Biología Forense

Laboratorio de Genética Forense

Departamento de Toxicología y Legislación Sanitaria. Facultad de Medicina. Universidad Complutense de Madrid (UCM)

Biología Forense

Dra. Ana María López Parra

Biología Forense Índices de Criminalidad en España (2019)

45,1 por

cada 1.000

habitantes

Biología Forense Laboratorio de la Policía Científica y Guardia Civil: ADN

Principios de los 90: 2.000 muestras

Año 2013: 25.664 informes

Año 2015: 35000 perfiles de ADN

Biología Forense Ventajas del análisis de ADN

1. Aumenta la probabilidad de discriminación:

El resultado de un análisis genético

permite EXCLUSIÓN INCLUSIÓN NO EXCLUSIÓN

¿Con que poder de discriminación?

Biología Forense Kits comerciales

*Población caucasoide

Nombre

Marca

Fecha STR Loci

*Poder de

Discriminación

TH01, TPOX, CSF1PO

monoplexes

Promega

Feb 1993

TH01, TPOX, CSF1PO

1:410

AmpFlSTR Blue

Applied

Biosystems

Oct 1996

D3S1358, VWA, FGA

1:5000

AmpFlSTR Green I

Applied

Biosystems

Jan 1997

Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO

1:410

CTTv

Promega

Jan 1997

CSF1PO, TPOX, TH01, VWA (vWF)

1:6600

FFFL

Promega

Jan 1997

F13A1, FES/FPS, F13B, LPL

1:1500

GammaSTR

Promega

Jan 1997

D16S539, D13S317, D7S820, D5S818

1:1.8x104

PowerPlex

(version 1.1 and 1.2 later)

