Control Nematodos

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    Manejo de nemtodos fitoparasticos utilizando productosnaturales y biolgicos

    por

    Rosimar Morales Mallery

    Tesis sometida en cumplimiento parcial de los requisitos para el grado de

    Maestro en Cienciasen

    Proteccin de Cultivos

    UNIVERSIDAD DE PUERTO RICO

    RECINTO UNIVERSITARIO DE MAYAGEZ2006Aprobado por:

    ________________________________Lydia I. Rivera Vargas, Ph.D.Miembro, Comit Graduado

    __________________Fecha

    ________________________________Ral E. Macchiavelli, Ph.D.Miembro, Comit Graduado

    __________________Fecha

    ________________________________Roberto Vargas Ayala, Ph.D.Presidente, Comit Graduado

    __________________Fecha

    ________________________________Fernando J. Bird, Ph.D.Representante de Estudios Graduados

    __________________Fecha

    ________________________________Miguel Muoz, Ph.D.Director Departamento

    __________________Fecha

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    ABSTRACTThis study is intended to evaluate different non-chemical agricultural practices such

    as organic amendments, biocontrol fungi and antagonist legumes in the control of plant

    parasitic nematodes. Greenhouse and field trials were conducted at the Alzamora Farm,

    UPR-Mayagez and at the Agricultural Experiment Substation of Isabela and Corozal. At

    field trials, Paecilomyces lilacinus, a mycorrizal mixture, and chitin intercropped with

    Canavalia ensiformis were assessed.

    Plant parasitic nematode populations were reduced with the application fo the fugusP. lilacinus and chitin plots planted with the antagonist legume, Canavalia, when compared

    to the chemical treatment. However, non-significant differences were observed among these

    treatments (>0.05). These results indicate that the use of biological products associated with

    Canavalia as intercrop is a feasible alternative for the control of plantain parasitic nematodes

    as an effective tool to reduce the use of chemical products in agricultural lands.

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    RESUMEN

    Este estudio pretende evaluar diferentes prcticas agrcolas no-qumicas tales como

    enmiendas orgnicas, hongos biocontroladores y leguminosas antagonistas para el control de

    nemtodos fitoparasticos. Se realizaron ensayos de invernadero y campo en la Finca

    Alzamora de Mayagez y las Subestaciones Experimentales Agrcolas de Isabela y Corozal.

    En campo se utiliz el hongo Paecilomyces lilacinus, una mezcla de micorrizas, quitina y

    Canavalia ensiformis como leguminosa intercalada.

    Las poblaciones de los nemtodos fitoparasticos disminuyeron al aplicar el hongo P.

    lilacinus y la quitina a parcelas sembradas con la leguminosa antagonista, Canavalia y el

    pltano, esto comparado con al tratamiento qumico. Sin embargo, no se observaron

    diferencias significativas (=0.05) entre estos tratamientos. Los resultados indican que el uso

    de productos biolgicos asociados a Canavalia intercalada con el pltano es una alternativa

    viable para el control de los nemtodos fitoparasticos, esto es una herramienta efectiva para

    el control de nemtodos reduciendo la utilizacin de productos qumicos en predios

    agrcolas.

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    DEDICATORIAEl haber logrado este sueo es un momento muy especial en mi vida y no hubiera

    sido posible sin la ayuda de Dios y de algunos angelitos. A ellos y a mi familia les dedico

    este trabajo.

    Mami (Wanda Mallery) gracias por todos los sacrificios que has hecho para ayudarme

    a alcanzar mis sueos; porque desde el momento en que me permitiste nacer has forjado mi

    camino, vivo orgullosa de ti y la nica manera que conozco de agradecrtela es la que t me

    has enseado, alcanzar mis metas y con buenas calificaciones, as que te entrego mi trabajo y

    una vez ms te doy las gracias.

    Wandalith Rivera y Amilcar Marcano, hermana gracias por siempre cuidarme y

    brindarme tu cario que ha sido de mucha importancia en momentos difciles; a ti cuado te

    sorprenders pero yo te debo muchas cosas, gracias por tu apoyo incondicional con mi

    familia. A ambos les agradezco por mi princesa, Andrea Fernanda Marcano, mi nia

    preciosa, a ti te dedico este trabajo por ser la luz de mis ojos, porque con tu sonrisa llenabas

    mi vida de felicidad y en los momentos ms difciles tu recuerdo me daba las fuerzas para

    continuar y todos los sbados donde me abrazabas y me decas titi te amo era lo que me

    impulsaba a continuar mi trabajo.

    Roberto I. Muiz, Juan Carlos Lpez y Luis Antonio Daz (abuelo) gracias a los tres

    porque su apoyo, consejos y amor siempre han sido incondicional.

    Con todo mi cario y amor

    Rosimar Morales

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    AGRADECIMIENTOSHay que ser realista, fueron muchos los tropiezos para terminar mi grado de maestra.

    Sin embargo, estos fueron mermando al recibir la colaboracin y gran ayuda de muchas

    personas que llevare siempre en mi corazn. Deseo expresarles mis ms sinceros

    agradecimientos a:

    Dr. Roberto Vargas Ayala primero que nada por confiar en m y aceptar ser mi

    profesor consejero, por su apoyo, consejos y recomendaciones que me han servido a ser

    mejor persona y crecer como investigadora.

    Dra. Lydia I. Rivera Vargas y Dr. Ral E. Macchiavelli, por sus comentarios y

    sugerencias en la realizacin de este trabajo.

    Agro. Luz Mara Ramrez por toda la colaboracin y consejos brindados en este

    trabajo.

    Sra. Mara Pagn y Sra. Jeannette Morales por toda la ayuda que me brindaron en

    estos aos, sus consejos y la sonrisa que siempre me regalaban.

    A todo el personal de la Subestacin Experimental Agrcola de Corozal, por todo el

    trabajo de campo realizado, en especial Sr. Ral Jimnez y Agro. Juan Ortz.

    A mis amigos Carmen I. Rivera, Dianne Ortz, Yazmn Rivera, Merari Feliciano,

    Ismael Badillo y a todos mis otros amigos por siempre estar cuando ms los necesitaba.

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    Tabla de Contenido

    ABSTRACT.........................................................................................................................................................II

    RESUMEN ........................................................................................................................................................III

    DEDICATORIA............................................................................................................................................... IV

    AGRADECIMIENTOS.....................................................................................................................................V

    TABLA DE CONTENIDO............................................................................................................................... VI

    LISTA DE TABLAS.........................................................................................................................................VII

    LISTA DE FIGURAS..................................................................................................................................... VIII

    1 INTRODUCCIN ....................................................................................................................................2

    2 REVISINDELITERATURA................................................................................................................63 METODOLOGA....................................................................................................................................19

    3.1 EXPERIMENTOENINVERNADERO.....................................................................................................193.1.1 Primerensayo:Productosbiolgicoscomerciales................................................................193.1.2 Segundoensayo:EnmiendasOrgnicas .................................................................................233.1.3 Tercerensayo:Productosbiolgicoscomercialesmssiembradecanavalia ..................24

    3.2 EXPERIMENTODECAMPO ................................................................................................................263.2.1 Primerensayo:Productosbiolgicomssiembrade canavaliaenIsabela ....................263.2.2 Segundoensayo:ProductosbiolgicosmssiembradecanavaliaenCorozal................28

    3.3 POBLACINDENEMTODOS ...........................................................................................................313.4 PARMETROSEVALUADOSENLAPLANTA...323.5

    ANLISIS

    ESTADSTICO .....................................................................................................................32

    4 RESULTADOS ........................................................................................................................................33

    4.1 ENSAYOSDEINVERNADERO .............................................................................................................334.1.1 Evaluacinproductosbiolgicos(tomate)............................................................................334.1.2 Evaluacindeenmiendas(pltano)........................................................................................334.1.3 Evaluacindeproductosbiolgicoscomercialesmssiembradecanavalia...................414.1.4 Parmetrosagronmicos..........................................................................................................46

    4.2 ENSAYOSDECAMPO.........................................................................................................................504.2.1 Productosbiolgicosmssiembrade canavaliaenIsabela..............................................504.2.2 ProductosbiolgicosmssiembradecanavaliaenCorozal..............................................564.2.3 Parmetrosagrnomicos..........................................................................................................62

    5 DISCUSIN ...........................................................................................................................................656 ConclusionesyRecomendaciones.......737 LITERATURACITADA ........................................................................................................................74

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    Lista de Tablas

    Tablas Pgina

    Tabla 4.1 Efecto de la aplicacin de enmiendas orgnicas sobre el ndice poblacional denemtodos fitoparasticos............................39

    Tabla 4.2 Efecto de Canavalia ensiformis como cultivo intercalado, Paecilomyces lilacinus,quitina y un tratamiento qumico sobre el ndice poblacional de nemtodosfitoparasticos..45

    Tabla 4.3 Altura, peso de follaje, peso de races y nmero de nodulacin del tomate en elensayo para evaluar productos biolgicos comerciales...47

    Tabla 4.4 Altura, nmero de hojas y peso de races de pltano en el ensayo para evaluarenmiendas orgnicas aplicadas al suelo como componentes agronmicos. ................... 48

    Tabla 4.5 Parmetros utilizados para evaluar el efecto de diferentes prcticas biolgicasaplicadas al suelo en pltano en un ensayo de invernadero....49Tabla 4.6 Efecto de Canavalia ensiformis como cultivo intercalado, Paecilomyces lilacinus,

    micorrizas y producto qumico sobre el ndice poblacional de nemtodosfitoparasticos. ................................................................................................................. 54

    Tabla 4.7 Efecto de Canavalia ensiformis como cultivo intercalado, Paecilomyces lilacinus,quitina y un tratamiento qumico sobre el ndice poblacional de nemtodosfitoparasticos..60

    Tabla 4.8 Datos agronmicos del pltano en el ensayo para evaluar prcticas biolgicasaplicadas al suelo en la evaluacin de rendimiento en Isabela. ...................................... 63

    Tabla 4.9 Datos agronmicos del pltano evaluados en el ensayo de prcticas biolgicas

    aplicadas al suelo en Corozal.....64

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    ListadeFigurasFiguras PginaFigura 2.1 Mtodo de manejo de nemtodos, recomendado por la Estacin Experimental

