Compartiendo la experiencia en el uso de MALDI-TOF

Dra. Patricia García Profesora Titular

Departamento de Laboratorios ClínicosJefa Laboratorio de Microbiología

Pontificia Universidad Católica de Chile

Declaración de conflictos de interés

Grants con• Biofire (BM)• MSD• Pfizer

Como funciona MALDI-TOF para la Identificación

Separación mediante la relación masa/carga de las proteínas intactas de una bacteria o de un hongo.

Generación de un campoelectromagnético

Cámara de ionización

Analizador de tiempo de vuelo

Detector de partículas

Aplicaciones de MALDI-TOF en Microbiología

② Adquisición de datos

ID por MALDI

Reporte de Resultados

ID directa de la

muestra paciente

Bacterias aeróbicasBacterias anaeróbicasLevadurasHongos filamentososMicobacterias

Reporte de Resultados① Adquisición

de datosID por MALDI

Colonias

aisladas

Reporte de Resultados③ Adquisición

de datosSusceptibilidad

por MALDIReacciones

bioquímicas

Colonias

aisladas

Susceptibilidad Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Colonias

aisladas

CarbapenémicosCefalosporinas

Micro-dropplet AssayMBT- ASTRA

HemocultivosUrocultivos

Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Lipidómica

Cambio a ion (-)

Colonias aisladas Susceptibilidad a colistin

Cutibacterium acnesSalmonella sp

Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Tipificación bacteriana

Colonias

aisladas⑥

Identificación de bacterias aeróbicas, anaeróbicas y

levaduras por MALDI-TOF

Reporte de Resultados① Adquisición

de datosID por MALDI

Colonias

aisladas

Experiencia en la UC de MALDI-TOF en ID de bacterias aérobicas y anaeróbicas

MALDI-TOF en ID de bacterias aérobicas y anaeróbicas

El % de No ID se explica por el N°de espectros en la BD (Versión 3.0)Abril 2011

Actinobacillus suis por secuencia, Actinobacillus ureae por MALDI-TOF.Finegoldia magna por secuencia, Anaerococcus hidrogenalis por MALDI-TOF.

MALDI-TOF en ID de bacterias aérobicas y anaeróbicas

cepa Nº de

muestrasNo identificadas

(score<1.700)Discordancia

ID sólo a nivel de genero

ID a nivel de especie

C. parapsilosis 9 0 0 0 9 (100%)

C. glabrata 14 0 0 0 14 (100%)

C. tropicalis 7 0 0 0 7 (100%)

C. albicans 25 0 0 0 25 (100%)

C. lusitaniae 5 0 0 0 5 (100%)

C. krusei 7 0 0 0 7 (100%)

C. guillermondi 1 0 0 0 1 (100%)TOTAL 69 0 0 0 69 (100%)

Evaluación de 69 cepas de distintas especies de Candida identificadas previamente porAPI Levaduras.

La identificación por MALDI-TOF en especies de Candida constituye una herramienta útil.• Resultados exactos• Menor costo• Periodo de tiempo sustancialmente menor.

Identificación de especies de Candida por MALDI-TOF

Importancia en la UD de Candida auris por MALDI-TOF(FDA abril 2018)

Recomendaciones CDC (agosto 2018)

https://www.cdc.gov/fungal/diseases/candidiasis/pdf/Testing-algorithm-by-Method-temp.pdf

Resumen ID MALDI-TOF bacterias y levaduras

Ventajas

Mejora la exactitud en la ID de microorganismos (secuenciación)

Requiere sólo 1 colonia (no es necesario subcultivos)

Sensibilidad analítica: 100.000UFC/mL

↓Tiempo de identificación en 1,5 días

Base de datos pueden ser ampliados por el usuario (a > tamaño BD >tpo ID)

Costo/efectividad

Amplio espectro de ID de microorganismos (aerobios,

anaerobios, levaduras)

