CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA TRABAJO DE...

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

TRABAJO DE TITULACIÓN

PREVIA LA OBTENCIÓN DEL TÍTULO DE

BIOQUÍMICA FARMACÉUTICA

TEMA:

ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS

MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR

ASPIRANTE

ANDREA AZUERO C.

TUTOR

Dra. HAYDELBA D’ ARMAS, PhD

COTUTOR

Dra. CARMITA JARAMILLO JARAMILLO

MACHALA - EL ORO - ECUADOR

2015

2

CERTIFICACIÒN

El presente trabajo de investigación “ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO

DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”,

realizado por el autor Sra. Andrea Jacqueline Azuero Caamaño, egresado de la carrera de

Bioquímica y Farmacia, ha sido prolijamente dirigido y revisado, por lo tanto autorizo su

presentación previo a la obtención del título de Bioquímico Farmacéutico.


DIRECTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN

3

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

INFORME DE HORAS DE TRABAJO DE TITULACIÓN

Machala, 06 de Abril del 2015.

Dr.

Jhonny Pérez

Decano de la Unidad Académica de Ciencias Químicas y de la Salud

De mi consideración.

La presente sírvase para notificarle a Ud. y por su intermedio al H. Consejo Directivo de la Unidad

Académica, que luego de haber dirigido en calidad de Tutor del Trabajo de Titulación “ANÁLISIS

DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO

ANCESTRAL EN EL ECUADOR”, el mismo que ha sido ejecutado y revisado bajo mi

responsabilidad ha cumplido todas las normas de redacción de la Unidad Académica y el rigor

científico que amerita, incluyendo las normas reglamentarias que exige un trabajo de titulación, lo

cual detallo a continuación:

200 horas de trabajo permanente con la tutora, en asesoramiento de trabajo de titulación y

laboratorio.

200 horas de trabajo permanente en laboratorio, sin el tutor.

240 horas de trabajo autónomo en la elaboración del documento final del trabajo de

titulación.

Detalle que certifica un total de 640 horas de trabajo de titulación, correspondiente a 16

créditos académicos, del aspirante Sra. Andrea Jacqueline Azuero Caamaño.

Esperando que la presente tenga una acogida favorable, le reitero mis agradecimientos.

Atentamente


TUTOR DEL TRABAJO DE TITULACIÓN

4

RESPONSABILIDAD

Yo, ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO, autor del presente trabajo de

titulación cuyo tema es: “ANÁLISIS DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE

PLANTAS MEDICINALES DE USO ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”, declaro

que la investigación, resultados y conclusiones expuestas en el presente trabajo,

son de mi responsabilidad.

———————————————————————

ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO

AUTOR

5

CESIÓN DE DERECHO DE AUTORÍA

Yo, ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO, con cédula de identidad

0704996180, egresada de la escuela de Bioquímica y Farmacia, de la Unidad

Académica de Ciencias Químicas y de la Salud, de la Universidad Tecnica de

Machala, responsable del presente trabajo de titulación con tema: “ ANÁLISIS

DEL EFECTO ANTIMICROBIANO DE DOCE PLANTAS MEDICINALES DE USO

ANCESTRAL EN EL ECUADOR ”, Durante los meses JUNIO DEL 2014 hasta

MARZO del 2015, certifico que la responsabilidad de la investigación, resultados y

conclusiones del presente trabajo pertenecen exclusivamente a mi autoriza, una

vez que ha sido aprobado por mi tribunal de sustentación del trabajo de titulación

autorizando su presentación.

Deslindo a la Universidad Técnica de Machala de cualquier delito de plagio y cedo

mis derechos de autor a la Universidad Técnica de Machala para que ella proceda

a darle el uso que crea conveniente.

---------------------------------------

ANDREA JACQUELINE AZUERO CAAMAÑO

C.I. 0704996180

6

DEDICATORIA

Dedico este trabajo primeramente a Dios ya que me ha dado las fuerzas

necesarias para seguir adelante y bendiciéndome día a día, a mi padre Holger

Azuero que no esté conmigo, sé que desde el cielo me ha cuidado y sé que está

muy orgulloso de mí.

A mi madre Rosa Caamaño, a mis hermanos Angélica Azuero y Holger Azuero

quienes estuvieron allí apoyándome y dándome su fortaleza y amor en esos

momentos que sentía que ya no podía más.

A mi esposo Jovanny Chamaidan, quien me apoyo incondicionalmente en mi

carrera universitaria.

7

AGRADECIMIENTO

Primero darle gracias a Dios ya que sin el nada sería posible y por las Bendiciones

que derrama en mi vida.

Gracias a mi querida tutora la Dra. Haydelba D’ Armas, por su paciencia,

dedicación y por sus conocimientos, y ante todo por ser una gran amiga.

Gracias a la Dra. Carmita Jaramillo por sus consejos y por siempre estar dispuesta

a ayudarme.

Gracias a BQF. Diana Sanmartín por ayudarme en mi trabajo de tesis en el

laboratorio de Microbiología y por siempre estar allí despejando todas mis dudas.

Gracias a todos ellos logre una de mis metas de mi vida, que es ser una

Bioquímica Farmacéutica de la Universidad Técnica de Machala.

8

RESUMEN

La actividad antimicrobiana de plantas medicinales es un grande beneficio que se

puede obtener para lograr tener un efecto ya sea antibacteriano o anti-fúngico, y

así lograr sanar alguna patología que se presente con una de estas plantas. En el

ensayo de la actividad antibacteriana se utilizó el medio de cultivo Müller-Hinton y

las cepas de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, y Staphylococcus aureus

realizándole dos pocillos mediante los cuales se formaron sus respectivos halos

de inhibición, un pocillo se usó para colocar el medicamento que sirvió para

combatir las bacterias, en este caso ciprofloxacina, y en el otro pocillo el extracto

metanólico de la planta. En el ensayo de la actividad antifúngica se utilizó el medio

de cultivo Agar Papa Dextrosa y se utilizó la cepa de Candida albicans, se

utilizaron dos pocillos, en un pocillo se colocó el medicamento, en este caso

ketoconazol, para controlar el crecimiento de los hongos, en el otro pocillo se

colocó el extracto metanólico. Se le realizó el análisis antimicrobiano a estas doce

plantas medicinales Cymbopogon citratus, Melissa officinalis, Taraxacum officinale,

Artemisia absinthium, Piper carpunya, Moringa oleífera, Coriandrum sativum,

Momórdica charantia, Borago officinalis, Aloysia citriodora, Ambrosia artemisifolia,

Ageratum conyzoides. El análisis de bioactividad antimicrobiana a los extractos

metanólicos de dichas plantas, arrojo que la mayoría de las mismas exhibieron un

efecto antibacteriano y antifúngico contra las cepas de bacterias y hongo

ensayados. Por lo cual, se puede decir que estas plantas constituyen una fuente

promisoria de compuestos antimicrobianos de gran valor farmacológico.

Palabras Clave: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus

aureus, Plantas medicinales, actividad antimicrobiana.

9

ABSTRACT

The antimicrobial activity of medicinal plants is a great benefit that can be obtain in

order to have an effect either antibacterial or anti-fungal, and thus achieve heal any

pathology that is present with one of these plants. In the trial of the antibacterial

activity, medium Müller - Hinton and the strains of Escherichia coli, Pseudomonas

aeruginosa and Staphylococcus aureus were used to culture by bringing two wells

through which formed their respective halo of inhibition, a well was used to place

the medication that was used to combat bacteria, in this case ciprofloxacin, and the

methanolic extract of the plant was placed in the

other well. In the antifungal activity assay, medium of potato dextrose agar was

used for cultivation and the strain of Candida albicans, two wells were used and in

a well was placed the medication, in this case ketoconazole, to control the growth

of fungi, on the other well was placed the methanolic extract. Antimicrobial assays

were made to these twelve medicinal plants Cymbopogon citratus, Melissa

officinalis, Taraxacum officinale, Artemisia absinthium, Piper carpunya, Moringa

oleifera, Coriandrum sativum, Momordica charantia, Borago officinalis, Aloysia

citriodora, Ambrosia artemisifolia, Ageratum conyzoides. The analysis of

antimicrobial bioactivity to methanolic extracts of these plants, showed that most of

the same species exhibited an antibacterial and antifungal effect against the strains

of bacteria and fungus tested. Therefore, we can say that these plants are a

promising source of antimicrobial compounds for pharmacological great value.

Key Words: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus,

medicinal plants, antimicrobial activity.

10

ÍNDICE

CONTENIDO PAGINA

Resumen 8

Abstract 9

Introducción 15

Problema 17

Justificación 18

Objetivos 19

Objetivo General 19

Objetivo Especifico 19

Marco Referencial 20

1. Plantas Medicinales

1.1 Agar Mueller-Hinton

1.2 Agar Papa Dextrosa

1.3 Cepas

1.4 Escherichia coli

1.5 Pseudomonas aeruginosa

1.6 Staphylococcus aureus

1.7 Candida albicans

1.8 Plantas medicinales

Trabajo experimental

20

20

21

22

22

22

23

23

24

2. Diseño Metodológico 31

2.1 Localización Investigación 31

2.2 Universo de Trabajo 31

2.3 Tipo de Muestra 31

3. Materiales y Métodos 32

3.2 Tipo de Investigación 33

3.3 Selección de Muestra 33

3.4 Obtención y Preparación de muestra 33

4. Resultados y Discusión 36

5. Conclusiones 66

6. Recomendación 67

7. Bibliografía 68

11

ÍNDICE DE TABLAS

CONTENIDO PÁGINA

Tabla 1. Actividad antibacteriana del extracto

metanólico de Aloysia citriodora o Lippia

citriodora (Cedrón).

