CONTROL DE CALIDAD DE DROGASVEGETALES

Universidad Nacional Mayor de San Marcos(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

Facultad de Farmacia y Bioquímica

Q.F. Bertha Jurado Teixeira

Lima – Perú

2014

Comercio: -drogas -preparados fitoterapéuticos

*Deben garantizar su control de calidad aplicando técnicas modernas y el uso de patrones adecuados.

Las Farmacopeas describen métodos de ensayos generales para evaluar o valorar las drogas oficiales.

IDENTIFICACIÓN Y CONTROL DE CALIDAD DE DROGAS

La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha recomendado: realización de monografías

implantación de normas o especificaciones de calidad, basadas en la experiencia de cada país, para aquellas drogas no incluídas en las Farmacopeas y que son ampliamente utilizadas en Medicina Tradicional.

Para evaluar o valorar las drogas es necesario identificarlas y determinar su calidad y pureza, lo cual se traduce en su valor intrínseco, o lo que es lo mismo, en la cantidad de principios activos presentes en ella.

CONTROL DE CALIDAD DE DROGAS VEGETALES

Mme

Plantas medicinales

Medicamento

Materia prima(Fórmula Magistral)

Dificultad en el control

de drogas y extractos

LLlos Los controles permiten…

• Asegurar la identidad de la droga • Comprobar su estado de conservación • Determinar la cantidad exacta de principios activos

• Detectar posibles adulteraciones y falsificaciones

Control de drogas

Control de drogas

Control de identidad-Determinación de sus características macroscópicas y microscópicas-Determinación cualitativa de sus principios activos

Control de calidad-Cuantificación de sus principios activos-Otras determinaciones cuantitativas-Determinación de su actividad farmacológica

Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona Corteza de Cinchona succirubra Corteza de Cinchona succirubra

•Control de identidad-Definición de la droga-Características morfológicas:• Macroscópicas• Microscópicas

-Determinación cualitativa de los principios activos•Análisis por CCF (patrones de referencia)

•Control de identidad-Definición de la droga-Características morfológicas:• Macroscópicas• Microscópicas

-Determinación cualitativa de los principios activos•Análisis por CCF (patrones de referencia)

C

Corteza de Cinchona succirubra

•Control de calidad-Determinaciones cuantitativas•Humedad•Cenizas totales•Elementos extraños

•Modo de conservación

Cinchona succirubra

Control de identidad

•Control botánico (Análisis morfológico)

-Análisis macroscópico-Análisis microscópico (histológico)•Detección de falsificaciones y adulteraciones

•Control químico

-Caracterización de sus principios activos•Detección de fraudes.

Términos relacionados con la identidad y calidad de las drogas

•Droga pura•Droga impurificada o contaminada•Droga adulterada•Droga falsificada(sustitución)•Droga fraudulenta

RECOMENDACIONES

•Natural. Inocuo.•Evitar mezclas complejas de plantas medicinales•Empleo de plantas medicinales con el conocimiento del especialista•Precaución con los preparados exóticos a base de plantas medicinales•Los canales irregulares de venta no ofrecen garantía de seguridad•Notificación de reacciones adversas

Selección de las muestras a evaluar

La adecuada selección de la muestra asegura la confiabilidad de resultado.Debido a las características específicas de las drogas, en especial su poca homogeneidad, es necesario procedimientos especiales de manipulación relacionados con la toma de muestras.

La toma de la muestra se debe realizar de la siguiente forma:1. Si el lote de la droga, está integrado por 5 ó menos sacos o paquetes, se inspeccionan todos. Si son más de 5 paquetes (entre 6 ó 50) se inspeccionan al azar 5 de ellos. Si fuera mayor de 50 paquetes, se escogerán aleatoriamente el 10% de ellos.

Una vez determinado el número de sacos o paquetes a inspeccionar, se tomará tres muestras de cada uno, (de la parte superior, media e inferior), mezclando bien todas las muestras para homogenizar mejor.La muestra mezclada se divide en cuatro partes, formando un cuadrado y se seleccionan las de dos lados opuestos, las cuales se vuelven a mezclar bien, repitiendo el proceso cuantas veces sea necesario, hasta obtener la cantidad de muestra para los ensayos. Esto se conoce como “Muestra Promedio”, y es representativa del lote a analizar. Si se observa deterioro en algún saco o paquete se analiza independientemente.Con la “Muestra Promedio” se realizan los ensayos de calidad, dentro de los cuales se encuentran: métodos de percepción, físico-químicos y químicos, que pueden llegar hasta aislamiento y purificación de p.a.