    Agrcola en Puerto Rico para el cultivo de pltano....7Figura 3.1 Finca Alzamora UPR Recinto de Mayagez, Puerto Rico ..20Figura 3.2 Sub-estacin Experimental Agrcola de Isabela, Puerto Rico..26Figura 3.3 Sub-estacin Experimental Agrcola de Isabela, Puerto Rico......29Figura 4.1 Nmero de ndulos en tomate ocasionado porMeloidogyne spp. en invernadero

    experimentos de invernadero utilizando productos biolgico.... 31Figura 4.2 ndice poblacional deRadopholus sp. en ensayo de enmiendas al pltano en

    invernadero.................................................................................................................. 34Figura 4.3 ndice poblacional de Pratylenchus sp. en ensayo de enmiendas al pltano en

    invernadero.. 35Figura 4.4 ndice poblacional deMeloidogyne sp. en ensayo de enmiendas al pltano en el

    invernadero ..... 37Figura 4.5. ndice poblacional deRadopholus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Invernadero. . . 40Figura 4.6. ndice poblacional de Pratylenchus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Invernadero. .. 41Figura 4.7. ndice poblacional deMeloidogyne sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Invernadero. .... 42Figura 4.8. ndice poblacional deRadopholus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Isabela.. ... 50Figura 4.9. ndice poblacional de Pratylenchus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Isabela.. 51Figura 4.10. ndice poblacional deMeloidogyne sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Isabela.. 52Figura 4.11. ndice poblacional deRadopholus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Corozal. ....56Figura 4.12. ndice poblacional de Pratylenchus sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Corozal 57Figura 4.13. ndice poblacional deMeloidogyne sp. en pltano influenciado por prcticas

    agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en Corozal .58Figura 5.1 Modelo sugerido para la produccin del pltano...70

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    1 INTRODUCCIN

    En Puerto Rico el cultivo del pltano (Musa acuminata X Musa balbissiana)

    constituye el producto farinceo de mayor importancia econmica. Segn datos del

    Departamento de Agricultura (2004-2005) esta farincea aport al ingreso bruto anual cerca

    de $62 millones al producirse unos 358 millones de frutas de pltano. El pltano ocupa el

    tercer lugar en el orden de importancia econmica en Puerto Rico y se estima que el rea

    sembrada en Puerto Rico alcanza, las 10 mil hectreas (Departamento de Agricultura 2003-

    2004).

    El pltano se cultiva a travs de toda la isla, pero la mayor parte de la produccin se

    encuentra en la regin montaosa que incluye los pueblos de Corozal, Naranjito y Comero,

    entre otros. Es calificado como alimento bsico de millones de personas en los pases

    tropicales ya que aporta gran parte de los requerimientos nutricionales como carbohidratos,

    fibras, vitaminas (A, B6 y C) y minerales tales como potasio, fsforo y calcio.

    La produccin del pltano se ve afectada mayormente por los daos que ocasionan

    diversas plagas y enfermedades. Entre las plagas de importancia econmica se encuentra, el

    picudo del pltano (Cosmopolites sordidus Germar) y los nemtodos fitoparasticos. Entre las

    enfermedades, causadas por hongos la Sigatoka amarilla y negra ocasionadas por

    Mycosphaerella musicola Leach (Oramas y Romn, 1982) y M. fijensis, respectivamente.Entre los nemtodos de importancia en Puerto Rico se distinguen, el nemtodo barrenador

    del pltano, Radopholus similis (Cobb) Thorne, el nemtodo lesionador de races,

    Pratylenchus coffeae (Zimmeramann) Filip y Chitwood y el nemtodo nodulador,

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    Meloidogyne incognita (Chitwood). Otras especies mencionadas son Helicotylenchus

    multicinctus (Cobb) yRotylenchus reniformis, Lindford y Oliveira (Romn, 1986).

    En muchos pases productores de pltano las altas poblaciones de nemtodos y la

    incidencia de enfermedades ocasionan prdidas considerables a los agricultores (Sarah et al.,

    1996; Stover, 1972). Sasser y Freckman (1987) estiman que el promedio anual en prdidas

    de produccin debido a daos por nemtodos en pltano es de 19.7%. Las prcticas

    recomendadas para eliminar o disminuir las poblaciones de nemtodos en los predios

    agrcolas estn basadas en la utilizacin de mtodos qumicos, fsicos, genticos, culturales y

    biolgicos. Sin embargo, tradicionalmente los agricultores utilizan el control qumico o

    nematicidas como la nica opcin, ya que su efecto es rpido y eficaz. El uso de nematicidas

    qumicos es considerado una excelente alternativa para el control de nemtodos

    fitoparasticos en el cultivo del pltano en Puerto Rico. Aplicaciones bien dirigidas han

    permitido lograr incrementos significativos en el crecimiento y la produccin (Gowen, 1995;

    Araya y Cheves, 1997). Los nematicidas qumicos registrados en Puerto Rico y que el

    agricultor tiene a disposicin son el oxamyl (Vydate L.), ethoprop (Mocap 10G) y

    fenamiphos (Nemacur 15G); siendo estos distribuidos por tres Empresas de Productos

    Agrcolas (Agro Servicios, Ochoa Fertilizer y Ral Maldonado y Co.). El costo de estos

    productos en la actualidad vara entre los 70 y 80 dlares. En la utilizacin de nematicidas el

    agricultor gasta aproximadamente $220.00 por cuerda ($564.00 por hectrea), lo cual

    representa un 17% de los gastos de la finca en la regin semirida (Annimo, 1995). Por otro

    lado, los nematicidas han sido asociados con daos a la salud y al ambiente (Thomason,

    1987). Estos enfrentan varios cuestionamientos ambientales, representando una amenaza para

    el agroecosistema.

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    Debido a los inconvenientes que tiene el uso de productos qumicos como estrategia

    de control en pltano, es importante desarrollar un programa de control enfocado a una

    agricultura sustentable y de esta manera contribuir a la conservacin del ambiente. El control

    biolgico se presenta como una alternativa potencial y libre de riesgo frente a los numerosos

    y crecientes problemas derivados del uso de plaguicidas. Sin embargo, los efectos adversos

    de los plaguicidas, han provocado que actualmente el control biolgico se reconozca como

    una de las reas principales de investigacin.

    En una revisin realizada por la autora, desde el 1972 en la Universidad de Puerto

    Rico, Recinto Universitario de Mayagez, se han publicado sobre 60 estudios relacionados al

    control biolgico de plagas, de los cuales 25 de ellos son relacionados al control de

    nemtodos. La informacin de estos estudios ha sido publicada por distintos investigadores

    de la universidad en el Journal of Agriculture of the University of Puerto Rico. En los

    ltimos aos se han realizado alrededor de cuarenta (40) tesis de maestra cuya investigacin

    se refiere al uso de organismos para el control de plagas, quince (15) de estas tesis son en el

    rea del control de nemtodos.

    Es importante sealar que para utilizar un producto biolgico se requiere de un

    permiso, ya que se debe cumplir con ciertas restricciones para salvaguardar los riesgos al ser

    humano y al medio ambiente. Estos productos son regulados por la Agencia de Proteccin

    Ambiental, EPA por sus siglas en ingls.Las prdidas econmicas que generan los nemtodos fitoparasticos al pltano, justifican

    la continua bsqueda de nuevas alternativas de control para mejorar su productividad. Por

    esta razn, se dise este estudio dirigido a la evaluacin de algunos productos comerciales,

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    a base de organismos como hongos, nemtodos beneficiosos, enmiendas y leguminosas

    antagonistas de nemtodos fitoparasticos. Nuestro inters es encontrar una alternativa de

    control efectivo y viable que permita minimizar el uso de productos qumicos.

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    2 REVISINDELITERATURALos nemtodos fitoparasticos han sido reconocidos como una plaga que ocasiona

    daos y prdidas econmicas en los cultivos. En la zona caribea, el nemtodo

    barrenadorRadopholus similis, es considerado el ms daino al pltano, ocasionando

    lesiones y pudricin de las races, generalmente llamada cabeza negra. Como resultado se

    afecta la absorcin de agua y nutrientes en la planta. Stover (1972) menciona adems los

    gneros: Pratylenchus, Meloidogyne yHelicotylenchus como parsitos importantes de las

    races del pltano. Romn (1986) incluye a Rotylenchulus reniformis entre las especies

    dainas a la produccin de bananos. Otros sntomas causados por nemtodos son:

    enanismo, nodulacin, amarillamiento, volcamiento de las plantas y reduccin en el

    rendimiento.

    Actualmente, la alternativa de control ms comnmente utilizada es el uso de

    productos qumicos. Se han realizado varios estudios para observar la eficacia de estos

    productos. Romn et al. (1976) evaluaron la eficacia de varios nematicidas en el control

    de nemtodos en pltano. Ellos encontraron que los nematicidas fenamiphos, carbofuran,

    oxamyl, alicarb y ethoprop, protegen las plantas del ataque del nemtodo o evitan la

    reduccin en el rendimiento si son utilizados adecuadamente. Estos resultados fueron

    corroborados por Chavarra e Irizarry (1997) quienes reportaron resultados similares a

    dosis ms bajas que las recomendadas en la etiqueta, a intervalos de cuatro meses. En

    Puerto Rico, la Estacin Experimental Agrcola recomienda al productor del pltano

    realizar aplicaciones de nematicidas dos veces, al momento de siembra y otra aplicacin a

    los seis meses (Annimo, 1995), junto a fertilizantes qumicos (Figura 2.1).

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    El uso de nematicidas qumicos ha ido mermando a consecuencia de la

    preocupacin de los agricultores y la sociedad, por los riesgos que stos han ocasionado

    al ambiente y a la salud. Atendiendo estas preocupaciones han surgido estudios y nuevas

    estrategias para el manejo de organismos patgenos del suelo. Muchas de estas prcticas

    de manejo envuelven el uso de rotacin de cultivo, cultivo intercalado, labranza mnima o

    cero labranza, uso de variedades resistentes, seleccin de semillas, organismos

    antagonistas, enmiendas orgnicas y otras prcticas de conservacin de suelos. Estas

    prcticas han sido utilizadas por los agricultores y actualmente se incluyen en todo

    programa de manejo integrado y agricultura sustentable. En la pasada dcada, el trminoagricultura sustentable se defini utilizando los conceptos de produccin, manteniendo la

    preservacin de la calidad del ambiente, conservando los recursos naturales y la

    diversidad biolgica (McSorley y Porazinska, 2001). Para que la productividad de un

    agroecosistema se sostenga indefinidamente deben considerarse varias medidas. En

    muchos casos, el elemento ms limitante es determinar la futura sustentabilidad del

    sistema. Adems, establecer el contexto en el cual se deben tomar decisiones sobre el

    manejo de nemtodos (McSorley y Porazinska, 2001).

    La controversia surgida por el uso indiscriminado de nematicidas y la creciente

    concienciacin por el uso de las prcticas de agricultura sustentable, ha ocasionado un

    aumento en la reflexin de la sociedad lanzando un reto a los investigadores a buscar una

    solucin a este problema. El control biolgico es una alternativa de manejo de

    poblaciones de nemtodos a travs de mecanismos tales como parasitismo, depredacin,

    competencia y antibiosis. Estos tipos de antagonismo son definidos por Cook y Baker

    (1983) de la siguiente forma: (a) antibiosis como la inhibicin o destruccin de un

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    organismo por un producto metablico de otro; (b) competencia como el esfuerzo de dos

    o ms organismos a obtener el rea o los nutrientes necesarios para desarrollarse; y (c)

    parasitismo o depredacin, donde un organismo se alimenta o vive a expensas de otro.