No genera desechos

Excelente reproducibilidad interlaboratorio

Otros usos

Limitaciones

Aprobación por la FDA según microorganismo

Bases de datos no son de libre acceso

Requiere colonias aisladas

Dificultades con colonias mucosas y desde algunos medios

Dificultad extracción de proteínas en Micobacterias y hongos filamentosos

10% de las cepas requiere repetición y/o extracción

Dificultad ID especies estrechamente relacionadas

Error en la carga del pocillo1/400 riesgo de inversión de la colonia en la

lámina

Dificultad en cultivos mixtos

Identificación de hongos filamentosos

por MALDI-TOF

Reporte de Resultados① Adquisición

de datosID por MALDI

Colonias

aisladas

J. Fungi 2019, 5(1), 4; https://doi.org/10.3390/jof5010004

Se evaluó un total de 64 aislados de hongos filamentosos• Aspergillus spp. (10) • Fusarium spp. (3)• Trichophyton spp. (3)• Rhizopus spp. (3) • Penicillium spp. (3)• Curvularia spicifera• Mucor velutinosus• Rhodotorula glutinis• Sarocladium strictum• Lichtheimia corymbifera• Pseudallescheria boydii• Sporothrix globosa • Sporothrix chilensis• Alternaria alternata• Epidermophyton floccosum• Coccidioides posadasii.

Vitek® MS identificó correctamente 59 (92,2%) cepas • 37 (57,8%) fueron identificadas a nivel de especie• 19 (29,7%) a nivel de complejo • 3 (4,7%) a nivel de género. En 5 casos (Aspergillus tritici, Penicillium canescens, Rhizopus delamar, Rhodotorula glutinis y Sporothrixchilensis), el equipo no entregó un resultado de identificación. No estaban incluida en la base de datos, excepto R. glutinis.

• Con el nuevo Mold Kit, el sistema Vitek® MS permitió una rápida y correcta identificación de la mayoría de los hongos filamentosos evaluados.

• Práctico y fácil de utilizar, pero ↑los costos. • El sistema permite identificar un amplio espectro de

hongos filamentosos en un laboratorio de microbiología clínica, lo que normalmente no es posible con técnicas tradicionales.

XXXV Congreso Chileno de Infectología Coquimbo, 21 al 24 de Noviembre de 2018

1. Principal limitación: falta de una librería estandarizada disponible. 2. Disponible una nueva librería MBT Filamentous Fungi MALDI Biotyper©: incluye 152

especies/grupos de hongos mejorando su capacidad de identificación incluyendo muestras desde medio de cultivo sólido.

MALDI-TOF en ID de hongos filamentosos 2019

Tipo de procesamiento

48 horas > 48 horasExtracción Medio

SólidoExtracción

Medio Líquido

N° muestras procesadas (%)

15/69 (21,7)28/69 (40,5)

4/69 (5,8)

40/69 (57,8)

N° muestras identificadas (%)

12/15 (80)

18/28 (64,3)

1/4 (25)

40/40 (100)

• MALDI-TOF mostró un buen rendimiento para la identificación de hongos filamentosos siendo capaz de identificar 68 de 69 muestras estudiadas.

• Solo una cepa no fue identificada por inexistencia de esta en la librería.• No hubo identificaciones incorrectas en esta serie.• La extracción desde medio líquido tuvo el mejor rendimiento observado.

P. Legarraga et al

2019: Librería V 3.0 (151 especies con 577 espectros) Mejora ID desde medio sólido

Identificación de bacterias micobacterias

por MALDI-TOF

Reporte de Resultados① Adquisición

de datosID por MALDI

Colonias

aisladas

May 2019 Volume 57 Issue 5 e01408-18 Journal of Clinical Microbiology

Evaluación MALDI-TOF en ID de micobacterias

Se analizaron 28 aislamientos de 9 especies:• Complejo M. tuberculosis (4) • Complejo M. avium/intracellulare (11) • Complejo M. abscessus/chelonae (4) • M. fortuitum (2)• M. gordonae (2) • M. mucogenicum (2) • M. neoaurum(1) • M. kansasii (1)• M. terrae (1)

• MALDI TOF permitió unaidentificación correcta en el 100%de las especies de micobacteriasestudiadas con excepción de M.avium/intracellulare en donde seobtuvo un 56% a nivel de especie,sin resultados discordantes.

• Esta metodología es rápida, fácil yde bajo costo respecto a losmétodos moleculares.

La identificación fue confirmada mediante hibridación reversa con sondas en tira por el Instituto de Salud Pública de Chile (19 cepas) y por el Colegio de Patólogos Americanos (9 cepas).

