8/16/2019 Determinación de Plomo Inorgánico en Orina

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D ETERM IN ACIÓ N D EPLO M O IN O RG ÁN ICO EN

O RIN A

Francy Julieth Atuesta Hernández.

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Indicadores deexposición

Indicadores de efecto

LA PLUMBURIA (Pb-U)  se expresa en µg/g decreatinina o en µg/l de orinade 24 horas. La muestra deorina se recoge en

recipientes exentos de plomoy de!e ser mantenida entre2 "# y $ "# de temperatura.%e!e tenerse especialcuidado en e&itar la

contaminaci'n am!iental dela muestra. La plum!uria sedetermina por m(todos dea!sorci'n at'mica. )l &alornormal de *!+, es in-erior a µg/g de creatinina.

ÁCIDO DL!AAMI"OL#UL$"ICOURI"ARIO (ALA-U)

La acumulaci'n de ALA yposterior aumento de la excreci'nurinaria del ALA+, se producecomo consecuencia de lainhi!ici'n del plomo so!re el ALA+% y la estimulaci'n del ALA+

sintetasa. 0umerosos estudioshan demostrado 1ue la excreci'nurinaria de este indicador estáasociada a la cantidad de plomometa!'licamente acti&o en elorganismo lo 1ue podrá indicar

su utilizaci'n para e&aluar lacantidad de plomo mo&iliza!leantes del tratamiento 1uelante

e mide en mg/g de creatinina.#omo t(cnica anal3tica se utilizael m(todo %a&is.

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Determinación de plomo en orina - Método de

quelación-extracción / Espectrofotometría de

absorción atómica

la determinaci'n de plomo en orinapor espectro-otometr3a de a!sorci'n

at'mica con llama en un rango deconcentraciones de + µg de*!/litro de orina 524+ 64µmol/litro7.

)l m(todo es 8til para realizar elseguimiento de po!lacionesla!orales potencialmente expuestas

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Fundam ento

La muestra de orina se recoge en un -rascode polietileno utilizando ácido n3trico comoconser&ante. )l plomo se comple9a con

pirrolidinditiocar!amato de amonio 5A*%#7 yel comple9o se extrae con iso!utilmetilcetona5:;caci'n.

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Tom a de m uestra

Las muestras de orina pre-erentemente de 24 horasse toman en -rascos de polietileno 1ue contienen ml de ácido n3trico concentrado. %espu(s dehomogeneizar la muestra agitando se trans>ere unaal3cuota de 4 ml a un -rasco para en&iar al la!oratorio.

Hasta el momento de e-ectuar el análisis las muestrasde!en conser&arse re-rigeradas.

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Procedim iento

 ?odo el material de &idrio utilizado enel análisis despu(s de su la&adode!e mantenerse sumergido durante&arios minutos en ácido n3trico 1:1  yser despu(s cuidadosamenteen9uagado con agua !idestilada.

Limpieza delmaterial

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*reparaci'n de lamuestra

6. *ipetear 6 ml de orina en un tu!o de centr3-uga.

2. A@adir 6 ml de disoluci'n de ?rit'n +6/A*%# y agitarmecánicamente durante 6 segundos.

. A@adir 2 ml de :;

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*reparaci'n depatrones y cur&a de

cali!raci'n6. *reparar las disoluciones de B 6B 2 y µg

*!/ml

2. %e cada una de estas disoluciones pipetear 6 ml en

tu!os de ensayo.. #on cada uno de los patrones se sigue el mismo

proceso 1ue para las muestras

4. %e!e someterse al mismo proceso 1ue las muestrasy patrones un ensayo en !lanco de agua !idestilada.

. #on las lecturas o!tenidas para los patronescorregidas con el &alor del !lanco se construye lagrá>ca se@al+concentraci'n a9ustando los puntoso!tenidos a una recta.

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Cálculos

Los resultados expresados en micro gramo de plomo porlitro de orina se o!tienen mediante la siguiente expresi'nC

%ondeC# D #oncentraci'n de plomo en µg/litro de

orina. c D #oncentraci'n de plomo en µg/ml

le3da en la cur&a de cali!raci'n.Los resultados pueden re-erirse a la cantidad de creatininapresente en la muestra mediante la siguiente expresi'n

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Determinación del ácido delta-aminolevulínico

(AA! en orina - Método de intercambio iónico /

Espectrofotometría

La determinaci'n del ácido delta+aminole&ul3nico 5ALA7 enorina utiliza un m(todo espectro-otom(trico.