30


metanólico de Ambrosia artemisifolia

(altamisa).

32


metanólico de Taraxacum officinale (diente

de león).

34


metanólico de Ageratum conyzoides

(mastrante).

36


metanólico de Piper carpunya (guaviduca)

38


metanólico de Borago officinalis (borraja).

40


metanólico de Coriandrum sativum (cilantro). 42


metanólico de Melissa officinalis (toronjil).

44


metanólico de Cymbopogon citratus (hierba

luisa).

46

12


metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo).

48

Tabla 11. Efecto antibacteriano de achochilla y

Ciprofloxacino contra las cepas de E. coli, P.

aeruginosa y S. aureus.

50

Tabla 12. Efecto antibacteriano de moringa y

Ciprofloxacino con cepa E.coli, P. aeruginosa

y S. aureus.

52

Tabla 13. Actividad antifúngica del extracto

metanólico de Aloysia citriodora (cedrón),

Ambrosia artemisifolia (altamisa) y

Taraxacum officinale (diente de león).

54


metanólico de Ageratum conyzoides

(mastrante), Piper carpunya (guaviduca) y

Borago officinalis (borraja).

54


metanólico de Coriandrum sativum (cilantro),

Melissa officinalis (toronjil) y Cymbopogon

citratus (hierba luisa).

56


metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo),

Momórdica charantia (achochilla) y Moringa

oleífera (moringa).

56

13

ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1. Efecto antibacteriano del Cedrón y

Ciprofloxacina contra las Cepas E.coli, P.

aeruginosa y S. aureus

31

Figura 2. Efecto antibacteriano de altamisa y

ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.


33

Figura 3 . Efecto antibacteriano de diente de

León y ciprofloxacino contra cepas E. coli, P.


35

Figura 4 .Efecto antibacteriano de mastrante y

ciprofloxacino con cepa E.coli, P.aeruginosa

y S. aureus

37

Figura 5. Efecto antibacteriano de guaviduca y

Ciprofloxacino contra la cepa E.coli, P.


39

Figura . Efecto antibacteriano de borraja y

Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.


41

Figura 7. Efecto antibacteriano de cilantro y

Ciprofloxacino contra las cepas E.coli, P.


43

Figura 8. Efecto antibacteriano de toronjil y

Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.


45

Figura 9. Efecto antibacteriano de hierba luisa

y Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P.


47

Figura 10. Efecto antibacteriano de ajenjo y

Ciprofloxacino con cepa E.coli, P. 49

14


Figura 11. Achochilla y Ciprofloxacino con

cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

51

Figura 12. Moringa y Ciprofloxacino con cepa

E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

53

Figura 13. Efecto antifungico de cedrón,

altamisa, diente de león, mastrante, guaviduca,

borraja y control etoconazol contra la cepa

Candida albicans

55

Figura 14. Efecto antifungico de cilantro,

toronjil, hierba luisa, ajenjo, achochilla, moringa

y control (ketoconazol) contra la cepa Candida

albicans.

57

15

INTRODUCCIÓN

Hasta los comienzos del siglo XX, los productos naturales ocuparon el principal

lugar en los tratamientos de la salud, pero fueron desplazados por el vertiginoso

desarrollo de drogas sintéticas, en particular por la producción industrial de

antibióticos. Las especie vegetales son una fuente importante de nuevos fármacos,

los que tienen una creciente demanda en compuestos antimicrobianos debido al

aumento de la población y a la creciente resistencia a los antibióticos, lo que

constituye una amenaza mundial según señala la Organización Mundial de la

Salud-OMS (VIVOT et al, 2012).

Las patologías por bacterias y hongos han ido aumentando cada vez más, ya que

estas presentan cierta resistencia a los medicamentos que se les aplican para

contrarrestarlas, provocando la mayoría de las ocasiones efectos secundarios a los

pacientes y como consecuencia de ello no existe ninguna mejoría en el paciente.

En la actualidad existen una gran variedad de plantas medicinales que crecen y

son recolectadas aquí en Ecuador ya que éstas contienen metabolitos que

presentan actividad biológica, además a la mayoría de las plantas que crecen en

nuestro País, no se les ha realizado un estudio profundo para conocer las grandes

propiedades curativas que poseen, algunas de estas plantas son consumidas por

las personas, sin embargo existen otras que lastimosamente no son consumidas

por no ser reconocidas por la población.

La utilización de sustancias naturales en el tratamiento de diferentes

enfermedades, incluidas las de etiología infecciosa, constituye en la actualidad un

16

desafío en la medicina y se ofrece como una alternativa, especialmente en aquellas

dolencias para las que no existe un remedio adecuado (DOMINGO y LÓPEZ-

BREA, 2003).

Después utica se dedicó

s las antiguas

squeda de nuevos

medicamentos de origen herbario (RUIZ y ROQUE, 2009).

17

PROBLEMA

Actualmente, uno de los problemas más comunes es que existen plantas

medicinales que tienen una actividad antimicrobiana conocida por la población sin

embargo no han sido analizadas a fondo, para determinar cuáles son sus

beneficios, pasando muchas veces desapercibidas.

Un número creciente de personas recurren a sus propiedades curativas basándose

en su uso tradicional. No obstante, ciertas plantas medicinales no han mostrado las

propiedades que les atribuye la medicina popular, e incluso han resultado

peligrosas (HERNÁNDEZ, 2006).

Existen reportes en la literatura de que numerosas investigaciones están

encaminadas a la búsqueda de nuevos compuestos con actividades biológicas a

partir de fuentes naturales, mientras otras están destinadas a verificar las

propiedades que se les atribuyen (AVELLANEDA, 2005).

El estudio científico de las plantas medicinales es una fuente relevante para el

descubrimiento de nuevos fármacos que luego se sintetizan, pero también permite

un conocimiento más profundo de los vegetales que conduce a que muchos

productos naturales sean reconocidos como fitofármacos, es decir, compuestos

que igualan el nivel de los fármacos de síntesis (VIVOT et al, 2012).

18

JUSTIFICACIÓN

El control de diferentes patologías ya sea causadas por hongos y bacterias

utilizando estos extractos metabólicos de doce plantas medicinales es algo que

aún no ha sido probado.

Estas plantas de estudio han demostrado poseer efectos antibacterianos y

antifúngicos, muy aparte de que poseen otras propiedades curativas además de

estas, ya que para esta investigación solo se utilizó las hojas de estas doce plantas

medicinales que son recolectadas únicamente en Ecuador.

La solución que se encontraría para evitar consumir tantos medicamentos que no

ejercen una acción curativa se da la alternativa que mediante el estudio realizado

en este trabajo se conozcan la capacidad que tienen estas plantas y así poder

utilizarlas en la elaboración de algún medicamento que pueda ayudar a las

personas que presenten patologías pudiendo ser estas sanadas por la potente

acción de estas maravillosas plantas medicinales.

Con esta investigación se contribuiría a que estas plantas sean reconocidas por

todos y sepan lo valiosas que son y principalmente los benéficios que estas

brindan a la población.

19

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

Evaluar el efecto antibacteriano y antifúngico de las hojas de algunas plantas

medicinales recolectadas en la Provincia del Oro.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

1) Procesar las doce plantas en estudio como es lavado, secado, molienda y

luego extraer los metabolitos secundarios presentes en las plantas, mediante

la obtención de los extractos.

2) Determinar la actividad antibacteriana de los extractos obtenidos, mediante

el método del antibiograma.

3) Ensayar la actividad antifúngica de los extractos de las plantas, haciendo

uso del método de difusión en agar.

20

MARCO REFERENCIAL

1. MEDIOS DE CULTIVO

Uno de los sistemas más importantes para la identificación de microorganismos es

observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el

laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el

Medios de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial

debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y

presión de oxígeno adecuada, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad.

Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento

necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios

de cultivo. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se

solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre

el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en el.

En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de

enriquecimiento como hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos

fundamentales para incrementar el valor nutritivo del medio y ´para detectar

reacciones de fermentación de microorganismos que ayuden a identificarlos. El

suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los

microorganismos menos resistentes.

El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve

afectado por una serie de factores de gran importancia y que en algunos casos son

ajenos al propio medio (CASADO, et al 2012).

21

1.1 AGAR MUELLER-HINTON

Se emplea para ensayos de sensibilidad de los microorganismos frente a

antibióticos y sulfonamidas. También en aislamiento primario de Gonococos y

Meningococos.

Mueller y Hinton tomaron como punto de partida de sus estudios el medio de

Gordon y Hine con el fin de encontrar un medio capaz de resistir el autoclavado. El

primer paso fue sustituir la harina de guisante por el almidón, que a su vez protegía

el medio de las toxinas que pudieran estar presentes. Después sustituyeron la

peptona de carne por la de caseína hidrolizada, que por ser más fragmentada

favorecía más los crecimientos. Finalmente ha sido reconocido como el más

indicado para los ensayos de sensibilidad a antibióticos y sulfamidas por el

procedimiento de los discos.

