detección de sangre oculta en heces
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DETECCIÓN DE SANGRE OCULTA EN HECES Proyecto final del Ciclo Formativo de Grado Superior “Laboratorio Clínico y Biomédico” I.E.S. Isla de la Deva (Piedras Blancas, Asturias) Promoción 2015-2017 Patricia Magadán Vilamañe
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DETECCIÓN DE SANGRE OCULTA EN HECES
Proyecto final del Ciclo Formativo de Grado Superior
“Laboratorio Clínico y Biomédico”
I.E.S. Isla de la Deva (Piedras Blancas, Asturias)
Promoción 2015-2017
Patricia Magadán Vilamañe
1
AGRADECIMIENTOS
Deseo expresar mi más profundo agradecimiento a todo el profesorado del I.E.S.
Isla de la Deva, especialmente a mi tutora del proyecto Aurora Rionda Rodríguez
por toda su ayuda, consejos y disponibilidad, además de los voluntarios que han
accedido amablemente a colaborar conmigo en la realización del mismo.
Sin vuestra gran ayuda, yo sola no lo hubiera logrado.
Mil gracias.
2
ÍNDICE
1. Resumen ....................................................................................................... 3
2. Introducción y justificación ......................................................................... 4
3. Objetivos ....................................................................................................... 8
4. Desarrollo ...................................................................................................... 8
4.1. Material y métodos ................................................................................... 8
4.1.1. Haemoccult (Método del guayaco) .................................................... 9
4.1.2. Accu-Tell Rapid FOB Test (Método inmunoquímico) ...................... 11
4.2. Resultados ............................................................................................. 15
4.3. Discusión ................................................................................................ 18
4.4. Conclusión ............................................................................................. 19
5. Referencias bibliográficas ......................................................................... 20
3
DETERMINACIÓN DE SANGRE OCULTA EN HECES
Patricia Magadán Vilamañe
1. RESUMEN
La incidencia del cáncer de colon va en aumento en nuestro país, sin embargo,
esta neoplasia es prevenible y responde de manera eficaz a los tratamientos
cuando es detectada en etapas tempranas. Es por ello que los programas de
cribado encaminados a la detección precoz de lesiones precursoras están
adquiriendo mayor valor ya que éstas pueden producir la aparición de sangre en
las heces. Esto ha llevado a la búsqueda de pruebas que permitan el análisis de
la materia fecal, como el test de detección de sangre oculta en heces, que puede
realizarse mediante la técnica del guayaco o la inmunoquímica. Esta última se
antepone a la primera ya que utiliza anticuerpos específicos frente a
hemoglobina humana y sus resultados no están influenciados por factores
dietéticos, a diferencia de la prueba del Guayaco.
Palabras clave: sangre oculta en heces, colonoscopia, cáncer, colon, guayaco,
ABSTRACT
Colorectal cancer incidence is increasing in our country, however this neoplasm
is preventable and it responds in a good way to treatments when is detected in
early stages. Screening programs for the detection of precursor lesions are
gaining more value as they can produce the apparence of blood in the stool. This
has lead to the search of tests that allow to analyze the stool, like the fecal occutl
blood test (FOBT), which can be performed by the guaiac test and the
inmmunochemical test. The last one is put ahead of the first one because it uses
specific antibodies against human hemoglobin and its results are not influence
by diet factors, unlike the guaiac test.
Key words: fecal occult blood, colonoscopy, cancer, colon, colorectal, guaiac
4
2. INTRODUCCIÓN Y JUSTIFICACIÓN
El cáncer de colon y de recto es una neoplasia que se localiza a nivel del recto
o del colon, y que se origina, en la mayoría de los casos, a partir de adenomas
esporádicos, aunque en menor frecuencia también puede derivar de síndromes
genéticos de poliposis o de la enfermedad inflamatoria intestinal. Estos pólipos,
que aparecen en la mucosa que reviste el intestino grueso como consecuencia
del crecimiento anormal de las células debido a un fallo en el mecanismo de
autodestrucción de las mismas (apoptosis), normalmente no cursan con
sintomatología. Aunque en un principio estas protrusiones son de carácter
benigno, si no se extirpan a tiempo, pasados los años pueden degenerar y llegar
a convertirse en un tumor maligno.
Es un cáncer de elevada incidencia, pero es una de las pocas neoplasias que
pueden diagnosticarse en fases tempranas de la enfermedad, aumentando así
las probabilidades de curación hasta en un 90%, por lo que la prevención sería
el arma más potente de la que disponemos. A pesar de ello no todas las
comunidades autónomas están al día con los programas de cribado, ya que
mientras algunas los han implantado recientemente, otras aún se encuentran en
fases de desarrollo.
