clase de sifilis

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Universidad Dr. Andres Universidad Dr. Andres Bello Bello Tema: Prueba de R. P. R. Tema: Prueba de R. P. R. Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Navidad O. Navidad O.

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Page 1: clase de sifilis

Universidad Dr. Andres BelloUniversidad Dr. Andres Bello

Tema: Prueba de R. P. R.Tema: Prueba de R. P. R.

Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Navidad O.Facilitador: Dr. Y Lic. Juan Carlos Navidad O.

Page 2: clase de sifilis

La sífilis es una enfermedad de transmisión La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ITS).sexual (ITS).

1905 descubierta1905 descubierta

Treponema pallidumTreponema pallidum, (espiroqueta), , (espiroqueta), originalmente se le denominó Spirochaeta originalmente se le denominó Spirochaeta pallida.pallida.

Page 3: clase de sifilis

Infección por T. pallidum subespecie Infección por T. pallidum subespecie pallidumpallidum

Huésped produce anticuerpos:Huésped produce anticuerpos:

1. contra material lipoidal liberado por las 1. contra material lipoidal liberado por las células dañadas (reaginas)células dañadas (reaginas)

2. contra material lipoproteico y 2. contra material lipoproteico y cardiolipina liberada por los treponemas cardiolipina liberada por los treponemas (anticuerpos específicos)(anticuerpos específicos)

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REAGINAREAGINA (Anticuerpos Reagínicos o No-Treponémicos) (Anticuerpos Reagínicos o No-Treponémicos)

Es una proteína similar a un anticuerpo, que se une Es una proteína similar a un anticuerpo, que se une a un antígeno (cardiolipina, lecitina y colesterol) a un antígeno (cardiolipina, lecitina y colesterol) en las pruebas RPR o VDRL, producidos por un en las pruebas RPR o VDRL, producidos por un individuo infectado con T pallidum, contra sus individuo infectado con T pallidum, contra sus propios tejidos o contra células de mamíferos. propios tejidos o contra células de mamíferos.

No son exclusivos de la sífilis No son exclusivos de la sífilis

Page 5: clase de sifilis

Anticuerpo: son glucoproteínas que forma el organismo como respuesta al contacto con un antígeno, y que reaccionan específicamente con él.

Antígeno: sustancia capaz de provocar una reacción o respuesta inmunitaria, tras su unión específica provoca una respuesta inmune.

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Infección por TreponemaInfección por Treponemasubespecie pallidumsubespecie pallidum

Anticuerpos antilipídicos: Anticuerpos antilipídicos:

Se detectan en etapa primaria Se detectan en etapa primaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Aumenta cantidad en etapa secundaria Disminuyen en etapas posteriores Disminuyen en etapas posteriores Se producen en otras enfermedades Treponémicas Se producen en otras enfermedades Treponémicas Se producen en respuesta a enfermedades No Se producen en respuesta a enfermedades No treponémicas agudas o crónicastreponémicas agudas o crónicas

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TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILISPARA SÍFILIS

MicroscopíaMicroscopía directa Ex. Treponémicos directa Ex. Treponémicos (muestra de lesión o tejido) (muestra de lesión o tejido)

Ex. No TreponémicosEx. No Treponémicos Ex. Serológicos Ex. Serológicos (muestras de sangre y LCR)(muestras de sangre y LCR)

Ex. TreponémicosEx. Treponémicos

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TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS

Ex. de microscopía directaEx. de microscopía directa

Microscopía de Campo Oscuro (CO)Microscopía de Campo Oscuro (CO)

Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum pallidum (DFA-TP(DFA-TP))

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TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS

Microscopía de Campo OscuroMicroscopía de Campo Oscuro

Lesiones húmedasLesiones húmedas Examen inmediatoExamen inmediato Observación de organismos móvilesObservación de organismos móviles

RequisitosRequisitos Microscopio adecuadoMicroscopio adecuado CapacitaciónCapacitación Buena toma de muestraBuena toma de muestra PerseveranciaPerseverancia

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Ex. de microscopía directaEx. de microscopía directa

Page 11: clase de sifilis

TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILISPARA SÍFILIS

Examen de microscopía directa positivaExamen de microscopía directa positiva

Demostración del T. Demostración del T. pallidumpallidum:: MorfologíaMorfología MovilidadMovilidad

Diagnóstico de sífilis:Diagnóstico de sífilis: PrimariaPrimaria SecundariaSecundaria Congénita precoz Congénita precoz Recaída infecciosa Recaída infecciosa