Determinación de materias extrañas

Se entiende por materias extrañas, aquellas partes de la droga que no corresponden a las exigencias que señala la monografía en cuanto a color, tamaño, estado y grado de pulverización, mezclas de otras partes de la planta o de otras plantas, polvo, arena, piedra y otras sustancias minerales.Las drogas deben estar libres de organismos patógenos y de microorganismos, insectos y cualquier otra contaminación animal, incluyendo excretas. No deben tener olores anormales, decoloraciones o algún signo de deterioro.Durante la cosecha de la droga, se deben remover las partículas de polvo, tierra, arena y después de la recolección las drogas pueden ser sometidas a lavado y desinfección.

El almacenamiento debe ser en lugares higiénicos para evitar la contaminación, teniendo un cuidado especial ante la presencia de hongos, porque pueden producir aflatoxinas.

Los límites para las materias extrañas, se establecen en las monografías o especificaciones de calidad de cada droga en particular.La presencia de cualquier otro contaminante, en especial animal o microbiano, o el no cumplimiento de los parámetros establecidos para la droga, hace que la misma sea declarada

No apta para el consumo.

Determinación de microorganismos

Las drogas normalmente transportan bacterias y tierra del suelo. Un gran número de bacterias y hongos de la naturaleza aparecen en la microflora de las drogas, siendo predominante las esporas aeróbicas.La práctica de cosechas, manipulación y producción son causas adicionales de contaminación y crecimiento microbiano.La presencia de aflatoxinas provocada por hongos se consideran contaminantes altamente peligrosos en una droga.Los límites establecidos para la contaminación microbiana están de acuerdo al uso que se le va ha dar al material y al material en si mismo.

a) Contaminación de “drogas crudas” que se emplearán

en procesos posteriores.Los límites son dados para drogas no tratadas,

cosechados bajo condiciones higiénicas aceptables. por gramo máximo Escherichia coli máximo 105 Tierra vegetalb) Drogas que serán pretratadas, (elaboración de

infusiones y decocciones), o se usarán en forma tópica.

por gramo máximo 107 bacterias aérobicas máximo 103 Sacharomycetes e Hyphomycetes máximo 102 Escherichia coli máximo 104 otras enterobacterias NO SALMONELLA

c) Drogas para uso interno

por gramo máximo 103 bacterias aeróbicas máximo 103Sacharomycetes e Hyphomycetes máximo 102 Escherichia coli máximo 103 otras enterobacterias NO SALMONELLA

Examen Visual e Inspección MicroscópicaLas drogas son categorizadas atendiendo a sus característicasorganolépticas, macroscópicas y microscópicas. Por esto la mayor información acerca de su identidad, pureza y calidad pueden darse de estas observaciones.

La inspección visual (características sensoriales y macroscópicas), es en base a la forma, tamaño, color, características superficiales, texturas y fracturas. Este no es un ensayo definitorio, ya que en caso de adulteraciones con otras drogas de características similares suelen llegarse a resultados erróneos y es necesario la aplicación de los métodos microscópicos y fisico-químicos para poder llegar a resultados concluyentes.

Evaluación microscópica de drogas es indispensable para identificación, incluso con ayuda de reactivos químicos para mayor información y visualización de los tejidos. Este ensayo aislado no es concluyente; pero utilizado en asociación con otros métodos analíticos ofrece un soporte valioso.

Evaluación macroscópica de las drogasPor conveniencia para su estudio, las drogas se agrupan de acuerdo a su clasificación morfológica en:órganos subterráneos: raíz, rizoma, bulboTallos: cortezas y leñosFloresFrutosSemillasComo primer aspecto antes de comenzar las descripciones macromorfológicas, se debe conocer para las drogas a evaluar la siguiente información.Nombre vulgar o vernáculoNombre científicoFamiliaUso tradicional o reconocidoPlanta endémica o aclimatada.Con ayuda de microscopio esteroscópico se realizará una monografía de las drogas crudas a evaluar.

Se toma en cuenta los siguientes puntos:A. Órganos subterráneos1. Tamaño (dimensiones en largo y diámetro).2. Color3. Olor 4. Forma y consistencia (rectos, torcidos, simples,

forma cilíndrica, cónica, ovoide etc.)5. Condición (fresca, seca, entera, cortada, privada de

algún tejido).6. Caracteres de la superficie (lisa, arrugada, estriada,

anillada, fisurada. Presencia o no de cicatrices y yemas). anillada, fisurada

7. Sección transversal (tamaño relativo de la corteza, del leño y de la médula).

8. Fractura (Describir como se rompe la pieza cuando se somete a presión; puede ser completa, incompleta, corta, fibrosa, dura, débil etc.)

