Clase Pruebas de Compatibilidad copia.pdf

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa Mdica

Prueba de Compatibilidad Pretransfusional

Leonor Armanet BernalesUniversidad de Chile


Abordaremos

Riesgos asociados a la transfusin de GR

Concepto y elementos que incluye

Prueba cruzada o crossmatcho Mtodos

o Modalidades

o Control de Calidad

Control de calidad y seguimiento

Algunos problemas


Frecuencia de Reaccin Adversa a la Transfusin (RAT)

Frecuencia de Reaccin Adversa a la Transfusin (RAT)

Generalmente no ocurren, cuando

aparecen son benignas.

Algunas pueden causar Morbilidad

severa o mortalidadSntomatologa a menudo muy similar


RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA

Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85

RIESGO DE LA TRANSFUSION SANGUINEA

Casos de muertes reportadas a FDA entre 1976-85

N de muertes (%) Causa Comentarios159 (48.5%)

23 (7.0)55.5%

Hemlisis inmune agudaHemlisis retardada

Principalmente incomp. ABOMuerte de causa mltiple,pero asociada a nuevosanticuerpos: Rh, Kell, Duffy yKidd

73 (22.2) Enf transmisibles portransfusion

Hepatitis NANB, B, VIH

33 (10.1) Edema agudo pulmonar26 (7.9) Contaminacin bacteriana Bacterias Gram + y Gram -

aerbicas y anaerbicas14(4.2) Anafilaxis, Hemlisis

externa, GVHD

Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa Mdica182 Muertes debida a hemlisis postransfusional182 Muertes debida a hemlisis postransfusional

Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990Ref: Transfusion Therapy: Guidelines for Practica.AABB 1990

N de muertes Grupo ABO delReceptor

Grupo ABOtransfundido

82208611118

OOOAABB

Desconocido

AB

ABB

O*A

ABDesconocido

14 Diferentes causas Informacin insuficiente8 Acs diferentes a ABO 5 anti-Kell

1 anti-e1 anti-Fya1 anti-Jka+b

*Sangre total

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaRIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*

BJM 1999;319:16-19 (3 July)RIESGOS DE LA TRANSFUSION SANGUINEA (SHOT)*

BJM 1999;319:16-19 (3 July)

62 ABO incompatible:Error de identificacin en cualquier etapa del proceso3 muertes

4 bacterianas7 virales1 malaria

164 hospitales341 casos en 6 millones

analizados (en 2 aos)22 muertes

*

*

*

*

*

*Serious Hazards of Transfusion

52%

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaReacciones transfusionales

hemolticas tardas

8 muertes

o 53% anti-Jka/Jkbo 38% anti-Rh

14% errores podran haber sido evitados

mejorando los procesos de laboratorio. o Error humano


Calidad y Seguridad Transfusional

Regulaciones Recomendaciones internacionales (OMS,AABB,ISBT, otras)

Normativas, Estndares, Orientaciones Nacionales.o (Servicios de Sangre, Bioseguridad)

Controleso Control de los procesos de toda la cadena transfusional.

o Control de Calidad de los procedimientos.Garanta de Calidad


Riesgo: 1% por unidad transfundida (Issit).o Pacientes generales: 3%o Politransfundidos: 35%o Anemia Falciform: 35%.o Talasmicos 10%o >60% receptores crnicos (otra serie)

Puede ocurrir por transfusin, embarazo o aborto

2 exposicin al mismo ag rpida respuesta imune destruccin g.rojos transfundidos.

Prevalencia de Sensibilizacin de Receptores


Prevalencia de Inmunizacin 3% - 8.4% receptores eventuales

Persistencia del Ac (26% a los 10 meses hasta aos)o Anticuerpos Kidd: < tiempo de deteccin

Respuesta inmune en 7 dias o Anti-Jka en 4 dias

1 2% de los potenciales receptores tendrn aloanticuerpos significativos diferentes a anti-Do 75% de dichos acs. con especificidad Rh o Kell.