En la ´reparación de este medio es fundamental que las concentraciones de timina,

timidina y ácido 4-aminobenzoico, sean lo suficiente bajas para no inhibir la

actividad antibacteriana de antibióticos y el ultimo las sulfamidas. El ensayo de

sensibilidad de un microorganismo frente a un antibiótico se puede realizar sobre

placas de agar Mueller-Hinton por procedimientos de difusión, por diluciones

seriadas o por técnicas turbidimétricas en el Caldo Mueller-Hinton. En las técnicas

de difusión se mide el halo de inhibición del crecimiento confluente alrededor del

depósito del antibiótico ya sea discos, torrecillas etc. (AMER, et al 1966).

1.2 AGAR PAPA DEXTROSA

El agar de Papa Dextrosa es un medio comúnmente utilizado para cultivar hongos

y levadura y a este medio se le puede añadir antibióticos para evitar el crecimiento

de bacterias.

El PDA es utilizado por varios investigadores para el aislamiento de especies

Fusarium. No se recomienda este medio para estos propósitos ya que varios

22

hongos saprófitos y bacterias también pueden crecer en el medio e interferir con la

recuperación de hongos del género Fusarium presentes.

Si se utiliza PDA para la recuperación de hongos provenientes de plantas entonces

se debe reducir la concentración de papa y dextrosa entre un 50 y 75% y añadir

antibióticos de amplio espectro para inhibir el crecimiento de bacterias (LESLIE, et

al 2006).

1.3 CEPAS

1.4 Escherichia coli

Es una de las especies bacterianas mas minuciosamente estudiadas y no

solamente por sus capacidades patogénicas sino también como sustrato y modelo

de investigaciones metabólicas, genéticas, poblacionales y de diversa índole

(Neidhardt, 1999).

E. coli puede ser causa de una enfermedad endógena en pacientes debilitados o

en situación de alteración de la pared intestinal como peritonitis, sepsis entre

otras, pero las infecciones entéricas provocadas por este germen no son causadas

por las cepas que habitan normalmente en el intestino, sino por las líneas

especialmente patógenas en esta localización (NATARO, et al 1998).

1.5 Pseudomonas aeruginosa

Es el principal patógeno de la familia Pseudomonadaceae y se identifica por ser un

bacilo gramnegativo ligeramente curvado que crece mejor en aerobiosis es muy

versátil nutritivamente y no fermenta hidratos de Carbono pero produce ácido a

partir de azúcares como la glucosa, fructosa y lactosa o sacarosa.

En relación a la morfología de las colonias puede ser variada y generalmente

pigmentadas se encuentran las típicas colonias que se extienden en la placa con

un brillo metálico y con un aspecto gelatinoso, viscoso especialmente en zonas de

mayor crecimiento y las variantes de colonias con morfotipo enano, coliforme y

muciode frecuentes de observar en las vías respiratorias y en pacientes con

fibrosis quística.

23

P. aeruginosa se caracteriza por estar ampliamente distribuida en la naturaleza

formando parte de la microbióta normal del hombre, la facilidad que muestra P.

aeruginosa para crecer tanto en la naturaleza como a nivel nosocomial le permite

ser una de las principales causas de infecciones hospitalarias graves (MONTERO,

2012).

1.6 Staphylococcus aureus

Es la especie más patógena y virulenta para el hombre, pero también puede

encontrarse colonizando la piel y las mucosas.

Las colonias de S. aureus presentan un color amarillo dorado característico debido

a la producción de carotenoides durante su crecimiento de ahí su nombre se deriva

d ela palabra latina con la que se designa el oro, sin embargo muchas cepas

presentan variantes no pigmentadas S. aureus crece bien a altas concentraciones

de NaCl, es coagulasa, DNAsa y catalasa positivo y fermenta el manitol, lo que

permite diferenciarlo del resto de especies del género Staphylococcus

(BANNERMAN, 2003).

La infección por S. auerus se produce tras lesiones cutáneas, traumáticas o

quirúrgicas que favorecen la penetración del microorganismo desde la piel hasta

los tejidos profundos. Desde estos puntos puede producir bacteriemia y cuadros

metastásicos. Las infecciones causadas por S. aureus generalmente son

supurativas y tienden a la formación de abscesos (PASCUAL, 2005; LOWY, 2006).

1.7 Candida albicans

Es un microorganismo muy versátil por su capacidad para sobrevivir como

comensal en varios sitios anatómicamente distintos como el intestino, cavidad oral

y vagina, y puede causar la enfermedad cuando se le presenta la oportunidad. La

limitación por nutrientes y la competencia entre bacterias y hongos en las

superficies mucosas proporcionan una presión selectiva que ocasiona la

eliminación de los microorganismos menos adaptados.

Candida albicans tiene varios atributos de virulencia para colonizar el huésped y

ocasiona daño de forma directa, al activar, resistir o desviar los mecanismos de

24

defensa del mismo. Los factores de virulencia expresados o requeridos por el

microorganismo para causar infección pueden variar según el tipo, el sitio y la

naturaleza de las defensas del huésped (CASTRILLON, et al 2004).

1.8 PLANTAS MEDICINALES

Se pueden encontrar gran variedad de plantas con usos medicinales que se

expenden en mercados de Costa, Sierra y Amazonia (ORTEGA et al, 1988).

Las causas y el extenso empleo de plantas medicinales entre los ecuatorianos son

el bajo poder adquisitivo de la mayoría que no permite el acceso a medicamentos,

la carencia de un sistema oficial de salud efectivo y principalmente que el

conocimiento medico ancestral es inmenso (ESTRELLA, 1995; BUITRON, 1999).

Hierba luisa cuyo nombre es Cymbopogon citratus, es perteneciente a la

familia Verbenácea, es vivaz, leñosa, arbustiva, que puede alcanzar 1 m y

más de altura. Los tallos son largos, delgados y asurcados por pequeñas

costillas longitudinales. Las hojas están insertas en cada nudo, en vértices

de tres; tienen un peciolo corto y son lanceoladas de borde entero con una

nerviación central muy saliente por su envés de los que parten casi

perpendicularmente numerosas nerviaciones secundarias, las hojas tienen

un característico olor a limón, las hojas y sumidades contienen del 0,20 al

0,25 % de aceite esencial cuyos componentes mayoritarios son: limoneno,

citral, geraniol, 40-45 % de sesquiterpenos , verbenona, aldehído y cetonas.

Su aplicación es que tiene un efecto tónico, estomáquica, digestiva,

antiespasmódica y carminativa (MUÑOZ ,1996). La principal accion del

aceite esencial es sobre el aparato digestivo, por lo que puede aplicarse en

casos de colitis, gastroenteritis y otras afecciones como las gastritis causada

por la bacteria Helicobacter pylori como se demuestra en un estudio en

Kyoto donde se inhibió totalmente el crecimiento de la bacteria mediante la

administración oral del aceite (OHNO et al, 2003).

Toronjil cuyo nombre científico es Melissa officinalis, proviene de la familia

Laminaceae, es una hierba vivaz, perenne de 30 a 80 cm de altura, tallo

cuadrangular, erecto algo velludo y muy ramificado; hojas opuestas,

25

pecioladas ovales, con base amplia, agudas, con pelillos y bordes rizados,

de color verde oscuro por la cara superior más pálidas en el envés, rugosas

al tacto y con intenso olor a limón, se cultiva en huertos y jardines tanto

como ornamental como por su agradable olor y por ser medicinal

actualmente es utilizado en farmacia y perfumería. Sus compuestos

químicos son flavonoides, ácidos fenólicos, mucilagos urónicos, derivados

triterpénicos aceite esencial, glucósidos, taninos y su acción farmacológica

es sedante, carminativa, espasmolítico antibacterial, antiviral, antioxidante y

antihormonal y sus usos medicinales empíricos son desmayos, decaimiento

de ánimo, vértigos, migraña, cólicos nerviosos, espasmos, calambres,

dolores neurálgicos (ARANGO, 2014). El aceite esencial de esta planta

posee marcada actividad antibacteriana, antioxidante y antifúngica (DUKIT

et al, 2004). Se ha demostrado también que el extracto acuoso de M.

officinalis presenta propiedades inmunoestimulante; la esencia de M.

officinalis mostró citotoxicidad frente a diferentes líneas tumorales humanas

y de ratón (SOUSA et al. 2004).

Diente de león cuyo nombre científico es Taraxacum officinale y proviene

de la familia de las Asteráceas, es considerado como una cotiledónea es

decir una planta que produce dos hojas a partir de la germinación de su

simiente. Su tronco sin rama crece de 5 a 45 cm por encima de un ramo de

hojas brillantes toscamente dentadas, sin pelo y que son más anchasen su

parte superior que en la base. Los dientes de las hojas por lo general

tienden hacia abajo y las hojas crecen sobre un rosetón que actúa como

base dado que las hojas tienen una ranura natural que sirve para conducir

el agua a la raíz de la planta. Las plantas de diente de león prefieren suelos

ricos bien drenados enriquecidos con nitrógeno y de pH neutro, la mejor

recolección de esta especie se lleva a cabo en la primavera antes de que

las plantas florezcan, las personas que afirman tener aversión al sabor de

las hojas del diente de león muy probablemente las han recolectado una vez

que la planta ya ha florecido su uso medicinal es como diurético, laxante, así

como para evitar el escorbuto (MARS, 1999). Como tónico digestivo en

26

casos de estreñimiento en afecciones del hígado y la vesícula biliar, para

aumentar la diuresis, afecciones genitourinarias, gota, sobrepeso

acompañado de retención. Por su acción depurativa en el tratamiento de

fondo de enfermedades cutáneas. (LINARES, 2013).

