Identificación de //Pseudomonas //

Filtrar el agua e incubar el filtro sobre CetrimidaPseudomonas Agar base.

MEDIO CETRIMIDA PSEUDOMONAS AGAR BASE

o Medio selectivo (cetrimida) para Pseudomonas que permite la producción de pigmentos fluorescentes (fluoresceína y piocianina)

o Peptona de Gelatina: 20.0g

o K2SO4:10.0go MgCl2:1.4go Cetrimida 0.03%: 0.3 g

o Agar: 13.6g

o pH final: 7.2 ± 0.2

PREPARACIÓN:

o Suspender 45.3g en 1 litro de agua desionizada

o añadir 10 ml de glicerina,

o mezclar

o calentar a ebullición

o (distribuir) esterilizar a 121ºC 15 min.

NOTA: COMPOSICIÓN POR LITRO.

Las placas con los filtros se incuban a 35ºC 24 horas. Se observan las colonias. Cualquier crecimiento indicaPseudomonas.

Examinar bajo luz ultravioleta: colonias color amarillo verdoso son positivas para: P.aeruginosa, P. fluorescens, P.putida Comprobación de la identificación de Pseudomonas de las colonias detectadas en la figura de la parte superior Aislar (en TSA) ambos tipos de colonias detectadas en el cultivo sobre Cetrimida Pseudomonas Agar base.

Incubar 24h a 28ºC.

Tomando bacterias con un asa, suspender en solución ambas bacterias para la identificación.

Un tipo de colonia corresponde aPseudomonas aeruginosa Identificación con API 10S y prueba de la oxidasa Inocular los pocillos de la galería según recomendaciones del fabricante.

Colocar agua en la bandeja del fondo.

Incubar durante 24 h a 28 oC

Resultados

Los reactivos necesarios se muestran en la imagen.

La imagen muestra que ambas bacterias dan negativas las pruebas de TDA y producción de indol , que ninguna acumula nitritos y que se diferencian por el consumo de citratos.

Detección de oxidasa: la bacteria que produce colonias grandes es positiva (izquierda). La que produce colonias de menor tamaño no produce oxidasa (imagen de la derecha).