Cromatografía Mgter Murillo

7/24/2019 Cromatografa Mgter Murillo

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CromatografaMgter. Valentn Murillo Torres

Reg 1418


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Mikhail Tswett, 1906

Separacin de pigmentos vegetales usando una

columna de carbonato clcico.

ORIGEN


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La cromatografa es un mtodo de separacin en el

que se aprovechan las diferencias en el

comportamiento de particin entre una fase mvil y

una fase estacionaria para separar los componentes

de una mezcla.

CROMATOGRAFA


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Cromatografa gas-liquido (CGL) que es una!romatografa de "arti!i#n.

Cromatografa gas-s#lido (CG$) que es una!romatografa de adsor!i#n.

$i es un %uido su"er!rti!o(C&$) "uede ser

de "arti!i#n o de adsor!i#n

Si es Gas:


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La CLM es un 'ariedad de !romatografalquida en fase in'ersa que !ontienemi!elas generalmente de dode!il sulfatos#di!o que a!tan !omo modi!adores dela fase m#'il * un sol'ente org+ni!o oal!o,ol de !adena !orta


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FASE ESTACIONARIA: (matriz soportecromatogrfico! componente esttico de la

cromatografa.

FASE MVIL: (eluyente! solvente que arrastra atravs de la columna los componentes de la mezcla

a analizar.

TERMINOLOGA de IMPORTANCIA


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ELUCIN: paso de fase mvil a travs de unacolumna hasta lograr la salida de los solutos.

ELUIDO: fase mvil que se recoge a la salida de una

columna

CROMATOGRAMA: "erfil cromatogrfico perfil deelucin. #epresentacin grfica de la cuantificacin

de solutos en el eludo de una columna.

TERMINOLOGA


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VOLUMEN DE ELUCIN: volumen de fase mvil que

pasa a travs de la columna hasta que sale cada soluto.

VOLUMEN MUERTO: volumen de elucin de unamolcula que via$a a travs de la columna con la

velocidad de la fase mvil que no e%perimenta ning&n

retraso. 'ambin se llama volumen de e%clusin.

TERMINOLOGA


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e "a"eln !a"a nae gases

e e/!lusi#n mole!ular 0nter!amio i#ni!o2arti!i#n3nidad2LC

MTODOS CROMATOGRFICOS


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CROMATOGRAFA EN PAPEL

La cromatografa en papel es una tcnica ampliamente

utilizada en el laboratorio debido a su ba$o costo y a la

rapidez del anlisis.

Se realiza colocando el pimento sobre una ho$a de

papel filtro y posteriormente ste se coloca en un

disolvente (generalmente un disolvente fcil de

evaporar!.


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CROMATOGRAFA DE CAPA FINA

La cromatografa en capa fina se basa en la

preparacin de una capa uniforme de un adsorbente

mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte.


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Cromatografa en !a"a na (TLC) ofre!e unm5todo r+"ido arato * re"rodu!ile "arala dete!!i#n de materiales de "lantasmedi!inales.

Tal material 'egetal sigue desem"e6andoun "a"el en la identi!a!i#n de los

!om"uestos de "lomo "ara la industriafarma!5uti!a.

ventajas


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CROMATOGRAFA DE EXCLUSINMOLECULAR

PRINCIPIO Separacin en funcin del tama)o.

TIPOS DE MATRIZ "olmeros entrecruzados conporos de un tama)o determinado. *e%tranos entrecruzados+garosa "oliacrilamida


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Las molculas grandes fluyen

ms rpido que las peque)as.


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VENTAJAS: ,le%ibilidad en cuanto a solvente. -ondiciones poco agresivas. "roporciona informacin estructural.

DESVENTAJAS: "oco resolutiva debido a difusin.

La muestra se diluye. s necesario aplicar vol&menes muy peque)os. tapas finales de protocolos de purificacin.



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APLICACIONES:"ara la determinacin y purificacin de protenas.

"ara separacin de molculas de peso molecular

desde algunos cientos hasta varios millones.

"ermite estimar el peso molecular de polmeros degran tama)o o de productos naturales.



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CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIOINICO

s un mtodo que permite la separacin de

molculas basada en sus propiedades de carga

elctrica. "uede ser usada en casi cualquier tipo de

molcula cargada incluyendo grandes protenas

peque)os nucletidos y aminocidos.


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Inte!"#$%"d&e' %(n%!&':

/ntercambio aninico.

/ntercambio catinico.



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VENTAJAS:+lta resolucin.-on una misma columna se puede utilizar a

diferentes p0 y obtener diversos perfiles de elucin.

DESVENTAJAS:Las muestras deben estar desalinizadas antes de

ser aplicadas a este tipo de cromatografa.