Utilidad en la detección de microorganismos directo de la muestra:

Hemocultivos Urocultivos

② Adquisición de datos

ID por MALDI

Reporte de Resultados

ID directa de la

muestra paciente

1 mL Sangre+ 200 uL

Buffer de lisis/saponina 0.5%

Descartar sobrenadante

Extracción con Acido fórmico/

AcetonitriloCentrifugación

Se carga 1uL del sobrenadante

Se agrega 1uL de la matriz ácido α-ciano-4-hidroxicinámico (HCCA)Se hace el análisis y se obtiene el espectro

2 minutos de centrifugación

10.000 rpm

Descartar sobrenadanteLavar con 1 ml solución de

lavado/1ml de Agua destilada

2 minutos de centrifugación

10.000 rpm

Evaluación MALDI-TOF en ID bacteriana desde Hemocultivos

Evaluación de ID directa de Hemocultivos (+)

Marzo 2012, se evaluaron 50 HC positivos conocidos.

Cepas estudiadas

Escherichia coliKlebsiella sppPseudomonas aeruginosaSalmonella sppStaphylococcus epidirmidisStaphylococcus haemolyticumStaphylococcus hominisEnterococcus faecalisActinobaculum schaalii

Rev Chilena Infectol 2015; 32 (4): 399-402

Entre el 1 de enero y 30 de junio de 2014, se estudiaron en paralelo 145 hemocultivos (+).

Evaluación de ID directa desde muestras de orina

Relación entre la concentración bacteriana en la orina (UFC/mL) y el rendimiento de MALDI-TOF MS en la ID bacteriana de uropatógenos

107UFC/mL

106UFC/mL

105UFC/mL

104UFC/mL

DeMarco M and Ford BClin Lab Med 2013;33:611-628

MALDI TOF ID microorganismos directamente desde orina, especialmente >100.000 ufc/mL.Un resultado positivo es altamente sugerente de ITU permitiendo el inicio precoz de la terapia.En el caso de polimicrobismo, MALDI TOF podría identificar al agente predominante

Utilidad de MALDI-TOF para el diagnóstico de infección urinaria desde muestras de orina

UTU es una patología frecuente en la práctica clínica. 3% de las muestras corresponden a polimicrobismo (≥3 o más microorganismos)→ repetición de la muestra con retraso en la entrega de resultados y ↑ costos.

Identificación convencional (número de casos)

% ID por MALDI % de Identificación por género / especie

Microorganismo único recuento >100 000 ufc/mL (100) 75% (75/100) 1,3% género98,7% especie

2 microorganismos (uno en recuento > 100 000 ufc/mL ) (9) 66% (6/9) 16%,género (1/6)84% especie (5/6)

3 o más microorganismos (10) 50% (5/10) 20% género (1/5)80% especie (4/5)

Microorganismo único recuento menor a 100 000 ufc/mL (6) 0/6

April 2019 Volume 57 Issue 4 e01678-18 Journal of Clinical Microbiology

Utilidad de MALDI-TOF en la detección de resistencia

Clinical Microbiology Reviews January 2019 Volume 32 Issue 1 e00037-18

Estrategias:1. Detección de modificación del antimicrobiano por enzimas bacterianas2. Semicuantificación del crecimiento bacteriano en presencia de algún antimicrobiano3. Análisis de cambios en el perfil de masa de la bacteria

Detección de modificación del antimicrobiano por enzimas bacterianas

(resistencia a carbapenémicos)

Reporte de Resultados③ Adquisición

de datosSusceptibilidad

por MALDIReacciones

bioquímicas

Colonias

aisladas

Carbapenémicos

Cefalosporinas

Requiere analizar moléculas <1.000 Da:

1.Diferente preparación de la muestra

2.Matriz → el AAM y la matriz deben tener distinta masa

para que no exista superposición de los espectros

MALDI-TOF : Detección de carbapenemasas

Análisis de los productos de degradación de los antibióticos

Carbapenémicos y su degradación por -lactamasas

Hidrólisis del puente amida del anillo lactámico

Se produce un cambio en la masa molecular del nuevo compuesto

Algunos lactámicos son decarboxilados después de la hidrólisis otro cambio en la masa molecular Hrabak et al, JCM 2011;49:3321-3324

Sparbier, Kostrzwa JCM 2012; 50:927-937

Meropenem intacto: 383 (+H matriz)= 384 DaImipenem intacto: 299,4 (+H matriz)= 300,4 DaErtapenem intacto: 475,5 (+H matriz)= 476,5 Da