Ajenjo su nombre científico es Artemisia absinthium L, proviene de la

familia Asteraceae es una planta perenne hasta 1 m de altura muy

ramificada tallos erectos con ramas herbáceas, flexibles de olor muy fuerte

característico y agradable para muchas personas, sus hojas alternas

trilobuladas las inferiores y bilobuladas las superiores, las inferiores son más

grandes que las superiores se hacen más pequeñas hacia arriba. Su

composición química son las lactonas sesquiterpénicas responsables del

sabor amargo de la droga, y el aceite esencial y su uso en la medicina

tradicional para el tratamiento de transtornos gástricos y biliares, se usa

como digestivo, como estimulante del apetito y de la secreción de los jugos

gástricos y de la bilis, su actividad terapeútica se lo debe principalmente a

su aceite esencial ya que este presenta acción antihelmíntica,

antibacteriana, vermífugo y también ayuda a regular las funciones digestivas

(FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007).

Guaviduca cuyo nombre científico es Piper carpunya, pertenece a la

familia Piperaceae es un árbol de 8 m de alto, ramillas con nudos

hinchados; hojas alternas, elípticas; las inflorescencias son amentos. Se

usan las hojas como condimento para preparar carnes y sopas también en

sus usos tenemos para aliviar cólicos menstruales, inflaciones estomacales

y cólicos estomacales, también ayuda a suspender la diarrea (VEERLE et

al, 1999). La Guaviduca es ampliamente utilizada en la medicina popular en

los paises tropicales y subtropicales de América del Sur como un remedio

anti-inflamatorio,anti-úlcera, antidiarreico y antiparasitario, asi como una

enfermedad para las irritaciones de la piel. Es una especie endémica de las

regiones del Norte de América del Sur, es un remedio con propiedades anti-

27

inflamatorias y antiulcerosos que se utiliza en la medicina popular del

Ecuador (FONNEGRA, et al 2007)

Moringa cuyo nombre científico es Moringa oleífera, pertenece a la familia

Moringaceae, sus hojas tienen cualidades nutritivas sobresalientes que

están entre las mejores de todos los vegetales perennes el contenido de

proteína es del 27 % además tienen cantidades significativas de calcio,

hierro, fosforo así como vitamina A y C este valor nutricional es importante

en áreas donde la seguridad alimentaria se puede ver amenazada

(FOLKARD y SUTHERLAND, 1996). Las hojas de la moringa pueden

utilizarse como purgante, cataplasma en las heridas, para minimizar los

dolores de cabeza, las hemorroides, la fiebre, el dolor de garganta, la

bronquitis, las infecciones óticas y oculares, el escorbuto y el catarro; el jugo

de las hojas controla los niveles de glucosa y reduce la inflamación

glandular. Las hojas frescas de moringa tienen grandes cualidades

nutritivas: más vitamina A que las zanahorias, más vitamina C que las

naranjas, más calcio que la leche, más potasio que el plátano, más hierro

que la espinaca y más proteína que ningún otro vegetal. También son muy

apetecidas con ellas se pueden preparar infusiones, ensaladas verdes,

pastas para bocaditos, salsas, sopas, cremas, guisos, arroz salteado etc.

Pueden ser mezcladas con cocteles de frutas o con jugos (BONAL et al.

2012).

Cilantro cuyo nombre científico es Coriandrum sativum, pertenece a la

familia de las Apiaceas, es una especie cultivada que integra grupos de

hierbas medicinales, aromáticas y de condimento de mayor consumo esta

es industrializada para la extracción de aceites esenciales y productos

farmacéuticas; así también se destaca por ser utilizada como repelente de

insectos a nivel de campo y almacenaje, entre sus usos medicinales esta

que es eupéptico, elimina los gases, antiespasmódica y ligeramente

tonificante del sistema nervioso, fungicida, antiinflamatorio, antihelmíntico y

analgésico por vía externa (VALDIVIEZO, 2011). La composición química

del cilantro se basa principlamente en sus aceites esenciales, los cuales

28

contienen decanal, dodecanal, decano, huleno, cerofileno, linalol, taninos,

ácido málico y otros componentes activos entre los que se encuentran varios

ácidos, linoleico, oleico, palmítico, ascórbico, que le otorgan al cilantro

propiedades antibacteriales, confiriéndole las mismas a las comidas que

sean preparadas con esta hierba, el cilantro es considerado como una de

las plantas medicinales emergentes no solo por el amplio mercado mundial

que abarca sino porque es una planta muy utilizada en muchos países

donde la han utilizado con múltiples fines terapéuticos. (SALAZAR, 2008).

Achochilla es conocida científicamente con el nombre de Momórdica

charantia y la familia Cucurbitácea, es una planta que se da exclusivamente

en el trópico, es considerada maleza ya que daña los cultivos siendo

arrancada por el campesino, ha sido muy usada en la Amazonía del país,

así como también en el litoral ecuatoriano en donde los nativos de la zona la

usan frecuentemente para curar a dolores abdominales, infecciones, en

tratamientos para parásitos, bajar de peso y bajar el colesterol muchos

sostienen que la planta es abortiva. En algunos lugares del mundo, la planta

ha sido estudiada por laboratorios de alto prestigio es donde se a

determinado que tiene propiedades hipoglucémicas, afrodisíacas, aunque

actualmente la achochilla es usada en tratamientos para personas enfermas

de SIDA, también para personas que padecen de cáncer de colon (FELIX y

CORONEL, 2003). El extracto metanólico provoca disminución de niveles de

glucosa, triglicéridos y lipoproteínas de baja densidad así como un

incremento de lipoproteínas de alta densidad por lo que puede ser efectivo

para el tratamiento de la hiperglucemia además de hipoglucemia (LAGARTO

et al. , 2008).

Borraja pertenece a la familia Boraginaceae y su nombre científico es

Borago officinalis L. Es una planta herbácea anual hasta 80 cm de altura,

tallo ramificado toda planta con pubescencia áspera, glauca. Hojas alternas

anchas decrecen en tamaño hacia el ápice de la rama las hojas basales

29

pecioladas, ovales y las caulinares, sésiles, lanceoladas, su composición

química contiene mucilagos, ácidos orgánicos, ácido láctico, acético y

silícico, heterópsidos, cianogénicos, sapogeninas, taninos 3 % flavonoides y

sales minerales. En medicina tradicional se usa como depurativo,

emoliente, béquico, diurético, laxante, expectorante, antipirético, diaforético,

galactogogo, se emplea también como antiinflamatorio de las vías urinarias,

de las vías respiratorias y afecciones de los bronquios; la decocción de las

hojas se utiliza como sudorífico contra la tos y como expectorante

(FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007). Las hojas de Borraja pueden ser

aplicadas a irritaciones de la piel ayuda a extraer venenos, el calcio líquido y

las proteínas presentes en las hojas se utilizan aplicándolas sobre una rotura

de hueso o sobre los huesos rotos en recuperación (ITZIK, 2007).

Cedrón pertenece a la familia Verbenáceas y sus nombres científicos son

Aloysia citriodora y Lippia citriodora es ampliamente utilizada en el

tratamiento de la diarrea y la disentería común, también para combatir las

lombrices. La manera en que se utiliza es en infusión. Tiene los siguientes

compuestos químicos alcoholes monoterpénicos: geraniol, α- terpinol,

citronelol, 1,8-nerol, cineol, epoxicariofileno, B- cariofilenósido; alcaloide

:cedrina; carbohidratos ; almidón; pigmento: amarillo (TORRES et al.,

2005). El aceite esencial mostró actividad actividad contra. S. Aureus ,

S.epidermidis, Bacillus cereus, Escherichia coli, Klebsiella ozaenae,

Enterococcus sp, Bacillus subtilis y Candida albicans (OLIVA et al., 2010).

Las hojas y tallos del cedrón son ricos en un aceite esencial cuyo

componente principal es el citral, responsable de su aroma y contiene

además limoneno, linalol, cineol, terpineol y cariofileno, un aldehido

sesquiterpénico al que se atribuye acción eupeptica y espasmolítica. Posee

una importante cantidad de malatonina sustancia que se usa como relajante

natural y que favorece el sueño nocturno ayuda al descanso total de la

memoria (ANDONI, 1988).