9. Otras peculiaridades.

B. Cortezas y LeñosLa mayoría de los términos descriptivos aplicados a

los órganos subterráneos también pueden utilizarse paracortezas y leños. Pueden destacarse algunas

peculiaridadescomo:1. Forma de la pieza (curvada, aplanada, acanalada,

tubo simple, tubo doble, tubo compuesto).2. Superficie externa (cicatrices de hojas, presencia

de lenticelas, mohos, líquenes, etc.).3. Superficie interna (color, estriaciones, surcos,

etc.).C. HojasPara describir las hojas podemos guiarnos por las

siguientescaracterísticas:1. Forma (pueden clasificarse tomando en cuenta el

peciolo, lámina, base, ápice, bordes y nervadura).2. Textura (membranosa, coriácea, frágil, suculenta).3. Superficie (glabra o pubescente).4. Color

5. Olor6. Dimensiones (largo y ancho)7. Condición (fresca, seca, completa, rota)8. Peculiariedades (presencia de glándulas,

puntuaciones,pelos, etc.).D. FloresSe tiene en cuenta las siguientes características:1. Estado de desarrollo2. Condición (fresca, seca, completa o parte de ella).3. Color4. Olor5. Peculiaridades (aspectos morfológicos más

sobresalientes como: tipo de inflorescencia, tipo de cáliz, tipo de pétalos, número de estos, tipo de ovario, estambres, etc.).

E. FrutosAl hacer el estudio macroscópico del fruto deben definirseque tipo y/o que parte del mismo constituye la droga.Las características más importantes son:1. Pericarpio (color, textura, uniforme o modificado)2. Dehiscencia3. Forma4. Dimensiones5. Color6. Olor7. Marcas externas o peculiares.F. SemillasLas características más importantes son:1. Caracteres físicos (forma, dimensión, dureza y peso, etc.).2. Color3. Olor4. Peculiariedades.

Determinación de cenizasLas cenizas son el residuo que queda después de la igniciónde una droga y se determina por tres métodos diferentes:

Cenizas totalesCenizas ácido-insolubles Cenizas solubles en agua.

Las cenizas totales permiten determinar la cantidad dematerial remanente después de la ignición: “cenizas fisiológicas, derivados de los tejidos de la planta y “cenizasno fisiológicas, que son el residuo después de la ignición de la materia extraña (polvo, arena, tierra, etc.) adherida a la superficie de la droga.

Se determina la masa de no menos de 2.0 g ni más de 3.0 g de la porción de ensayo pulverizada y tamizada con una desviación permisible de 0.5 mg en un crisol de porcelana o platino (en dependencia de la sustancia analizada) previamente tarada

- Incinerar en un horno mufla a una temperatura de 700 a a 750 °C (sino señala otra temperatura en la norma específica) durante 2 horas.

- Enfriar el crisol en una desecadora y se pesa.

- Se repite el proceso hasta que dos pesadas sucesivas no difieran en más de 0.5 mg (masa constante) en intervalos de 30 minutos entre calentamiento y pesada.

Residuo con trazas de carbón se le añade gotas de solución de peróxido de hidrógeno concentrado, ácido nítrico o solución de nitrato de amonio al 10% m/v y se calienta hasta evaporar los solventes. Al enfriar el crisol el residuo es de color blanco o casi blanco.

Las cenizas ácido-insolubles son los residuos después de la ebullición de las cenizas totales con ácido clorhídrico diluido.Esta determinación mide la presencia de sílice, especialmente de arena y tierra silícea.

Las cenizas insolubles en agua son calculadas por diferencia en peso entre las cenizas totales y el residuo remanente después del tratamiento de las cenizas totales con agua.

Cuando los valores obtenidos para las cenizas totales sonelevados (>5%), es necesario conocer si las mismas están compuestas por metales pesados, lo cual se determinamediante los ensayos de cenizas insolubles, y si esteresultado es elevado hay que someter la droga a otrosanálisis antes de aprobar su uso.

Determinación de arsénico y metales pesados

La presencia de arsénico y metales pesados en las drogas puede deberse a muchas causas, entre las cuales se citanla contaminación ambiental y los residuos de pesticidas.

La contaminación con trazas de arsénico se debe principalmente al tratamiento de las plantas con ciertos pesticidas, estando los límites permisibles en términos de ug de arsénico por gramo de droga.

Para cadmio y plomo, se atribuye su presencia a la contaminación de los suelos por desechos industriales, las cantidades máximas permitidas están en el orden de 10 ppm y 0.3 ppm, respectivamente.