Anticuerpos clnicamentesignificativos

Causan destruccin de los GR incompatibles

Cruzan la placenta y causan EHRN

Importante recordar que la unin de anticuerpos a los eritrocitos no les causa dao directo

Respuesta es heterognea, depende de mltiples variables


Factores que influencian la destruccininmune de GR

1. Concentracin plasmtica y avidz del Ac.

2. Rango trmico del Ac.

3. Clase y subclase de la inmunoglobulina

4. Densidad del Ag. en la membrana del GR

5. Volumen de eritrocitos transfundidos

6. Presencia de Ag en el plasma

7. Actividad del sistema fagocitario mononuclear

8. Sensibilidad de eritrocitos al complemento

9. Grado de activacin del complemento


Importancia clnica de los Alo Acs Transfusin solo tomado en cuenta tipificacin ABO y Rh: 98% de seguridad

Acs. siempre asociados a potenciales riesgos

transfusionales:o ABO, Rh, Kell, Duffy, Kidd, SsU, Di,

Acs. a veces asociados a riesgo transfusional:o Lea , MN, P1, Lutheran (Lua, Lub), Cartwright ( Yta), Sda, Bg(HLA), Ge, Vel

Rara vez asociado a riesgo transfusional:o Leb, Chido/Rodgers, York (Yka), Sda, Xga, Bg, HTLA, Csa, Kna, JMH, Jra


Inmunogenicidad relativa de antgenoseritrocitarios

D> K> c> E> k> e> Fya > C> Jka > S> Jkb > s


Test de Compatibilidad PretransfusionalTest de Compatibilidad Pretransfusional

Serie de procesos y procedimientos cuyo objetivo final es asegurar el mejor resultado posible de una Transfusin sangunea. Ausencia de RPTH

Su aplicacin es para aumentar la seguridad transfusional, ya que no pueden garantizar una sobrevida normal de los GR transfundidos.


Elementos de la P de C1. Indicacin de Transfusin 2. Identificacin del Receptor

1. En la muestra2. En la solicitud3. Del receptor

3. Anlisis a realizar a la muestra del R1. Caractersticas y condiciones de la muestra2. Grupo ABO y RhD3. Deteccin de Acs Irregulares4. Identificacin de Anticuerpos5. Comparacin con resultados previos

4. Seleccin de la unidad a transfundir1. Confirmacin ABO y RhD del Componente

5. Prueba Cruzada o Crossmatch1. Serolgico2. Electrnico

6. Etiquetado de componente a transfundir

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaIdentificacin del Receptor

Dispositivos para mejorar identificacin del paciente

Vox Sanguinis (2006) 91, 97101


Identificacin pre transfusional Recordar:

o La mayora de las RPTH ocurren por una errada identificacin del paciente o de la Unidad a transfundir

Cada SS debe:o Establecer e implementar el procedimiento para una identificacin segura del paciente, muestra y producto

Puede ser solamente de lectura visual o visual y electrnica

Uso de N nico de identificacin

Definir sistema de ID para pacientes inconscientes

Datos de ID en la muestra (EJ:cdigo de barras)


La muestra

Correctamente tomada, etiquetada y apta para el anlisis que se va a realizar. o Plasma (EDTA), Suero o Volumen

o Carctersticas: definir limitaciones y excepciones

Presencia de hemlisis visible

Presencia de lipemia

Presencia de un buffy coat anormalmente grande

Presencia de cogulos

Bajo volumen

Una razn clula:plasma, inesperadamente grande

Tiempo:


Dos Modelos

Paciente transfundido dentro de: La muestra se debe tomar no ms de:

3 14 das 24 horas antes de la transfusin

15 28 das 72 horas antes de la transfusin

29 das - 3 meses 1 semana antes de la transfusin

o Pctes transfundidos o embarazadas en los ltimos 3 meses: NO MAS DE 3 DIAS al momento de la transfusin, para reflejar el estado inmunolgico del paciente

o Sin esta restriccin para otro tipo de pacientes

o Pctes sin historia clnica o transfusional demostrable, usar criterio de 3 das


Cunto tiempo guardar la muestra pretransfusional?