30

Altamisa cuyo nombre científico es Ambrosia artemisifolia, pertenece a la

familia Asteraceae, de las partes aéreas de esta planta se han aislado

flavonas y alcaloides, es venenosa para conejos y vacas, su forma de uso

se da para el calor en el cuerpo, desinflamar y prevenir el paludismo

(BLAIR y MADRIGAL, 2005). Sus hojas son lobuladas de 4 a 15 cm de

largo la inflorescencia es de color verde y se presenta en forma de racimos

sus frutos son pequeños de 2 – 3 mm de largo ha sido utilizado como

antihelmíntico y antiespasmódico y para regular la menstruación (NUÑEZ,

1982). Sus funciones se han utilizado tradicionalmente para tratar fiebre,

resfriados y diarrea. Cuando se excede su dosificación puede ocasionar

trastornos nerviosos e incluso convulsiones, la plana colocada en el piso si

no mata por lo menos repele las pulgas en lugares infestados por

estas(ABAD et al, 2011).

Mastrante cuyo nombre científico es Ageratum conyzoides, pertenece a la

familia Lamiaceae y se encuentra ampliamente distribuida como maleza de

potreros y campos abiertos, esta es una hierba arbustiva anual erecta, hasta

de 1 m ó más de altura. Tallo erecto cuadrangular ramificado, pubescente

en el apice de las ramas, hojas opuestas aovadas a lanceoladas, margen

dentada, glabras, tiene sus flores blancas, frutos tipo nuececilla de color

café marrón. Su composición química contiene malato y nitrato de potasio,

también triterpenos, ácido hyptático, tormentico y ursólico. Su uso en la

medicina tradicional el zumo o cataplasma de toda la planta se usa como

hemostático, antiséptico para cicatrizar las úlceras varicosas, para tratar

eczemas, alergias e inflamaciones. La fracción de la hoja machacada se

utiliza para la rasquiña, picadura de insectos, reumatismo y para aliviar el

dolor de muelas (FONNEGRA y JIMÉNEZ, 2007).El extracto de esta

especie presenta actividad insecticida, unos de sus usos más importantes

como analgésico, para la fiebre, antiespasmódico, cólicos, disminuyen la

inflamación y el dolor.

31

2. DISEÑO METODOLOGICO

2.1 Localización de la Investigación

El presente proyecto investigativo, se realizó en el Laboratorio de Microbiología y

Planta Piloto de Farmacia de la UCQS de la Universidad Técnica de Machala.

2.2 Universo de Trabajo

Las plantas fueron obtenidas en el Centro Comercial Las Mercedes, en el Cantón

el Guabo en los meses de agosto y septiembre de 2014.

2.3 Tipos de muestra

Para la realización de este proyecto se utilizaron doce plantas medicinales, donde

se obtuvo su extracto metanólico antes de realizarse los ensayos respectivos.

3. MATERIALES Y MÉTODOS

3.1. Materiales

Material de vidrio

• Cajas Petri

• Tubos de ensayo

• Vaso de Precipitación

• Pipeta de Pasteur

• Pipetas graduadas

32

• Embudo

Equipos:

• Rotaevaporador (Heidolph)

• Balanza (Ohaius)

• Cocineta (Haceb)

• Autoclave (Vertical V-3C)

• Esterilizador (Tuttnauer)

• Incubadora (Memmert)

• Estufa (Memmert)

Reactivos

• Metanol (100% puro)

Muestra

• Materia Vegetal ( Hojas)

Agar

• Agar de Papa Dextrosa

• Agar de Müller-Hinton

Microorganismos Analizados

Cepas certificadas obtenidas del IESS-Laboratorio de Biología Molecular (Aislado

de muestras clínicas).

• Escherichia coli

33

• Pseudomonas aeruginosa

• Staphylococcus aureus

• Candida albicans

3.2. Tipo de investigación

El siguiente trabajo, fue realizado como un proyecto investigativo para determinar

la actividad antimicrobiana de doce plantas medicinales que son utilizadas en

Ecuador para fines terapéuticos.

3.3. Selección de la muestra

Las hojas que se utilizaron fueron adquiridas en el centro comercial Las Mercedes

del Cantón El Guabo, que fueron llevadas a la Planta Piloto de Farmacia de la

UCQS en los meses de Agosto y Septiembre.

3.4. Obtención y Preparación de las muestras

▪ Se separaron las hojas de las plantas que se utilizaron, se lavaron con H2O

destilada y se secaron a temperatura ambiente durante un día y luego se las

colocó en la estufa para eliminar rastros de humedad.

▪ Ya obtenidas las hojas secas se molieron finamente y luego se las colocaron

en envases individuales a cada planta debidamente rotuladas.

▪ A las hojas trituradas se les realizó la extracción con metanol 100% puro. Se

obtuvieron los extractos con metanol, porque así se extraen tanto los

metabolitos polares como los no polares, y se quería averiguar la sensibilidad

microbiana ante una gama amplia de metabolitos secundarios, para así poder

34

inferir sobre la actividad antimicrobiana de estos extractos o mezcla de

compuestos químicos presentes en las hojas de estas plantas.

▪ Posteriormente, luego de la maceración se filtró, y a este filtrado se evaporó

en un rotavapor marca Heidolph a presión y temperatura de 40 ºC,

obteniéndose así los extractos fluídos de las drogas vegetales, los cuales se

prepararon según la metodología de MIRANDA et al. (2001). Estos extractos

en metanol eran fluidos y se llevaron a sequedad por evaporación a presión

reducida, eliminándose todo el metanol para obtener los extractos crudos o

secos de las hojas. Luego se retomaron con una mÍnima cantidad de metanol

a una concentración determinada para hacer las pruebas antimicrobianas, es

decir antibacterianas y antifúngicas, esto porque está demostrado que el

metanol no influye en los resultados, es un solvente ampliamente utilizado en

este tipo de bioensayo.

▪ Se prepararon los medios de cultivo para hongos con agar Papa Dextrosa

(PDA) y bacterias con agar Müller-Hinton previamente esterilizados.

▪ Se realizó la siembra en sus respectivos medios de cultivo utilizando las

cepas para bacterias: Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa,

Staphylococcus aureus, y como cepa de hongo Candida albicans.

▪ Posteriormente, a cada uno de los extractos se les ensayó su actividad

antibacteriana y antifúngica contra cepas patógenas de bacterias y hongos

respectivamente, según el método de BAUER et al. (1966).

▪ Actividad Antibacteriana

Para la ejecución de este bioensayo, se empleó la técnica de difusión en agar,

llamada Antibiograma.

1) Se realizó dos pocillos utilizando una pipeta de Pasteur invertida cuya

medida es de 6mm, uno para el extracto y el otro pocillo para el control

(Ciprofloxacino), se colocó 25 ul del extracto a 40 mg / ml, y 25 ul del control

cada uno en su respectivo pocillo.

35

2) Se los colocó en una placa de agar Müller-Hinton, previamente inoculada con

una suspensión bacteriana de concentración conocida (108 células/ml)

3) Se preincubó a 5°C por 12 h, y luego se incubaron a 37°C por 24 h.

4) La acción antibacteriana se midió tomando el diámetro (mm) del crecimiento

bacteriano alrededor del disco.

▪ Actividad Antifúngica

Seguidamente a cada uno de los extractos se les ensayo su actividad

antifúngica contra una cepa certificada y patógena según el método de

MADUBUNYI (1995).

1) Este método consiste en incubar cepas de hongos en tubos, a temperatura

ambiente por una semana.

2) Transcurrido este tiempo, se le agregarán aproximadamente 10 ml de agua

destilada estéril a cada tubo para remover las esporas y se filtrarán sobre

gasas estériles, para obtener la solución esporangial.

3) Utilizando hisopos estériles, se colocará la solución obtenida sobre las

cápsulas o placas de Petri, previamente preparadas con el agar papa

dextrosa (PDA).

4) Seguidamente, se realizará la técnica del antibiograma, la cual radica en

realizar dos pocillos utilizando una pipeta de Pasteur invertida cuya medida es

de 6mm, uno para el extracto y el otro pocillo para el control (Ketoconazol), se

colocó 25 ul del extracto a 40 mg / ml, y 25 ul del control cada uno en su

respectivo pocillo y se incubarán por 48 horas a temperatura ambiente.

5) La actividad será detectada al medir el diámetro (mm) del halo de inhibición

que se observará alrededor del disco.

36

4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

A continuación se presentan los resultados obtenidos (Tablas 1-16 y Figuras 1-

14), sobre los halos de inhibición del crecimiento bacteriano y antifúngico, por

efecto de los extractos metanólicos de doce especies vegetales ensayadas por el

método del antibiograma, con tres cepas de bacterias Gram(+) y (-), y un hongo

patógeno.

- Actividad antibacteriana

Tabla 1. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Aloysia citriodora o

Lippia citriodora (Cedrón).

MUESTRA

CEPA HALO DE INHIBICIÓN ( mm ) a

S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

CEDRON

8,6 7,8 8,2 8,2 0,4

E. coli

7.9 8.0 7.8 7.9 0,1

P. aeruginosa

0

0 0 0 0

S. aureus

Ciprofloxacina

9,4 8,6 9,9 9,3 0,6

E. coli

9,2 9.0 9.6 9.2 0.4

P. aeruginosa

8.9

9.1 9.3 9.1 0,2

S. aureus

a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo (6 mm ); ( media ); S (

desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.

