1INMUNOHEMATOLOGIAINMUNOHEMATOLOGIA

Aplicar los principios inmunologicos para el estudio de los antgenos presentes en los elementos formes de la sangre y su comportamiento serologico, as como los desordenes hematologicos relacionados con el estado inmune del individuo

2ANTIGENOSANTIGENOS

Sustancia extraa Estructura Qumica

Protenas,Polisacaridos Lpidos, Ac.Nucleicos

Epitopes:sitio critico Grupos Qumicos,

tridimensionales Existen uno o varios Azcar,Ac Grasos y aa

Inmunogeno Rx In Vivo Rx In Vitro

T, pH, Fza Ionica, solubilidad, Qx Ag.

Aglutinacin, hemolisis Hapteno (Drogas) Tamao Molecular

Factor mas importante mas 10,000 Daltons Glucagon: 4000 D

3ANTIGENOSANTIGENOSAntigeno Grupo Sanguineo

Sistema de Grupo Sanguineo

Inmunogenicidad (%)

D (Rho) RH 50.00K KELL 5.00c RH 2.05E RH 1.69k KELL 1.50e RH 0.56Fya DUFFY 0.23C RH 0.11Jka KIDD 0.07S MNSs 0.04Jkb KIDD 0.03s MNSs 0.03Williams, WJ: Inmunogenicidad relativa de Ag Hemticos

4GLUCOLIPIDOS A,B,H , P1 Membrana HematieOligosacarido + Lipido Lea Le b Plasma

PROTEINA RH Membrana HematieProteina + Lipido

GLUCOPROTEINA A,B,H , P1 Secreciones (Moco)Polipeptido + lipido Lea Le b

M;N Membrana Hematie

COMPOSICION QUIMICA y UBICACIN ORGANICA DE Ags HEMATICOS

Linares, Inmunohematologia y Transfusin

5A,B,H , Membrana Hematie Todos TejidosABH,I, Sda,Lewis Plasma Saliva, Leche

RH Membrana HematieKELL Membrana Hematie K: Monocitos y Neutrofilos

HLA -A,B Todas Cels NucleadasHLA-DR CelB, Endoteliales, M acrofagos,M onocitos,Espermatozoides

DISTRIBUCION y UBICACIN ORGANICA DE LOS ANTIGENOS

Harmening D, Tcnicas Modernas de Bco Sangre

6ANTICUERPOSANTICUERPOS

5 Clases Igs Difieren

Tamao molecular Contenido carbohidrato Vida media Actividad biolgica

Concentracin Vs Edad IgA: mayor Secreciones IgG: mayor en Suero

NH2-

-CO

OH

NH2-

-CO

OH

-S-S-

-S-S- -S-S-

7ESTRUCTURA DE LOS ANTICUERPOSESTRUCTURA DE LOS ANTICUERPOS

Conformacin Qx comn 4 polipeptidos Enlaces :S-S covalente

Regin articulacin Cadena L (2)

PM 22,500 daltons Kappa o Lambda

Cadena H (2) PM 50,000 - 75,000 diferencia Igs:Alfa, Mu,

Epsilon, Delta y Gamma

-S-S-

-S-S-

Pesada Variable

PesadaConstante

Liviana

COOH

NH2

8Estructura de los AnticuerposEstructura de los Anticuerpos

REGIONES Constante: -COOH Variable: -NH2 SITIO Ag COMBINANTE

DOMINIOS: S-S Cadena Liviana: V1 y C1 Cadena H: VH(1-4):IgA,GyD VH(1-5) IgM, E V L y VH: Idiotipos CH2: F. Complemento CH3: Macrofago

PAPAINA : Fab, FcCH3

V H

C H1

CH2

VLVL

CLCL

COOH

NH2-

9Anticuerpos Monoclonales y Anticuerpos Monoclonales y PoliclonalesPoliclonales Policlonales