Page 12: clase de sifilis

Examen de microscopía directa positivaExamen de microscopía directa positiva

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TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICAS PARA SÍFILIS PARA SÍFILIS

Examen de microscopía directa negativaExamen de microscopía directa negativa

No descarta sífilisNo descarta sífilis

Tiempo o condición de la lesiónTiempo o condición de la lesión

Tratamiento previo (local o sistémico)Tratamiento previo (local o sistémico)

Mala toma de muestraMala toma de muestra

Mala identificación del T. Mala identificación del T. pallidumpallidum

Page 14: clase de sifilis

TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS

Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum (DFA-TP)(DFA-TP)

Reemplaza al examen C.O.Reemplaza al examen C.O.

Lesiones húmedasLesiones húmedas

Lesiones oralesLesiones orales

Líquidos corporalesLíquidos corporales

Page 15: clase de sifilis

TÉCNICAS DIAGNÓSTICASTÉCNICAS DIAGNÓSTICASPARA SÍFILISPARA SÍFILIS

Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum Anticuerpos Fluorescentes Directos para T. pallidum (DFA-TP)(DFA-TP)

Macerado de tejidosMacerado de tejidos

Examen no inmediatoExamen no inmediato

Envío a Laboratorio de ReferenciaEnvío a Laboratorio de Referencia

Emplea anticuerpos monoclonalesEmplea anticuerpos monoclonales

Page 16: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes AntígenoExámenes AntígenoAnticuerpoAnticuerpo

No treponémicos Cardiolipina ReaginaNo treponémicos Cardiolipina Reagina

Treponémicos T. pallidum EspecíficosTreponémicos T. pallidum Específicos

Page 17: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes serológicosExámenes serológicos

No treponémicos (RPR, USR, VDRL)No treponémicos (RPR, USR, VDRL)

Treponémicos (MHA-TP, FTA-ABS, Treponémicos (MHA-TP, FTA-ABS, Inmunocromatografía, ELISA)Inmunocromatografía, ELISA)

Page 18: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos

VDRL en láminaVDRL en lámina ((VVenereral enereral DDiseaseisease

RResearch esearch LLaboratory)aboratory) USRUSR ((UUnheated nheated SSerum erum

RReagin)eagin) RPR en TarjetaRPR en Tarjeta ((RRapid apid PPlasma lasma RReagin)eagin)

Page 19: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Page 20: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos

Emplean antígeno lipoidal (cardiolipina, lecitina, Emplean antígeno lipoidal (cardiolipina, lecitina, colesterol)colesterol)

Son exámenes de floculación (lámina o tarjeta)Son exámenes de floculación (lámina o tarjeta)

Fáciles de realizarFáciles de realizar

Page 21: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos

Miden anticuerpos IgG e IgMMiden anticuerpos IgG e IgM

Examen cualitativo de tamizaje (RPR)Examen cualitativo de tamizaje (RPR)

Examen cuantitativo de seguimiento (VDRL, Examen cuantitativo de seguimiento (VDRL, USR)USR)

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TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos

Nivel aceptable de especificidadNivel aceptable de especificidad

Sensibilidad altaSensibilidad alta

Costo relativamente baratoCosto relativamente barato

Lectura macroscópica (RPR)Lectura macroscópica (RPR)

Page 23: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes No treponémicosExámenes No treponémicos

Lectura microscópica (VDRL, USR)Lectura microscópica (VDRL, USR)

Tiempo de ejecución 40 a 90 minutosTiempo de ejecución 40 a 90 minutos

Estabilidad ag. 12 hrs VDRL, 1 año RPR, USREstabilidad ag. 12 hrs VDRL, 1 año RPR, USR

Se realiza en suero (RPR, VDRL, USR) o en LCR Se realiza en suero (RPR, VDRL, USR) o en LCR (VDRL)(VDRL)

Page 24: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

% SENSIBILIDAD Y % DE ESPECIFICIDAD % SENSIBILIDAD Y % DE ESPECIFICIDAD EXAMENES NO TREPONÉMICOSEXAMENES NO TREPONÉMICOS

Page 25: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Anticuerpos anti-T.Anticuerpos anti-T.pallidumpallidum

Se detectan en etapa primariaSe detectan en etapa primaria

Aumenta cantidad en etapa secundariaAumenta cantidad en etapa secundaria

Permanecen de por vidaPermanecen de por vida

Page 26: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICASTÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos

FTA-ABSFTA-ABS ( (FFluorescent luorescent TTreponemal reponemal AAntibody ntibody AAbsorption)bsorption)

