Caracterización (antagonismo y patogenicidad) de hongos ...Antagonismo in vitro 97 vs M. roreri 84...

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Caracterización (antagonismo y patogenicidad) de hongos endófitos foliares de cacao contra Moniliophtora roreri y M. perniciosa DAYNET SOSA DEL CASTILLO. RED BIO 2016-PERÚ

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Caracterización(antagonismoypatogenicidad)dehongosendófitosfoliaresdecacaocontra

Moniliophtora roreri yM.perniciosaDAYNET SOSA DEL CASTILLO. REDBIO 2016-PERÚ

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(450 TM x 103) (250 TM x 103) (50 TM x 103) (30 TM x 103) (30 TM x 103)

Phytophthora spp.Moniliophthora perniciosa Moniliophthora roreri

Hinchamiento delbrote

Oncobasidium theobromae

Escoba debrujaPudriciónparda

Cacaoswollenshootvirus

MuerteregresivavascularMoniliasis

Consideracionesgenerales

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Métodostradicionalesdecontroldeenfermedadesencacao

• Prevención:Limpiezaytráfico

• Químicosdebasecúprica(contactoysistémicos)

• Prácticasculturales(reducirfactoresquefavorecenyreducirfuentedeinóculoypropagación).

• Controlgenético:variedadestolerantes/resistentes

• Controlbiológico/etológico

• CombinacióndetodasenManejoIntegradodePlagas(MIP)

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Gliocladium catenulatum: ↓70% de incidencia plántulas (Rubini et al., 2005)

Clonostachysrosea:↓10%incidenciamazorcaesporulada (Mejíaetal.,2008)

Pestalotiopsis,Curvularia,Tolypocladium yFusarium:↓ severidadenmazorcas(Hanada etal.,2010)

Colletotrichumgloeosporioides:↓pérdidasenmazorcas(Mejíaetal.,2008)

Controlbiológicoconhongosendófitosencacao

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Metodología

Antagonismoinvitro97vsM.roreri

84vs.M.perniciosaAislamientoenhojas

150aislados

PCR-ITS114Identificados36Noidentificados

Patogenicidad103enhojas83enfrutos

ColectahojassanasRegiónCosta

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a-.Conidia andmacroconidia ofCladosporium cladosporoides,b-.Apressoria,conidiogenous cell andconidia ofColletotrichum sp.,c-.Conidiogenous cell andconidia of Curvularia lunata,d-.Macroconidia ofFusariumdecemcellulare,e-.Openperitheciumwith exposed asci andascuspores ofGlomerella sp.,f-.Conidia ofLasiodiplodiatheobromae,g-.Conidia of

Nigrospora sp.,h-.Conidiophore ofPenicillium sp.,i-.Conidia ofPestalotiopsis sp.,j-.α- yβ-conidia ofPhomopsis sp..

a b c d e f g h i j

Morfotipos diferenciadossegúncoloniasenPDA(selección)

Diversidadmorfológicadelamicobiota endófitadeT.cacao

Estructurasreproductivas(selección)

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Annulohypoxylonsp.Bionectriacf.ochroleucaCeriporialacerataCeriporiasp.ColletotrichumboninenseColletotrichumfragariaeColletotrichumgloeosporioidesCoriolopsispolyzonaCorynesporacassiicolaCurvulariaverruculosaDaldiniaeschscholtziiDaldiniaplacentiformisDiaporthephaseolorumDidymosphaeriafutilisEndomelanconiopsissp.Eutypasp.FusariumcamptocerasFusariumdecemcellulareFusariumequisetiFusariumgraminearumFusariumincarnatumFusariumoxysporumFusariumsolaniFusariumsp.FusariumthapsinumGlomerellasp.HypoxyloninvestiensHypoxylonsp.LasiodiplodiatheobromaeNectriapseudotrichiaNINigrosporaoryzaeNigrosporasp.NigrosporasphaericaPestalotiopsismicrosporaPestalotiopsissp.PhanerochaetechrysosporiumPhomasp.Phomopsissp.PhytophthorapalmivoraPsathyrellasp.PseudolagarobasidiumbelizenseTrichotheciumroseumXylariaberteriXylariafeejeensisXylariasp.XylariavenosulaXylariaceae