Fig.1
Fuente: Dirección General de Salud Pública. Conselleria de Sanitat. Generalitat valenciana.
5
Estos programas incluyen diferentes métodos para la detección precoz de
lesiones premalignas, como pueden ser la sigmoidoscopia, la colonoscopia o el
test de sangre oculta en heces (SOH).
El test consiste en una sencilla y barata prueba que se realiza a la población de
riesgo medio (mayores de 50 años y sin síntomas aparentes), una vez al año o
cada dos años. Simplemente se necesita una pequeña muestra fecal del
individuo y el kit de detección de SOH, el cual será analizado posteriormente. Si
el resultado obtenido es negativo, es poco probable que el paciente tenga algún
tipo de lesión, no obstante, la prueba no tiene una fiabilidad del 100%, ya que
pueden aparecer falsos negativos debido a la presencia de pólipos no
sangrantes, por lo que sería recomendable repetirla al año, o a los dos años, y
acudir al médico si se presentan molestias. Sin embargo, si el resultado es
positivo, éste nos dará a entender que se ha detectado sangre oculta en las
heces, que puede ser debido a diversas causas como pólipos, hemorroides, u
otras patologías que no necesariamente implican una lesión cancerosa, pero que
sí aconsejan una posterior realización de pruebas complementarias para llegar
a conocer la causa de tal sangrado.
Fig. 2
Fuente: Fundación Española del Aparato Digestivo (FEAD).
6
En España el cáncer de colon supone el segundo tumor maligno más frecuente
entre hombres y mujeres detrás de los de próstata y mama respectivamente,
pero si tenemos en cuente ambos sexos pasa a convertirse en el de mayor
incidencia, con 41.441 nuevos casos diagnosticados en 2015. Además,
constituye el segundo de mayor mortalidad por detrás del cáncer de pulmón.
Respecto al Principado de Asturias, tan solo en el 2015 se detectaron 900
nuevos casos, lo que supuso un 11,25% del total de tumores, convirtiéndose
también en el de mayor frecuencia valorando conjuntamente tanto a hombres
como a mujeres, por delante incluso del de pulmón y mama. A pesar de ello,
Asturias ha sido de las últimas Comunidades Autónomas en implantar el
programa de cribado poblacional para la detección precoz del cáncer de colon,
poniéndose en marchar a principios de 2015 con la intención de extenderlo a
toda la población antes del 2024 como fecha límite establecida por las
autoridades sanitarias.
En una primera fase se invitaba a participar, vía postal, a 14.000 asturianos
procedentes de los centros de salud de Candás, Castrillón, Cudillero y Llanera
con edades comprendidas entre los 50 y 69 años, de los cuales al menos 5.757,
un 42%, llegaron a realizarse la prueba.
Fig. 3
Tumores más frecuentes en ambos sexos (2015).
Fig. 4
Mortalidad por tumor en ambos sexos (2015).
Fuente: Sociedad Española de Oncología Médica.
7
1667,5%
559192,5%
Positivos Negativos
1977,9%
228692,1%
115 58,4%
63%
Positivos Negativos Lesiones precancerosas Cáncer diagnosticado de forma temprana
De todos estos, 166, un 7,5%, dieron positivo para sangre oculta en heces, por
lo que fueron derivados a sus hospitales de referencia correspondientes para la
realización posterior de pruebas complementarias, como la colonoscopia.
Desde octubre de 2016, el programa ha sido ampliado al Área sanitaria III, con
cabecera en Avilés, donde se llamaba a realizar el test a 43.578 personas. A
marzo de 2017 se sabía que aproximadamente 8.044 vecinos habían recibido la
correspondiente invitación y que de todos ellos 2.483, un 33,2%, accedieron a
formar parte del programa de cribado, de los cuales 197, un 7,9%, obtuvieron un
resultado positivo y, por lo tanto, también se les recomendó ser sometidos a una
colonoscopia, gracias a la cual se ha podido confirmar que el 58% presentaba
lesiones precancerosas, además de diagnosticar de forma temprana 6 nuevos
casos de cáncer de colon.
A lo largo del 2017 sanidad incorporará al estudio el área sanitaria VII,
correspondiente con la Comarca del Caudal, Mieres.
Fig. 5
Fuente: Elaboración propia.
Fig. 6
Fuente: Elaboración propia.
8
3. OBJETIVOS
De acuerdo con lo expuesto en la introducción, considero que sería de gran valor
e interés, tanto sanitario como educativo, la realización a una escala menor, de
nuestro propio cribado de cáncer colon y recto mediante el test de SOH, cuyos
objetivos en este trabajo serían:
1. Detectar y cuantificar la presencia de sangre oculta en heces en una
muestra poblacional.