MHA-TPMHA-TP ( (MMicroicroHHemagglutination emagglutination AAssay for antibodies to ssay for antibodies to TT. .

ppallidumallidum))

ELISAELISA Enzimoinmunoensayo Enzimoinmunoensayo

InmunocromatografíaInmunocromatografía

Page 27: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos

Reacciones antígeno-anticuerpo, de aglutinación, Reacciones antígeno-anticuerpo, de aglutinación, coloración, de inmunocromatografíacoloración, de inmunocromatografía

Antígeno T. pAntígeno T. pallidumallidum subespecie subespecie pallidumpallidum

Detectan anticuerpos dirigidos contra Detectan anticuerpos dirigidos contra componentes treponémicos celularescomponentes treponémicos celulares

Son exámenes cualitativosSon exámenes cualitativos

Page 28: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Exámenes TreponémicosExámenes Treponémicos

Son exámenes confirmatoriosSon exámenes confirmatorios

Son sensiblesSon sensibles

Son específicosSon específicos

Permanecen reactivos de por vidaPermanecen reactivos de por vida

Page 29: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Examen Treponémico FTA-ABSExamen Treponémico FTA-ABS

Es un método de fluorescencia indirectoEs un método de fluorescencia indirecto

Se hace reaccionar un frotis de T. pallidum con Se hace reaccionar un frotis de T. pallidum con suero del pacientesuero del paciente

Se agrega conjugado marcadoSe agrega conjugado marcado

Se observa al microscopio de fluorescenciaSe observa al microscopio de fluorescencia

Page 30: clase de sifilis

FTA-ABS REACTIVOFTA-ABS REACTIVO

Page 31: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Examen Treponémico MHA-TPExamen Treponémico MHA-TP

Hemaglutinación pasiva de eritrocitos sensibilizados con Hemaglutinación pasiva de eritrocitos sensibilizados con T. pall. y anticuerpos del sueroT. pall. y anticuerpos del suero

Muestras reactivas forman una malla suave de células Muestras reactivas forman una malla suave de células aglutinadasaglutinadas

Muestras no reactivas forman un botón compacto de Muestras no reactivas forman un botón compacto de células no aglutinadascélulas no aglutinadas

Menos sensible en sífilis primariaMenos sensible en sífilis primaria

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Examen Treponémico MHA-TPExamen Treponémico MHA-TP

Page 33: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA

Método indirecto para detectar anticuerposMétodo indirecto para detectar anticuerpos

El antígeno recubre los pocillos de la placa de El antígeno recubre los pocillos de la placa de microtitulaciónmicrotitulación

Se agrega una dilución de suero para que los Se agrega una dilución de suero para que los anticuerpos se unan al antígenoanticuerpos se unan al antígeno

Page 34: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA

Se usan Igs. antihumanas marcadas para detectar Se usan Igs. antihumanas marcadas para detectar anticuerpos del paciente anticuerpos del paciente

Se agrega un sustrato para su detección Se agrega un sustrato para su detección

Si el paciente tiene anticuerpos a T.Si el paciente tiene anticuerpos a T. pallidum pallidum se se produce una reacción de colorproduce una reacción de color

Page 35: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Examen Treponémico ELISAExamen Treponémico ELISA

La intensidad del color desarrollado es La intensidad del color desarrollado es proporcional a la cantidad de anticuerpos proporcional a la cantidad de anticuerpos presentespresentes

El cambio de color se lee en un lector ELISAEl cambio de color se lee en un lector ELISA

Ventaja de la técnica: elimina la interpretación Ventaja de la técnica: elimina la interpretación subjetiva de los resultadossubjetiva de los resultados

Page 36: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Técnica de inmunocromatografía Técnica de inmunocromatografía

Emplea combinación Igs. antihumanas y conjugado Emplea combinación Igs. antihumanas y conjugado coloreado como fase móvilcoloreado como fase móvil

Emplea proteínas recombinantes de sífilis fijadas en las Emplea proteínas recombinantes de sífilis fijadas en las líneas de prueba y controllíneas de prueba y control

La muestra fluye y las Igs. humanas son capturadas por el La muestra fluye y las Igs. humanas son capturadas por el conjugado Ig. antihumano coloreado formando un conjugado Ig. antihumano coloreado formando un inmunocomplejoinmunocomplejo

Page 37: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Técnica de inmunocromatografíaTécnica de inmunocromatografía

El inmunocomplejo se une a las proteínas El inmunocomplejo se une a las proteínas recombinantes de sífilis en la línea de prueba y se recombinantes de sífilis en la línea de prueba y se produce una línea rojo-violetaproduce una línea rojo-violeta

Un exceso de conjugado reacciona en la línea de Un exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una 2ª líneacontrol formando una 2ª línea

Page 38: clase de sifilis

Técnica de inmunocromatografíaTécnica de inmunocromatografía

Page 39: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas

Para distinguir reacciones debidas a sífilis de las Para distinguir reacciones debidas a sífilis de las falsas positivas en las pruebas No treponémicas.falsas positivas en las pruebas No treponémicas.

