detección sulfonamidas

14
MÁSTER EN CIENCIA E INGENIERÍA AGRARIAS -TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS- “Comparación de técnicas de detección de sulfonamidas en leche de vaca” Celia Librán Cuervas-Mons

Transcript of detección sulfonamidas

Page 1: detección sulfonamidas

MÁSTER EN CIENCIA E INGENIERÍA

AGRARIAS

-TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS-

“Comparación de técnicas de detección de

sulfonamidas en leche de vaca”

Celia Librán Cuervas-Mons

Page 2: detección sulfonamidas

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

ÍNDICE

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 3: detección sulfonamidas

ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 4: detección sulfonamidas

SULFONAMIDAS (SAs)Agentes antibacterianos

LECHE → Alimento importante presente el la dieta de

niños y adultos.

LÍMITES LEGALES:• F.D.A. : 10 ppb (ng/mL)

• U.E. : Límite máximo de residuos= 100 µg/kg

• Sulfametazina →Tumores en la tiroides

HPLC y GC/MS Métodos ampliamente usados en el análisis de muestrasbiológicas

INTRODUCCIÓN

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 5: detección sulfonamidas

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

ÍNDICE

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 6: detección sulfonamidas

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

ARTÍCULOS

• Wenjuan Xu, et al. Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 7198–7207. Determination of sulfonamides in bovine milk with column-switching high performance liquid chromatography using surface imprinted silica with hydrophilic external layer as restricted access and selective extraction material.

Determinación de presencia de sulfonamidas porinyección directa de leche en el HPLC → Empleo deprecolumna RAM (“Restricted acces material”)

OB

JE

TIV

O

HPLC + 2 bombas. Detector UV (Abs(SAs)=268nm; Abs(BSA)=280nm). Válvula 10 pos. Columna C18 (5μm) (250mm x 4.6mm). Inyector loop 100μL. Flujo=1mL/min

Preparación muestra → Dilución de SAs stock en disolvente A y después en leche (25, 100 y 500 ng/mL)M

AT.

Y M

ÉT

OD

OS

Page 7: detección sulfonamidas

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

ARTÍCULOS

• Valerie B. Reeves. Journal of Chromatography B, 723 (1999) 127–

137. Confirmation of multiple sulfonamide residues in bovine milk by

gas chromatography–positive chemical ionization mass spectrometry. Desarrollo de un método de confirmación de la presenciaSFAs en leche fortificada y concentración de los mismoshasta una concentración de 10 ng/mL mediante GC-MS

OB

JE

TIV

OM

AT.

Y M

ÉT

OD

OS

GC: Columna capilar DB-1 30m x 0.25mm. Inyector split-splitless.

Tª inyector=240ºC. 1 µL muestra. Vel=32 m/s. Grad Tª: 1 min a

40ºC, 30ºC/min hasta 200ºC, 6ºC/min hasta 280ºC, 10 min a

280ºC.

MS: Interfase directa. Inyector automático split-splitless. Ionización

química positiva. Tª cuadrupolo=100ºC

Obtención muestras: Alimentación vacas y ordeño hasta alcanzar

40 ng/mL (Almacenamiento=-80ºC)

Preparación muestras: Separación de fases en la leche.

Evaporación de solventes. Extracción en fase sólida de

ciclohexil. Derivatización con N1-metil-N4-trifluoriacetil

Page 8: detección sulfonamidas

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

ÍNDICE

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 9: detección sulfonamidas

• GC-MS:– Buena recuperación de las sulfonamidas con

respecto a las estándars, excepto la sulfaquinoxalina→ Columna DB-1

– Fractura iónica buena con repeticiones en todas lasmuestras de m/z 190 y 222 → Anilina trifluroacilada. Correcta derivatización

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

• HPLC-UV:

– Separación total de la seroalbúmina bovina → Precolumna RA-MIP-GS

– Detección de todas las sulfonamidas → Empleo de 3 disolventes

RESULTADOS

Page 10: detección sulfonamidas

ÍNDICE

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 11: detección sulfonamidas

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

CONCLUSIONES

• Ambos métodos suponen una mejora

frente a métodos anteriores

• El método GC/MS requiere un

pretratamiento más laborioso

• El método GC/MS no da un buen

resultado para la sulfaquinoxalina

Page 12: detección sulfonamidas

ÍNDICE

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

1. INTRODUCCIÓN

2. ARTÍCULOS

3. RESULTADOS

4. CONCLUSIONES

5. BIBLIOGRAFÍA

Page 13: detección sulfonamidas

BIBLIOGRAFÍA

• Wenjuan Xu, et al. Journal of Chromatography A, 1217 (2010) 7198–7207. Determination of sulfonamides in bovine milk with column-switching high performance liquid chromatography using surface imprinted silica with hydrophilic external layer as restricted access and selective extraction material.

• Valerie B. Reeves. Journal of Chromatography B, 723

(1999) 127–137. Confirmation of multiple sulfonamide

residues in bovine milk by gas chromatography–positive

chemical ionization mass spectrometry.

TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS

CELIA LIBRÁN CUERVAS-MONS

Page 14: detección sulfonamidas

FIN