BIOLUMINISCENCIA APLICACIONES EN

MICROBIOLOGIA

Cuando la reacción quimioluminogénica es

enzimática, ocurre en un organismo vivo o bien se produce en sistemas químicos derivados de éstos, al fenómeno se le denomina BIOLUMINISCENCIA

El complejo luciferin –luciferaza para medir

ATP se detecto por primera vez en Photinus pyralis cola de la luciernaga .

La luz producida en la bioluminiscencia se mide en un tubo detector multiplicador y se expresa en unidades relativas de luz ( URL)

Cuantificadas por un fotometro o luminimetro

La producción de bioluminiscencia en los animales es

un proceso químico complejo en el que la oxidación de un sustrato de proteína luciferina es catalizado por la enzima luciferasa.

La luciferina acompañada de la enzima luciferasa, la molécula energética ATP

La combinación entre la luciferina y el oxígeno provoca la oxidación de la luciferina dando lugar a la oxiluciferina. Esta reacción necesita del ATP para generar moléculas de oxiluciferina en estado excitado

y el oxígeno genera la luz bioluminiscente

Molécula + enzima + un poco de oxígeno = luz

La bioluminiscencia es un fenómeno que ha

sido explorado por una variedad  de organismos. Para que esta reacción química ocurra es necesaria la presencia de una proteína denominada luciferina, la enzima catalizadora luciferasa, oxígeno molecular y ATP (Trifosfato de adenosina), sustancia capaz de generar la energía necesaria para que se dé la reacción

Se puede observar del verde al azul, que es lo

más frecuente, ya que es la luz que se transmite a mayor profundidad en el agua. Aunque se observa también del rojo o al ámbar, en menor medida ya que el color rojo se absorbe rápidamente en el agua y pocos organismos marinos tienen la capacidad de percibir ese color.

 

La bioluminiscencia no debe confundirse con

la fluorescencia, la fosforescencia o la refracción de la luz, técnicas empleadas también por numerosos organismos.

Es un recurso evolutivo presente en bacterias, hongos, protistas unicelulares, celentéreos, gusanos, moluscos, cefalópodos, crustáceos, insectos, equinodermos y peces.

La técnica de detección está basada en lareacción ATP (Adenosin-trifosfato) presente en todoslos organismos vivos. La cantidad de luz emitida esproporcional a la cantidad de ATP presente ya sea enuna mesada (lote) o en el producto final. Mediante un Luminómetro portátil se mide la cantidad de fotonesemitidos en URL o Unidades Relativas de Luz que esproporcional a la cantidad de microorganismospresentes.

El método de Bioluminiscencia permite obtener resultadosen un corto periodo de tiempo, sin embargo, no especifica cuantitativamente la población microbiana existente en una muestra determinada debido al ATP no microbiano presente en la muestra.

Desventajas

INNOVACIONES

para el monitoreo ambiental conocer un estudio donde se destacan los beneficios de productos de ATP, además de ofrecerles un artículo sobre cómoidentificar las zonas críticas y la frecuencia de las pruebas de ATPEL LUMINOMETRO MIDE EL ATP EN UNA MUESTRA EN 30 segundos

Se utiliza para la detección rápida de

microrganismos vivos y su monitorización Especialmente en la valoración de la

contaminación . Especialmente en la Higiene de superficies

instrumentos ,que afecta la calidad de los productos .

Siendo las biopeliculas las que emiten microrganismos que pueden contener .

Usos en la Higiene

Las superficies que indican bajo ATP indican

ausencia de contaminación . Si son altas indican presencia de organismos

vivos o materia orgánica Los desinfectantes alteran la membrana

celular ,inhiben la actividad metabólica . Disminuyendo la emisión de luz

Factores ambientales como : Ph Temperatura Restos de detergente Desinfectantes . Provocando una disminucion de la luz emitida La medición de valores altos de ATP no indica

necesariamente contaminación microbiana .

Interferencias en el Metodo

Si la cantidad de ATP es baja puede deberse a Presencia de bacterias gram negativas o

esporas . Si es alta levaduras o gram positivas con

actividad metabólica alta . Por lo tanto no sustituye los métodos

tradicionales .

INDICADORES

Equipos para medir ATP

Es un luminómetro portátil multifuncional que

puede ser usado para validar higiene, empleando hisópos para medir ATP residual en superficies o líquidos. También puede ser empleado con zondas para medir PH, Temperatura y Conductividad. Reduce la necesidad de tener diferentes instrumentos en la planta. El equipo puede almacenar en su poderosa memoria hasta 5000 resultados. 

: Monitoreo de limpieza en 10 segundos con sensibilidad de

0.000000000015 gramos de ATP ó contaminación por materia orgánica

Cuenta con calibradores trazables NIST y controles positivos de ATP Totalmente portátil y ergonómico, 460 gramos de peso Almacena hasta 10,000 resultados y puede configurar hasta 1000

puntos diferentes Exclusivo software para configurar datos, transferencia a la

computadora en un solo paso y software para analizar datos con capacidad gráfica con sólo configurar una pantalla en menos de 1 minuto

Determina pH 0-14, temperatura de -20° hasta 105°C y concentración de sanitizantes y limpiadores desde 10 hasta 100,000 microsiemens y/o 10 hasta 200,000 ppm.

principales características