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1 BACTERIAS BACTERIAS FITOPAT FITOPAT Ó ÓGENAS GENAS 27 de setiembre de 2010 Ing. Agr. María José Montelongo OBJETIVOS • Introducción a la clasificación de las bacterias fitopatógenas (taxonomía y nomeclatura) • Reconocer las características de las bacterias fitopatógenas Reconocer síntomas y signos más comunes Conocer el proceso de diagnóstico de una enfermedad bacteriana • Conocer las etapas de desarrollo de una enfermedad bacteriana • Conocer las medidas de manejo adecuadas para las enfermedades bacterianas Algunos agentes fitopatógenos en una célula vegetal El microscopista alemán Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), fue el primero que vio una bacteria de su placa dental en 1683 Robert Koch (1843-1910) demostró por primera vez, en 1876, que una bacteria causaba la enfermedad de antrax en las ovejas Se conocen alrededor de 1.600 especies de bacterias, la mayoría son saprófitas y benéficas Muchas especies causan enfermedades en humanos (tuberculosis, neumonia, fiebre tifoidea) y en animales (brucelosis y antrax) Alrededor de 100 especies de bacterias causan enfermedades a plantas Algunos datos… Árbol filogenético Bacterias fitopatógenas Procariotas unicelulares – Cápsula Pared celular compleja Membrana citoplasmática – Citoplasma Material genético nuclear y extranuclear • Flageladas La mayoría Gram- Variabilidad genética – transformación, conjugación, transducción y mutación Bacterias fitopatógenas

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BACTERIAS BACTERIAS FITOPATFITOPATÓÓGENASGENAS

27 de setiembre de 2010

Ing. Agr. María José Montelongo

OBJETIVOS• Introducción a la clasificación de las bacterias

fitopatógenas (taxonomía y nomeclatura)

• Reconocer las características de las bacterias fitopatógenas

• Reconocer síntomas y signos más comunes

• Conocer el proceso de diagnóstico de una enfermedad bacteriana

• Conocer las etapas de desarrollo de una enfermedad bacteriana

• Conocer las medidas de manejo adecuadas para las enfermedades bacterianas

Algunos agentes fitopatógenos en una célula vegetal

• El microscopista alemán Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), fue el primero que vio una bacteria de su placa dental en 1683

• Robert Koch (1843-1910) demostró por primera vez, en 1876, que una bacteria causaba la enfermedad de antrax en las ovejas

• Se conocen alrededor de 1.600 especies de bacterias, la mayoría son saprófitas y benéficas

• Muchas especies causan enfermedades en humanos (tuberculosis, neumonia, fiebre tifoidea) y en animales (brucelosis y antrax)

• Alrededor de 100 especies de bacterias causan enfermedades a plantas

Algunos datos…

Árbol filogenético

Bacterias fitopatógenas

• Procariotas unicelulares– Cápsula – Pared celular compleja– Membrana citoplasmática– Citoplasma– Material genético nuclear y

extranuclear

• Flageladas• La mayoría Gram-• Variabilidad genética

– transformación, conjugación, transducción y mutación

Bacterias fitopatógenas

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Bacterias fitopatógenas

•No producen endosporas•Se reproducen por fisión binaria•Alta tasa de multiplicación

• La mayoría tienen forma de bacilo (1-2μm x <1μm)• Hay bacterias filamentosas

Bacterias fitopatógenas

Streptomyces spp. causante de la sarna de la papa: filamentosa

Agrobacterium, Erwinia, Pseudomonas y Xanthomonas: bacilos

• Saprófitos facultativos: se multiplican en el huésped, pero pueden sobrevivir en restos y en el suelo. Algunas se consideran habitantes del suelo (Pseudomonas, Agrobacterium, Streptomyces).