Para confirmar sífilis en etapa de incubación.Para confirmar sífilis en etapa de incubación.

Para confirmar sífilis tardía en aquellos casos con Para confirmar sífilis tardía en aquellos casos con ex. No treponémico No reactivos.ex. No treponémico No reactivos.

Page 40: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas

Para resolver casos con evidencia epidemiológica de Para resolver casos con evidencia epidemiológica de sífilis y la pareja presenta ex. No treponémico sífilis y la pareja presenta ex. No treponémico repetidamente No Reactivos. repetidamente No Reactivos.

Si después de efectuar repetidos ex. No treponémicos Si después de efectuar repetidos ex. No treponémicos el diagnóstico continúa siendo dudoso.el diagnóstico continúa siendo dudoso.

Si el título de VDRL permanece estable con o sin Si el título de VDRL permanece estable con o sin tratamientotratamiento

Page 41: clase de sifilis

TÉCNICAS SEROLÓGICAS TÉCNICAS SEROLÓGICAS SÍFILIS SÍFILIS

Uso de técnicas TreponémicasUso de técnicas Treponémicas

Si el título de VDRL muestra una variación de Si el título de VDRL muestra una variación de solo una dilución (mayor o menor) en dos solo una dilución (mayor o menor) en dos controles sucesivos con intervalo de más de un controles sucesivos con intervalo de más de un mes.mes.

Para ayudar al dg. de sífilis en una madre que es Para ayudar al dg. de sífilis en una madre que es No Reactiva al VDRL y que no presenta síntomas No Reactiva al VDRL y que no presenta síntomas clínicos de sífilis pero tiene un hijo con sífilis clínicos de sífilis pero tiene un hijo con sífilis congénitacongénita

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EXÁMENES TREPONÉMICOSEXÁMENES TREPONÉMICOS

% SENSIBILIDAD Y % ESPECIFICIFIDAD% SENSIBILIDAD Y % ESPECIFICIFIDAD

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Técnicas TreponémicasTécnicas Treponémicas

FTA-ABS IgM - 19S IgMFTA-ABS IgM - 19S IgM

Aún se encuentra en investigaciónAún se encuentra en investigación Cara de realizarCara de realizar Resultados poco sensibles y poco específicosResultados poco sensibles y poco específicos RN produce ac. IgM contra IgG maternos (Falso RN produce ac. IgM contra IgG maternos (Falso

Positivo)Positivo) Inhibición de ac. IgM por IgG materno (Falso Inhibición de ac. IgM por IgG materno (Falso

Negativo) Negativo)

Page 44: clase de sifilis

PCRPCRReacc. en Cadena de la Polimerasa Reacc. en Cadena de la Polimerasa

Técnica de biología molecularTécnica de biología molecular Emplea un fragmento de ADNEmplea un fragmento de ADN Obtención de gran Nº de copiasObtención de gran Nº de copias Sirve para amplificar un fragmento del Sirve para amplificar un fragmento del

ADNADN Facilita identificación de las bacteriasFacilita identificación de las bacterias Técnica susceptible de contaminación Técnica susceptible de contaminación

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WESTERNWESTERN BLOTBLOT

Técnica en estado de investigaciónTécnica en estado de investigación Ags. T. Ags. T. pallpall. se separan por electroforesis. se separan por electroforesis Polipéptidos se transfieren a hojas de Polipéptidos se transfieren a hojas de

nitrocelulosanitrocelulosa Suero se coloca en la tira, se incubaSuero se coloca en la tira, se incuba Se agrega conjugado, sustrato enzimáticoSe agrega conjugado, sustrato enzimático Si es positivo se obtiene una reacción de Si es positivo se obtiene una reacción de

color color

Page 46: clase de sifilis

R.P.R CARBONR.P.R CARBON

FUNDAMENTO:FUNDAMENTO:

LAS REAGINAS DEL SUERO O PLASMA SE PUEDEN DETECTAR LAS REAGINAS DEL SUERO O PLASMA SE PUEDEN DETECTAR POR UNA REACCION DE AGLUTINACION EN PRESENCIA DE UN POR UNA REACCION DE AGLUTINACION EN PRESENCIA DE UN ANTIGENO NO TREPONEMICO. EL ANTIGENO CONTIENE ANTIGENO NO TREPONEMICO. EL ANTIGENO CONTIENE PARTICULAR DE CARBON QUE COAGLUTINAN CUANDO LA PARTICULAR DE CARBON QUE COAGLUTINAN CUANDO LA REACCION ES POSITIVA FACILITANDOSE LA OBSERVACION REACCION ES POSITIVA FACILITANDOSE LA OBSERVACION MACROSCOPICA.MACROSCOPICA.

EL ANTIGENO CONTIENE CARDIOLIPINA, LECITINA, EL ANTIGENO CONTIENE CARDIOLIPINA, LECITINA, COLESTEROL Y MICROPARTICULAS DE CARBON.COLESTEROL Y MICROPARTICULAS DE CARBON.

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MATERIALES:MATERIALES:

PIPETAS AUTOMATICAS QUE DISPENSEN 50 ulPIPETAS AUTOMATICAS QUE DISPENSEN 50 ulPUNTAS PARA PIPETASPUNTAS PARA PIPETAS

ROTADOR ROTADOR TARJETAS CON CIRCULOS TARJETAS CON CIRCULOS

DISPENSADORESDISPENSADORES

MUESTRA:MUESTRA:

SUERO O PLASMA LIBRE DE HEMOLISIS Y SUERO O PLASMA LIBRE DE HEMOLISIS Y CONTAMINACION.CONTAMINACION.

LAS MUESTRAS SE PUEDEN CONSERVAR VARIOS DIAS LAS MUESTRAS SE PUEDEN CONSERVAR VARIOS DIAS DE 2-8 °C O A-20 °C.DE 2-8 °C O A-20 °C.

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TECNICATECNICA

PRUEBA CUALITATIVAPRUEBA CUALITATIVA::

1.DEJAR QUE EL 1.DEJAR QUE EL REACTIVO

Y LAS MUESTRAS SE ATEMPERENY LAS MUESTRAS SE ATEMPEREN

POR LO MENOS 30 MIN.POR LO MENOS 30 MIN.

2.PREPARAR LOS CONTROLES: 2.PREPARAR LOS CONTROLES: DOS CONTROLES INTERNOS: REACTIVO CONOCIDO Y NO DOS CONTROLES INTERNOS: REACTIVO CONOCIDO Y NO

REACTIVOREACTIVO DOS CONTROLES DEL SET: REACTIVO Y NO REACTIVODOS CONTROLES DEL SET: REACTIVO Y NO REACTIVO

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3. DEPOSITAR EN UN CIRCULO DE UNA DE LAS TARJETAS 50 ul O UNA GOTA DE MUESTRA Y CONTROLES.

4.CON UN AGITADOR DE UN SOLO USO EXTENDER LA MUESTRA SOBRE TODA LA SUPERFICIE DEL CIRCULO.

5.DEPOSITAR UNA GOTA DEL ANTIGENO Y COLOCAR LA TARJETAEN EL ROTADOR DURANTE 8 MIN A 100 RPM

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PRUEBA CUANTITATIVAPRUEBA CUANTITATIVA

EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION SALINA EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION SALINA AL 0.85 %. NO EXTENDERAL 0.85 %. NO EXTENDER

DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRADEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA

MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR LA MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR LA FORMACION DE BURBUJAS)FORMACION DE BURBUJAS)

A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA DILUCION 1:2, A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA DILUCION 1:2, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTAR LOS 50 ul SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTAR LOS 50 ul

DE LA ULTIMA DILUCION).DE LA ULTIMA DILUCION).

DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32.