Aumento de la masa en +18 Da (H2O)

Disminución de la masa en -44 Da (decarboxilación)

Considerar también los cambios de masas de las sales: sal monosódica, disódica, monopotásica, etc

MALDI-TOF Detección de carbapenemasas

A partir de colonias aisladas en agar MH o AS

Solución McFarland 3

En buffer tris-HCL 20 mM y NaCl 20mM a pH 7.0

Centrifugar1 ml

Resuspender en 50L de buffer (20mMTris-HCL y SDS 0.01%, pH 7.0 con 0.1 mM de

meropenem

Incubar 2 horas a 37°C Centrifugar a

14.000 g por 3 min

Mezclar 1l sobrenadante con 1L de la matriz

Matriz :

Dihidroxibenzoico (DHB) al 50% con etanol

Obtención de los espectros:•Molécula del lactámico•Sales de sodio•Productos de degradación

Análisis por espectrometría de masas y tiempo de vuelo

Hrabak et al, JCM 2012;50: 2441-2443

La medición debe hacerse inmediatamente después de que las muestras se sequen (<1h) por degradación del meropenem

Las moléculas son ionizadas por la acción del láser y los ácidos orgánicos de la matriz.

Clave el calibrador: Bradikinina PM 1059.6

Klebsiella pneumoniae cepa chilena KPC(+) UC

Pseudomonas aeruginosa VIM-2 (+)

405

Cepa sin CPM:Peak 405 y 383 muy discreto

383

Meropenem solo:Peak 405 y 383

Cepa PEEC CPM:Desaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y no 358

Cepa PSAE con CPM tipo VIM:Desaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y no 358

380

Klebsiella pneumoniae NDM (+)

Cepa sin CPM:Peak 405 y 383 muy discreto

Meropenem solo:Peak 405 y 383

405383

Cepa chilena KLPN con KPC:Desaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y no 358

380

KLPN con NDM: Desaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y no 358

KLPN con OXADesaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y no 358

Cepa sin CPM:Peak 405 y 383 muy discreto

Cepa sin CPM:Peak 405 y 383 muy discreto

KLPN con KPCDesaparece peak 405 y 383Aparece peak 380 y 358

Klebsiella pneumoniae OXA-48 (+)

380 405

Verificación de las espectrometría de masas MALDI-TOF para detección de carbapenemasas

Cepas Mecanismo de resistencia

MALDI-TOF

10 Klebsiella pneumoniae KPC +

1 Klebsiella pneumoniae NDM-1 +

1 Klebsiella pneumoniae OXA-48 +

1 Escherichia coli KPC +

1 Serratia marcescens SME +

1 Serratia marcescens IMP +

1 Pseudomonas fluorescens VIM-2 +

Total 100%

Verificación de las espectrometría de masas MALDI-TOF para detección de carbapenemasas

Peak (m/z) Carbapenemasa (+) Carbapenemasa (-)

405 No hay peak Aparece peak

383 No hay peak Aparece peak en meropenem intacto

380 Aparece peak No hay peak

358 No siempre aparece peak No hay peak

• MALDI-TOF es una excelente herramienta para detectar carbapenemasas,

utilizando buffer tris-HCL 20 mM, meropenem, dihidroxibenzoico al 50% con

etanol como matriz e incubación de 2 horas

• Cada laboratorio debe ajustar los procedimientos

• Importancia de la validación

MBT STAR-BL IVD Software Module y Kit STAR-Carba IVD (TAT: 1 hora)

Susceptibilidad Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Colonias

aisladas

Semicuantificación del crecimiento bacteriano en presencia de algún antimicrobiano

MALDI-Biotyper-Antibiotic Susceptibility Test Rapid Assay (MBT-ASTRA)

Katrin Sparbier , Sören Schubert b Markus Kostrzewa . MBT-ASTRA: A suitable tool for fast antibiotic susceptibility testing? Methods 104 (2016) 48–54

MALDI-Biotyper-Antibiotic Susceptibility Test Rapid Assay (MBT-ASTRA)

Medición semicuantitativa de la influencia de los antibióticos sobre el crecimientobacteriano, mediante el calculo y una normalización de los espectros en relación a unestándar y calcula AUC del microorganismo con y sin antibióticos.

La relación AUC desde cultivos con y sin AAM es el RG (Relative Growth) que cuantificael impacto del AAM sobre el crecimiento bacteriano

100% resultados concordantes para E coli y cefalosporinas con 2 horas de incubación.

