratorio! .eben seguirse normas b#sicas sencillas queaseguren calidad y minimicen los riesgos, )s recomendable que el #rea sea e+clusiva, pero
no siempre es posible!
Lectura de extendidos coloreados por Ziehl Neelsen
Fbicar cerca del microscopio todos los elementos necesarios;
-aceite de inmersin!-pauelos o tro*os de papel suave!
-el 9egistro del Laboratorio!
-una lapicera!
-una caa para guardar portaobetos!-un frasco con +ilol o con etanol a 20E!
.epositar una gota de aceite de inmersin en un e+tremo del frotis, sin tocar el preparado
con el gotero!
)nfocar el e+tendido donde ha colocado la gota de aceite, con la lente 100+ de inmersin!
"bservar cada campo microscpico en superficie y profundidad, moviendo
permanentemente el tornillo microm%trico, antes de despla*arse al campo contiguo!
$eguir un recorrido en lneas rectas, sistem#tico para recorrer el e+tendido evitando repetir
la lectura de algunos campos!
"bservar la calidad del e+tendido y de la coloracin! $i no fuesen buenas, repetir
nuevamente la baciloscopia de esa muestra!
$i se observan anormalidades, identificar las ausas!
ontar el n7mero de campos que ha ledo y el n7mero de :9 que ha identificado!
http://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/baciloscopia-observacion-de-los-bacilos_03.htmlhttp://demostraciondelbacilodekoch.blogspot.com/2011/06/baciloscopia-observacion-de-los-bacilos_03.html -
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/ara calcular el promedio de :9 encontrados por campo, sumar el total de :9
contados y dividir ese total por el n7mero de campos observados! uando los bacilos se
presentan agrupados, una estimacin apro+imada del n7mero de bacilos presentes en el
c7mulo es suficiente para calcular este promedio!
Los campos ledos deben ser
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Las bacterias que resisten la decoloracin son de color roo y las que no, se observan de
color a*ul, ya que se utili*a a*ul de metileno como tincin de contraste!