• Parásitos obligados: bacterias fastidiosas, limitadas al xilema y Mollicutes (fitoplasmas y espiroplasmas)

Bacterias fitopatógenas

MAYORÍA

• Forman un grupo monofilético dentro de las bacterias Gram +

• Carecen de pared celular, sólo rodeados por la membrana plasmática

• Son los procariotas más pequeños que pueden autoreplicarse

• Parásitos (dependen de la célula hospedante para vivir)

• Resistentes a penicilina (interfiere con la producción de la pared celular) pero sensibles a tetraciclina y cloranfenicol (interfieren con la síntesis de proteínas)

Clase Mollicutes

• Los fitopatógenos son transmitidos por insectos que se alimentan del floema

• Mollicutes fitopatógenos: fitoplasmas y espiroplasmas

Clase Mollicutes

No se han podido No se han podido cultivar cultivar in in vitrovitro Cultivables Cultivables in in vitrovitro

TaxonomíaCaracterísticas taxonómicas:

– Morfología – Culturales (forma, bordes,

color de las colonias)– Fisiología– Reacciones bioquímicas– Pruebas patológicas

(capacidad para atacar a determinado huésped)

taxonomía

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Monótrico

Lofótrico

Anfítrica

Perítrica

Polar

flagelos Principales géneros de Bacterias fitopatógenas

Pared celular

GRAM (-)– Erwinia– Pseudomonas– Xanthomonas– Xylella– Agrobacterium

GRAM (+)– Clavibacter– Curtobacterium– Streptomyces

Principales géneros de Bacterias fitopatógenas

Coloración de colonias

Ej: Xanthomonas se caracteriza por su color amarillo el que se visualiza mejor creciendo sobre un medio YDC

Características culturales

Morfología de colonia en medio sólido

Forma

Elevación

Borde

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Reacción de oxidación/fermentación

La mayoría de las bacterias fitopatógenas tienen metabolismo oxidativo

Características fisiológicas

• Metabolismo oxidativo– Pseudomonas– Xanthomonas– Xylella– Agrobacterium– Clavibacter

• Metabolismo fermentativo– Erwinia

Reacción de o/f

Producción de pigmentos fluorescentes

Pseudomonas fluorescens se caracteriza por producir pigmentos fluorescentes (izq)

Características fisiológicas

ErwiniaAgrobacteriumPseudomonas no fluorescentes

Género especie patovar (variación patogénica)

nomenclatura

Xanthomonas campestris pv. vesicatoria

Género especie patovar (variación patogénica)

nomenclatura

Xanthomonascampestris pv. cucurbitae

Xanthomonascampestris pv. fragariae

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Síntomas de enfermedades bacterianas

• Manchas foliares• Manchas en frutos• Cancros• Marchitez• Hiperplasia• Podredumbre• Costras• Necrosis

Agallas o tumores

Síntomas de enfermedades bacterianas

Agrobacterium tumesfasciens

Psudomonas savastanoipv.savastanoi

Síntomas de enfermedades bacterianas

Agallas o tumoresLesiones en frutos

Síntomas de enfermedades bacterianas

Xanthomonas arboricola pv. pruni

Lesiones en frutos

Síntomas de enfermedades bacterianas

Pseudomonas syringae pv. papulans

Xanthomonasaxonopodispv. citri

Lesiones en frutos

Síntomas de enfermedades bacterianas

Xanthomonas campestris pv. cucurbitae

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Podredumbres blandas

Síntomas de enfermedades bacterianas

Podredumbres blandas

Síntomas de enfermedades bacterianas

Afecciones vasculares

Síntomas de enfermedades bacterianas

Marchitez

Síntomas de enfermedades bacterianas

Síntomas de enfermedades bacterianas

Manchas foliares

Síntomas de enfermedades bacterianas

Manchas foliares

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Síntomas de enfermedades bacterianas

Manchas foliares

Pantoea stewartii

Síntomas de enfermedades bacterianas

Manchas

Xanthomonas translucens

Síntomas de enfermedades bacterianas

Cribado Defoliación

Síntomas de enfermedades bacterianas

Cancros

Síntomas de enfermedades bacterianas

Costras

Síntomas de enfermedades bacterianas

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Zooglea: Aspecto mucilaginoso, constituido de masa bacteriana y restos del vegetal.