Almacenar por 7 das en refrigeracin (AABB)

Otras referencias 3 das

Muestra del donante (tubuladura)

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaSeleccin de la unidad a

transfundir

ISOGRUPO

Aspecto o Hemlisis, contaminacin, aire

Circuito cerradoo Indemnidad del equipo

o No abierto

Das de almacenamiento, segn condicin del receptor

Tipo de paciente: Pediatrico, adulto

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaComponentes compatibles para transfusin

1 opcin: ISOGRUPO

Grupo del receptor

Plasma / crioprecipitado compatible

GR compatibles

Plaquetas compatibles 1 opcin

Plaquetas compatibles 2 opcin

A A, AB A, O A, AB B, O

B B, AB B, O B, AB A, O

O O, A, B, AB O O A, B, AB

AB AB AB, A, B, O AB A, B, O

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaTiempos de prueba estimado y riesgo

de los diferentes mtodos

Procedimiento Tiempo que requiere, desde recepcin de

solicitud a trmino de pruebas compatibilidad

(min)

Riesgo de hemlisis, %

Inmediata, sin pruebas 5 > 5

Solo ABO y Rh D 5 a 10 2-5

Type and screen 30 a 45 < 0,1

Type and screen +prueba cruzada

serolgica

30 a 45 < 0,1


25

Preparacin de los hemates de la tubuladura del componente

La principal dificultad reside en lograr la identificacin segura

de la tubuladura y del tubo secundario utilizado en el test, a

partir del nmero en cdigo de barra del producto: Recontrol

ABO y RhD.

Preparacin de los GR: lavado con PBS resuspensin 5%.

Mantener circuito cerrado del componente por seguridad.

Utilizar dispositivos limpios/ desechables para cortar la

tubuladura.

Mantener la cadena de fro.


Prueba Cruzada o Crossmatch Es una investigacin de anticuerpos irregulares (TAI)

personalizada, se usan los GR del D y plasma del R. Controla compatibilidad ABO entre R y D, de forma inmediata.

El plazo de validez de este anlisis es de 72 horas.

Hay que disponer de:o POE, CC con aplicacin y programa computacional para cada test

o Reactivos aptos y suficientes

o Equipos aptos y suficientes

o Material apto y suficiente


27

Ejecucin tcnica

La prueba cruzada se efecta en iguales condiciones tcnicas que el TAI, utilizando un suero AGH humana poliespecfico, con incubacin a + 37C.o Si reaccin positiva >>> componente incompatibleo Si reaccin negativa >>> componente compatible

Pd ser en tubo o en gel.

Pd ser Manual o automatizada

Se puede usar LISS para disminuir tiempo de incubacin y aumentar sensibilidad.


Modalidadestcnicas

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaMtodo type and screen

(Clasificacin y Deteccin)

Realizar ABO, Rh D y TAI a todo potencial receptor de transfusin

Guardar la muestra para crossmatch por posible transfusino En caso de TAI (-) Se transfunde componente isogrupo ABO / Rh D, con

crossmatch salino. Muy rara vez se requiere transfusin tan urgente como para no hacer clasificacin ABO / D toma 5 10 min.

o Mantener un stock suficiente de GR para pacientes que se operan con esta modalidad.

o En caso de TAI positivo identificar los anticuerpos, y PC completa

o Si hay anticuerpos significativos, seleccionar unidades antgeno negativo.


Un type and screen es vlido hasta por 72 horas (3 das), si el paciente no ha recibido una transfusin o no ha estado embarazada en los ltimos 3 meses.

Mtodo type and screen(Clasificacin y Deteccin)


31

Uso de Prueba Cruzada completa

Obligatorio en :

o Paciente que haya desarrollado un aloanticuerpo anti eritrocitario : TAI +

o Recin nacido con un TAD positivo uso de muestra de la madre.

o Recin nacido cuya madre est aloinmunizada

o Pacientes con AHAI

Recomendado en (puede usar T/S):

o En pacientes no transfundidos

o En pacientes con TAI negativo


MSBOSMaximum Surgical Blood Order Schedule

Definido por Comit Hospitalario de Transfusin.

Corresponde la lista de cirugas electivas ms comunes, con el nmero mximo de unidades que deben estar disponibles para la operacin.

Se recomienda para procedimientos que requieren poca sangre (menos de 0.5 unidades de glbulos rojos/ paciente/ procedimiento).

Disminuye costos en PC Disminuye reservas innecesarias de unidades

Preparar con T/S + PC salino el nmero especfico de unidades requeridas de acuerdo al MSBOS.

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaDespacho electrnico

Electronic cross match

Paciente con type and screen previo en 2 ocasiones. o Si ambos son negativos, est registrado en el sistema y no ha sido transfundido en ese periodo, se transfunde con componente ABO compatible elegido por computacin y no se le hacen ms pruebas.