    En el suelo pueden encontrarse muchos organismos antagonistas a nemtodos, de los que

    se mencionan hongos, bacterias, nemtodos depredadores, protozoarios, parsitos,

    viroides y virus (Jatala, 1986). Los mtodos que se utilizan en el control biolgico se

    puede dividir en forma general en dos grupos: a) directo, donde los antagonistas se

    puedan introducir directamente sobre o dentro del tejido de la planta, b) indirecto, donde

    las condiciones del cultivo, suelo o ambiente puedan modificar la actividad de losantagonistas que ocurren naturalmente (Cook y Baker, 1983).

    El control biolgico es un mtodo que ofrece ciertas ventajas al agricultor sobre

    otras prcticas que normalmente utilizan. El agente biocontrolador podra persistir por un

    largo perodo de tiempo y resurgir cuando la plaga aparezca nuevamente. El control

    biolgico de los nemtodos fitoparasticos, resulta un aporte importante al manejo de

    poblaciones ya que estos abundan en predios agrcolas y su erradicacin es imposible.

    La aplicacin de materia orgnica, como una alternativa de control de nemtodos

    fitoparasticos, es una prctica agronmica que se ha utilizado por muchos aos en

    cultivos de importancia econmica. Se considera una enmienda orgnica a todo aquel

    material que se aade al suelo con el objetivo de crear mejores condiciones para el

    crecimiento de los cultivos (Zavaleta, 1987) y afectar el desarrollo de parsitos. Ejemplos

    de enmiendas orgnicas al suelo son: residuos de algunos cultivos, tortas aceitosas,

    estircol de animales, cultivos de cobertoras, desechos de la industrializacin de

    productos agrcolas, ganaderos, marinos, avcolas, excremento y desechos de animales,

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    entre otros. El incremento en el rendimiento de los cultivos tratados con enmiendas

    orgnicas se atribuye a los suministros adicionales de nutrientes y al control de los

    nemtodos fitoparasticos. Uno de los mecanismos de control es la toxicidad de nitratos,

    cambios en pH del suelo y mayor actividad de la ureasa en el suelo (Mian et al., 1982).

    Generalmente, los residuos orgnicos ms efectivos para el control de nemtodos son

    aquellos que poseen alto contenido de nitrgeno en comparacin a los que contienen

    compuestos nematxicos. Esto fue estudiado por Gonzlez y Canto en el 1993 quienes

    reportaron que las microparcelas inoculadas con estircol de caballo y de gallina

    aumentaron el rendimiento de los tubrculos de papa, obtenindose mayor reduccin enel nmero de Globodera pallida cuando se usaba estircol alto en nitrgeno (gallinaza).

    Mian y Rodrguez (1982 ) en experimentos de invernadero estudiaron el efecto de

    enmiendas al suelo con tortas de aceite de algodn (Gossypium hirsutum L.) y de man

    (Arachis hypogaea L.), as como el estircol de gallina sobre el nemtodo nodulador,

    Meloidogyne spp. En estos estudios se encontr que las enmiendas redujeron el nmero

    de ndulos de las races causado por el nemtodo, adems de estimular el crecimiento de

    las plantas. El estircol de gallina a diferencia de las otras enmiendas no mostr ser

    fitotxico. Aparentemente, los resultados se relacionan con niveles altos de nitrato,

    actividad de la ureasa y un pH del suelo ms bsico. Otros estudios indican que la

    combinacin de enmiendas orgnicas con benzaldehido reduce la incidencia de

    Meloidogyne incognita y otros nemtodos fitoparasticos (Chavarra et al., 2001).

    La eficacia de la materia orgnica en el manejo de nemtodos fitoparasticos

    depende de diferentes factores: la especie del nemtodo, la composicin qumica de la

    enmienda y otros organismos en el suelo responsables de degradar la enmienda

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    (McSorley y Gallahear, 1996; Mojtahedi et al., 1993; Stirling, 1991). Sin embargo, el

    mecanismo de accin puede suceder por la liberacin de compuestos nematicidas o

    nematostticos y/o fomentando el desarrollo de organismos antagonistas del nemtodo

    (Rodrguez-Kbana, 1991).

    Otra alternativa al control qumico es el uso de agentes biocontroladores como los

    hongos, bacterias, protozoarios, insectos y nemtodos depredadores (Jatala, 1986; Taylor

    y Sasser, 1983). Muchos de los hongos antagonistas presentan actividad quitinoltica o

    capacidad para degradar la quitina, complejo protenico presente en la capa media de la

    pared del huevo del nemtodo. La quitina es un polmero de N-acetylglucosaminafrecuentemente presente en tejidos de insectos, crustceos y hongos (Muzzarelli, 1991).

    En Puerto Rico, los desechos da langosta, camarones y otros crustceos pudiera

    explotarse como fuente de quitina. Esta protena es un componente importante de la capa

    media del cascarn o pared del huevo de los nemtodos (Bird, 1971; Bird y McClure,

    1976).

    El efecto nematicida de la quitina sobre los nemtodos fitoparasticos, fue

    investigado por primera vez por Mankau y Das (1969 y 1974), utilizndola como

    enmienda en el cultivo de ctricos. En el suelo, la quitina es despolarizada por la quitinasa

    resultando la liberacin de amonio, sustancia con propiedades nematicidas (Tian et al.,

    2000). En adicin, el agregar quitina al suelo estimula el crecimiento de bacterias,

    actinomicetos y un gran nmero de especies de hongos con actividad quitinoltica (Tian

    et al., 2000).

    Miller et al. (1973) establecen que la quitina y el micelio quitinoltico se utilizan

    como enmiendas para la supresin de nemtodos fitoparasticos. Mankau y Das (1969)

    11

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    19/87

    encontraron una disminucin en el nmero de juveniles y ndulos radicales de

    Meloidogyne spp. en plantas sembradas y tratadas con enmiendas en base de quitina.

    Lara-Martes et al. (1993) lograron reducir el dao de Meloidogyne incognita en plantas

    de tomate utilizando una enmienda de exoesqueleto de camarn aplicadas al suelo antes

    de la siembra. Estudios revelan que la quitina no solo afecta el desarrollo del huevo del

    nemtodo sino que tambin acelera el crecimiento de las plantas e induce la activacin

    del mecanismo de defensa en las plantas (Benhamou et al., 1994). Otros investigadores

    (Kokalis-Burelle et al., 2002; Galper et al., 1990) establecen que las enmiendas a base de

    quitina promueven el desarrollo de la micoflora quitinoltica del suelo, responsables de lasupresin de nemtodos fitoparasticos en el suelo. Mian et al., (1982) reportan que las

    investigaciones en las cuales se utilizan suelos enmendados con quitina, encuentran una

    micoflora especfica antagonista de nemtodos.

    Enmiendas con altas concentraciones de quitina facilitan el desarrollo de la

    micoflora responsable de producir enzimas quitinolticas, las cuales contribuyen a la

    destruccin de los huevos de nemtodos sedentarios como Meloidogyne, Globodera y

    Heterodera (Culbreath et al., 1986; Godoy et al., 1983). Lo cual demuestra que estas

    enmiendas pueden favorecer la actividad de microorganismos antagonistas de nemtodos.

    Estudios por Godoy et al., (1983) concluyen que agregar quitina al suelo estimula las

    poblaciones de microorganismos parsitos de huevos deMeloidogyne yHeterodera. Por

    otra parte, Chen et al. (2000 a) reportan que al aplicar sustratos de quitina al suelo en el

    cultivo de la lechuga; encontraron que organismos como: Bacillus thuringiensis,

    Streptomyces costaricanus y Paecilomyces marquandii, suprimen al nemtodo nodulador

    Meloidogyne hapla.

    12

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    Hallmann et al., (1999) estudian comunidades microbiales asociadas al control de

    nemtodos y encontraron que aplicar enmiendas de quitina modifica las comunidades de

    bacterias en el suelo y rizsfera. Otro que estudi el efecto de enmiendas con quitina

    para combatirMeloidogyne arenaria fue Mian et al. en 1982. Segn Mian et al. (1982),

    las enmiendas de quitina eliminaron el agallamiento de las races y causaron el aumento

    de la actividad de quitina y urea del suelo. Este investigador reporta que el suelo tratado

    con quitina desarroll una micoflora especfica con capacidad de crecimiento en un agar

    de quitina y sales minerales. Posteriormente, pruebas invitro demostraron que todas las

    especies fungosas eran parsitas de huevo.En Puerto Rico, Dvila et al. (1999) identificaron microorganismos con capacidad

    quitinoltica y los clasificaron como posibles controladores biolgicos del nemtodo

    nodulador, Meloidogyne incognita. Ellos aislaron dos especies de Paecilomyces (P.

    lilacinus y P. marquandii), adems de otros hongos. Ambas especies han sido reportadas

    como enemigos naturales de nemtodos. Culbreath et al. (1986) estudiaron el efecto de la

    quitina sobre Meloidogyne sp. en suelos colonizados porP. lilacinus. Los tratamientos

    con quitina as como con P. lilacinus, disminuyeron los valores de agallas y nmero de

    larvas por gramo de raz de tomate. Los resultados sealan que las enmiendas con quitina

    y P. lilacinus son efectivas para combatir a Meloidogyne sp.

    Stirling (1991) menciona que han sido numerosos los estudios realizados por ms

    de 15 aos que sugieren evidencia de que especies de hongos pertenecientes a los gneros

    de Verticillium, Fusarium, Cylindrocarpon, Exophiala, Gliocladium, Paecilomyces y

    Phoma, pero particularmente las especies de V. chlamydosporium, F. solani, F.

    oxysporum y P. lilacinus, regularmente colonizan quistes y huevos de nemtodos.

    13

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    Algunos de estos hongos nematfagos han dado muy buenos resultados en el control de

    nemtodos en diferentes cultivos en el mbito mundial.