Fusarium

Xylaria

Colletotrichum

Lasiodiplodia75aisladoshastaespecie(33)34aisladoshastagénero(13)5aisladoshastafamilia(1)

18aislados

22aislados

21aislados

8aislados

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Cinéticadeinhibicióndelcrecimientodeambospatógenosporgruposdeendófitos

-40

-20

0

20

40

60

80

3d 5d 7d 10d%ICM

.RORE

RI

DAYSOFINTERACION

MR-1(63) MR-2(3) MR-3(6) MR-4(10) MR-5(14)

-60

-40

-20

0

20

40

60

3d 5d 7d 10d

%IC

M.PER

NICIOSA

DAYSOFINTERACTION

MP-1(40) MP-2(6) MP-3(9) MP-4(6) MP-5(20)

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Resultados delainteracción delas coloniasendófito-patógeno alos10ddecultivo vis-à-vis.

Tipodeinteracción Descripción delainteración M.roreri M.perniciosa

Competencia porelsustrato

Endófito gana (Ecrece sobre elP) 34 44

Neutral(haycontacto, pero nosobrecrecimiento) 33 26

Patógeno gana (Pcrece sobre elE)20 4

Resultados ambiguos entreréplicas7 1

Antibiosis Sincontactodelascolonias 2 8

TOTAL 96 83

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PatogénicoNo

Patogénico

Control

Síntomas inducidos por hongos endófitos inoculados en hojas yfrutosdesprendidos decacao

H:22/103

F:37/83

H:81/103(28UTO)

F:46/83(18UTO)

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Not pathogenic (Leaflet & Fruit) Pathogenic (Leaflet or Fruit) Not pahogenic (Leaflet or Fruit)

Not

iden

tifie

d

Xyla

ria

Col

leto

trich

um

Tric

hoth

eciu

m

Phom

opsi

s

Fusa

rium

Phyt

opht

hora

Pest

alot

iops

is

Hyp

oxyl

on

Nec

tria

Glo

mer

ella

Phom

a

Psat

hyre

lla

Nig

rosp

ora

Lasi

odip

lodi

a

Xyla

riace

ae

Cer

ipor

ia

Dia

porth

e

Pseu

dola

garo

basi

dium

Phan

eroc

haet

e

Euty

pa

Endo

mel

anco

niop

sis

Ann

uloh

ypox

ylon

Dal

dini

a

Cor

ynes

pora

Cor

iolo

psis

Operative Taxonomic Units

0,00

0,10

0,20

0,30

0,40

Rel

ativ

e fre

uenc

y

Not pathogenic (Leaflet & Fruit) Pathogenic (Leaflet or Fruit) Not pahogenic (Leaflet or Fruit)

Patogenicidaddelosaisladossegúngénero(UnidadesTaxonómicasOperativas)

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CepaspromisoriascontraM.roreri(GrupoMR-5,>%IC)ysuscaracterísticaspatogénicas,tipodeinteraccióndelascoloniasy

comportamientofrenteaM.perniciosaCEPA SÍNTOMAS ESPECÍMENES INTERACCIÓNVIS-À-VIS (10d) %INHIBICIÓNDELCRECIMIENTO

M.roreri%INHIBICIÓNDELCRECIMIENTO

M.perniciosaHojas Frutos M.roreri M.perniciosa 3d 5d 7d 10d 3d 5d 7d 10d

C027 NP L.theobromae Neutral Endófitoganó 48,05 71,26 80,77 82,76 22,22 39,13 53,33 63,16

