Pruebas Microbiológicas CF Laboratorio – Práctica coloración vital de microorganismos -1-

�&2/25$&,Ï1�9,7$/�'(�0,&5225*$1,6026� 2%-(7,926�'(�/$�35È&7,&$��- Poner de relieve detalles estructurales de los microorganismos, que no se pueden observar en fresco, sin causar modificaciones físicas o químicas incompatibles con el elemento estudiado.

- Realizar el trabajo de laboratorio de forma correcta, siguiendo las buenas prácticas de laboratorio.

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- Microscopio óptico con varios objetivos - Portaobjetos y cubreobjetos - Estuche de disección - Lámpara de alcohol - Asa de siembra y papel de filtro

352'8&726�5($&7,926� - Rojo neutro (dilución 1:10.000) - Aceite de inmersión

)81'$0(172� Para poner de relieve detalles estructurales de microorganismos que no se puedan observar en fresco es necesario utilizar colorantes que nos permitan el contraste. Algunos colorantes (vitales) permiten la observación sin causar modificaciones físicas o químicas incompatibles con el elemento estudiado. No obstante, los colorantes vitales siempre tienen un cierto grado de toxicidad, por lo que se preparen muy diluidos, acaban matando a los microorganismos. 7e&1,&$� Proceder de la siguiente forma:

��� Poner en el centro del portaobjetos una gota de la suspensión de microorganismos y otra del colorante.

��� Mezclar con el asa y colocar el cubreobjetos sobre la gota resultante, procurando que no se formen burbujas de aire.

�� Observar al microscopio utilizando el objetivo de inmersión. Se puede utilizar un objetivo de menor aumento previamente para buscar una zona óptima de observación.

�� Otra posibilidad es preparar una cámara húmeda y colocar una gota de colorante en la parte media de una arista del cubreobjetos, haciendo penetrar éste por capilaridad, succionando con un papel de filtro en la arista contraria.

5(68/7$'26�(�,17(535(7$&,Ï1�� Los microorganismos se observan coloreados de rojo, en un medio acuoso del mismo color.

27526�&2/25$17(6�9,7$/(6�87,/,=$'26�621�� - Azul de letileno - Nigrosina - Moreno de Bismark - Azul de tripán - Verde Janus fisiológico...

Pruebas Microbiológicas CF Laboratorio – Práctica coloración vital de microorganismos -2-

��$&7,9,'$'(6�),1$/(6����� 2EVHUYDU�ODV�VLJXLHQWHV�LQVWUXFFLRQHV��

- Los portas deberán lavarse y volver a colocarlos limpios y secos en sus recipientes. Los cubres se tiran a la basura; se ruega cuidado en no dejarlos abandonados en las mesas, pues pueden dañar a los demás.

- El microscopio deberá limpiarse esmeradamente tras su uso. ���� 5HVSRQGHU�DO�VLJXLHQWH�FXHVWLRQDULR��

2.1. ¿Por qué hay que evitar la formación de burbujas de aire en el método de la cámara húmeda?

2.2. ¿Cómo se puede comprobar la movilidad de un microorganismo?

3.3. ¿Por qué razón deben estar muy diluidos los colorantes vitales?

2.4. Cita las diferencias entre tinción y coloración vital.

2.5. ¿Qué efecto produce el papel de filtro utilizado en el método de la cámara húmeda? ¿Sabrías explicar la razón por la que se produce este efecto?

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Una vez finalizada la experiencia práctica se debe realizar un informe en el se reflejen los siguientes puntos:

3.1. Una introducción donde se expresen esquemáticamente los contenidos conceptuales soportes de la experiencia realizada.

3.2. Un completo desarrollo del guión explicando detalladamente todos los pasos y manipulaciones, ordenadas secuencialmente, que se han conseguido en la realización de la práctica.

3.3. Dibujos esquemáticos de los aparatos o equipos utilizados.

3.4. Material utilizado.

3.5. Incidencias y observaciones o notas a tener en cuenta.

3.6. En una hoja, un esquema gráfico de todo el proceso manipulativo seguido.

3.7. Resultados obtenidos, incluyendo los dibujos necesarios, y conclusiones.

3.8. Resolución detallada del cuestionario.

3.9. Bibliografía utilizada.

Este informe es absolutamente necesario que se desarrolle de forma individual, de forma que cada alumno aporte su punto de vista personal de la práctica realizada \�aporte la necesaria reflexión \�síntesis de los resultados.

Para realizar el informe pueden utilizar la plantilla-memoria de prácticas.