)s aplica!le a la determinaci'n de ni&eles de ALA >siol'gicos y

patol'gicos de hasta $ mg/; e1ui&alente a EE mg/gcreatinina para una creatinuria de 62 g/;.

La determinaci'n de ALA en orina es aplica!le como parámetrocomplementario del ni&el de plomo en sangre al seguimientode po!laciones la!oralmente expuestas a plomo o sus

compuestos i'nicos especialmente en el caso de ni&eles deexposici'n altos 5plum!emias superiores a µg/6 ml7.

#omo -actores 1ue pueden inGuenciar el aumento de ALA enorina aparte de la exposici'n a plomo o sus compuestosi'nicos hay 1ue tener en cuenta el alcoholismo agudoen-ermedades gra&es del h3gado y algunas -ormas de por>rias

hepáticas

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Fundam ento 

La orina se hace pasar a tra&(s de un sistema dedos columnas de intercam!io i'nico. )n la primera1ue contiene una resina ani'nica 1ueda retenido

el por-o!ilin'geno 9unto a otras inter-erencias.o!re la segunda conteniendo una resinacati'nica se retiene el ALA 1ue es posteriormenteelu3do con acetato s'dico. A continuaci'n se hacereaccionar con acetilacetona a pH 4E -ormándose

un compuesto pirr'lico 1ue a su &ez reacciona conel p+dimetilamino!enzoaldehido del reacti&o de)hrlich dando un crom'geno de color rosado 1uese mide espectro-otom(tricamente a nm

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Tom a de m uestra

ecoger la orina de 24 horas. A@adir mlde ácido clorh3drico concentrado. :ezclar

!ien y medir el &olumen total. #onser&arlore-rigerado. )n estas condiciones el ALA esesta!le al menos en 2 semanas.

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Procedim iento

e realiza una suspensi'n de la resinautilizando g de resina y ml de agua paracada columna. e depositan 6 ml de dichasuspensi'n en una columna de &idrio o

plástico con&enientemente cerrada con&idrio o algod'n de manera 1ue resulte unacolumna de 2 cm de altura y 6 cm dediámetro.

#olumnas deintercam!io

i'nico

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*reparaci'n delpatr'n

Diso%&ción patrón de ALA (' *+,*%)

*esar 2E mg de ALA+H#; disol&i(ndolo ya-orándolo a 6 ml con la disoluci'ntamp'n pH D 4E

Diso%&ción patrón de traba.o de ALA (*+,/'' *%)

)n el momento del análisis diluir 6. ml dela disoluci'n patr'n de ALA a 6. ml contamp'n acetato de pH D 4.E

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*rocedimiento deanálisis

6. #olocar la columna 1ue contiene la resinaani'nica so!re la cati'nica de manera 1ue laprimera descargue so!re la segunda.

2. *ipetear en la columna superior 1,0 ml de lamuestra de orina y 20,0 ml de agua !idestilada

. etirar y descartar la columna superior yreemplazar el matraz por un tu!o de ensayo de15 x 100 mm.

4. *ipetear 10,0  mL de la disoluci'n de acetatos'dico 1 : en la columna restante recogiendo eleluato en su totalidad

. A@adir a cada tu!o 2 ml de acetilacetona.

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E.*reparaci'n de !lanco y patr'nCI B%anco0 6 ml de acetato de sodio 6 : y 2 ml deacetilacetona.

IPatrón0  ml de acetato de sodio 6 :B 6 ml dedisoluci'n patr'n de tra!a9o de ALA y 2 ml deacetilacetona.

.agitar en(rgicamente los tu!os de muestras !lanco ypatr'n y mantenerlos al !a@o :ar3a hir&iente durante 6minutos.

$. )n cu!etas adecuadas colocar al3cuotas de 6 ml del!lanco patr'n y muestras. A@adir a cada una 6 ml delreacti&o crom'geno.

.:ezclar y esperar 6 minutos para 1ue se desarrolle elcolor

6.Leer las a!sor!ancia a nm -rente al !lanco. Lacoloraci'n o!tenida es esta!le s'lo durante 6 minutospor lo 1ue es necesaria su medida antes de 1uetranscurra este periodo.

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Cálculos

La concentraci'n de ALA en orina se calculamediante las siguientes ecuacionesC

donde #p es laconcentraci'n de

ALA en mg/6 mldel patr'n

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Referencias

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Gracias