2. Valorar personalmente la utilidad del programa de detección de SOH para
el cribado de cáncer de colon y recto.
3. Concienciar e informar a la población de la enorme importancia que tiene
formar parte de los programas de detección precoz del cáncer.
4. DESARROLLO
El test será realizado sobre una población diana elegida totalmente al azar, de
30 individuos con edades comprendidas entre los 50 y 69 años, a los cuales se
les ha proporcionado gratuitamente el kit de detección de SOH, que será
devuelto y analizado posteriormente por una técnico en el laboratorio clínico del
I.E.S. Isla de la Deva (Castrillón). Tras el análisis, se informará a cada uno de los
participantes de los resultados que se han obtenido a raíz del test para que con
estos valore si es conveniente o no acudir a su centro sanitario para la realización
de otras pruebas complementarias.
4.1. Material y métodos
Disponemos de dos formas comerciales para la realización del cribado de cáncer
de colon y recto a través de la detección de SOH: El método del guayaco y la
técnica inmunocromatográfica “Accu-Tell Rapid FOB Test”, con la que se ha
realizado este estudio.
9
Fig. 7
Fuente: Haemoccult. Beckman Coulter Inc.
4.1.1. Haemoccult (Método del guayaco)
Se trata de una técnica cualitativa visual, rápida y sencilla, basada en la
oxidación de la resina de guayaco en presencia de peroxidasa, que da como
resultado productos de oxidación de tonalidad azulada. El grupo hemo de la
hemoglobina, procedente de los eritrocitos de la sangre, actúa como transmisor
de oxígeno y cataliza esta reacción química. La presencia de hemoglobina, o su
grupo hemo, es indicador de SOH, por lo que el test será positivo.
Normalmente se necesitan tres muestras de heces de tres días consecutivos
para la realización del test. El kit proporcionado contiene tres tarjetas con papel
de filtro impregnado de dicha resina, en las que se depositará cada una de las
muestras del paciente. Posteriormente, cuando la muestra ya se haya secado en
la tarjeta, se utiliza una solución alcohólica de peróxido de hidrogeno como
sustancia reveladora. Si en el transcurso de 60 segundos se observa que el
papel se vuelve azulado, indicará que el resultado es positivo para SOH.
10
Es habitual que este método requiera seguir una dieta específica rica en fibra,
donde además, se deberá suprimir todo tipo de carne cruda o poco hecha como
mínimo 3 días antes de la realización de la prueba, y durante la misma. Tampoco
se debe tomar sustancias antiagregantes y/o anticoagulantes como el ácido
acetilsalicílico (aspirina), o cualquier otro fármaco antiinflamatorio no esteroideo
(ibuprofeno, naproxeno) como mínimo 7 días antes, a fin de evitar obtener falsos
positivos por las posibles hemorragias causadas por estos medicamentos.
También se recomienda no sobrepasar la dosis diaria de 250 mg de ácido
ascórbico (vitamina C), puesto que éste podría producir un falso negativo.
Los individuos que obtengan un resultado positivo en el test deberán informar a
su médico de atención primaria para que valore la necesidad de ser sometidos
a otro tipo pruebas complementarias, como, por ejemplo, una colonoscopia.
11
4.1.2. Accu-Tell Rapid FOB Test (Método inmunoquímico)
Se trata de una prueba inmunocromatográfica rápida, diseñada exclusivamente
para la detección cualitativa de hemoglobina humana en muestras fecales.
El kit para la realización del test, que debe conservarse a una Tª que no
sobrepase los 30º C, se compone de un recolector de heces que contiene una
disolución tamponada salina en su interior y de un dispositivo, o placa de
cromatografía, para la posterior interpretación visual de los resultados obtenidos
al depositar en él la solución contenida en el recolector.
INDICACIONES PARA LA CORRECTA RECOGIDA DE HECES:
1. Recoger una muestra de heces en un recipiente limpio y seco.
2. Desenroscar uno de los tubos del kit y retirar el colector de heces.
3. Con la ayuda del colector, tomar muestras de varias partes de las
heces.
4. Poner el colector de nuevo en el tubo y enroscarlo.
.
Fig. 8
Fuente: Programa de detecció precoç de cáncer còlon i recte de Barcelona.
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PASOS PARA REALIZAR EL TEST:
1. Las muestras de los pacientes deben atemperarse a unos 20-30º C
antes de comenzar la prueba.