Determinación de agua (humedad residual)

El exceso de agua en una droga puede provocar el crecimientomicrobiano, la presencia de hongos o insectos y el deterioro, seguido de la hidrólisis de los principios activos.

Este ensayo es sumamente importante para aquellas drogasque absorben humedad fácilmente o se deterioran rápidamente en presencia de agua.

Los límites de agua establecidos en la Farmacopea para lasdrogas, oscila entre un 8 y 14% con pocas excepciones, correspondiendo los valores más altos de humedad a la corteza, tallos y raíces.

La humedad residual o límite para la cantidad de agua, puede ser establecido mediante el estudio del secado de la droga.

Para la determinación de la humedad se pueden emplear dosmétodos:

Método azeotrópico: se puede obtener de forma directa la cantidad

de agua presente en la droga cuando esta es destilada junto conun solvente inmiscible tal como tolueno o xileno.Si el solvente es anhidro, el agua puede ser absorbida por el solventey el resultado sería falso, por lo que se recomienda saturar el solventecon agua antes de usarlo.

Pérdida por desecación: determina el agua y las sustancias volátiles ya que el método plantea el calentamiento de la droga a 100 –105°C ó en una desecadora sobre pentóxido de fósforo a presión atmosférica o reducida a temperatura ambiente por un período de tiempo específico para cada droga.Este método no es recomendable cuando la planta contiene aceites esenciales u otras sustancias volátiles, para evitar el error que introducirían, en el resultado final.

Determinación de sustancias extraíbles

Se basa en la extracción de las sustancias solubles en agua,alcohol o mezclas hidroalcohólicas mediante maceración y evaporación hasta sequedad de una alícuota del extracto.

Este método determina la cantidad de principios activos en una cantidad dada de droga, extraíble con un solvente. Se emplea para aquellas drogas en las cuales no se dispone de un método de ensayo químico o biológico aprobado, para determinar su composición química cuantitativa.Los resultados se aproximan hasta las décimas.

Determinación del índice de amargor

Muchas drogas empleadas como medicinales presentan un fuerte sabor amargo; lo cual es utilizado en terapéutica como estimulante del apetito.

Los principios amargos estimulan las secreciones del tracto gastrointestinal y en particular del jugo gástrico.

Las sustancias amargas pueden ser determinadas químicamente, pero al estar compuestos por 2 o más constituyentes con diferentes grados de amargor, es necesario en primer lugar medir el total de amargor empleando un método biológico.

La sensibilidad del amargor varía de persona a persona y en una misma persona puede variar en diferentes momentos (después de fumar, ingerir alimentos de sabor fuerte, etc.)La sensación de amargor debe ensayarse en la parte superior de la lengua, en las partes laterales de la boca y en la parte inferior o base de la lengua.

Las propiedades amargas de una droga son determinadas, el valor de amargor es expresado en términos de unidades equivalentes a la solución diluída de quinina que contiene 1 g en 2000 mL

Para llevar a cabo este ensayo, el catador debe comenzarprobando la concentración menor de la muestra de ensayo y transcurrido un período corto de tiempo (15 minutos), después de haberse enjuagado la boca con agua potable, debe compararel amargor contra la concentración menor de la sustancia de Referencia (hidrocloruro de quinina).

Como vehículo para la extracción de la droga se emplean generalmente agua potable, la cual se utiliza también en el lavado bucal después de cada ensayo.Si la persona no es capaz de apreciar la sensación amarga de la concentración menor 10,058 mg de la solución de quinina no es apta para esta determinación.

Determinación del índice de espuma

Este ensayo se realiza con la finalidad de establecerla capacidad que presentan algunas drogas de formarespuma persistente cuando una decocción o solución acuosa se agita vigorosamente en un corto período de tiempo.

Este ensayo es característico de compuestos como saponinas o de otros que debido a sus característicasestructurales son capaces de disminuir la tensión superficial del agua.

Determinación de la actividad hemolítica

Muchas drogas pertenecientes a diferentes familias comoAraliaceae, Sapindaceae, Dioscoreaceae contienen saponinas.La propiedad más característica de estos compuestos es la hemolítica, por la que producen lisis de los glóbulos rojos.

La actividad hemolítica de una droga o de un preparado que contiene saponinas, se determina por comparación con un material de referencia o saponina R, la cual tiene una actividadhemolítica de 1000 unidades por gramos. Una suspensión de glóbulos rojos se mezcla con igual volumen de una dilución seriada de la droga y se determina la menor concentración queproduce un efecto completo de hemólisis. Este ensayo se llevaa cabo simultáneamente con el patrón de referencia.

Para obtener buenos resultados es necesario estandarizar las condiciones experimentales.