Promega

Jan 1997

CSF1PO, TPOX, TH01, VWA, D16S539, D13S317,

D7S820, D5S818

1:1.2x108

AmpFlSTR Profiler

Applied

Biosystems

May 1997

D3S1358, VWA, FGA, Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO,

D5S818, D13S317, D7S820

1:3.6x109

AmpFlSTR Profiler Plus

Applied

Biosystems

Dec 1997

D3S1358, VWA, FGA, Amelogenin, D8S1179, D21S11,

D18S51, D5S818, D13S317, D7S820

1:9.6x1010

AmpFlSTR COfiler

Applied

Biosystems

May 1998

D3S1358, D16S539, Amelogenin, TH01, TPOX, CSF1PO,

D7S820

1:8.4x105

AmpFlSTR SGM Plus

Applied

Biosystems

Feb 1999

D3S1358, VWA, D16S539, D2S1338, Amelogenin,

D8S1179, D21S11, D18S51, D19S433, TH01, FGA

1:3.3x1012

PowerPlex 2.1

Promega

Jun 1999

D3S1358, TH01, D21S11, D18S51, VWA, D8S1179, TPOX,

FGA, Penta E

1:8.5x1010

PowerPlex 16

Promega

May 2000

CSF1PO, FGA, TPOX, TH01, VWA, D3S1358, D5S818,

D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11,

Penta D, Penta E, amelogenin

1:1.8x1017

AmpFlSTR Identifiler Applied

Biosystems

May 2001

CSF1PO, FGA, TPOX, TH01, VWA, D3S1358, D5S818,

D7S820, D8S1179, D13S317, D16S539, D18S51, D21S11,

D19S433, D2S1338, amelogenin

1:2.1x1017

1:410

1:2.1x1017

Biología Forense

2. Estudio de todo tipo de indicios biológicos e indicios mínimos

Ventajas del análisis de ADN

Biología Forense

3. Análisis de muestras antiguas y degradas, y mezclas

Ventajas del análisis de ADN

Biología Forense

4. Estudio de indicios genéticos atípicos

Ventajas del análisis de ADN

Biología Forense

5. Creación de bases de datos Bases públicas con interés criminal y/o investigación científica.

Ventajas del análisis de ADN

EDNAP mtDNA

Population Database

Biología Forense

Muestra obtenida en prueba paternidad /

escena del crimen

Extracción

de ADN Cuantificación

de ADN

Análisis de marcadores

genéticos

Obtención del perfil genético de la muestra

Comparación del perfil de la

muestra con el resultado de

otras muestras

Si coincide, comparación del perfil

con base de datos poblacional

Generación de Informe del caso con

probabilidad de coincidencia al azar

Procesamiento de muestras de ADN

Biología Forense

Indicios Biológicos

“ Toda sustancia líquida o sólida que provenga

directamente del cuerpo humano o que haya

estado en contacto con el mismo, y en cuya

superficie o interior pueda haber restos de

células”

“Todo material biológico o no biológico, objeto o fragmento que pueda encontrarse en el lugar de los hechos, sobre la víctima o sobre un sospechoso y de cuyo estudio pueda llegar a establecerse una evidencia en la reconstrucción del suceso”

Biología Forense

Tipos de indicios

Sangre

Semen

Pelo

Saliva

Orina

Fluido vaginal

Diente

Restos óseos

Células y Tejidos

Liquido amniótico

Biología Forense

Tipos de evidencias

Preservativos

Chicles, colillas

Sobres y sellos

Armas blancas

Llaves, monedas,

joyas

Piedras, ramas, hojas

Billetes, papeles

Ropa

Biología Forense Tipos de Indicios Biológicos

Indicios dubitados: -Recogidas en el lugar de los hechos -Recogidas en el cuerpo de la víctima

Indicios indubitados o de referencia: -Intervención corporal del individuo

Indicios atribuidos: -Se atribuye su pertenencia a un individuo pero no se tiene absoluta certeza

Biología Forense

“Normas para la preparación y remisión de muestras objeto de análisis por el Instituto

Nacional de Toxicología”

BOE nº 308 de 23/12/96

B.O.E. DEL 19 DE MAYO DE 2010

8030 ORDEN JUS/1291/2010, de 13 de mayo, por la que se aprueban

las normas para la preparación y remisión de muestras objeto de

análisis por el Instituto Nacional de Toxicología y Ciencias Forenses.

Biología Forense

Grupo Español y Portugués de la Sociedad Internacional de

Genética Forense (GEP-ISFG) • Universidad de Valencia. • Jefatura de Investigación y

Criminalística, Dirección General de la Guardia Civil, Madrid.

• Universidad de Granada. • Instituto Nacional de Toxicología y

Ciencias Forenses, Sevilla • Comisaría General de Policía

Científica, Madrid. • Instituto Nacional de Toxicología y

Ciencias Forenses, Madrid.

Biología Forense

En la hoja de custodia debe aparecer:

-Nombre o identificación y firma de la/s persona/s

responsable/s de la entrega de las muestras.

-Nombre o identificación y firma de la/s persona/s

responsable/s de la recogida de las muestras.

-Fecha y hora de la recogida.

-Condiciones de almacenaje de las muestras hasta su

envío al laboratorio.

Cadena de custodia

Documento escrito donde queda reflejada la gestión de

la muestra desde su toma hasta su destrucción o

devolución.

Biología Forense

ADN CELULAR

ADN MITOCONDRIAL

ADN NUCLEAR

COPIA ÚNICA (70%)

Codificante

10%

No codificante

60%

REPETITIVO (30%)

No codificante

20%

Codificante

10%

DNA repetido

disperso

DNA repetido

agrupado

(DNA satélite)

Minisatélites

(20-70bp)

Microsatélites

(2-4bp)

Exones

Reguladores

Intrones DNA

intergénico

Repeticiones en tándem Repeticiones dispersas

Organización del genoma

Biología Forense Tipos de variación genética

7 repeticiones

8 repeticiones

CTA

Short Tandem Repeats

Biología Forense

• Variaciones de secuencia de ADN en una sola base

• Para que la variación sea considerada un SNP debe darse en, al menos, un 1% de la población