Signo de bacterias

Microcorrida: para hojas

Técnicas para ver el signo de bacterias

Test de flujo: para tallos

Técnicas para ver el signo de bacterias

• Observación de síntomas y signos• Aislamiento en medios de cultivo• Prueba de hipersensibilidad en no huésped• Prueba de Gram• Características culturales• Pruebas de patogenicidad• Pruebas bioquímicas y fisiológicas• Pruebas serológicos (ELISA)• Técnicas moleculares

Diagnóstico de enfermedades bacterianas

La bibliografía indica que podría ser una bacteria!!

Diagnóstico de enfermedades bacterianas

1. Se realiza una inoculación masiva en el mesófilode una hoja de una planta NO HUESPED

2. Se observa la ocurrencia (o no) de reacción de hipersensibilidad

Hipersensibilidad en no húesped

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La aparición de una reacción de hipersensibilidad indica que la bacteria inoculada es patógena.

Hipersensibilidad en no húesped

Diagnóstico de enfermedades bacterianas

Prueba de patogenicidad

Inoculación mediante aspersión

• Sobrevivencia / Fuentes de inóculo

• Diseminación

• Inoculación

• Penetración

• Colonización

• Aparición de los síntomas

Ciclo de la enfermedad

• Las bacterias pueden sobrevivir en:

• restos vegetales

• semillas

• hospedantes alternativos

• suelo

Sobrevivencia

• Las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas son• Agua de salpicado, escorrentía, riego o

lavado.

• Insectos vectores

• Herramientas contaminadas

• Plantas o partes de ellas infectadas

• Hombre

diseminación

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El salpicado por el agua de lluvia o riego es una de las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas.

diseminación

• El agua de riego o las herramientas contaminadas pueden determinar el contagio de una fila de plantas.

diseminación

• Diseminación por semillas infectadas o infestadas

diseminación

• Las bacterias necesitan de heridas o aberturas naturales para producir infección.

• Estomas, hidátodos, lenticelas

penetración

El agua es un elemento indispensable

penetración

• Las bacterias producen lisis de los tejidos que colonizan

• Las bacterias se multiplican exponencialmente en condiciones favorables

• Pueden colonizar el parénquima intercelularmente

• Pueden colonizar los haces vasculares.

colonización

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Ciclo del cancro cítrico

• No existe un control químico efectivo

• Las medidas de manejo se basan en la prevención

• Es fundamental incidir sobre el ambiente (microclima) haciéndolo menos favorable al desarrollo de la enfermedad

Manejo de enfermedades bacterianas

• Enfermedades que no están presentes en el país: control legal

Manejo de enfermedades bacterianas

Distribución de Huanglonbing

• Enfermedades presentes: aplicar medidas de manejo que afecten– la tasa de multiplicación– sobrevivencia– diseminación

Manejo de enfermedades bacterianas

Patógeno Huésped

EnfermedadEnfermedad

Ambiente

Control cultural• Partir de material sano

• Suelo libre del patógeno

• Evitar las condiciones de humedad– Elegir sitios bien drenados– Canteros altos– Evitar encharcado– Ajustar el riego– Disminuir la densidad de plantas– Control de malezas

Control cultural Control cultural• Variedades resistentes

• Sustrato/Suelo libre de la enfermedad

• Evitar heridas

• Eliminar plantas o partes infectadas

• Desinfectar herramientas, manos, estructuras

• Rotación de cultivos

Control cultural

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Severidad puede disminuir hasta 75 %

Control cultural

Cortinas rompe viento

Control cultural

•Uso de material sano•Tratamiento de semillas

•desinfección•termoterapia

• Sustrato estéril o no infestado

• Evitar contaminar con suelo infestado

Control cultural

• Solarización

• Fungicidas con actividad bacteriostática:– Cúpricos– Fungicidas con zinc– Productos con Yodo

• Antibióticos de uso agrícola:– Sulfato de Estreptomicina– Kasugamicina

Control químico

• Desventajas de los antibióticos– Alto riesgo de que las bacterias se vuelvan

resistentes– Riesgos a la salud del aplicador y consumidor– Prohibidos en los Programas de Producción

Integrada

Control químico