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PRUEBA CUANTITATIVA EN TUBOPRUEBA CUANTITATIVA EN TUBO

A PARTIR DE UNA DILUCION DE 1:16 A PARTIR DE UNA DILUCION DE 1:16 EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION EN CINCO CIRCULOS COLOCAR UNA GOTA DE SOLUCION

SALINA AL 0.85 %. NO EXTENDERSALINA AL 0.85 %. NO EXTENDER DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA 1:16DEPOSITAR EN EL PRIMER CIRCULO 50 ul DE MUESTRA 1:16 MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR MEZCLAR ASPIRANDO Y EXPELIENDO 5 A 6 VECES (EVITAR

LA FORMACION DE BURBUJAS)LA FORMACION DE BURBUJAS) A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA A PARTIR DE ESTA MEZCLA QUE CONSTITUYE LA

DILUCION 1:32, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 DILUCION 1:32, PROSEGUIR LAS DILUCIONES EN BASE 2 MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN MEZCLANDO Y PASANDO SUCESIVAMENTE DE UN CIRCULO A OTRO (DESCARTARLOS 50 ul DE LA ULTIMA CIRCULO A OTRO (DESCARTARLOS 50 ul DE LA ULTIMA DILUCION).DILUCION).

DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES DE ESTA MANERA SE OBTIENEN LAS DILUCIONES SIGUIENTES: 1:32,:1:64,1:128,1:252, 1:512SIGUIENTES: 1:32,:1:64,1:128,1:252, 1:512

Page 53: clase de sifilis

RECOMENDACIONES PARA EVITAR REACCIONES RECOMENDACIONES PARA EVITAR REACCIONES FALSAS EN LA REACCION DE V.D.R.L - R.P.RFALSAS EN LA REACCION DE V.D.R.L - R.P.R

ANTES DE REALIZAR ESTA REACCION EL TECNICO DEBE ESTAR ANTES DE REALIZAR ESTA REACCION EL TECNICO DEBE ESTAR ENTERADO DEL CONTENIDO (INTRODUCCION- APENDICE) DEL ENTERADO DEL CONTENIDO (INTRODUCCION- APENDICE) DEL

INSERTO QUE TRAE EL SET.INSERTO QUE TRAE EL SET.

EL SET DEBE GUARDARSE A UNATEMPERATURA 2-8 °C.EL SET DEBE GUARDARSE A UNATEMPERATURA 2-8 °C.

NO SE DEBEN UTILIZAR MUESTRAS : HEMOLISADAS, TURBIAS, NO SE DEBEN UTILIZAR MUESTRAS : HEMOLISADAS, TURBIAS, CON CONTAMINACION O QUILOSAS.CON CONTAMINACION O QUILOSAS.

CORRECTA IDENTIFICACIONCORRECTA IDENTIFICACION

TIEMPO CORRECTO DE ROTACIONTIEMPO CORRECTO DE ROTACION

USO DE CONTROLESUSO DE CONTROLES

Page 54: clase de sifilis

LECTURA INMEDIATA LECTURA INMEDIATA

LOS SUEROS REACTIVOS DEBILES SE DEBEN ENSAYAR LOS SUEROS REACTIVOS DEBILES SE DEBEN ENSAYAR NUEVAMENTE POR PROCEDIMIENTOS CUALITATIVOS Y NUEVAMENTE POR PROCEDIMIENTOS CUALITATIVOS Y

CUANTITATIVOS ANTES DE NOTIFICAR LOS CUANTITATIVOS ANTES DE NOTIFICAR LOS RESULTADOS.RESULTADOS.

DEBE COMPARARSE UN LOTE NUEVO DE SUSPENSIÓN DEBE COMPARARSE UN LOTE NUEVO DE SUSPENSIÓN DE ANTIGENO CON UNA REACTIVIDAD CONOCIDA DE ANTIGENO CON UNA REACTIVIDAD CONOCIDA

ANTES DE SU USO DIARIO.ANTES DE SU USO DIARIO. EXAMINAR DIARIAMENTE LAS AGUJAS QUE SE EXAMINAR DIARIAMENTE LAS AGUJAS QUE SE EMPLEAN PARA DEPOSITAR EL ANTÍGENO QUE DEN EMPLEAN PARA DEPOSITAR EL ANTÍGENO QUE DEN

GOTAS UNIFORMES.GOTAS UNIFORMES.

TERMINADAS LAS REACCIONES DEL DIA RETIRESE LA TERMINADAS LAS REACCIONES DEL DIA RETIRESE LA AGUJA DEL FRASCO, ENJUAGUESE Y SEQUESE AL AIRE AGUJA DEL FRASCO, ENJUAGUESE Y SEQUESE AL AIRE (NO SE FROTE LA AGUJA PORQUE PIERDE LA CAPA DE (NO SE FROTE LA AGUJA PORQUE PIERDE LA CAPA DE

SILICON), TAPESE NUEVAMENTE EL FRASCO YSILICON), TAPESE NUEVAMENTE EL FRASCO Y ALMACENESE EN EL REFRIGERADOR. ALMACENESE EN EL REFRIGERADOR.

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