Es muy rpido y ahorra tiempo.


Esquemas para Test Pretransfusionales

AABB


Casos complejos

Sueros conteniendo Acs. mltiples Anticuerpos contra antgenos de alta frecuencia Transfusin en AHAI

GR raros es la unidad de componente sanguneo negativo para los antgenos de alta frecuencia y

mezcla de antgenos mas comunes.

(AABB)

Raro:< 1/5.000 Difcil manejo:


Casos complejosAc contra Ag de alta frecuencia

Difcil identificacin

Difcil encontrar la GR compatibles

Ac contra Ag de baja frecuencia

Algunas veces de difcil identificacin

Fcil encontrar la GR compatibles

Ac Mltiples

Algunas veces de difcil identificacin

Muchas veces difcil encontrar GR compatibles


39

Antgenos raros en panel de ID


SELECCIN DEL MEJOR MTODO

Uso de metodologas sensibleso Deben ser tan buenas como el test de AGH con LISS (LISS-IAT) en el uso de rutina. (Gold Standard)

o Entregar resultados reproducibles

o Costo efectivas

o No detectar Ac. sin importancia clnica (crioaglutininas)

o Tubo, Gel, Microplacas, molecular, etc.

Automatizacin de procesos permiteo Mejor utilizacin del tiempo, recursos humanos y econmicos

o Lectura objetivada


Procedimiento para la validar tcnicas inmunohematolgicas

Lectura y anlisis de insertos o Tubo, columna o microplaca

Sensibilidad: o Usar un panel de Acs. dbiles (no usar Acs. diluidos ya que tienen una alta afinidad por el Ag. y

son fcilmente detectados). Si se puede cuantificar el anti-D, debe ser 0,1 - 0,2 iu/ml o 20 - 40 nanogramos/ml

o Enfrentarlos a un panel de GR heterocigotos para los Ags. Importantes

Validacin de resultados negativos (tubo):o Usar GR sensibilizados con IgG (1+/2+)

Determinar la sensibilidad del test LISS-AGH:o Realizar tablero de ajedrez usando anti-D, anti-K y/o anti-Fya

Estudio de falsos positivos por AGH:o Realizar pruebas cruzadas usando suero fresco, permite detectar exceso de anti-C3d en el

sistema. (mtodos automatizados utilizan suero, anti-Jka y anti-Jkb se detectan por la presencia de un Ac. Anti-cadena liviana)


Estudio rutinario en paralelo (gran N de tests):o Conocer las fortalezas y debilidades del sistema en el trabajo diario del laboratorio

o Determinar incidencia de reacciones falsas positivas y negativas.

Estudio del efecto de dosis:o Comparar reactividad de Acs. Dbiles frente a GR homo y heterocigotos para varios Ags.

Procedimiento para la validar tcnicas inmunohematolgicas


CONCLUSIONES

NO EXISTE UN MTODO UNICO QUE SEA CAPAZ DE DETECTAR TODOS LOS ACS. DE IMPORTANCIA.o ELEGIRLO EN BASE A UN ANLISIS DE CALIDAD Y COSTO-BENEFICIO EN CADA INSTITUCION.

o MUCHA DEDICACION Y TRABAJO

EDUCACION Y CAPACITACION DEL PERSONAL DEL SS Y DEL HOSPITAL

Indicacin de la Transfusin

Pesquisa, manejo y estudio de RPT

Comit Hospitalario de Transfusiones


Muchas Gracias


Grupo internacional de serologistas y cientficos.

Programa de intercambio de Sueros, Clulas y Fludos Raros.

Inclusin del participante en el programa.

Los participantes pueden pedir sueros/ hemates de inters

directamente en la pgina del programa.

Los participantes deben enviar anualmente sueros y/o

hemates en la pagina del programa para los que puedan

interesarse.

S.C.A.R.F.(Serum Cels and Rare Fluids Exchange Program)

http://scarfex.jove.prohosting.con/

UNIVERSIDAD DE CHILEFacultad de MedicinaEscuela de Tecnologa MdicaSCARF Programa internacional

de cambio de muestras

Clase Pruebas de Compatibilidad copia.pdf

Documents

Transcript of Clase Pruebas de Compatibilidad copia.pdf