Dr. Héctor Monardes

Película adquirida Capa amorfa acelular de menos de 1 mm de espesor

constituida por la adsorción sobre superficies dentales de componentes salivales como glucoproteinas, proteínas y en menor grado productos secretados por M.O.

Formación del Biofilm

Película adquirida Cutícula sub-superficial Cutícula superficial Película manchada

Colonización primaria Gérmenes específicos

Colonización secundaria - Maduración bacteriológica y estructural

Capa formada por microorganismos y polímeros extracelulares

Placa madura o Clímax

•Formación de la película adquirida

• Adherencia a la película adquirida (colonización primaria)

• Agregación y Multiplicación interbacteriana (colonización secundaria)

Cubiertas adquiridas después de la erupción

1. Película Adquirida “Unidad ecológica vital en un constante y dinámico cambio, por adsorción y desorción de moléculas precursoras o micelas que contienen enzimas provenientes

de las glándulas salivales”.

Film orgánico, amorfo, homogéneo de 0.3 a 5.0 μm de espesor

Formación sitio-específica: Más gruesa en sitios vestibulares que en sitios palatinos

A las 2 horas: 100 a 700 nm

A las 24 horas: ~ 1.000 nm

Alto contenido enzimático: Saliva

Fluido crevicular

Bacterias

Mucosas

Tracto respiratorio

Dieta

Archives of Oral Biology 45 (2000) 277±291 y Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-139

Placa 2 días

Película

Esmalte

Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607

Formación de película sobre HA

Archives of Oral Biology 45 (2000) 277 - 291

Depósitos globulares formados en la superficie

Previo 5 min 20 min

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Gluco- proteínas salivales acídicas, fosforiladas y de bajo PM (45 – 50 %)

Alta afinidad con HA

IgA-S: Defensa específica del hospedero

α-Amilasa inmovilizada:

Enzima salival ( glándula parótida) Menor afinidad por el sustrato que la libre Cataliza la hidrólisis del almidón en glucosa (20%) y Maltosa (80%) Proporciona sustrato para las bacterias cariogénicas Facilita la adherencia de microorganismos a las superficies dentales Se une selectivamente a especies del estreptococo, tales como S.Sanguis., S. Gordonii, S. Mitis, S. Parasanguis, S.

Christa, y S. Salivarius. Junto con MG1son precursores tempranos en la formación de la película (2horas) Se une firmemente a la HA Componente estructural principal, por su adsorción temprana, adhesión bacteriana y actividad enzimática.

Mucinas MG1: Mucina más abundante en la película Se une firmemente a la HA Complejo MG1/Amilasa son precursores tempranos en la formación de la película (2horas)

•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-139 Biochemical and Biophysical Research Communications 320 (2004) 342–346

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Lisozima: Enzima salival (glándula submandibular y sublingual) Precursora de la película (5 minutos) Defensa independiente del anticuerpo Regula actividad bacteriana

Aumenta la permeabilidad de las membranas bacterianas Cambios osmóticos y de electrolitos S. Mutans, resistente a hidrólisis directa Enlace entre el ácido N-acetil murámico y el N-acetilglucosamina,.

Es policatiónica, lo que inhibe la actividad aniónica de la GTF Actividad enzimática mayor unida a la película que cuando está libre Es el principal componente bacteriolítico de los unidos a la película

Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Glucosil Transferasa (GTF) Enzima bacteriana con 3 isoformas B – C Y D

GTF C y GTF D potencian su actividad inmovilizadas GTF de S Sanguis mayor afinidad al substrato (sacarosa) cuando la enzima está libre GTF D causa la mayor disminución de la actividad amilasa comparada con las otras isoformas

Facilita la adhesión de los microorganismos ( S Mutans dependiente de glucano) Sintetiza glucanos extracelulares Interacción amilasa y GTF modulan la formación de glucanos Amilasa proporciona sustrato (glucosa)

Amilasa y GTF compiten por los sitios de unión en la película

Ej. de adaptación bacteriana a los biofilms fisiológicos del hospedero, para facilitar la colonización

Fructosil Transferasa: Forma fructopolisacáridos (transfiere grupos fructosil) De menor significación que los glucopolisacáridos en la formación de la placa Menos importante que GTF en modificación bacteriana

Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Peroxidasas Dos especies:

Peroxidasa salival (acino glandular) Mieloperoxidasa (leucocitos del fluido crevicular o mucosa)

Principal mecanismo de defensa:

Proteína antioxidante Disminuyen el stress oxidativo

Catalizan: Reducción del H2O2

Oxidación del thiocianato (SCN -) a Hipothiocianato (OSCN -)

Inhibe crecimiento bacteriano:

Por formación de OSCN – Inhibición de glicólisis bacteriana ( hexokinasa)

•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Anhidrasa Carbónica 8 iso-enzimas (I – VIII) Acino glandular seroso Homeostasis de pH en diversos tejidos Alta capacidad Buffer, remineralización Cataliza reacción

En cavidad bucal: VI inmovilizada Conserva su actividad biológica Protege los dientes por neutralización de iones hidrógeno y ácidos

Altos niveles de actividad en saliva de niños carie-libres

•Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

CO2 + H2O HCO3 - + H+

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Fosfatasas: Hidrolizan monoesteres orgánicos del ácido fosfórico Hay dos subespecies:

Fosfatasa ácida: mineralizaciòn

Fosfatasa alcalina: en pelìcula

PRPs: (proteínas acídicas ricas en prolina) Un tercio de las proteínas presentes en la saliva Son parte integral de la película Se unen a la HA por su extremo N- terminal negativo Actividad en la adherencia bacteriana Remineralización Mantención de integridad del cristal de HA

(Biochemical and Biophysical Research Communications 320 (2004) 342–346)

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Elastasas:

Remueven la región N-terminal de PRPs Productos de su digestión tienen menor afinidad por la HA PRPs intactas, incorporadas ya en la película, son resistentes Acción antibacteriana

Estaterinas - Aglutinina Parotídea - Seroalbúmina

Carbohidratos: Glucosa Fructosa Galactosa Manosa Galactosamina y Glucosamina

Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

1. Película Adquirida Estructura compleja encargada de mantener la integridad del diente

Proteasas o Peptidasas: Actividad hidrolasa Hay cuatro subgrupos:

Serine- proteinasas Cisteine- proteinasas Asparragina ácido-proteinasas Metaloproteinasas (EC 3.4.24).

Proteasa de S. Sanguis Degrada IgA1-S Interfiere con actividad anti-bacteriana IgA1- secretora es parte integral de la película e inhibe la adherencia del S. mutans

Metaloproteinasas de matriz : Rol importante en la progresión de la caries dentinaria

Histatinas salivales: Inhiben las proteasas del huésped y las bacterianas Protege actividad de la amilasa de los efectos inhibitorios de los taninospor ej.

Cistatinas:

Enzima salival Regula actividad bacteriana y degradación proteica en sitios de inflamación o infección. Remineralización y mantención de integridad del cristal de HA Moléculas precursoras de la película y aparentemente inhibidoras de proteasas.

Microbes and Infection, 2, 2000, 1599−1607 ; Eur J Oral Sci 2005; 113: 2-13

Dra C De L M

Interacción

1. Película Adquirida Funciones Protección:

Lubrica y protege al diente del medio ambiente Controla la composición de la microflora

Adhesión no específica y selectiva de bacterias Provee proteínas antibacterianas

Induce el desarrollo de la placa

Adsorción selectiva de bacterias

Soporte físico y químico: Adsorción y andamiaje

Barrera permeable:

De / Remineralización Almacena iones y selecciona su transporte

Enzimas de importancia Amilasa, lisozima, anhidrasa carbónica, GTF, Peroxidasa

Archives of Oral Biology (2005) 50, 821—828

Hipótesis sobre las Placas Se plantea dos teorías sobre la relación entre las placas

dentales y la génesis de las patologías infecciosas orales.

Teoría de la placa inespecífica

Teoría de la placa específica.

Placa Inespecífica Todas las bacterias que forman la placa participan en

la génesis de las patologías infecciosas.

Un incremento cuantitativo sería el principal causante de las patologías.

Problemas No explica el porqué grandes acumulaciones de placa

no siempre producen caries ni destrucción de los tejidos periodontales.

No explica el porqué una placa escasa si produce patologías

Placa Específica Sólo ciertas bacterias que componen la placa

participan en la génesis de las patologías infecciosas

Por lo tanto cambios cualitativos en la placa generan los procesos patológicos infecciosos.