Tipos de variación genética

SNPs (Single Nucleotide Polymorphism)

Biología Forense

Tipos de polimorfismos de ADN

• Polimorfismos nucleares autosómicos

• Cromosoma Y

• Cromosoma X

• ADN mitocondrial

Biología Forense

ADN NUCLEAR Marcadores

autosómicos - Copia doble

Herencia paterna y materna

Poco abundante en muestras críticas / arqueológicas /

antropológicas

* Relaciones familiares (paternidad y

maternidad)

* Casos forenses

* Identificación de desaparecidos

CSF1PO

D5S818

D21S11

TH01

TPOX

D13S317

D7S820

D16S539

D18S51

D8S1179

D3S1358

FGA VWA

AMEL AMEL

Biología Forense Mini STRs

Biología Forense

10-15 18-15

12-15 10-18 15-18 10-18

Marcadores autosómicos

Biología Forense

Herencia del cromosoma Y

Biología Forense

- Copia única

Regiones no recombinantes

Herencia exclusivamente paterna

Secuencia total ADN ~60 Mb

Poco abundante en muestras críticas

- Gran interés en investigaciones

forenses

98% crímenes violentos cometidos

por hombres

CROMOSOMA Y

Biología Forense

Herencia del cromosoma X

DXS8378

DXS9898

DXS7133 GATA31E08DXS8378

DXS9898

DXS7133 GATA31E08

DXS7132DXS9902 DXS6789

DXS7132DXS9902 DXS6789

GATA172D05DXS7423

DXS6809

DXS6810

GATA172D05DXS7423

DXS6809

GATA172D05DXS7423

DXS6809

DXS6810

GATA172D05DXS7423

DXS6809

Biología Forense

Herencia del ADN mitocondrial

Biología Forense

ADN MITOCONDRIAL

- Abundancia

Por célula: 1000-10000 copias mtADN

vs 2 copias nADN

- Copia única

no recombina

herencia exclusivamente materna

- Útil para la reconstrucción del pasado

reciente de las poblaciones humanas

µ región control=2’06 10-6 - 4’14 10-6

Resolución más baja que marcadores

nucleares

Biología Forense

ACCGCTATGT ATTTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACGG TACCATAAAT

16090 16100 16110 16120 16130 16140

rCRS

ACCGCTATGT ATCTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACAG TACCATAAAT Q

K ACCGCTATGT ATCTCGTACA TTACTGCCAG CCACCATGAA TATTGTACAG TACCATAAAT

Muestra Q

16093C

16129A

Muestra K

16093C

16129A

Adapted from Figure 10.8, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press

Diferencias respecto a la Secuencia de referencia

16093 16129

Biología Forense

Haplotipo: Conjunto de alelos de diferentes marcadores que

definen a un individuo (Huella genética o DNA fingerprint)

Ejemplo: Marcadores nucleares

D3S1358 D8S1179 D5S818 HUMVWA D21S11 D13S317

10-12 15-21 7-9 8-8 10-15 8-12

Ejemplo: Cromosoma Y

DYS388 DYS389I DYS389II DYS390

12 10 26 14

Ejemplo: Región Hipervariable I de mtDNA

16069A, 16126C, 16261T

Identificación personal por ADN

Biología Forense

Bases de datos de interés poblacional o forense

- STRs autosómicos:

- Y- STRs:

- ADN mitocondrial:

EDNAP mtDNA

Population Database

Otros…

Biología Forense Low-Level DNA (LL-DNA)

• <100 pg ADN genómico (~15-17 copias diploides de ADN nuclear)

• Normalmente se requiere 150-250 pg

Allele imbalance Allele dropout

Biología Forense

AIM (Ancestry Informative Markers)

Biología Forense Physical trait Markers

Biología Forense

Biología Forense

Biología Forense Transferencia

Biología Forense

Estudio de indicios genéticos atípicos