Diagnostico De Tbc Por El Laboratorio 3

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METODOS DIAGNOSTICO PARA TUBERCULOSIS

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  • 1. DIAGNOSTICODE LA TUBERCULOSIS POR EL LABORATORIOORIANA RIVERA LOZADA BACTERIOLOGA ESPECIALISTA EN MICROBIOLOGIA

2. EPIDEMIOLOGIA TBC 3. DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL LABORATORIO

  • En el departamento del Cauca la tasa denotificados en el 2004 fue de 26.92 por 100.000 habitantes incrementndose en comparacin con la de 1994
  • 17.94 por 100.000

4. DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL LABORATORIO

  • COLOMBIA : 42 MILLONES HTS
  • 1/3 INFECTADOS: 14 MILLONES.
  • 5% ENFERMARAN: 700.000 HTS
  • LA MITAD EN 5 AOS: 350.000 HTS.
  • 70.000 CASOS NUEVOS POR AOS!!!!!!

5. DIAGNOSTICO DE MICOBACTERIAS POR EL LABORATORIO 6. ESQUEMADE LA PARED DE LAS MICOBACTERIAS 7. DIAGNOSTICO DE TBC POR METODOS TRADICIONALES 50-55 DIAS Pbas bioqumicas tradicionales (Niacina, Catalasa, Reduccin de Nitratos etc)IDENTIFICACIN DE LA ESPECIE 20-25 DAS Lowestein-Jensen Ogawa- KudohDETECCION DE CRECIMIENTO24 HORAS Coloracin de Kinyoun Coloracin de Ziehl-NeelsenEXAMEN DIRECTO TIEMPO PROMEDIO DEL REPORTE DESDE EL DIA EN QUE SE PROCESA LA MUESTRATECNICAS PROCEDIMIENTO 8. DIAGNOSTICO DE TBC POR METODOS TRADICIONALES 60 DIAS Mtodo de las proporciones mltiplesPRUEBAS DE SENSIBILIDADTIEMPO PROMEDIO DEL REPORTE DESDE EL DIA EN QUE SE PROCESA LA MUESTRATECNICAS PROCEDIMIENTO 9. DIAGNOSTICO DE TBC POR METODOS RECOMENDADOS POR EL CDC 18 das BACTEC, Sondas deADN, HPCLIDENTIFICACIN DE LA ESPECIE 15 das BACTEC,DETECCION DE CRECIMIENTO24 horas Coloracin Auramina/RodaminaEXAMEN DIRECTO TIEMPO PROMEDIO DEL REPORTE DESDE EL DIA EN QUE SE PROCESA LA MUESTRA TECNICAS PROCEDIMIENTO 10. DIAGNOSTICO DE TBC POR METODOS RECOMENDADOS POR EL CDC 30 das BACTECPRUEBAS DE SENSIBILIDADTIEMPO PROMEDIO DEL REPORTE DESDE EL DIA EN QUE SE PROCESA LA MUESTRA TECNICAS PROCEDIMIENTO 11. BACILOSCOPIA CON TINCIONES ACIDORRESISTENTES

  • Es muy til en tuberculosis pulmonar, donde con tres baciloscopias del esputo se puede establecer la presencia de micobacterias en un 70% a 80%

12. BACILOSCOPIA CON TINCIONES ACIDORRESISTENTES

  • Se utilizan dos tipos de coloraciones para microorganismos acidorresistentes:
  • Coloraciones con carbolfuscina:
  • Ziehl-Neelsen
  • Kinyoun
  • Coloracin con fluorocromo: Auramina O, con o sin un segundo fluorocromo, la Rodamina.