2. Sacar el dispositivo para realizar el test de su correspondiente bolsa
justo antes de comenzar la prueba y atemperar para evitar la
condensación de humedad en la banda que contiene. Etiquetarlo con la
identificación del paciente o del control.
3. Agitar bien el tubo del kit que contiene la muestra de heces junto con la
solución salina tamponada.
4. Romper la punta del tubo con un movimiento de torsión y sostenerlo en
posición vertical y dispensar 4-6 gotas en el pocillo del dispositivo.
5. Los resultados son observados transcurridos 5 minutos, aunque si son
claramente positivos pueden aparecer incluso antes. No se deben
interpretar una vez hayan pasado 8 minutos.
Fig. 9
Fuente: Accu-Tell rapid FOB test. AccuBioTech.
13
FUNDAMENTOS DEL TEST:
Este test ha sido diseñado para la detección de hemoglobina humana en
muestras fecales mediante la interpretación visual del color que aparece en
el dispositivo, o placa de cromatografía.
El dispositivo está compuesto por una membrana en la que se observan dos
bandas, una recubierta de anticuerpos contra hemoglobina humana,
denominada “región T”, y otra banda con anticuerpos de cabra anti-ratón,
llamada “región C” y que actuará como control del correcto funcionamiento
del test.
El mecanismo de esta técnica se basa en:
1. La membrana de cromatografía viene con una almohadilla de oro
coloidal unido a anticuerpos de ratón anti-hemoglobina humana,
formando un conjugado que se encuentra añadido en exceso.
2. La muestra se carga en la placa de cromatografía, se une al
conjugado y va fluyendo por capilaridad. Si en la muestra hay
hemoglobina humana, se unirá a este conjugado.
3. Al llegar la muestra a la región T que se encuentra cargada con
anticuerpos anti-hemoglobina, si existe hemoglobina humana
reaccionará con ellos y se formará una línea roja indicativa de la
presencia de la sangre oculta en las heces. Este proceso tarda de 2
a 3 minutos.
4. La muestra sigue fluyendo por la membrana, y al llegar a la región C,
se producirá una reacción entre los anticuerpos de ratón que están en
el conjugado, con los anticuerpos de cabra anti-ratón que están
cargados en la región C y se formará una segunda línea de color rojo.
Esta línea debe aparecer siempre, ya que actúa de control para
indicar el buen funcionamiento del test.
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INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS:
Positivo: Aparecen dos lineas de color rojo. Una en la región C y otra en
la región T.
Negativo: Aparece tan solo una linea de color rojo en la región C. En la
región T no se observa color.
Test no válido: La ausencia de lineas de color rojo en ambas regiones
indica un error en los procedimientos seguidos, o que los reactivos del test
pueden haberse deteriorado. Se debe repetir la prueba con un dispositivo
nuevo.
Fig. 10
Fuente: Vetlab.
Fig. 11
Fuente: Accu-Tell rapid FOB test. AccuBioTech.
15
4.2. Resultados
Los resultados recopilados en la siguiente tabla de datos han sido obtenidos a
partir de la prueba inmunoquímica “Accu-Tell Rapid FOB test”, ya que, a juicio
propio, dispone de una mayor fiabilidad y comodidad respecto al otro
procedimiento también descrito “Haemoccult”, ya que como bien se ha explicado
anteriormente, “Accu-Tell Rapid FOB test” está diseñado exclusivamente contra
hemoglobina humana, por lo que estaría exento de falsos positivos si el paciente
siguiera una dieta rica en carnes rojas. Otra gran ventaja que presenta es que
tan solo se necesita una muestra fecal por persona para realizar la prueba, al
contrario de lo que sucede con “Haemoccult”, donde harían falta tres muestras
procedentes de tres días consecutivos.
Las muestras analizadas se han conseguido aleatoriamente de 30 individuos con
edades comprendidas entre los 49 y 66 años, de las cuales 18 pertenecen a
mujeres y 12 a varones. De todas las muestras, 24 de ellas (el 80%) dieron un
resultado negativo para SOH. En contraposición, se obtuvieron 6 muestras
positivas (el 20%), de las cuales 4 procedían de varones de 50, 55, 61 y 64 años
de edad, mientras que el resto correspondían a 2 mujeres de 50 años cada una.
Fig.12
Fuente: Elaboración propia.
Resultado positivo
Resultado negativo
Fig. 13
Fuente: Elaboración propia.