37

Figura 1. Efecto antibacteriano del Cedrón y Ciprofloxacina contra las Cepas

E.coli, P. aeruginosa y S. aureus

En el gráfico 1 se puede observar que el Cedrón tiene mayor efecto antibacteriano

contra la E. coli, mostrando también que tiene efecto antibacteriano contra la cepa

de P. aeruginosa, dado que para S. aureus su efecto antibacteriano es nulo; en

comparación de este resultado obtenido con un análisis de la misma planta

realizado en otra investigación se determina que el Cedrón mostró un efecto

antibacteriano contra la E. coli , S. aureus, pero no presentó efecto inhibitorio

contra P. aeruginosa ( SANCHEZ et al., 2012).

8,2 7,9

0

9,3 9,2 9,1

E. coli P. aeruginosa S. aureus

CEDRON CONTROL

38

Tabla 2. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Ambrosia

artemisifolia (altamisa).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

ALTAMISA

7,2 7,1 7,4 7,2 0,1

E. coli

7,9 7,2 7,4 7,5 0,3

P. aeruginosa

6.8 7.0 6.7 6,8 0,2

S. aureus

Ciprofloxacina

9,8 9,7 9,8 9,7 0,1

E. coli

10.1 10,0 9.7 9.9 0,3

P. aeruginosa

9,4

9,4 10,9 9,9 0,8

S. aureus

a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pocillo ( 6 mm ); ( media ); S

(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana

39

Figura 2. Efecto antibacteriano de altamisa (Ambrosia artemisifolia) y

ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus

En el gráfico 2, se puede apreciar que altamisa muestra un mayor efecto

antibacteriano contra P. aeruginosa y E. coli, aunque también tiene efecto

bactericida contra la bacteria S. aureus, aunque en menor proporción. Esta especie

vegetal mostró actividad biológica tanto contra bacterias Gram (+) como Gram (-)

demostrándose así que si presentan un efecto antimicrobiano.

Franseria artemisoides conocida también como Altamisa, demostró tener un

efecto inhibitorio frente al S. aureus y también en contra de las cepas demostraron

actividad antibacteriana contra el Bacillus subtilis y el Micrococcus oxford.

(VELASQUEZ L, 2007).

7,2 7,5

6,8

9,7 9,9 9,9


ALTAMISA CONTROL

40

Tabla 3. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Taraxacum officinale

(diente de león).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

DIENTE DE LEON

10,2 9,9 10,6 10,2 0,3

E. coli

7,4 7,4 6,8 7,2 0,3

P. aeruginosa

6,6 6 6,4 6,3 0,3

S. aureus

Ciprofloxacina

10,5 10,1 10.0 10.2 0,2

E. coli

10,4 10,3 10,7 10,4 0,2

P. aeruginosa

10,9 10,8 10,5 10,7 0,2

S. aureus



41

Figura 3. Efecto antibacteriano de diente de León (Taraxacum officinale) y

ciprofloxacino contra cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus

En la Figura 3 se puede observar que el diente de León, al igual que la altamisa,

mostró actividad antibacteriana contra bacterias Gram (+) y Gram (-);

observándose que tiene mayor efecto antibacteriano contra E. coli, y en menor

proporción inhibió el crecimiento de las bacterias P. aeruginosa y S. aureus.

Según en otra investigación ensayando al Diente de León, este no demostró tener

actividad inhibitoria frente a E. coli, P. aeruginosa, B. cereus y S. aureus

(RAMOS A, 2013).

10,2

7,2

6,3

10,2 10,4 10,7


DIENTE DE LEON CONTROL

42

Tabla 4. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Ageratum

conyzoides (mastrante).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

MASTRANTE

8 8,4 8,4 8,2 0,2

E. coli

6,6 6,7 6,6 6,6 0,0

P. aeruginosa

6,4 6,5 6,4 6,4 0,0

S. aureus

ciprofloxacina

9,4 9,1 9.0 9,1 0,3

E. coli

8,7 9,9 10,2 9.6 0,7

P. aeruginosa

9,9 9,7 10.0 9.8 0,2

S. aureus



43

Figura 4 . Efecto antibacteriano de mastrante (Ageratum conyzoides) y

ciprofloxacino con cepa E.coli, P.aeruginosa y S. aureus

En el gráfico 4, se puede observar que mastrante, al igual que altamisa y diente de

león, tiene mayor efecto antibacteriano contra E. coli, siendo muy significativo en

relación al control, pero también actúa contra la P. aeruginosa y S. aureus en

menor proporción.

Se reportaron halos de inhibición de hasta 12 mm para A. conyzoides utilizando

un método de extracción similar al que se utilizó en este trabajo (maceración con

etanol), además de utilizar una concentración más baja para la Cepa de E. coli.

ADETUTU et al. (2012).

8,2

6,6 6,4

9,1 9,6 9,8


MASTRANTE CONTROL

44

Tabla 5. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Piper carpunya

(guaviduca)

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

GUAVIDUCA

10,4 10,2 10,0 10,2 0,2

E. coli

6,4 6,6 6,1 6,3 0,2

P. aeruginosa

0

0 0 0 0

S. aureus

ciprofloxacina

9.9 10.0 10.2 10.0 0.2

E. coli

10,4 10,6 10,4 10,4 0,1

P. aeruginosa

10,4

11,0 10,4 10,6 0,3

S. aureus


(desviación estándar ). 0,1 < 0,6 = no tiene actividad antimicrobiana.

45

Figura 5. Efecto antibacteriano de guaviduca (Piper carpunya) y Ciprofloxacino

contra la cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

El gráfico 5 muestra que guaviduca tiene mayor efecto antibacteriano contra la E.

coli que el control (ciprofloxacina), y una actividad antibacteriana moderada P.

aeruginosa, aunque no muestra un efecto bactericida contra S. aureus, tal como lo

observado para el extracto de cedrón. Se podría decir que el extracto de guaviduca

es una fuente de principios bioactivos, posibles antibióticos contra la cepa Gram (-)

E. coli.

No existen reportes en la literatura sobre la actividad antibacteriana q puedan

poseer esas plantas. Sin embargo, las mismas presentan otras propiedades

terapéuticas.

Poseen una actividad gastroprotectora produciendo una rápida y total recuperación

de la mucosa gástrica evidenciándose en el análisis macroscópico y con el estudio

histopatológicos de los estómagos (QUINTANA, K. 2012).

10,2

6,3

0

10 10,4 10,6


GUAVIDUCA CONTROL

46

Tabla 6. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Borago officinalis

(borraja).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

BORRAJA

8,6 7,6 7 7,7 0,8

E. coli

6,2 6,4 7,5 6,7 0,7

P. aeruginosa

8

8,9 8,4 8,4 0,4

S. aureus

ciprofloxacina

9.8 10.4 10.1 10.1 0,4

E. coli

10,9 10,3 10,7 10,6 0,3

P. aeruginosa

10,4

11,0 10,4 10,6 0,3

S. aureus



47

Figura 6. Efecto antibacteriano de borraja (Borago officinalis) y Ciprofloxacino

contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.

El extracto de borraja presentó un efecto antibacteriano moderado en contra de las

dos cepas E. coli y P. aeruginosa, mostrándose una actividad bactericida fuerte

contra de S. aureus, ya que su acción antibacteriana fue mucho mayor y más

potente que el control usado y muy superior al diámetro usado del pocillo (6mm).

No existen reportes en la literatura sobre la actividad antibacteriana q puedan

poseer esas plantas.

7,7

6,7

8,4

10,1 10,6 10,6


BORRAJA CONTROL

48

Tabla 7. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Coriandrum sativum

(cilantro).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

CILANTRO

6,6 7,1 7,0 6,9 0,2

E. coli

6,9 7,9 8,0 7,6 0,6

P. aeruginosa

6,4 6,6 6,5 6,5 0,1

S. aureus

ciprofloxacina

10,2 9,8 10.0 10.0 0,2

E. coli

10,0 9.9 10.4 10.1 0,3

P. aeruginosa

10,5

10.6 10,2 10,4 0,3

S. aureus



49

Figura 7. Efecto antibacteriano de cilantro (Coriandrum sativum) y Ciprofloxacino

contra las cepas E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

En este gráfico se puede observar que el cilantro tiene un mayor efecto

antibacteriano en contra de la P. aeruginosa, y también demuestra una actividad

antibacteriana muy leve contra E. coli y S. aureus.

Coriandrum sativum ha sido utilizado para tratar algunas dolencias no relacionadas

con las enfermedades infecciosas, sin embargo se ha demostrado que tiene

actividad antimicrobiana frente a diferentes géneros de bacterias Gram Positivas

(Listeria monocytogenes y Staphylococcus aureus) y Gram negativas (ARDILA et

al. 2009).

6,9 7,6

6,5

10 10,1 10,4


CILANTRO CONTROL

50

Tabla 8. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Melissa officinalis

(toronjil).

MUESTRA


S BACTERIANA RÉPLICA

1 RÉPLICA

2 RÉPLICA

3

TORONJIL

10.0 8,6 9,8 9,4 0,7

E. coli

6,2 6,5 6,4 6,3 0,1

P. aeruginosa

6,6 6,4 6,5 6,5 0,1

S. aureus

ciprofloxacina

9.9 9.9 10.4 10.0 0,4

E. coli

9,6 9,8 10,1 9,8 0,3

P. aeruginosa

9.7

10.2 10.5 10.1 0,5

S. aureus



51

Figura 8. Efecto antibacteriano de toronjil (Melissa officinalis) y Ciprofloxacino

contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.