13. COLORACION DE ZIEHL-NEELSEN 14. COLORACIN A AURAMINA-RODAMINA 15. Comparacin entre los tiempos requeridos para observar extendidos negativos coloreados con una coloracin convencional y Auramina-Rodamina 15 Minutos 3 Minutos S:96.5% E: 98% TIEMPO TOTAL PARA OBSERVAR UN EXTENDIDO 300 30 MAXIMO DE CAMPOS OBSERVADOS 1000X 400X AUMENTO FUSCHINA AURAMINA-RODAMINA CONDICION 16. Comparacin entre los tiempos requeridos para observar extendidos negativos coloreados con una coloracin convencional y Auramina-Rodamina 12 horas con 50 minutos 2 horas con 5 minutos TIEMPO TOTAL PARA 50 EXTENDIDOS FUSCHINA AURAMINA-RODAMINA CONDICION 17. BACILOSCOPIA Y TINCIONES ACIDORRESISTENTES

  • Ulukanligil y col. compara dos mtodos de tincin, la fluorescencia y Ziehl-Neelsen en un total de 465 muestras obtenidas de 295 pacientes con el fin de determinar la sensibilidad para detectar tuberculosis.

18. BACILOSCOPIA Y TINCIONES ACIDORRESISTENTES 80% 66% 61% Ziehl-Neelsen 92% 83% 83% Fluorescencia TRES MUESTRAS DOS MUESTRAS UNA MUESTRA TIPO DE TINCION 19. MEDIOS DE CULTIVO 20. MEDIOS DE CULTIVO

  • Lowestein-jensen.
  • Kirchen.
  • Middlebrook (7H9, 7H10 Y 7H11).
  • Ogawa Kudoh. (OK).
  • Stonebrink modificado por Giraldo (STG).

21. MTODO DE CULTIVO EN CAPA DELGADA MCD 22. Porcentaje de deteccin de las muestras positivas comparando los dos cultivos (CIB) EN 761 MUESTRAS 76.2% 40.4% 14.6% 1.3% LJ 100% 95.2% 82.3% 65.3% MCD 4 SEMANA 3 SEMANA 2 SEMANA 1 SEMANA Medio de cultivo 23. Tiempo (das) necesario para obtener el crecimiento en cada medio de cultivo CIB 28.5 +/-9.3 24.6+/- 7.3 26.5+/- 8.6 LJ 14+/-7.1 8.4+/- 3.2 11+/- 4.9 MCD Muestras extrapulmonares Muestras pulmonares Todas las muestras Medios de cultivos 24. SISTEMA MGIT(Mycobacterial Growth indicator tube) 25. COMPARACION DE MGIT CON OK Y MCD 5.6% 99.1% 71.1% 15.1% MCD 15.5% 94.1% 84% 24.3% MGIT 4.6% 24.7% OK SENSIBILIDAD EN MUESTRAS PAUCIBACILARES ESPECIFICIDAD SENSIBILIDAD PORCENTAJE DE POSITIVIDAD MEDIO DE CULTIVO 26. SISTEMA BACTEC 27. BACTEC 9000 28. Evaluation of Nonradiometric System (BACTEC 9000 MB) for Detection of Mycobacteria in Human Clinical Samples.1997 PORCENTAJE DE RECUPERACION DE MICOBACTERIAS 95.1% 10.3 91.9% 10.0 69.3% 27.3 TOTAL DIAS + 82.3% 88.2% 52.9% Especimenes NO respiratorios100% 93.3% 75.5% Especimenes respiratoriosBACTEC 9000 BACTEC 460 LJ TIPO DE MUESTRAS 29. II Difco ESP culture system 30. Multicenter Comparison of ESP Culture System II with BACTEC 460 TB and with Lowenstein-Jensen Medium for Recovery of Mycobacteria from diferent Clinical Specimens including Blood 199833.3% 27 66.6% 17 100%* 18 SANGRE TIME 64.8% 67.6% 90.5%* 85.3%* 77.0% 85.3%* Respiratorias NO Respiratorias 64.4% 89%* 78.9% TODAS LJ BACTEC ESP II MUESTRA 31. BACTEC 960 MGIT 32. Comparison of Recoveries ofMycobacterium tuberculosisusing the automated BACTEC MGIT 960 System, The BACTEC 460TB System, and Lowenstein-Jensen Medium 2000( ) 50% 81.8% 80.7% 36.2 LJ Tiempo 100% 92.7% 93.0% 16.8 BACTEC 460 Tiempo 100% 96.4% 96.5% 13.2 BACTEC MGIT 960 Tiempo MNT M.tuberculosis TODAS LAS MICOBACTERIAS MEDIO 33. CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PRESION (HPCL) 34. Identificacin correcta por HPCL deM. tuberculosissegn diferentes autores 100 98 319 80 319 82 3 Butler (1991) CIB 100 122 122 2 Guthertz (1993) 99 648 649 1 Glickman(1994) CONCOR. ( %) No. confir. HPCL NO CEPAS EVALUADAS REFERENCIA 35. MAPIA (Prueba serolgica multiantignica )