Poseen : 2/3 CL kappa Derivan varios clones

Monoclonales Unicamente CL K o L Un sola clona reconocen una epitope

10

ExpresiExpresin Monomerica y n Monomerica y PolimericaPolimerica Monomeros IgG,D,E,A Pentamero: IgM Dimero/Trimero:IgA Polmeros: Cadena J

Glucopolipeptido :15000

Subtipos IgG: 1- 4 Diferencia en N de S-S Difiere Act. biolgicas

11

Caracteristicas IgA IgD IgE IgG IgMTipo Cadena Pesada Alfa Delta Epsilon Gamma MuCoeficiente Sedimentacion 7 - 15* 7 8 6,7 19Peso Molecular (qd) 160 - 500 180 196 150 900Vida Media (dias) 5,8 2,8 2,3 21 5Contenido Carbohidrato 7.5 - 9 10 - 13 11 - 12 2.2 - 3.5 7 - 14Tranferencia Placentaria No No No Si NoF. Complemento Ausente Ausente Ausente + +++Aglutinacion Salina + Ausente Ausente + ++++Alotipos Cadena Pesada Am Ausente Ausente Gm AusenteTipo de Respuesta ? ? ? Secund PrimariaMecanismo produccion ? ? ? Inmune NaturalProporcion de Ig total (%) 13 1 0.002 80 6

CARACTERISTICAS DE INMUNOGLOBULINAS SERICAS

12

Caracteristicas IgG1 IgG2 IgG3 IgG4Proporcion IgG Total (%) 65-70 23-28 4-7 3-4F. Complemento ++ + +++ -Receptores Fc Macrofagos +++ ++ +++ +Capacidad cruzar placenta + + + +Actividad Acs

Anti-Rh ++ - + +Antifactor VIII - - - -

Anti-Kell + - - -Anti-Duffy + - - -

Antiplaquetrios - - + -Vida Media (dias) 21 21 7-8 21

PROPIEDADES BIOLOGICAS DE SUBCLASES DE IgG

13

Alotipos de IgsAlotipos de Igs

Variaciones genticas de Inmunoglobulinas

Se localizan CL Kappa (Km): 3 CH y CL IgA (Am): 2 CH y CL IgG (Gm): 17

No presentan:IgD,E,M, A1 Usos de Alotipos

Test Paternidad Gentica Poblacional

NH2-

-CO

OH

NH2-

-CO

OH

-S-S-

-S-S- -S-S-

Idiotipos

Alotipos

14

DefinicionesDefiniciones

Anticuerpos amplio rango Termico

Anticuerpo incompleto

Anticuerpo monovalente

Aloanticuerpos Autoanticuerpos Anticuerpos calientes Anticuerpos frios Anticuerpos

irregulares Anticuerpos naturales

15

ReaccionReaccion AgAg--AcAc

Se produce In vivo, In Vitro Principios:

ESPECIFICIDAD REACCIONAN MOLECULAS ENTERAS FENOMENO SUPERFICIE PROPORCION VARIABLE TIEMPO VARIABLE

16

ReaccionReaccion AgAg--Ac.Ac.-- FasesFases

1 Fase: Unin Ag-Ac 2 Fase: |Ag-Ac| TIPOS

Aglutinacin Precipitacin Inhibicin ELISA RIA

AGLUTINACION SENSIBILIZACION

AGLUTINACION

17

Factores que afectan FasesFactores que afectan Fases

SENSIBILIZACION Concentracion Ag, Ac Temperatura pH Tiempo de Incubacion Fza Ionica del Medio

AGLUTINACION N Sitios Ags Caracteristica

molecular del Ac Potencial Z

18

Otros Factores y Medios ReacciOtros Factores y Medios Reaccinn

ANTIGENO Efecto dosis edad clulas T Conservacin Suspensin Celular

ANTICUERPO Avidez Titulo Conservacin Suero

MEDIOS SOL SALINA ALBUMINA

BOVINA LISS ENZIMAS