    Paecilomyces lilacinus fue observado por primera vez en asociacin con huevos

    de nemtodos por Lysek en 1976 (Stirling, 1991). Luego se encontr parasitando huevos

    de M. incognita en Per en el 1979 (Jatala, 1986). Desde entonces este hongo ha sido

    asociado al nemtodo nodulador y al nemtodo del quiste (Stirling, 1991). Khan y Saxena

    (1997) establecieron que P. lilacinus controla efectivamente a M. javanica en la India,

    parasitando hembras y huevos. Adems, encontr que la habilidad de P. lilacinus

    controlando el nemtodo aumenta cuando este se integra a un material orgnico.Lara-Martes et al. en 1996 realizaron un estudio de campo para demostrar la

    eficacia de P. lilacinus en el control biolgico del nemtodo nodulador y su rentabilidad

    en el tomate. El estudio revel que P. lilacinus redujo las poblaciones deMeloidogyne sp.

    en el suelo y en las races, parasit los huevos del nemtodo, disminuy la nodulacin

    radical e increment los rendimientos y los beneficios econmicos en el cultivo. En

    condiciones de invernadero, P. lilacinus redujo la poblacin deRotylenchulus reniformis

    en 63% usando 5 gramos de sustrato de arroz colonizado (Walters y Barker, 1994). La

    aplicacin de P. lilacinus, semanas antes de la siembra del pimiento, redujo la poblacin

    de R. reniformis y M. incognita y aument el rendimiento sin presentar diferencias

    significativas al compararlo con el tratamiento qumico (Vicente y Acosta, 1992).

    Paecilomyces lilacinus acta como un buen colonizador de raz y competidor de

    rizsfera (Chen et al., 2000 b). Se ha comprobado que el pH del suelo est relacionado al

    efecto de las actividades txicas que tienen los hongos en las etapas juveniles de los

    nemtodos. Chen et al. (2000 b) observaron la viabilidad de Heterodera sp. cuando se

    14

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    expone a hongos. Estos informan que una alta produccin del la toxina del hongo ocurre

    a niveles bajos de pH (cido), afectando las etapas juveniles de los nemtodos. Sin

    embargo, se determin que el pH no tuvo efecto en la actividad nematicida de P.

    lilacinus.

    Algunos de los agentes biocontroladores de fitonemtodos ms utilizados y de los

    cuales se han desarrollado bionematicidas son los hongos P. lilacinus, V.

    chlamydosporium y Metarrhizium anisopliae. En el mercado existen varios productos

    bionematicidas comerciales cuyo agente activo es el hongo P. lilacinus, entre estos se

    encuentran Biocon

    , Nemachek

    , Bioact

    y Melocon

    .Khan et al. (2001) reportaron que al agregar un hongo nematfago, al suelo de

    forma separada a P. lilacinus y Trichoderma harzianum, que son hongos nematfagos

    junto a un substrato orgnico se reduce la actividad patognica de M. incognita. Al

    agregar la combinacin de ambos hongos al suelo junto al substrato orgnico se reduce la

    poblacin del nemtodo nodulador y aumenta el vigor de la planta (Khan et al., 2001).

    Otra alternativa al control de nemtodos son las micorrizas. Las micorrizas son

    una asociacin simbitica mutualista entre races de plantas superiores y ciertos grupos

    de hongos. Hay un gran nmero de investigaciones acerca de la interaccin entre

    micorrizas arbusculares y patgenos. Aunque los resultados son variables, en general se

    puede concluir que las micorrizas arbusculares incrementan la resistencia de la planta al

    ataque de los patgenos, en especial los que atacan la raz, cuando ocurre el

    establecimiento de la micorrizas arbusculares previo al ataque del patgeno (Snchez,

    1999). En el caso de los nemtodos fitoparsiticos, se ha registrado que la micorrizas

    arbusculares reducen la incidencia y el dao ocasionado por nemtodos a consecuencia

    15

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    de una compensacin y aumento en el sistema radicular, por tanto en la absorcin de

    nutrientes (Snchez, 1999). Los mecanismos mediante los cuales ocurre el control de los

    patgenos se relacionan con cambios en la morfologa y fisiologa de las plantas

    micorrizadas, tales como: mayor lignificacin de las paredes celulares que dificulta la

    penetracin del patgeno; el mejoramiento en la nutricin de la planta hospedera,

    especialmente fsforo y potasio que tornan la planta menos susceptible al ataque de

    patgenos (Snchez, 1999).

    Arias et al. (1999) indican que las micorrizas arbusculares establecen un nivel radical

    en una relacin simbitica que le posibilita a las plantas una mejor absorcinespecialmente de los nutrientes pocos solubles y/o mviles. Las infecciones radicales por

    nemtodos patgenos son generalmente menores sobre plantas en relacin simbitica con

    la micorriza que sobre plantas que no tienen esta relacin (Paulitz y Linderman, 1991).

    Sin embargo, las respuestas pueden variar y los mecanismos involucrados son

    controversiales. Barbosa et al. (2002) muestran que plantas de pltano con la micorriza

    arbuscularGlomus clarum y un sustrato de materia orgnica poseen mejor enraizamiento,

    mayor masa foliar, pseudotallo ms robusto y un nmero mayor de races. A

    consecuencia de esto la planta presenta mayor absorcin de fsforo y mayor radio

    radicular en comparacin con las plantas no inoculadas con las micorrizas.

    El control biolgico de nemtodos es una de las mejores alternativas para

    incrementar los rendimientos, sin causar dao al medio ambiente. Se han realizado

    algunos estudios utilizando leguminosas supresoras de nemtodos. Las leguminosas

    adems de suprimir la poblacin de nemtodos, nos brindan otros beneficios en las

    prcticas agrcolas como por ejemplo: el control de la erosin hdrica cuando se

    16

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    establecen como cobertoras, la estimulacin de una microfauna benfica y el

    mejoramiento de la fertilidad del suelo. Sin embargo, ha sido poco el uso de plantas

    cobertoras para el control de nemtodos en pltano.

    Rubiano (2000) estudi la siembra de pltano intercalado con leguminosas y la

    aplicacin del hongo P. lilacinus. Este inform que la Canavalia ensiformis en

    asociacin present un efecto supresor sobre las poblaciones de Helicotylenchus spp.,

    Rotylenchulus reniformis y R. similis en suelo y raz. Tambin P. lilacinus suprimi las

    poblaciones deR. similis en races.

    Canavalia ensiformis, comnmente llamada canavalia, frjol espada, haba de

    caballo y frjol machete, es una leguminosa originaria de Centroamrica y la Antillas.

    Para simplificar la discusin nos referiremos a esta planta como canavalia, desde este

    punto en adelante. Se indica que crece bien en suelos con bajo contenido de fsforo

    (Binder, 1997). Esta planta compite con malezas y sirve como barrera natural para

    reducir la erosin. Su produccin de materia verde est entre 110 a 200 kg/ha y su aporte

    en nitrgeno alcanza los 100 kg/ha por ao (Binder, 1997). En condiciones de

    invernadero, utilizando suelo infestado con Meloidogyne arenaria raza 2, M. javanica y

    Heterodera glycines raza 4, canavalia present agallamiento en sus races, por lo que se

    considera una planta supresora de nemtodos (Rodrguez-Kbana et al., 1992). El asocio

    de esta leguminosa con tomate reduce las poblaciones de Naccobus aberrans en el

    cultivo principal (Marbn-Mendoza y Zuckerman, 1989).

    Varias especies de leguminosas pueden ser utilizadas como abono verde y a la vez

    reducir las poblaciones de nemtodos. La siembra intercalada as como el tapado mulch

    puede ser tan eficiente como la rotacin de cultivos (Johnson et al., 1992).

    17

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    Econmicamente las leguminosas producen importantes compuestos orgnicos como las

    lectinas de canavalia, la cual es utilizada actualmente como plaguicida (Morris y Walker,

    2002). Las leguminosas pueden utilizarse dentro de un plan de rotacin de cultivo o

    cultivo cobertor y reducir las poblaciones de nemtodos fitoparasticos (Johnson et al.,

    1992; Stirling, 1991). La incorporacin de leguminosas como mtodo de control de

    plagas ha tenido varios resultados dependiendo del tipo de leguminosa, textura del suelo,

    flora microbiana y fauna (Campbell, 1989).

    Dentro del grupo de leguminosas con mayor potencial como supresoras de

    nemtodos se encontraron laMucuna deeringiana y la canavalia. Saavedra (1998) indicque al intercalar M. deeringiana o canavaliacon pltano se reduce la poblacin de R.

    similis. Este investigador report que intercalar estas leguminosas con pltano suprimen

    adems las poblaciones de M. incognita y R. reniformis en suelo y races hasta cuatro

    meses despus de iniciado el asocio. El efecto supresivo de estas leguminosas fue similar

    al que present el nematicida sobre la poblacin del nemtodo en el campo. Una

    respuesta similar fue reportada por Morris y Walter (2002) quienes trabajaron con

    canavalia incorporada al suelo y poblaciones deM. incognita.

    Se cree que canavalia alberga en sus races poblaciones de bacterias y hongos

    antagonistas de nemtodos que contribuyen al efecto supresor. Este mecanismo ha sido

    reportado en leguminosas con caractersticas similares a canavalia (Vargas et al., 2000).

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    3 METODOLOGAEsta investigacin incluy tres ensayos de invernadero y dos de campo, en las Sub-

    Estaciones Experimentales Agrcolas de Isabela y Corozal. El propsito de este estudio

    fue conocer la efectividad de integrar productos biolgicos comerciales con potencial

    para el manejo de las poblaciones de nemtodos fitoparasticos en Puerto Rico; dentro de

    un programa de Manejo Integrado de Plagas.

    3.1 ExperimentoenInvernadero3.1.1 Primerensayo:Productosbiolgicoscomerciales

    El primer ensayo se estableci en un invernadero de la Finca Alzamora de la

    Universidad de Puerto Rico, Recinto de Mayagez (Figura 3.1). Este ensayo se realiz

    con el fin de evaluar el grado de supresin de nemtodos fitoparasticos utilizando

    productos biolgicos comerciales. El ensayo se inici el 19 de febrero y finaliz el 20 de

    mayo de 2004. Se utilizaron plntulas de tomate (Lycopersicum esculentum) variedad

    Florida 47, de cinco semanas de germinacin susceptibles al nemtodo nodulador

    (Meloidogyne spp.). Estas se obtuvieron de Jardines Eneida en Cabo Rojo, Puerto Rico.

    El suelo que se utiliz se recolect de terrenos aledaos de la Sub-Estacin Experimental

    Agrcola de Corozal y de la Finca Alzamora. Estos suelos fueron mezclados y se pasaron

    por un cernidor (rejilla de metal) para homogenizarlos.