Uso de MALDI-TOF para la evaluación de la susceptibilidad a drogas contra Mycobacterium tuberculosis. Experiencia inicial.

XXXV Congreso Chileno de Infectología, 2018Samuel Contreras, Francisco Vera, David Rodríguez, María Elvira Balcells, Luis Celis, Paulette Legarraga, Juan Carlos Román, Patricia García

Se obtuvo una medición semicuantitativadenominada intensidad relativa ( intensidadde los peaks bacterianos/ intensidad de unestándar).

Para determinar la inhibición de losantibióticos sobre el crecimiento bacteriano,se dividió la intensidad relativa del grupoincubado con isoniazida o rifampicina por laintensidad relativa del grupo sin drogas,obteniendo el crecimiento relativo (CR).

En condiciones de susceptibilidad aantibióticos los valores de CR son bajos yaumentan en casos de resistencia.

El punto de corte utilizado para comparar elcrecimiento relativo fue de 0.50 (literatura)significa que el crecimiento de una cepasusceptible en presencia del antibióticodisminuye en más de 50% del control sinantibiótico.

J Clin Microbiol 2017; 55:624 – 634

Susceptibilidad Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Colonias

aisladas

MALDI-TOF MS direct - on – target microdroplet growth assay (MALDI –TOF MS DOT-MGA)

MALDI-TOF MS direct - on – target microdroplet growth assay(MALDI –TOF MS DOT-MGA)

La identificación exitosa de especies (puntuación ≥1.7) se definió como una detección exitosa de crecimiento.La detección exitosa de crecimiento (puntuación ≥1.7) en una muestra con antibiótico define un aislado como resistente, mientras que si no hay detección de crecimiento (puntuación <1.7) en presencia del antibióticos define al aislado como susceptible

Idelevich EA, Sparbier K, Kostrzewa M, Becker K, Rapid detection of antibiotic resistance by MALDI-TOF mass spectrometry using a novel direct-on-target microdroplet growth assay, Clinical Microbiology and Infection (2017), doi: 10.1016/j.cmi.2017.10.016.

Test rápido fenotípico por MALDI-TOF MS direct - on – target microdroplet growth assay (MALDI –TOF MS DOT-MGA)

Accuracy of detection of carbapenem-non-

susceptibility in Klebsiella pneumoniae, n=24Accuracy of detection of carbapenem-non-

susceptibility in Pseudomonas aeruginosa, n=24

Idelevich EA, Sparbier K, Kostrzewa M, Becker K, Rapid detection of antibiotic resistance by MALDI-TOF mass spectrometry using a novel direct-on-target microdroplet growth assay, Clinical Microbiology and Infection (2017), doi: 10.1016/j.cmi.2017.10.016.

Test rápido fenotípico directo de hemocultivos por MALDI-TOF MS direct - on – target microdroplet growth assay

MALDI –TOF MS DOT-MGA

Idelevich EA, Storck LM, Sparbier K, Drews O, Kostrzewa M, Becker K. 2018. J Clin Microbiol 56:e00913-18

• 14 Enterobacterias NS a meropenem (4 ug/mL) y 14 susceptibles (2 ug/mL) 6/14carbapenemasas• Inoculación de botellas de HC con 10 UFC/mL y 4 métodos preanalíticos para comparar resultados.• Incubación 3-4 horas c/s meropenem (2 ug/mL)• Mejor resultado: Lisis-centrifugación• Es clave la estandarización del inóculo para la discriminación entre susceptibles y no susceptibles.

Análisis de cambios en el perfil de masa de la bacteria:

Detección de resistencia a colistin

Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Lipidómica

Cambio a ion (-)

Colonias aisladas

SCIENTIFIC REPORTS (2018) 8:16910 DOI:10.1038/s41598-018-35041-y

Requiere que la fuente de iones esté 20 kV en modo ion negativo

J Antimicrob Chemother. 2018 Dec 1;73(12):3359-3367. doi: 10.1093/jac/dky330.

Utilidad en la tipificación bacteriana

Adquisición de datos

Reporte de Resultados

Tipificación bacteriana

Colonias

aisladas⑥

Tipificación bacterianaSpinali, Belkum, Goering, Girard, Welkeret al. JCM 2015;53:760-765

• La tipificación bacteriana es clave para la comprensión de la epidemiología de infecciones comunitarias y asociadas a la atención de salud.