  • La protena de 38 Kd
  • El complejo antignico 45/47 Kd
  • El antgeno de 16 Kd,
  • Las protenas ricas en glicina PE_PGRS
  • El antgeno de 30 Kd o 85b .

36. MAPIA (Prueba serolgica multiantignica) 37. MAPIA (Prueba serolgica multiantignica

  • Su desventaja es que la sensibilidad puede variar ya que los pacientes responden a diferentes antgenos y no existe un antgeno dominante en tuberculosis .

38. MAPIA (Prueba serolgica multiantignica

  • INS
  • 66 suerospacientes con enfermedad tuberculosa comprobada
  • 47 sueros de individuos sin tuberculosos
  • anticuerpos para 8 antgenos :
  • 3 mezclas enriquecidos antgenos
  • 5 antgenos recombinantes.
  • SENSIBILIDAD5%, y 83%
  • ESPECIFICIDAD 9% y 100%

39. PCR REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA 40. PCR REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA

  • Inmunologa del Hospital San Juan Dios
  • 147 pacientes, la mayora extrapulmonares.
  • Sensibilidad 100%
  • Especificidad 95.3%

41. PCR

  • RELACTB
  • (Red Latinoamericana y del Caribe de investigacin en tuberculosis).
  • Cada laboratorio recibi 30 muestras .
  • los resultados mostraron gran variabilidad en la sensibilidad y especificidad .
  • La sensibilidad y especificidad general obtenida fue 55% y 71.6% respectivamente.

42. PCR LABORATORIO INMUNOLOGA, UNIVERSIDADDEL CAUCA 66.6% 14 28 TBC CLINICA 92.5% 1 12 TBC ESTABLECIDA S ENSIBILIDADPCR NEGATIVO PCR POSITIVO MUESTRA 43. TCNICASMOLECULARES RECIENTES Amplicor test

  • Estatecnica detecta la presencia de mycobacterial 16 S ribosomal RNA (rRNA) gen por PCR amplificacin seguido por una reaccin de ELISA.
  • especificidad99%
  • sensibilidad 80%-92%

44. TCNICASMOLECULARES RECIENTES el EnchancedM. tuberculosisDirect Test (E-MTD; Gen-Probe, San Diego).

  • Este ensayo es basado en la transcripcin mediada porun sistema de amplificacin (TMA). El mycobacterial rRNA.
  • EL RNA amplicon producido es detectado en solucin usando luminometrico. Esta aprobado solo para muestras respiratorias

45. MTODOS PARA DETERMINAR LA SUCEPTIBILIDAD DEMycobacterium tuberculosis (MTB)

  • mtodo de las proporciones mltiples .
  • BACTEC .
  • luciferasa
  • . sondas de acidos nucleicos .
  • Citometra de Flujo (CMF)

46. CONCLUSIONES

  • El diagnstico es la piedra angular dentro de la lucha de la TBC.
  • Las pruebas con alta tecnologa son inviables en pases pobres donde se concentra la mayora de pacientes con TBC.
  • Deben existir programas que ayuden a instaurar las nuevas tecnologas.

47. CONCLUSIONES

  • A Pesar de los grandes avances en los mtodos diagnsticos contra la tuberculosis, hay muchos factores que limitan su aplicacin a la poblacin que mayormente lo requiere, por lo tanto falta mucho tiempo para decir que erradicamos a nuestra compaera de los ltimos 10 mil aos:
  • La tuberculosis

48. GRACIAS