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l modo de separacin de la columna de afinidades diferente de otros modos de separacin que se

e%plicaron anteriormente. l gel de relleno es

modificado con ligandos 1 similares a los grupos

funcionales.

Se basa en una interaccin especfica

nzima 1 sustrato.

+nticuerpo 1 antgeno. #eceptor1 ligando especfico.

CROMATOGRAFA DE AFINIDAD


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APLICACIONES:

"urificar y concentrar una sustancia a partir de

una mezcla en una solucin tampn.

#educir la cantidad de una sustancia en una

mezcla.

*iscernir qu compuestos biolgicos se unen a

una sustancia en particular.

"urificar y concentrar una solucin de enzima.

CROMATOGRAFA DE AFINIDAD


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CROMATOGRAFA DE GASES

La cromatografa gaseosa es una tcnica de

separacin y anlisis de mezclas de sustancias

voltiles basado en la distribucin de los

componentes de una mezcla entre dos fases

inmiscibles una estacionaria y otra mvil.

La fase mvil es un gas inerte.

La fase estacionaria generalmente est constituidapor una columna de metil polisilo%ano o derivados

de ste.


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F)n!%&n"#%ent&



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T%*&' de !"t&+",-" de +"'e':

-romatografa gas1lquido (2L-!

sta es la que se utiliza ms ampliamente y que se

puede llamar simplemente cromatografa de gases(2-!.

-romatografa gas1slido (2S-!

ste tipo de cromatografa es de aplicacin limitada. Su&nica aplicacin es la separacin de especies

gaseosas de ba$o peso molecular.



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Diagrama de un equipo de cromatografa

de gases3. 2as de arrastre o

portador.

4. "uerto de inyeccin.

5. 6na columna.7. 6n registrador o

cualquier otro

dispositivo de salida

para medir la se)al del

detector.

8. 6n detector.

9. -romatogramas.



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+lta resolucin. :elocidad.

Sensibilidad. Sencillez. ;uy buenos resultados

cuantitativos.

V7T33$

CROMATOGRAFIA DE GASES


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Solo muestras voltiles. s difcil tratar

compuestos inicos

compuestos de elevada

polaridad y compuestos

de peso molecularsuperior a 9


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APLICACIONES:

-ontrol de calidad de materia prima.

;onitoreo y optimizacin de procesos qumicos.+nlisis forense. -ontrol ambiental. *eterminacin de pureza. ;edicina fotoqumica.

CROMATOGRAFIA DE GASES


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CROMATOGRAFA DE

PARTICIN

F)nd"#ent&:

Separacin debida a la diferenciade solubilidades entre ambas

fases. Similar al fenmeno de

e%traccin.


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%isten 4 tipos

CROMATOGRAFA DE

PARTICIN


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.PLC

La cromatografa de lquidos de alta resolucin es

un modo de cromatografa en la cual el proceso

de separacin y transferencia de masa es entre la

fase estacionaria y la fase mvil y una temperatura

dada.


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9:

C*&nente' *%n!%*"/e':

Solvente

?omba de alta presin /nyector -olumna *etector

2raficador

.PLC


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Diagrama Bsico de un sistema de HPLC

.PLC


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9;

C/"'%,%!"!%(n de /&' e0)%*&':

/ntegrados -ada una de sus partes estn reunidas en

un gabinete y su intercambio o cone%in con otros

componentes es difcil.

;odulares Los mdulos son instrumentos individuales

que permiten no solo armar el equipo seg&n las

necesidades sino aumentar su comple$idad seg&n esa

necesidad vare.

.PLC


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B"'e' de /" 'e*""!%(n:

-uando la fase mvil y la muestra son forzadas a

atravesar la fase estacionaria se presentandiferentes tipos de interacciones hidrofbicas

puentes de 0idrgeno interacciones dipolares y

electrostticas stas son responsables de la mayor

o menor afinidad de cada uno de los componentes

de la muestra por alguna de las fases.

.PLC


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C""!te-'t%!"' en /" e/e!!%(n de/ '&/1ente:

*isponible comercialmente

"recio "ureza y stabilidad. n la actualidad contamos conproductos de calidad de pureza cromatogrfica. ?a$ocontenido de impurezas.

*isolver la muestra

;iscible con otros solventes para formar mezclas&tiles

.PLC


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VENTAJAS: 'odo el proceso slo toma unos pocos minutos. Los resultados obtenidos son de una alta resolucin

y son fciles de leer.

DESVENTAJAS+lto costo del equipo. ,uncionamiento muy comple$o. *ebido a la velocidad del proceso el equipo tiene

una ba$a sensibilidad a algunos compuestos.

.PLC


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GRACIAS POR SA!"#CI$#%

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