    19

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    Figura 3.1 Finca Alzamora UPR Recinto de Mayagez, Puerto Rico

    Imagen Orthophoto 1998 (Imagen suministrada por Roberto I. Muiz de PPR)

    20

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    Los productos biolgicos evaluados fueron: Power Organic (1.5g/planta), Plant

    success tablets mycorrhizae (1.5 g/planta), Nemastop (40 ml/planta) y Melocon (1.5

    g/planta). El ensayo incluy plantas sin tratar (testigo). Power Organic Mycorrhizal

    Root Booster se compone de una mezcla de ectomicorrizas y endomicorrizas, de las

    cuales incluyen esporas de Glomus brasilianum, G. monosporus, G. intraradices, G.

    mosae y Gigaspora margarita; esporas de Lacarria loccata, L. bicolor, Pisolithus

    tinctorious,Rhizopogon fulvigleba, R. rubescens, R. villasuli, Scleroderma cepa y S.

    citrinium. Este producto es distribuido por Chappys Power Organics (Malibu,

    California). Plant Success consiste en tabletas que contienen una mezcla deectomicorrizas y endomcorrizas de las que incluyen: P. tinctorius (9,000,000

    esporas/gramo), Rhizopongon luteolus (250,000 esporas/gramo), R. fulvigleba, R.

    villosuli, y R. amylopogen. Adems, contiene esporas de G. intraradices (20

    esporas/gramo), G. clarum (5 esporas/gramo), G. mosae (5 esporas/gramo), G.

    monosporus (5 esporas/gramo), G. deserticota (5 esporas/gramo), G. brasilliarum (5

    esporas/gramos) y G. margarita (5 esporas/gramo). En adicin a las micorrizas, las

    tabletas poseen nitrgeno (17%), fsforo (9%) y potasio (5%). Este producto es

    distribuido por Peaceful Valley Farm, California. Nemastop es un lquido compuesto de

    extractos de plantas. Su ingrediente activo, es una mezcla de extractos de Quercus

    falcata, Opuntia lindheimeri,Rhus aromatica y Rhizophora mangle. Este es distribuido

    por Soil Technologies. MeloconTM WG son pellets los cuales se componen de P.

    lilacinus y es distribuido por Prophyta (www.prophyta.com).

    Cada unidad experimental consisti de un tiesto, con una capacidad de 5,000 cm3

    de suelo y un dimetro de 24 cm. Se transplant una planta de tomate (Lycopersicum

    21

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    esculentum) en cada uno de los tiestos. El arreglo experimental utilizado en este ensayo

    fue un diseo completamente aleatorizado (DCA) con cinco tratamientos y cuatro

    rplicas. A los trece das de transplante las plntulas fueron inoculadas con 5,000 huevos

    y/o larvas de Meloidogyne incognita por tiesto. Se utilizaron plantas de Impatiens

    wallerana infectadas porM. incognitapara la obtencin de los huevos y larvas aplicados

    al suelo. Para la preparacin de este inculo se realiz una modificacin del mtodo

    descrito por Shurtleff y Averre (2000). La modificacin consistien lavar las races para

    eliminar las partculas de suelo, cortando estas en pedazos; las races se colocaron en un

    envase con una solucin de agua y hipoclorito de sodio (clorox al 10%), se ajit durante 4minutos. Despus la solucin se verti en un tamiz #200 y se colect en un tamiz #500,

    se lav con agua y se guard en otro envase; luego se tom una gota de aproximadamente

    0.1 ml y se cont el nmero de huevos y larvas, entonces de aqu se estim la cantidad

    que se aplic de inculo (Shurtleff y Averre, 2000). A los 22 das del transplante se

    realiz la aplicacin de los tratamientos. El manejo agronmico de las plantas de tomate

    consisti en la aplicacin de abono 20-20-20 cada diez das. Las plantas se estaquearon

    segn fue necesario segn lo recomendado en el conjunto tecnolgico de tomate

    (Annimo, 1995).

    Para evaluar el efecto de los tratamientos sobre el crecimiento de la plantas, a los

    90 das de establecida la siembra, las plantas de tomate se cortaron a nivel del suelo y se

    tomaron datos de altura, peso de las hojas y peso de la raz. Para registrar el dato de peso

    de hoja y raz se utiliz una balanza digital (modelo Mettler PC 440). Para estimar la

    poblacin y dao de nemtodos fitoparasticos se contabiliz el nmero de ndulos en la

    raz.

    22

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    3.1.2 Segundoensayo:EnmiendasOrgnicasEl segundo ensayo de invernadero fue similar al primero con la particularidad que

    en este ensayo se evalu el uso de enmiendas orgnicas como tcnica para suprimir las

    poblaciones de nemtodos fitoparasticos en pltano. Para determinar la efectividad de las

    enmiendas orgnicas se estableci el ensayo bajo condiciones de invernadero. El ensayo

    se inici el 19 de septiembre de 2003 y finaliz el 21 de abril de 2004.

    Para este ensayo se utilizaron cormos de pltano las cuales se obtuvieron de una

    siembra localizada en la parte posterior del edificio Piero del RUM. El material

    vegetativo se prepar segn recomendado por el Conjunto Tecnolgico para la

    Produccin de Pltano y Guineo (Annimo, 1995). El suelo que se utiliz se tom de

    predios de la Subestacin Experimental Agrcola de Corozal y de la Finca Alzamora en el

    RUM Las enmiendas que se evaluaron en este estudio fueron: Quitina (30 g/planta),

    Sesamun indicum (ajonjol, semilla triturada, 30 g/planta), Gallinaza (28 g/planta),

    Mucuna (semilla molida 30 g/planta) y plantas no tratadas (testigo). La quitina es un

    producto comercial distribuido por Peaceful Valley Farm Supply, California. El producto

    de semilla de ajonjol es un producto orgnico distribuido por natural Organic Product in

    Mount Dora, Florida y est compuesta por semillas de ajonjol trituradas a un 100%. La

    gallinaza provino de una granja parillera en Coamo. sta se dej secar completamente en

    un invernadero para luego ser aplicada al suelo. La mucuna se obtuvo de una coleccin

    de semillas ubicadas en el laboratorio de Nematologa del Departamento de Proteccin de

    Cultivos en el RUM. Las semillas se colocaron en un horno para secarlas y luego se

    trituraron en un molino o triturador. El resultado (harina) se utiliz como enmienda al

    suelo.

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    Para este ensayo se utiliz un diseo completamente aleatorizado con cinco

    tratamientos y tres rplicas. Cada unidad experimental consisti de un tiesto, con una

    capacidad de veinticuatro kilogramos de suelo y un dimetro de treinta centmetros. Para

    estimar la poblacin de nemtodos fitoparasticos se realizaron dos muestreos de suelo y

    races a los cuatro y ocho meses despus de la siembra. Para la evaluacin del efecto de

    los tratamientos sobre el crecimiento de la planta se tomaron datos del nmero de hojas y

    altura de la planta. El manejo agronmico de las plantas de pltano consisti en la

    aplicacin de un abono (20-20-20) cada diez das.

    3.1.3 Tercerensayo:ProductosbiolgicoscomercialesmssiembradecanavaliaPara evaluar el efecto que tiene la utilizacin de hongos biocontroladores,

    enmiendas orgnicas y leguminosas antagonistas, sobre poblaciones de nemtodos

    fitoparasticos en pltano, se estableci un tercer estudio bajo condiciones de

    invernadero. El ensayo se inici el 5 de abril y finaliz el 5 de julio de 2005.

    Para este ensayo se utilizaron plntulas de pltano que se obtuvieron del

    Laboratorio de Propagacin Vegetal y Cultivo de Tejido en la Estacin Experimental

    Agrcola de Ro Piedras. El suelo que se coloc en los tiestos provino de predios en la

    Finca Alzamora, RUM. Los tratamientos evaluados fueron: Fenamiphos (Nemacur 15g,

    30g/planta) desde este momento nos referiremos a este tratamiento como nematicida,

    segn lo recomendado por el Conjunto Tecnolgico (EEA, 1995), Melocon (1.5g al

    hoyo de siembra), quitina (30g/planta), Melocon (1.5g al hoyo de siembra) ms una

    24

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    siembra intercalada de canavalia, quitina (30g/planta) ms una siembra intercalada de

    canavalia y plantas sin tratar (testigo absoluto). La siembra de canavalia se realiz

    colocando cuatro semillas alrededor de la planta en aquellos tratamientos que lo

    requeran.

    Se utiliz un diseo completamente aleatorizado con seis tratamientos y seis

    rplicas. Cada unidad experimental consisti de un tiesto, con una capacidad de 24,000

    cm3 de suelo y un dimetro de treinta centmetros. Para estimar la poblacin de

    nemtodos fitoparasticos se realiz un muestreo al final del ensayo (5/julio/2005) de

    suelo y races. Para la evaluacin del efecto de los tratamientos sobre el crecimiento de

    la planta se tomaron datos del nmero de hojas y altura de la planta. El manejo

    agronmico de las plantas de pltano consisti en la aplicacin de un abono con un

    anlisis 20-20-20 cada diez das.

    25

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    3.2 ExperimentodeCampo3.2.1 Primerensayo:Productosbiolgicomssiembradecanavalia

    enIsabelaPara evaluar prcticas agrcolas no-qumicas como la utilizacin de hongos

    biocontroladores y leguminosas antagonistas, sobre poblaciones de nemtodos

    fitoparasticos en campo, se estableci una siembra de pltano en la Subestacin

    Experimental Agrcola de Isabela. Esta finca esta localizada en la costa noroeste de P.R.,

    carretera nmero 2 Km 114.7 en Isabela (Figura 3.2) y se encuentra a una elevacin de

    420 pies sobre el nivel del mar.

    Figura 3.2 Subestacin Experimental Agrcola de Isabela, Puerto Rico

    Imagen Ikono 2002 (Imagen suministrada por Roberto I. Muiz de PPR)

    26

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    34/87

    Los tratamientos evaluados fueron: Fenamiphos (Nemacur 15G, 30g/planta),

    segn lo recomendado por el Conjunto Tecnolgico del pltano (Annimo, 1995),

    Melocon (1.5g al hoyo de siembra), Micorrizas (2.0g/planta) ms nemtodos

    entomopatgenos, Melocon (1.5g al hoyo de siembra) ms canavalia intercalada entre

    plantas, Micorrizas (2.0g/planta) ms canavalia intercalada entre plantas, ms nemtodos

    entomopatgenos y plantas sin tratar (testigo absoluto). La siembra de canavalia se

    realiz a los cuatro meses de establecido el experimento a una distancia de un (1) metro

    entre el surco del pltano y a 0.5 metros entre plantas de la leguminosa. La semilla de

    canavalia fue sembrada directamente en el predio y se obtuvo de una coleccin ubicadaen el laboratorio de Nematologa del Departamento de Proteccin de Cultivos en UPR-

    Mayagez. Fenamiphos (Nemacur 15G) es un producto nematicida que se utiliz con el

    fin de comparar su efecto con prcticas no-qumicas. El ingrediente activo de este

    qumico es ethyl 3-methyl-4-(methylthio) phenyl-(1-methylethyl) phosphoramidate y es

    distribuido por Bayer Corp Science LP, North Carolina.