C157 L.theobromae Endófitoganó 49,00 77,01 84,62 86,21 -8,33 13,04 33,33 47,37

C098 L.theobromae Endófitoganó Neutral 35,06 71,26 80,77 82,76 27,78 28,26 41,67 53,95

C059 NP Xylariafeejeensis Neutral Antibiosis 22,08 48,28 53,85 51,72 -22,22 4,35 26,67 42,11

C084 Daldinia eschscholtzii Patógenoganó 15,58 51,15 67,31 70,69

C071 NP Necrosis C.gloeosporioides Neutral Neutral 9,09 45,4 63,46 67,24 -16,67 8,7 30 44,74

C067 L.theobromae Neutral Endófitoganó 9,09 59,57 72,98 75,55 -47,22 -15,22 11,67 30,26

C120 L.theobromae Neutral Endófitoganó 9,09 59,77 73,08 75,86 -27,78 0 23,33 39,47

C035 Necrosis L.theobromae Endófitoganó 9,09 59,87 73,09 75,92

C107 NP C.gloeosporioides Endófitoganó Endófitoganó 9,09 59,77 73,08 75,86 -19,44 6,52 28,33 43,42

C013 Nec+Clor NP Phomopsis sp. Endófitoganó Endófitoganó -10,39 51,15 42,31 70,99 -11,11 -4,35 20 36,84

C055 NP Coriolopsis polyzona PatógenoganóPatógenoganó -10,25 51,05 67,31 70,69 -6,52 18,33 35,53

C135 NP Necrosis Nectria pseudotrichia Neutral Neutral -16,88 42,53 61,54 65,52 -11,11 4,35 26,67 42,11

C129 Nigrosporasp. Neutral Neutral -23,38 36,78 53,85 58,62 -30,56 -2,17 21,67 38,16

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CepaspromisoriascontraM.perniciosa(GrupoMP-2,>%IC)ysuscaracterísticaspatogénicas,tipodeinteraccióndelascoloniasy

comportamientofrenteaM.roreri

CEPA SÍNTOMAS ESPECÍMENES INTERACCIÓNVIS-À-VIS(10d)

%INHIBICIÓNDELCRECIMIENTO

M.roreri

%INHIBICIÓNDELCRECIMIENTOM.perniciosa

Hojas Frutos M.roreri M.perniciosa 3d 5d 7d 10d 3d 5d 7d 10dC098 L.theobromae Endófitoganó Neutral 35,06 71,26 80,77 82,76 27,56 28,26 41,67 53,95C060 NP NP Pestalotiopsissp. Patógenoganó Neutral 74,03 51,15 59,62 63,79 27,78 23,91 40,00 44,74C027 NP L.theobromae Neutral Endófitoganó 48,05 71,26 80,77 82,76 22,22 39,13 53,33 63,16C163 Necrosis C.gloeosporioides Mezclado Neutral -29,87 10,71 40,38 46,55 16,67 28,26 41,67 53,95C138 NP Fusariumcamptoceras Neutral Neutral -23,38 10,92 36,54 43,10 15,97 17,39 33,33 47,37C151 NP L.theobromae Endófitoganó 2,78 23,91 41,67 53,95

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ConclusionesUngranporcentajedeloshongosendófitosfoliaresaisladosnofueroncapacesdeinducirsíntomasdeclorosisy/onecrosisenhojas(79%)yenfrutos(55%)decacao.

Solamenteel21%fuepatogénicoenhojasyel45%enfrutos

EnlapoblaciónmuestreadadeendófitoscoexistenaisladosconefectoestimulanteeinhibitoriodelcrecimientodeMRyMP.

Segúnloscriteriosdeseleccióntrabajados,seguiremoslosestudioscon20aislados(14paraMRy6paraMP).

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Haciadóndevamos:evaluacióndeldesarrollodelaenfermedad

¿PuedenestosaisladosinfluenciaralaMoniliasis?

1.¿Nolainfluencian?

2.¿Lapromueven?

3.¿Lareducenaligualquelomostradoinvitro?

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GRACIAS