16
Nº PACIENTE
FECHA RECOGIDA
SEXO EDAD RESULTADO ACCU-TELL
1 24/02/2017 Mujer 49 Negativo
2 02/03/2017 Hombre 50 Positivo
3 05/03/2017 Mujer 53 Negativo
4 05/03/2017 Hombre 55 Positivo
5 05/03/2017 Mujer 54 Negativo
6 07/03/2017 Mujer 60 Negativo
7 07/03/2017 Mujer 55 Negativo
8 07/03/2017 Mujer 63 Negativo
9 08/03/2017 Mujer 56 Negativo
10 08/03/2017 Hombre 60 Negativo
11 08/03/2017 Hombre 64 Positivo
12 08/03/2017 Mujer 60 Negativo
13 09/03/2017 Hombre 66 Negativo
14 10/03/2017 Hombre 61 Positivo
15 12/03/2017 Mujer 50 Negativo
16 13/03/2017 Mujer 50 Negativo
17 15/03/2017 Mujer 62 Negativo
18 15/03/2017 Mujer 50 Positivo
19 16/03/2017 Hombre 57 Negativo
20 17/03/2017 Hombre 51 Negativo
21 23/03/2017 Mujer 50 Negativo
22 03/05/2017 Hombre 55 Negativo
23 05/05/2017 Mujer 58 Negativo
24 07/05/2017 Hombre 63 Negativo
25 07/05/2017 Mujer 54 Negativo
26 10/05/2017 Hombre 56 Negativo
27 12/05/2017 Mujer 50 Positivo
28 13/05/2017 Mujer 65 Negativo
29 14/05/2017 Hombre 60 Negativo
30 15/05/2017 Mujer 60 Negativo
Fig. 14
Fuente: Elaboración propia.
17
433%
867%
2 11%
1689%
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
Positivos Negativos
Resultados por sexo
Hombres Mujeres
6 20%
2480%
0
5
10
15
20
25
30
Relación de positivos y negativos
Positivos Negativos
Fig. 15
Fuente: Elaboración propia.
Fig. 16
Fuente: Elaboración propia.
18
4.3. Discusión
Respecto al primer objetivo, los datos obtenidos a partir de este cribado
manifiestan un 20% de resultados positivos para SOH, lo cual se sitúa muy por
encima de los obtenidos en el Área Sanitaria III que están alrededor de 7,9%,
pero se debe de tener en cuenta que este estudio se realizó sobre una población
diana de 30 individuos por los que no sería totalmente representativo.
Además, no sabemos con exactitud si todos los individuos que ha dado positivos
padecen realmente alguna lesión maligna o precancerosa, ya que únicamente
conocemos el seguimiento de tres personas: un varón de 64 años de edad que
se encuentra a la espera de realizar una colonoscopia a fin de averiguar las
causas del sangrado, y dos mujeres, una diagnosticada con anterioridad de la
enfermedad de Crohn y otra con hemorroides internas.
En relación al segundo objetivo, la prueba inmunoquímica Accu-Tell Rapid
FOB test es una excelente opción para el cribado del cáncer de colon y recto, y
de sus lesiones precursoras, junto con pruebas complementarias como la
colonoscopia. Sin embargo, en nuestro caso en particular, no sería viable hacer
una valoración estadística del estudio ya que se ha hecho a muy pequeña escala,
no obstante, es altamente recomendable su publicación con fines educativos y
de formación.
19
4.4. Conclusión
De acuerdo con los objetivos establecidos, se ha llegado a las siguientes
conclusiones:
Objetivo 1: Los datos obtenidos en la muestra poblacional analizada son
muy superiores a los datos del Área sanitaria III.
Objetivo 2: La prueba de SOH se considera una inmejorable técnica de
cribado ya que supone un cuantioso ahorro para la sanidad pública puesto que,
mientras tratar un cáncer costaría alrededor de 27.000€, el test de sangre oculta
en heces apenas llegaría a los 2€.
Objetivo 3: Cabe recalcar que es fundamental la colaboración e implicación
de las personas a la hora de formar parte de estos programas de detección
precoz, ya que de poco sirve que se establezcan si los individuos no acceden a
participar en ellos. En este caso sería imprescindible, por parte de las
autoridades sanitarias, un aumento y mejora de la información que disponen los
ciudadanos respecto a los programas de cribado del cáncer de colon y recto,
haciendo especial hincapié en la población de riesgo medio, así como fomentar
un estilo de vida saludable, donde se practique ejercicio físico de forma regular
y se evite el tabaco y el abuso de bebidas alcohólicas, además de seguir una
dieta equilibrada que incluya frutas y verduras, y que deje de lado el excesivo
consumo de carnes rojas procesadas y grasas saturadas de origen animal, todo
ello a fin de reducir la incidencia de este cáncer.
20
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Disponible en: http://www.lne.es/oviedo/2016/04/01/cancer-colon-avanza-asturias-
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