    El manejo agronmico de la siembra experimental, desde la preparacin del

    terreno, seleccin, preparacin de la semilla, hasta la cosecha, se realiz siguiendo las

    prcticas del Conjunto Tecnolgico para la Produccin de Pltano y Guineo (Annimo,

    1995). La siembra de los cormos se realiz en un terreno surcado y ahoyado. El material

    utilizado en la siembra fue el clon Sperpltano y se obtuvo de la Subestacin

    Experimental Agrcola de Isabela, P.R. Se sigui un diseo experimental de bloques

    completo aleatorizados con seis (6) tratamientos y cuatro (4) rplicas, donde se

    establecieron veinticuatro (24) parcelas experimentales de doce (12) plantas. La distancia

    de siembra fue 1.8 metros x 1.8 metros para una densidad de siembra de 1,516 plantas

    27

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    por hectrea. De las 24 parcelas, solo cuatro recibieron aplicaciones del producto

    nematicida, estas recibieron dos aplicaciones una al momento de siembra (23 de marzo de

    2004) y otra a los seis meses de establecida la siembra (7 de septiembre de 2004). A las

    plantas tratadas con Melocon y Micorrizas se le realizaron dos aplicaciones del producto

    a diferente etapas de crecimiento de la planta; una al momento de la siembra (al hoyo) y

    otra a los cuatro (4) meses de siembra (alrededor de la planta). Los nemtodos

    entomopatgenos (Heterorhabditis sp.) aplicados en los tratamientos que incluyeron las

    micorrizas, se aplicaron a los seis meses de establecida la siembra. Se aplicaron 100,000

    nemtodos entomopatgenos por planta. Para determinar la poblacin inicial y lafluctuacin de nemtodos en el campo se realizaron tres muestreos de suelo y races a los

    cuatro (18 de julio de 2004), ocho (16 de noviembre de 2004) y doce (12 de marzo de

    2005) meses despus de la siembra. Las unidades de muestreo fueron dos plantas,

    ubicadas en el centro de cada parcela experimental. En aquellas parcelas que no tuvieran

    disponible una o ambas plantas, a consecuencia del paso del huracn Jeanne el 16 de

    septiembre de 2004, se sustituyeron por plantas de los bordes.

    3.2.2 Segundo ensayo: Productos biolgicos ms siembra decanavaliaenCorozalPara evaluar la utilizacin de P. lilacinus, un producto orgnico a base de quitina

    y la leguminosa canavalia, sobre poblaciones de nemtodos fitoparasticos en pltano en

    campo, se estableci una siembra de pltano en la Subestacin Experimental Agrcola de

    Corozal. sta est localizada en la carretera 150 km.7.6 Bo. Padilla, Corozal, ubicada en

    la parte centro-norte de Puerto Rico con una altitud aproximada de 200 m.s.n.m. (Figura

    28

  • 7/31/2019 Control Nematodos

    36/87

    3.3). El tipo de suelo que predomina en esta zona pertenece a la serie Corozal-arcilloso

    (Aquic Tropudlts), caracterizado por su alto contenido de arcilla y con un pH de 5.0,

    aproximadamente.

    Figura 3.3 Subestacin Experimental Agrcola de Corozal, Puerto Rico

    Imagen Orthophoto 1998 (Imagen suministrada por Roberto I. Muiz de PPR)

    29

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    Los tratamientos evaluados fueron: Fenamiphos (Nemacur 15g, 30g/planta),

    segn lo recomendado por el Conjunto Tecnolgico (Annimo, 1995), Melocon (1.5g

    al hoyo de siembra), quitina (30g/planta) ms nemtodos entomopatgenos, Melocon

    (1.5g al hoyo de siembra) ms canavalia intercalada entre plantas, Quitina (30g/planta)

    ms canavalia intercalada entre plantas ms nemtodos entomopatgenos y plantas sin

    tratar (testigo absoluto). La siembra, la aplicacin de los tratamientos y el manejo se

    realiz utilizando el mismo procedimiento descrito para el ensayo de Isabela. El

    material utilizado en la siembra fue el clon Maricongo y se obtuvo de la Sub-estacin

    Agrcola de Corozal. Se sigui un diseo experimental de bloques completamentealeatorizados con seis tratamientos y cuatro rplicas, donde se establecieron veinticuatro

    (24) parcelas experimentales de doce (12) plantas cada una. La distancia de siembra fue

    1.8 metros x 1.8 metros para una densidad de siembra de 1,516 plantas por hectrea. De

    las veinticuatro (24) parcelas, solo cuatro recibieron aplicaciones del producto

    nematicida: recibieron dos aplicaciones una al momento de siembra el 4 de agosto de

    2004 y otra a los seis meses de establecida la siembra el 8 de febrero de 2005. A los

    tratamientos con Melocon y Quitina se le realizaron dos aplicaciones, la primera fue

    antes de la siembra aplicndola en el fondo del hoyo y la segunda a los seis meses de

    siembra alrededor de la planta. Esta segunda aplicacin era recomendada aplicarla a los

    cuatro meses de siembra pero debido a las condiciones ambientales (por la lluvia que se

    present en ese periodo) se realiz a los seis meses.

    Para determinar la poblacin inicial y la fluctuacin de nemtodos en el campo se

    realizaron dos muestreos de suelo y races a los 6 y 10 meses de sembrado el pltano. El

    crecimiento del pltano se vio afectado por condiciones ambientales ocasionadas por el

    30

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    huracn Jeanne el 16 de septiembre de 2004. La metodologa para tomar las muestras se

    realiz utilizando el mismo modelo descrito para el ensayo de Isabela.

    3.3 PoblacindeNemtodosPara determinar la poblacin de nemtodos, el suelo utilizado se tom del rea ms

    cercana a la raz conocida como rizsfera, para efectos de este escrito nos referiremos a

    esta muestra como suelo. Para extraer los nemtodos del suelo se tomaron 250 cc de

    suelo y se proces de acuerdo a una modificacin de la metodologa de decantacin y

    tamizado combinado con embudo Baermann descrita por Romn (1978). La modificacin

    consisti en disolver la muestra de suelo en agua y posteriormente vertir la suspensin

    sobre tamices nmero 60 y 325. El suelo recolectado en el tamiz ms fino (325) se coloc

    sobre rejillas de metal con un filtro de papel sobre un embudo Baermann, al cabo de 48

    horas a temperatura de saln (26C), las muestras se recolectaron en tubos de 8 ml para

    posteriormente cuantificar e identificar las poblaciones de nemtodos. La extraccin de

    nemtodos de las races de pltano se obtuvo a partir de 25 g de raz utilizando la mtodo

    de la licuadora combinada con el embudo Baermann descrito por Romn (1978),

    conocida tambin como la tcnica de trituracin (Shurtleff y Averre III, 2000).

    31

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    39/87

    3.4 ParmetrosevaluadosenlaplantaEntre las variables agronmicas consideradas en la toma de datos se incluyeron

    tamao de la planta, nmero de hojas, grosor del pseudotallo, manos por racimo, dedos

    por mano y peso del racimo. La altura se midi desde el suelo hasta la bifurcacin de la

    hoja ms nueva. El grosor del pseudotallo se midi en el primer tercio de la altura de la

    planta a partir del suelo.

    3.5 AnlisisestadsticosPara inferir sobre los resultados, se realiz un anlisis de varianza de los datos,

    utilizando el programa Infostat (DiRienzo et al., 2002) a un nivel de significancia de alfa

    () de 0.05. La verificacin del supuesto de normalidad se hizo mediante la prueba de

    Shapiro-Wilks. Se realizaron transformaciones de algunas variables a Ln(x+1) para

    homogenizar las varianzas. Cuando se encontr diferencia significativa entre los

    tratamientos, se realiz la prueba LSD Fisher. Con las poblaciones de nemtodos

    encontradas en el suelo se calcul el ndice poblacional restando la poblacin final (Pf)

    entre la inicial (Pi).

    32

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    4 RESULTADOS4.1 Ensayosdeinvernadero4.1.1 Evaluacinproductosbiolgicos(tomate)

    Durante el periodo de estudio (febrero a mayo 2004) se evalu el efecto de

    productos biolgicos en plantas de tomate (Lycopersicum esculentum) sobre las

    poblaciones de M. incognita. Para esto se cuantific el nmero de masas de huevos

    refirindonos a sta como el nmero de ndulos presentes en las races. Los anlisis

    reflejaron diferencias significativas entre los tratamientos en cuanto al nmero de

    ndulos. Los productos a base de micorrizas o P. lilacinus disminuyeron

    significativamente el dao causado por el nemtodo nodulador (Figura 4.1).

    4.1.2 Evaluacindeenmiendas(pltano)Durante el perodo de evaluacin, se determin la efectividad de las enmiendas

    (quitina, semilla de ajonjol, gallinaza y semilla de mucuna) aplicadas al suelo sobre las

    poblaciones de nemtodos fitoparasticos en suelo y raz. Se observ una disminucin

    (=0.05)en la poblacin de nemtodos fitoparasticos en el suelo de plantas tratadas con

    enmiendas a base de quitina. Los nemtodos encontrados con mayor frecuencia fueron

    Radopholus sp., Pratylenchus sp.,Meloidogyne sp.,Helicotylenchus sp. yRotylenchulus

    sp. Adems, se encontraron otros nemtodos pertenecientes a la familia Aphelenchoidae,

    33

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    ab

    bb

    b

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    Micorriza Micorriza tableta Extracto plantas Hongo Testigo

    Tratamientos

    Nmerodendulos

    Nmero de ndulo totales

    Figura 4.1 Nmero de ndulos en tomate, causados porMeloidogyne spp. enexperimentos de invernadero utilizando productos biolgico.Cada valor es el promedio de 4 replicaciones (tiestos) por tratamiento.Micorriza (Power organic micorriza); Micorriza en tableta (Plant success);Extracto de plantas (Nemastop); Hongo (Paecilomyces lilacinus). Losdatos promedios con la misma letra no difieren significativamente entre ssegn la prueba LSD (=0.05).

    34

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    Dorylaimidae y otros nemtodos pertenecientes al orden Tylenchida (Tabla 4.1). Los

    gneros de Radopholus sp.y Pratylenchus sp. mostraron una disminucin en el ndice

    poblacional en plantas tratadas con la enmienda a base de quitina (Figura 4.2 y 4.3

    respectivamente). Poblaciones deMeloidogyne sp. disminuyeron en plantas tratadas con

    la enmienda de harina de semilla de mucuna (Figura 4.4). Los ndices poblacionales de

    los gneros Helicotylenchus sp. y Rotylenchulus sp. mostraron mayor disminucin en

    plantas que fueron tratadas con semilla de ajonjol, seguido de las plantas tratadas con

    quitina. No se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos de ajonjol yquitina (Tabla 4.3).

