PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS

Para esta prctica se utiliz: Un pedazo de hgado del tamao de un dedo gordo de la mano Un poco de arena Una solucin de cloruro de sodio 2M H2O SDS (Dodecilsulfato de sodio) Alcohol En un mortero se coloc el hgado junto con la arena, posteriormente se tritur por un buen tiempo hasta que el hgado adquiri una textura de papilla, se observ lo siguiente:

1 mezcla de arena e hgado 2 Trituramiento de la mezcla

3 hgado completamente triturado Despus de tener triturado el hgado con lo cual se supone que bastantes clulas estn rotas y han dejado al descubierto su contenido, se agregan 50 mL de agua a la mezcla para disolver el contenido interno de las clulas que ha quedado expuesto y se procede a filtrar con el fin de dejar el tejido roto que no se necesita en el filtro. El filtrado se deposita en una probeta para saber cul es la cantidad que se filtr y as poder determinar qu cantidad de solucin de cloruro de sodio es la que se debe agregar.

4 Mezcla con los 50 mL de H2O 5 Mezcla siendo filtrada

6 cantidad de filtrado obtenido

Al agregar el filtrado a la probeta se determin que la cantidad obtenida fue de 44 mL con lo cual se debe agregar la misma cantidad de solucin de cloruro de sodio a la mezcla. Despus de agregar la solucin de NaCl se adiciono 3,5 mL de SDS (Dodecilsulfato de sodio) el cual hace que las molculas de protena que rodean al ADN se adhieran al SDS y quede la molcula de ADN libre.Por ultimo a la mezcla que se obtiene se le agrega 35 mL de alcohol bastante frio con una temperatura alrededor de los -5C, este se agrega con bastante cuidado procurando que no se mezcle y que quede en la parte superior de la mezcla.

7 Mezcla despus del SDS 8 Mezcla con alcohol

Finalmente la mezcla con el alcohol se dej en reposo por 3 minutos dando como resultado una mezcla con bastantes grumos los cuales se podan observar a simple vista, tal como en la siguiente imagen:

9 Mezcla con grumos

ANALISIS DE RESULTADOS

Los grumos que se obtuvieron en la mezcla son miles de millones de molculas de ADN agrupadas entre s, esto ocurri gracias a la temperatura tan baja y a la polaridad del alcohol agregado en la ltima parte del procedimiento. Como se puede apreciar en la imagen numero 9 hay grumos en la mezcla pero estos no se aprecian tan fcilmente, parece que no se han agrupado lo suficiente, esto puede deberse a que el alcohol agregado no estaba lo suficientemente frio, ya que al momento de agregarlo a la mezcla la mayora de compaeros de laboratorio lo haban utilizado, y es muy probable que haya habido transferencia de calor desde las manos de los estudiantes al alcohol, con lo cual el trabajo de este sobre el ADN no fue tan efectivo.El hecho de que se pueda observar los grumos de ADN es gracias tambin al SDS (Dodecilsulfato de sodio) el cual acta como un detergente dentro de las clulas rotas separando los lpidos y protenas que se encuentran en la disolucin dejando tan solo el ADN al descubierto, por esto la importancia del uso de SDS en estos ensayos, pero como la molcula de ADN es tan pequea es necesario el uso del alcohol para que las agrupe y forme grumos o fibras en un mejor caso, en el nuestro se formaron algunos grumos solamente por razones expuestas anteriormente. La informacin plasmada en el anlisis de resultados se basa en conocimientos adquiridos anteriormente y por informacin suministrada por el profesor durante la prctica de laboratorio.