• El retraso en le utilización de MALDI se debe fundamentalmente a la falta de guías para la estandarización, validación e interpretación de los resultados.

Microorganismo Equipo y programa Utilidad

Streptococcusagalactiae

Ultraflex III (Bruker) ClinPro Tools 2.0

ST-17 clon relacionado a enfermedad neonatal por cambio de peak de 7,650 a 7,625 m/z

Streptococcuspyogenes

AB 4700Proteomic Analyzer(Applied Biosystems)

Diferencia dentro del mismo tipo emm cepas no invasoras de las que producen Fasceitis necrotizante

Streptococcuspneumoniae

AB 4700Proteomic Analyzer(Applied Biosystems)

Diferencia cepas que producen conjuntivitis de las no productoras de conjuntivitis

Staphylococcusaureus

Microflex LT benchtop(Bruker) ClinPro Tools 2.0

Diferencia MRSA delos 5 complejos clonales masimportantes definidos por MLST

Escherichia coli Autoflex III (Bruker) ClinPro Tools 2.0

Diferencia O157:H7 de otros no patogénicos

Salmonella spp Biotyper 3.0 (Bruker) Diferencia Salmonella enterica serovar Typhi de las no Typhi

Clostridium difficile Identifica exitosamente biotipos 001, 027 y 078/126

A. baumannii Vitek MS RUO Diferenciación en un brote cepas clonales de no clonales

L. pneumophila Autoflex III (Bruker) Diferenciación de cepas clonales en un brote

March 2015 Volume 53 Number 3

Gel-like overview of mass spectra of type III and type IA references strains

of P. acnes, cultured for 48 or 24 h with the possible subtype of type III.

Gel-like overview of mass spectra of type IB and type IC reference strains of P. acnes showing the potentially differentiating

9950 Da peak

Gel-like overview of mass spectra of types I, II and III P. acnes reference strains; zoom into

m/z region of differentiation

Importancia de la tipificación de C. acnes

En el último tiempo C. acnes juega un rol preponderante pero no aclarado en la génesis de la HNP y en las infecciones protésicas.

Estudios han mostrado que la diferenciación es importante:Tipo Ia se asocia a infecciones de piel Tipo Ib y IIa cavidad oral , que se asocia más significativamente a lesiones degenerativas del disco intervertebral.

Orthopaedics & Traumatology: Surgery & Research 103 (2017) 795–799

Resultados UC MALDI Microflex, Biotyper 3.0

Puede ser IB o IC

Puede ser IB o IC

Diferencia grupo IA, IB/IC, II y III

Importancia de la tipificación de C. acnes

• Utilizando el Microflex Systems con Biotyper 3.0 se pudo difereciar biotipos de Cutibacterium acnes en las cepas estudiadas.

Effect of Propionibacterium acnes(PA) injection on intervertebral disc degeneration in a rat model: Does it mimic modic changes? T.Zamora, J.Palma, M.Andia, P.Garcia, A.Wozniak, A.Solar, M.CamposOrthopaedics&Traumatology:Surgery&Research103(2017)795–799

Es necesario interpretar estos resultados con precaución en relación a los métodos moleculares de referencia (PFGE) porque:1.La proteómica interpreta presencia o ausencia de peak y su intensidad que está sujeta a errores en la expresión de las proteínas bacterianas.2.El efecto de la matriz es muy importante porque puede haber incorporación de analitos en los cristales de la matriz, que pueden modificar los resultados.

Experiencia uso de MALDI-TOF en Microbiología

1. Las aplicaciones de MALDI-TOF van mucho más allá de la identificación bacteriana.

2. Es una herramienta de gran utilidad

3. Exactitud en ID bacteriana

4. Bajo costo y excelente tiempo de respuesta

5. Trabajo en equipo de microbiológos con expertos en espectrometría de masas.

6. La validación de los métodos que no son ID debe ser realizada en forma exhaustiva, considerando calibradores, efecto de los medios de cultivo.

Agradecimientos

Dr. Rafael Araos

Autoridades Red de Salud UC

Dra. Paulette Legarraga

Dres. Francisco Vera y David Gutiérrez

TM Laboratorio de Microbiología

Samuel Contreras

Tamara González

Galénica

Becton Dickinson

bioMerieux