    35

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    ABAB

    BC

    A

    C

    bc

    ababa

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400

    450

    500

    Quitina Ajonjol Gallinaza Mucuna Testigo

    Enmiendas orgnicas

    IndicepoblacionaldeRadopholussp.

    Suelo Raz

    c

    Figura 4.2 ndice poblacional deRadopholus sp. en ensayo de enmiendas alpltano en invernadero.Los datos promedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y enraz (letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn laprueba LSD (=0.05); ndice poblacional es poblacin final (Pf) poblacin inicial (Pi). Los datos son el promedio de tres replicaciones portratamiento. Las enmiendas orgnicas utilizadas fueron quitina (productocomercial), ajonjol (semilla triturada), gallinaza (producto de granjaparrillera) y mucuna (semilla molida).

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    D

    AB

    BC

    CD

    A

    c

    bcbc

    ab

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400

    Quitina Ajonjol Gallinaza Mucuna Testigo

    Enmiendas orgnicas

    Indicepoblacionalde

    Pratylenchussp.

    Suelo Raz

    Figura 4.3 ndice poblacional de Pratylenchus sp. en ensayo de enmiendas al

    pltano en invernadero.Los datos promedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y enraz (letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn laprueba LSD (=0.05); ndice poblacional es poblacin final (Pf) -poblacin inicial (Pi). Cada valor es el promedio de 3 replicaciones portratamiento. Las enmiendas orgnicas utilizadas fueron quitina (productocomercial), ajonjol (semilla triturada), gallinaza (producto de granjaparrillera) y mucuna (semilla molida).

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    C

    A

    B

    B

    B

    c

    b

    abaa

    0

    10

    20

    30

    40

    50

    60

    70

    80

    90

    Quitina Ajonjol Gallinaza Mucuna Testigo

    Enmiendas orgnicas

    Indicepo

    blacionaldeMeloidogynesp.

    Suelo Raz

    Figura 4.4 ndice poblacional de Meloidogyne sp. en ensayo de enmiendas alpltano en el invernadero.Los datos promedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y enraz (letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn laprueba LSD (=0.05); ndice poblacional es poblacin final (Pf) poblacin inicial (Pi). Cada valor es el promedio de 3 replicaciones portratamiento. Las enmiendas orgnicas utilizadas fueron quitina (productocomercial), ajonjol (semilla triturada), gallinaza (producto de granjaparrillera) y mucuna (semilla molida).

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    Tabla 4.1 Efecto de la aplicacin de enmiendas orgnicas sobre el ndice poblacionalde nemtodos fitoparasticos

    Enmiendas

    OrgnicaRizsfera

    3Raz

    4Rizsfera

    3Raz

    4Rizsfera

    3Raz

    4

    Quitina 11.81 ab 8.97 a 29.57 b 8.87a 266.74 b 14.80 aonjol 8.58 a 13.73 ab 8.97 a 21.42ab 79.64 a 22.81 a

    Gallinaza 24.03 bc 25.84 bc 48.40 b 34.16 b 306.97 b 28.67 a

    Mucuna 24.03 c 34.16 bc 48.40 b 45.06 bc 90.84 a 77.26 b

    estigo 42.82 c 55.26 c 97.49 c 94.58 c 33.47 a 78.84 b

    DMS(=0.05)6 0.69 0.92 0.53 0.92 0.99 0.93

    Helicotylenchussp. Rotylenchulus sp. Otros5

    ndice poblacional de nemtodos Pf-Pi 1,2

    Aj

    T

    1/ Los datos promedios con la misma letra en cada columna no difieren

    significativamente entre s segn la prueba LSD (

    =0.05). Los datos fuerondestranformados de Ln(x+1); x=Pf-Pi= poblacin final (Pf) poblacin inicial (Pi)2/Cada valor es el promedio de 3 replicaciones (tiestos) por tratamiento3/ Nmero promedio de nemtodos por 250 cc suelo4/ Nmero promedio de nemtodos por 25 g raz5/Especimenes detectados pertenecientes a grupos Aphelenchoidae, Dorylaimidae,

    Tylenchida y otros de vida libre6/ Presentada en escala transformada Ln(x+1)

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    En la evaluacin de poblaciones de nemtodos en raz se observ un

    comportamiento muy similar a las poblaciones encontradas en el suelo. Se observaron

    diferencias significativas (=0.05) entre tratamientos siendo la enmienda a base de

    quitina la que mostr una mayor disminucin en las poblaciones de nemtodos

    fitoparasticos. Sin embargo, este efecto result ms notable en las poblaciones de

    nemtodos ms dainos al pltano: Radopholus sp., Pratylenchus sp., Meloidogyne sp.,

    Helicotylenchus sp. yRotylenchulus sp. (Tabla 4.1, Figura 4.2, 4.3 y 4.4). Segn los datos

    la enmienda a base de quitina tiene un efecto supresor en las poblaciones de Radopholus

    sp. y Pratylenchus sp. mostrando una disminucin similar tanto en la poblacin de suelo

    como en la de raz (Figura 4.2 y 4.3)

    40

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    4.1.3 EvaluacindeproductosbiolgicoscomercialesmssiembradecanavaliaEste estudio de invernadero se extendi por tres meses. El objetivo del

    experimento fue evaluar aquellas prcticas agrcolas no-qumicas que haban resultado

    efectivas en el control de poblaciones de nemtodos fitoparasticos en el invernadero. Se

    evaluaron las poblaciones de nemtodos fitoparasticos en suelo donde se observ

    diferencias significativas entre los tratamientos (=0.05). Se detect una disminucin en

    el ndice poblacional de los nemtodos fitoparasticos en plantas tratadas con el

    nematicida y aquellas tratadas con quitina en asociacin con canavalia. De igual forma,

    el ndice poblacional de los gnerosRadopholus sp., Pratylenchus sp. yMeloidogyne sp.

    mostraron una disminucin significativa cuando se aplic el producto qumico o la

    quitina en asociacin con canavalia, esto en comparacin con el control (Figura 4.5, 4.6 y

    4.7). Adems, igual reduccin se observ en la poblacin deHelicotylenchus sp. (Tabla

    4.2). Se observ una disminucin deRotylenchulus sp. en el tratamiento con P. lilacinus.

    Por otro lado, la aplicacin de quitina tuvo el efecto de aumentar la poblacin de

    nemtodos de vida libre (Tabla 4.2).

    En este ensayo Las poblaciones de nemtodos fitoparasticos en las races

    mostraron una disminucin (=0.05) en plantas tratadas con alternativas no qumicas, la

    quitina asociada a la canavalia result ms efectiva. Se observ que las plantas tratadas

    con quitina asociadas a canavalia presentaron poblaciones de Radopholus sp. y

    Pratylenchus sp. similares al tratamiento nematicida. Segn los datos, en la poblacin de

    Meloidogyne spp. todas las prcticas agrcolas no qumicas mostraron una disminucin

    41

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    C

    A

    BBB

    A

    c

    ab

    bb

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400

    qumico hongo quitina hongo +

    leguminosa

    quitina +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    In

    dicepoblacionaldeRadopholus

    sp.

    Suelo Raz

    Figura 4.5. ndice poblacional de Radopholus sp. en pltano influenciado porprcticas agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en

    invernadero.Los datos son el promedio de seis replicaciones por tratamiento; Los datospromedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y en raz(letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn la pruebaLSD(=0.05); ndice poblacional es poblacin final (Pf) menos lapoblacin inicial (Pi); El producto qumico utilizado fue fenamiphos; elhongo utilizado fue Paecilomyces lilacinus; la quitina es de cascarn decrustceo; la leguminosa utilizada en asociacinfue Canavalia ensiformis;plantas testigos son plantas sin tratar.

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    C

    ABAB

    BB

    A

    c

    ab

    babab

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400

    qumico hongo quitina hongo +

    leguminosa

    quitina +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    In

    dicepoblacionaldePratylenchussp.

    Suelo Raz

    Figura 4.6. ndice poblacional de Pratylenchus sp. en pltano influenciado porprcticas agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos en

    invernadero.Los datos son el promedio de seis replicaciones por tratamiento; Los datospromedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y en raz(letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn la pruebaLSD (=0.05); ndice poblacional es la poblacin final (Pf) menos lapoblacin inicial (Pi); El producto qumico utilizado fue fenamiphos; elhongo utilizado fue Paecilomyces lilacinus; la quitina es de cascarn decrustceo; laleguminosa utilizadaen asociacin fue Canavalia ensiformis;plantas testigos son plantas sin tratar.

    43

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    D

    AB

    BC

    CC

    A

    b

    aaaa

    a

    0

    10

    20

    30

    40

    50

    60

    70

    80

    90

    qumico hongo quitina hongo +

    leguminosa

    quitina +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    Indicep

    oblacionaldeMeloidogynesp.

    Suelo Raz

    Figura 4.7. ndice poblacional de Meloidogyne sp. en pltano influenciado por

    prcticas agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos eninvernadero.Los datos son el promedio de seis replicaciones por tratamiento; Los datospromedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y en raz(letras minsculas) no difieren significativamente entre s segn la pruebaLSD (=0.05); ndice poblacional es la poblacin final (Pf) menos lapoblacin inicial (Pi); El producto qumico utilizado fue fenamiphos; elhongo utilizado fue Paecilomyces lilacinus; la quitina es de cascarn decrustceo; laleguminosa utilizadaen asociacin fue Canavalia ensiformis;plantas testigos son plantas sin tratar.

    44

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    Tabla 4.2 Efecto de Canavalia ensiformis como cultivo intercalado, Paecilomyceslilacinus, quitina y un tratamiento qumico sobre el ndice poblacional denemtodos fitoparasticos.