La Figura 8 muestra que el extracto de toronjil exhibe una actividad antibacteriana

mayor y fuerte contra la bacteria Gram (-) E. coli, y a su vez una actividad muy leve

contra las otras dos cepas Gram (+) ensayadas, al igual que lo observado para el

extracto de cilantro. Similar a guaviduca, ambos extractos de estas plantas poseen

una fuerte actividad bactericida contra E. coli.

No se reportó actividad antibacteriana a Melissa officinalis, pero este extracto

presentó efecto antioxidante, lo cual indica que dicho extracto puede convertirse en

candidato para el aislamiento de compuestos antioxidantes activos.

(CALDERON, 2011).

9,4

6,3 6,5

10 9,8 10,1

E. coli P.aeruginosa S. aureus

TORONJIL CONTROL

52

Tabla 9. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Cymbopogon

citratus (hierba luisa).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

HIERBA LUISA

9,0 9,4 9,6 9,3 0,3

E. coli

6,7 6,4 6,7 6,6 0,1

P. aeruginosa

6,4 6,6 6,7 6,5 0,1

S. aureus

ciprofloxacina

9,5 9.4 9.2 9.3 0,2

E. coli

9,8 9,9 10,0 9,9 0,1

P. aeruginosa

10.0

9.9 9.7 9.8 0,2

S. aureus



53

Figura 9. Efecto antibacteriano de hierba luisa (Cymbopogon citratus) y

Ciprofloxacino contra las cepas E. coli, P. aeruginosa y S. aureus

En este gráfico 9 se puede apreciar que el extracto de hierba luisa, al igual que

guaviduca y toronjil, posee una actividad antibacteriana fuerte contra la cepa E.

coli, pero también éste demuestra el efecto antibacteriano aunque un poco mas

muy leve del extracto de hierba luisa en contra de las Gram (+) P. aeruginosa y S.

aureus.

Otra investigación de esta especie mostró tener efecto antibacteriano en contra de

las cepas S.aureus, Sh.flexneri, S.typhi, S.enteritidis, V.cholerae y baja actividad

con P. aeruginosa quien se muestra un poco resistente, indicando que hierba luisa

puede utilizarse para tratamientos de afecciones intestinales como la salmonelosis

y el cólera como también en el tratamiento de procesos respiratorios causados por

la bacteria S. aureus (ALZAMORA et al. 2001).

9,3

6,6 6,5

9,3 9,9 9,8


HIERBA LUISA CONTROL

54

Tabla 10. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Artemisia

absinthium (ajenjo).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

AJENJO

9,4 9,8 9,1 9,4 0,3

E. coli

6,5 7,4 6,4 6,7 0,5

P. aeruginosa

6,3 6,0 6,4 6,3 0,2

S. aureus

ciprofloxacina

9.8 9.8 9.9 9.8 0,1

E. coli

9,7 10,4 10,4 10,1 0,4

P. aeruginosa

10,6

10,4 10,7 10,5 0,1

S. aureus



55

Figura 10. Efecto antibacteriano de ajenjo (Artemisia absinthium) y Ciprofloxacino

con cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

La Figura 10 muestra claramente que el extracto de ajenjo posee propiedad

antibacteriana fuerte en contra de la cepa E. coli, comportamiento similar al

observado para guaviduca, toronjil, hierba luisa, lo cual refleja la importancia de

estas especies en la producción de fitofármacos antibióticos. Para las cepas P.

aeruginosa y S. aureus, se podría decir que debido al promedio del halo de

inhibición mostrado, las mismas no poseen sensibilidad bacteriana ante el extracto

de ajenjo.

El extracto fluido con etanol al 70 % de A. absinthium mostro tanto actividad

antigiardiósica como antimicrobiana, contra E. coli, P.vulgaris, Paeruginosa, K.

pneumoniae, S. aureus, B,subtilis, C. albicans, lo que justifica su uso tradicional.

(GUERRA et al., 2001).

9,4

6,7 6,3

9,8 10,1 10,5


AJENJO CONTROL

56

Tabla 11. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Momórdica

charantia (achochilla).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

ACHOCHILLA

10,0 9,8 10,1 9,9 0,1

E. coli

8,2 8,1 8,0 8,1 0,1

P. aeruginosa

6,6 6,8 6,5 6,6 0,1

S. aureus

CIPROFLACINA

10.1 9,7 9,9 9,9 0,2

E. coli

10,2 10,7 10,4 10,2 0,3

P. aeruginosa

10,2

10,0 10,4 10,2 0,1

S. aureus



57

Figura 11. Efecto antibacteriano de achochilla (Momórdica charantia) y

Ciprofloxacino contra las cepas de E. coli, P. aeruginosa y S. aureus.

En la Figura 11 se observa que el extracto de achochilla ejerce su efecto

antibacteriano en contra de las tres cepas bacterianas ensayadas, mostrando un

efecto mayor en contra de la E. coli, actividad antibacteriana moderada contra P.

aeruginosa y leve contra S. aureus.

El extracto etanólico de Momórdica charantia demuestra actividad antibacteriana

sobre Shiguella, P. aeruginosa, Salmonella, E. coli y S. auereus. Además, esta

presenta actividad antitumoral, efecto antimicótico, actividad antiinflamatoria,

actividad antihelmíntica, inhibición de los radicales libres, es decir al extracto de

esta especie posee un potencial terapéutico avalado científicamente que se utiliza

en el tratamiento de múltiples enfermedades en especial la diabetes (LAGARTO et

al., 2008).

9,9

8,1

6,6

9,9 10,2 10,2


ACHOCHILLA CONTROL

58

Tabla 12. Actividad antibacteriana del extracto metanólico de Moringa oleífera

(moringa).

MUESTRA


S BACTERIANA

RÉPLICA 1

RÉPLICA 2

RÉPLICA 3

MORINGA

7,6 8,0 8,1 7,9 0,2

E. coli

6,6 6,7 6,9 6,7 0,1

P. aeruginosa

6,5 6,4 5,8 6,2 0,3

S. aureus

ciprofloxacina

9.9 10.2 10.0 10.0 0,2

E. coli

10,4 10,4 9,9 10,2 0,2

P. aeruginosa

10,4

10,2 10,3 10,3 0,1

S. aureus

a: diámetro del halo de inhibición alrededor del pozillo ( 6 mm ); ( media ); S


59

Figura 12. Efecto antibacteriano de moringa (Moringa oleífera) y Ciprofloxacino

con cepa E.coli, P. aeruginosa y S. aureus.

En este gráfico, se puede apreciar que el extracto de moringa presenta mayor

efecto antimicrobiano en contra de la E. coli, y en menor proporción contra las

cepas de P. aeruginosa y S. aureus (actividad antibacteriana leve).

En años recientes se han generado resultados científicos que confirman actividad

antibacteriana como la inhibición del crecimiento de P. aeruginosa y S. aureus.

(Cáceres et al., 1991).

7,9

6,7 6,2

10 10,2 10,3


MORINGA CONTROL

60

- Actividad antifúngica:

Tabla 13. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Aloysia citriodora (cedrón),

Ambrosia artemisifolia (altamisa) y Taraxacum officinale (diente de león).

MUESTRA

CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm)a

S FÚNGICA

RÉPLICA 1 RÉPLICA

2 RÉPLICA

3

Cedrón

Candida albicans

10,2 10,4 10,5 10,3 0.1

Ketoconazol

11,3 11,4 11,4 11,3 0,1

Altamisa

10,4 10,3 9,9 10,2 0,2

Ketoconazol

11,3 11,5 11,4 11,4 0,1

Diente de León

9,9 10,4 9,8 10,0 0,3

Ketoconazol

11,0 11,4 11,2 11,2 0,2

: media; S: desviación estándar; a: diámetro alrededor del pocillo (6 mm)

Tabla 14. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Ageratum conyzoides

(mastrante), Piper carpunya (guaviduca) y Borago officinalis (borraja).

MUESTRA

CEPA HALO DE INHIBICIÓN (mm) a

S FÚNGI

CA RÉPLICA

1 RÉPLICA

2 RÉPLICA

3

Mastrante

Candida albicans

11,2 11,4 11,1 11,2 0,1

Ketoconazol

11,5 11,6 11,3 11,4 0,2

Guaviduca

10,9 11,3 10,7 10,9 0,3

Ketoconazol

11,3 11,4 11,0 11,2 0,2

Borraja

10,1 11,1 10,9 10,7 0,5

Ketoconazol

11,2 11,4 11,4 11,3 0,2

61


Figura 13. Efecto anti fúngico de cedrón, altamisa, diente de león, mastrante,

guaviduca, borraja y control ketoconazol contra la cepa Candida albicans

En esta figura indica que el extracto de mastrante posee mayor efecto antifúngico

en contra de la cepa de Candida albicans, de igual manera la guaviduca y borraja

ejercen también efecto fungicida aunque en menor proporción. Los extractos de

cedrón, altamisa y diente de león, también exhibieron actividad antibacteriana

moderada.

10,3 10,2

10

11,2

10,9

10,7

11,3 11,4

11,2

11,4

11,2 11,3

CEDRON ALTAMISA DIENTE DELEON

MASTRANTE GUAVIDUCA BORRAJA

EXTRACTO CONTROL

62

Aun no se han reportado investigaciones científicas sobre el Cedrón, si ejerce o no

actividad contra la cepa C. albicans.