    Tratamiento3

    Rizsfera4

    Raz5

    Rizsfera4

    Raz5

    Rizsfera4

    Raz5

    Rizsfera4

    Raz5

    qumico 13.88 a 17.36 a 30.82 a 30.50 a 43.26 bc 24.03ab 43.26 bc 2.82 a

    hongo (h) 44.15 b 18.11 a 64.37 bc 33.12 a 55.83 bc 54.15 c 55.83 bc 14.49 cd

    quitina (q) 51.98 b 17.36 a 66.36 bc 29.27 a 67.72 c 45.53 bc 67.72 c 20.33 d

    h+canavalia(c) 40.68 b 29.88 a 28.67 a 31.14 a 49.91 bc 26.66 ab 49.91 bc 7.85 bc

    q + c 22.10a 15.44 a 35.23 ab 26.94 a 35.97 b 23.29 a 35.97 b 8.87 c

    testigo 54.15 b 71.97 b 83.77 c 90.84 b 18.69 a 45.53 bc 18.69 a 3.81 ab

    DMS(=0.05)7

    ndice poblacional de nemtodos Pf-Pi1,2

    0.49 0.64 0.58 0.710.53 0.64 0.62 0.69

    Helicotylenchussp. Rotylenchulus sp. Otros6 Vida libre

    1/ Cada valor es el promedio de 6 replicaciones (tiestos) por tratamiento2/ Los datos promedios con la misma letra en cada columna no difieren

    significativamente entre s segn la prueba LSD (

    =0.05). Los datos fuerondestranformados de Ln(x+1); x=Pf-Pi= poblacin final (Pf) poblacin inicial (Pi)3/ El producto qumico utilizado fue fenamiphos (Nemacur 15G); el hongo utilizado

    fue Paecilomyces lilacinus (Melocon); la quitina es un producto comercialdistribuido por PaecefulValley; laleguminosaasociada fue Canavalia ensiformis;plantas testigos son plantas sin tratar

    4/ Nmero promedio de nemtodos por 250 cc suelo5/ Nmero promedio de nemtodos por 25 g raz6/ Especmenes detectados pertenecientes a grupos Aphelenchoidae, Dorylaimidae,

    Tylenchida7/ Presentada en escala transformada Ln(x+1)

    45

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    similar a las plantas tratadas con el producto qumico. Solo las plantas sin tratar

    resultaron con poblaciones altas (Figura 4.5, 4.6 y 4.7). Rotylenchulus sp. mostr una

    disminucin significativa en todas las prcticas evaluadas en comparacin con el control,

    entre las prcticas evaluadas no se observ diferencias significativas. En la poblacin de

    este gnero se observ una tendencia que cuando se aplica quitina al suelo asociada a la

    leguminosa antagonista ocurre mayor disminucin en races del gnero (Tabla 4.2). El

    efecto nematicida de la enmienda de quitina asociada a canavalia se observ en

    poblaciones de Rotylenchulus sp., Helicotylenchus sp y otros nemtodos fitoparasticos

    (Tabla 4.2).

    4.1.4 ParmetrosagronmicosSegn los datos en la evaluacin de productos biolgicos en las plantas de tomate,

    no se encontraron diferencias en cuanto altura y peso de la raz entre los tratamientos,

    mientras que en peso fresco de follaje se encontr que las plantas tratadas con el producto

    a base de P. lilacinus obtuvo un aumento significativamente mayor en comparacin con

    los otros tratamientos. En la evaluacin de las enmiendas aplicadas al suelo en el cultivo

    de pltano no encontramos diferencias entre tratamientos de acuerdo al nmero de hojas

    y el peso de la raz, por otro lado en la altura se observ una tendencia que esta es mayor

    al aplicar quitina al suelo. No se observaron diferencias entre los tratamientos del ensayo

    donde se evaluaron prcticas agrcolas no-qumicas en relacin a la altura y nmero de

    hojas de la planta donde se muestra una tendencia a que la aplicacin de quitina aumenta

    la altura de la planta (Tabla 4.3, 4.4 y 4.5).

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    Tabla 4.3 Altura, peso de follaje, peso de races y nmero de nodulacin del tomateen el ensayo para evaluar productos biolgicos comerciales.

    Datos agronmicos del pltano1 ,2

    Porcin Areas Races

    Tratamiento3

    Altura (cm)Peso del

    Follaje (g)Peso Raz

    (g) # Ndulos

    Micorriza 104.24 a 27.25 a 18.35 a 74.75 a

    Micorriza en tableta 120.00 a 40.37 ab 39.01 a 285.25 b

    Extracto botnico 119.25 a 36.87 ab 45.99 a 289.50 b

    Hongo 126.34 a 47.54 b 31.16 a 193.50 ab

    Testigo 134.00 a 35.84 ab 28.20 a 319.33 b

    DMS (=0.05) 45.05 18.84 25.07 134.61

    1/ Cada valor es el promedio de 4 replicaciones (tiestos) por tratamiento2/ Los datos promedios con la misma letra en cada columna no difieren

    significativamente entre s segn la prueba LSD (=0.05).3/ Micorriza (Power organic micorriza); Micorriza en tableta (Plant succes); Extracto

    botnico (Nemastop); Hongo (Paecilomyces lilacinus)

    47

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    Tabla 4.4 Altura, nmero de hojas y peso de races de pltano en el ensayo paraevaluar enmiendas orgnicas aplicadas al suelo como componentesagronmicos.

    Datos agronmicos del pltano1,2

    Partes Areas RacesEnmiendas

    Orgnicas Altura (cm) # hojas Raz (g)

    Quitina 93.33 b 7.00 a 25.00 a

    Ajonjol 73.00 ab 7.67 a 25.00 a

    Gallinaza 69.67 ab 7.67 a 25.00 a

    Mucuna 61.33 a 9.33 a 23.67 a

    Testigo 77.33 ab 7.33 a 25.00 a

    DMS (=0.05) 27.70 2.85 1.87

    1/ Cada valor es el promedio de 4 replicaciones (tiestos) por tratamiento2/ Los datos promedios con la misma letra en cada columna no difieren

    significativamente entre s segn la prueba LSD (=0.05).

    48

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    Tabla 4.5 Parmetros utilizados para evaluar el efecto de diferentes prcticasbiolgicas aplicadas al suelo en pltano en un ensayo de invernadero.

    Datos agronmico del pltano1,2

    Tratamiento3

    altura (cm) # hojas

    qumico 62.67 ab 6.83 abhongo (h) 60.96 ab 7.50 b

    quitina (q) 72.39 b 7.83b

    h + canavalia (c) 47.00 a 6.50 ab

    q + c 60.90 ab 6.00 a

    testigo 60.00 ab 7.83 b

    DMS (=0.05) 16.25 1.48

    1/Cada valor es el promedio de 6 replicaciones por tratamiento2/ Los datos promedios con la misma letra en cada columna no difieren

    significativamente entre s segn la prueba LSD (=0.05).3/ El producto qumico usado fue fenamiphos (Nemacur 15G); el hongo utilizado fue

    Paecilomyces lilacinus (Melocon); la quitina es un producto comercial distribuidopor Paeceful Valley; la leguminosaen asociacin fue Canavalia ensiformis; plantastestigos son plantas sin tratar.

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    4.2 EnsayosdeCampo4.2.1 ProductosbiolgicosmssiembradecanavaliaenIsabela

    Durante el periodo de estudio de un ao, se evaluaron prcticas agrcolas no-

    qumicas para determinar la efectividad de stas en la disminucin de poblaciones de

    nemtodos fitoparasticos en suelo y raz. En el suelo se evaluaron las poblaciones de

    nemtodos fitoparasticos y se encontraron diferencias entre las plantas tratadas y las

    plantas no tratadas (=0.05). Se observ que plantas tratadas con el producto qumico y

    con el hongo P. lilacinus en asociacin a canavalia,presentaron poblaciones similares de

    Radopholus sp., Pratylenchus sp.y Meloidogyne sp., mostrando una disminucin de las

    poblaciones de nemtodos fitoparasticos en comparacin con el control y los otros

    tratamientos evaluados (Figura 4.8, 4.9 y 4.10). Los datos sugieren que tanto el

    tratamiento nematicida como P. lilacinus en asociacin a canavalia son tratamientos

    efectivos en la reduccin de nemtodos fitoparasticos. Las poblaciones de

    Helicotylenchus sp. y Rotylenchulus sp. presentaron una disminucin similar en las

    parcelas tratadas con nematicida o con P. lilacinus en asociacin con canavalia aunque no

    mostraron significancia. En el suelo se encontraron otros gneros de nemtodos asociados

    al cultivo. Parcelas a las cuales se le aplic el producto qumico mostraron mayor

    disminucin de otros gneros de nemtodos, mientras que las aplicaciones de micorrizas

    y P. lilacinus en asociacin a canavalia obtuvieron un mayor ndice poblacional en este

    grupo de nemtodos en especial los de vida libre (Tabla 4.6). Esta investigacin no

    incluye resultados del efecto de los tratamientos sobre insectos del suelo, por lo que la

    data relacionada a los nemtodos entomopatgenos no son discutidos en este trabajo.

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    C

    B

    A

    B

    AB

    A

    b

    aba

    abab

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    400

    450

    qumico hongo micorrizas hongo +

    leguminosa

    micorrizas +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    IndicepoblacionaldeRadopholussp.

    Suelo Raz

    Figura 4.8. ndice poblacional de Radopholus sp. en pltano influenciado porprcticas agrcolas no-qumicas para el control de nemtodos enIsabela.Los datos son el promedio de 6 replicaciones por tratamiento; Los datospromedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) y en raz (letrasminsculas) no difieren significativamente entre s segn la prueba LSD(=0.05); ndice poblacional es igual a la poblacin final (Pf) menos lapoblacin inicial (Pi). El producto qumico utilizado fue fenamiphos; elhongo utilizado fue Paecilomyces lilacinus; la micorriza es una mezcla deesporas de ectomicorrizas y endomicorrizas; la leguminosa utilizada enasociacin fue Canavalia ensiformis; plantas testigos son plantas sin tratar.

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    C

    B

    A

    BB

    A

    c

    b

    a

    bcbc

    a

    0

    50

    100

    150

    200

    250

    300

    350

    qumico hongo micorrizas hongo +

    leguminosa

    micorrizas +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    Indicep

    oblacionaldePratylenchussp.

    Suelo Raz

    Figura 4.9. ndice poblacional dePratylenchus sp. en pltano influenciadopor prcticas agrcolas no-qumicas para el control denemtodos en Isabela.Los datos son el promedio de 6 replicaciones por tratamiento; losdatos promedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) yen raz (letras minsculas) no difieren significativamente entre ssegn la prueba LSD(=0.05); ndice poblacional es igual a lapoblacin final (Pf) menos la poblacin inicial (Pi); El productoqumico utilizado fue fenamiphos; el hongo utilizado fue P.lilacinus; la micorriza es una mezcla de esporas de ectomicorrizasy endomicorrizas; laleguminosaen asociacin fue C. ensiformis;

    plantas testigos son plantas sin tratar.

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    C

    B

    A

    ABAB

    A

    b

    aa

    aba

    a

    0

    20

    40

    60

    80

    100

    120

    qumico hongo micorrizas hongo +

    leguminosa

    micorrizas +

    leguminosa

    testigo

    Prcticas qumicas y no qumicas

    Indicep

    oblacionaldeMeloidogynesp.

    Suelo Raz

    Figura 4.10. ndice poblacional deMeloidogyne sp. en pltano influenciadopor prcticas agrcolas no-qumicas para el control denemtodos en Isabela.Los datos son el promedio de 6 replicaciones por tratamiento; losdatos promedios con la misma letra en suelo (letras maysculas) yen raz (letras minsculas) no difieren significativamente entre ssegn la prueba LSD (=0.05); ndice poblacional es igual a lapoblacin final (Pf) menos la poblacin inicial (Pi); El productoqumico utilizado fue fenamipho