Altamisa y Diente de León no tienen investigaciones científicas que demuestren su

efecto en contra de C. albicans, sin embargo en un estudio reciente se demuestra

que estas dos especies si tienen actividad antifúngica, pero contra Mycosphaerella

fijiensis Morelet conocida como Sigatoka negra (VIVEROS et al., 2006)

El aceite esencial de A. conyzoides demostró tener un potente efecto antifungico,

demostrando así la inhibición total de cuatro hongos Candida albicans,

Cryptococcus neoformans, Sclerotium rolfsii y Trichophyton mentagrophytes

(PATTNAIK et al., 1996)

No se han reportado investigaciones para esta especie Piper carpunya contra

ninguna cepa fúngica.

A la Borraja no se le han realizado este tipo de ensayos que demuestren su

eficacia contra esta cepa, pero según otro tipo de investigaciones se determinó que

el aceite de borraja se recomienda usar ya sea administrado por vía oral como por

vía tópica en el tratamiento de afecciones de la piel.

63

Tabla 15. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Coriandrum sativum (cilantro),

Melissa officinalis (toronjil) y Cymbopogon citratus (hierba luisa).

MUESTRA


S FÚNGI

CA RÉPLICA

1 RÉPLICA

2 RÉPLICA

3

Cilantro

Candida albicans

11,1 11,0 11,3 11,1 0,2

Ketoconazol

11,3 11,5 11,2 11,3 0,2

Toronjil

11,0 11,5 11,2 11,2 0,2

Ketoconazol

11,5 11,4 11,4 11,4 0,1

Hierba Luisa

11,1 10,9 11,5 11,1 0,3

Ketoconazol

11,5 11,3 11.4 11,4 0,0


Tabla 16. Actividad antifúngica del extracto metanólico de Artemisia absinthium (ajenjo),

Momórdica charantia (achochilla) y Moringa oleífera (moringa).

MUESTRA


S FÚNGI

CA RÉPLICA

1 RÉPLICA

2 RÉPLICA

3

Ajenjo

Candida albicans

11,1 11,4 11,2 11,2 0,1

Ketoconazol

11,6 11,4 11,3 11,4 0,1

Achochilla

10,9 11,3 11,2 11,1 0,2

Ketoconazol

11,4 11,3 11,5 11,4 0,1

Moringa

10,3 10,7 10,9 10,6 0,3

Ketoconazol

11,2 11,4 11,5 11,3 0,2

64


Figura 14. Efecto antifungico de Cilantro, Toronjil, Hierba Luisa, Ajenjo, Achochilla,

Moringa y control (ketoconazol) contra la cepa Candida albicans.

En esta figura se puede observar que todas las especies vegetales analizadas

muestran un efecto antifúngico moderadamente fuerte contra la cepa del hongo C.

albicans.

El cilantro demostró tener un efecto antifúngico en contra de C. albicans, P.

islandicum y Aspergillus flavus, determinando que su actividad antifúngica se fue

reduciendo de acuerdo a los componentes de esta planta (INOUYE et al., 2006).

11,1

11,2

11,1

11,2

11,1

10,6

11,3

11,4 11,4 11,4 11,4

11,3

CILANTRO TORONJIL HIERBA LUISA AJENJO ACHOCHILLA MORINGA

EXTRACTO CONTROL

65

El cilantro demostró tener un efecto anti fúngico en contra de la cepa C. albicans,

realizada en un estudio en pacientes con síntomas de vulvovaginitis, indicando así

la eficacia de esta planta (MARQUEZ, 2012).

El aceite esencial de hierba luisa tuvo efecto contra C. albicans, ejerciendo un

efecto similar al del Micosatin que fue el control utilizado, como dato adicional que

para un tratamiento tópico de una uña del pie afectada por hongos, con gotas de

aceite esencial puro de hierba luisa mostró su potente efecto sanando

rápidamente, esta especie se perfila como una opción en el tratamiento de micosis

ocasionadas por C. albicans (ALZAMORA, et al. 2001).

El análisis realizado al extracto de Ajenjo indicó que tuvo actividad en contra de la

cepa de C. albicans teniendo un rango de 26 mg/dl, lo que justifica su uso

tradicional. (GUERRA et al., 2001).

La Achochilla presento una fuerte actividad antifúngica en contra la cepa de C.

albicans, como también otras actividades como antitumorales,

antiespermatogénico actividad antilipolítica entre otras, pudiendo ser utilizada esta

planta en diversas enfermedades, siempre y cuando sea caracterizado su potencial

tóxico para avalar su empleo como agente terapéutico (LAGARTO et al., 2008).

Se demostró la actividad antifúngica de aceites esenciales de las hojas y de

extractos alcohólicos de las semillas y las hojas contra dermatofitos como

Trichophyton rubrum y Trichopyton metagrophytes, aunque no se han reportado

ensayos con C. albicans (Chuang et al., 2007).

66

5. CONCLUSIONES

Las doce plantas medicinales fueron procesadas como su selección de hojas ,

lavado, secado,molienda y luego se le realizo la extracción de los metabolitos

secundarios luego de haber obtenido los extractos de las plantas con Metanol

siendo este un solvente muy utilizado para este tipo de ensayos quien no influye

en los resultados.

El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales contra la cepa Escherichia

coli determino que todas presentaron efecto con valores que van desde 6.9 mm

hasta 10.2 mm.

El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales contra la cepa

Pseudomona aeruginosa determino que todas estas plantas presentaron efecto

antibacteriano cuyos valores que se presentaron van desde 6.3 mm hasta 8.1 mm.

El efecto antibacteriano de las doce plantas medicinales en contra de la cepa

Streptococcus aureus determino que diez plantas mostraron su efecto a excepción

del Cedròn (Aloysia citriodora) y Guaviduca (Piper carpunya) quien sus efectos

fueron nulos, los valores de las diez plantas fueron desde 6.2 mm hasta 8.4 mm.

El efecto antifúngico de las doce plantas medicinales se lo realizó en contra de la

cepa Candida albicans quienes todas presentaron efecto con valores que van

desde 10 mm hasta 11.2 mm.

Los resultados obtenidos en esta investigación son diferentes a los de otras

investigaciones realizadas con estas mismas plantas por la razón de que estas

plantas crecen en Ecuador están en un medio diferente a los de otros países

influyendo principalmente la condiciones climáticas y el suelo.

Determinando que los análisis de bioactividad antimicrobiana realizado a los

extractos metanólicos de las plantas estudiadas arrojaron que la mayoría de dichas

especies exhibieron un efecto antibacteriano y antifúngico contra las cepas de

bacterias Gram (+) y Gram (-) y la cepa de hongo ensayado. Por lo cual se puede

decir que estas plantas constituyen una fuente promisoria de compuestos químicos

antimicrobianos de gran valor farmacológico.

67

6. RECOMENDACIONES

Por medio de esta investigación se determino que todas estas plantas sean

estudiadas más a fondo ya que además de demostrar que tienen efecto

antimicrobiano estas pueden también presentar otros tipos de beneficios ya

que durante la investigación de cada planta se demostró que cada una tiene

propiedades importantes que pueden llegar a ser útiles para sanar diversas

patologías en las personas.

También se podrían realizar otros análisis con más cepas de hongos y

bacterias para determinar si estas plantas también muestran su efecto, ya

que el objetivo de esta tesis fue descubrir si estas plantas medicinales

mostraban su efectividad para luego de ser demostrado se puedan seguir

realizando investigaciones para llegar a diseñar un medicamento que

contenga estas plantas que aún con el pasar del tiempo fueron

desconocidas por sus propiedades medicinales

68

7. BIBLIOGRAFÍA

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Foto 1. Seleccionando las hojas de las plantas medicinales.

Foto 2. Colocando las hojas a secar al medio ambiente

Foto 3. Las hojas secas colocándolas en la estufa

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Foto 4. Las hojas ya secas en la estufa listas para ser trituradas.

Foto 5. Pesando las hojas trituradas para poner a macerar en metanol y obtener el

extracto.

Foto 5. Preparando al extracto para luego pasar al Rotaevaporador.

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Foto 6. Los materiales a utilizar para preparar los medios de cultivo.

Foto 7. Pesando el Medio de Cultivo para prepararlo.

Foto 8. Disolviendo el medio de cultivo hasta observar cambio de coloración

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Foto 9. Esterilizando el medio de cultivo.

Foto 10. Pesando los extractos para realizar la siembra

Foto 11. Rotulando las cajas Petri.

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Foto 12. Realizando la siembra con las respectivas cepas, extracto y control.

Foto 13. Midiendo los halos de inhición

Foto 14. Una siembra con la cepa de E. coli

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Foto 15. Cepas de bacterias y hongos

Foto 15. Siembra con la cepa Pseudomona aeruginosa con extracto de Borraja.

Foto 16. Siembra con la cepa Staphylococcus aureus con extracto de cedrón.

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Foto 17. Siembra con Candida albicans con extracto de achochilla.

Foto 18. Siembra con Candida Albicans con extracto de ajenjo.

Foto 19. Siembra con Candida albicans con extracto de borraja.

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Foto 19. Al terminar la siembra hay que autoclavar todas las cajas Petri.

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