Domesticación de la Uña de Gato Taming the Cat's Claw con individuos élite en contenido de POAs...

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Domesticación de la Uña de Gato Taming the Cat's Claw con individuos élite en contenido de POAs (Penta Oxindol Alcaloids). With elite individuals POAs content (Penta oxindole Alcaloids). Con clonación

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Domesticación de la Uña de Gato

Taming the Cat's Clawcon individuos élite en contenido de POAs (Penta Oxindol Alcaloids).

With elite individuals POAs content (Penta oxindole Alcaloids).Con clonación

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Tenemos 5 componentes para alcanzar este objetivo.

We have 5 components to achieve this goal.

1 Efectuar colecta general en el bosque amazónico, en rodales de Uncaria, suficientemente distanciados

geográficamente.1 Perform generally collected in the Amazon forest, Uncaria stands, sufficiently far apart geographically.

2 Efectuar análisis fitoquímico con HPLC, de cada muestra, para determinar las plantas con mayor contenido de los POAs.

2 Perform phytochemical HPLC analysis of each sample to determine the plants with higher content of the POAs.

3 Micro propagar las UDGs seleccionadas, que presenten un alto contenido de POAs. Estos, serán convertidos en clones de Quimiotipos, que ya serán productos agrícolas cultivables.

3 Micro propagate, Uncarias selected which have a high content of POAs. These will be converted into clones of Chemotypes, already are arable agricultural products.

4 Determinar la variabilidad genética, de las muestras tomadas, para su identificación en

base a ADN.4 Determine the genetic variability of the samples taken for identification based on DNA.

5 Establecer prototipos, de sistemas agrícolas, para el aprovechamiento de las hojas de Uncaria.

5 Establish prototypes, agricultural systems for the use of Uncaria leaves.

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La colecta, con se realizó en el período del Hito 1 del Proyecto. Por problemas (Alta mortalidad), en la fase de traslado de esquejes, desde la colecta a la zona de enraizado, y en la fase de viverización, se

tuvieron que repetir 3 colectas para llegar a las muestras planificadas. The Collection, to be held in the period Milestone 1 Project. Problems (high mortality) in the phase transfer cuttings from the collection to the rooting zone, and viverización phase, they had to repeat 3 collections to reach the planned samples.

Colecta

Each stand of Uncaria is

georeferenced. You can determine its origin. To study

the soil

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Análisis fitoquímico con HPLC, de cada muestra, para determinar las plantas con mayor contenido de los POAs.

Phytochemical HPLC analysis of each sample to determine the plants with higher content of the POAs.

 Durante la colecta general en el bosque, se tomaron Hojas de cada Uncaria encontrada. Se identificaron y se entregaron para su análisis. Se están realizando los análisis en laboratorios con HPLC MS y HPLC NMR. La información recibida, permitirá seleccionar las Uncarias de alto valor fitoquímico.

During the general collection in the forest, they leave every Uncaria found were taken. They were identified and handed over for analysis.They are performing laboratory analysis with HPLC MS, HPLC and NMR. The information received will enable Uncarias select high phytochemical value.

SE está haciendo Un análisis con colaboración de la UNAS (Universidad Agraria de la Selva) Con el Dr. Manuel Sandoval. No

asegura datos confiables. It's getting Analysis in collaboration with UNAS (Agrarian University of the Jungle) With Dr. Manuel Sandoval. Does not ensure reliable data.

Se está haciendo un Análisis con La Universidad de Varsovia en Polonia

It is doing a review with the University of Warsaw in Poland

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Introduction terminal and axillary buds of Uncaria the laboratory IBT Agrarian University to develop micropropagation protocol.Se están trabajando en laboratorios del IBT. de la U. Agraria la Molina y en la Biofábrica de Estevia ONE de Tarapoto. Se están desarrollando protocolos de micro propagación a partir de Yemas terminales y

axilares de UDG. Como reporta la literatura científica se encuentra una gran mortalidad en este proceso por problemas de contaminación. Ya se estableció un protocolo de desinfección. Falta la de micropropagación

. They are working in laboratories IBT. U. Agraria La Molina and Stevia ONE, Biofactory of Tarapoto.They are developing micropropagation protocols, from terminals and axillary buds, of Uncaria.

As reported by the scientific literature it is high mortality in this process by pollution problems. And disinfection protocol was established. Work is micropropagation protocols.

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Uncaria bud. Harvested in the garden collection

Garden Collection. February 2015

Garden Collection. July 2015

Young Uncaria

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Procedures:

1.- DNA genotypes Cat's claw is removed.2.- For quantification of the concentration of the DNA bands of molecular weight marker Lambda cut with PstI and this allows comparison of bands obtained from each of the samples used. 3.- Then proceed to develop the AFLP technique. Which consists of 4 stages:  a) Digestion was performed with two restriction enzymes, EcoRI and MseI. Samples were then incubated at 37 ° C for a period of 4 hours. b) Ligating the digested DNA. c)Pre-amplification of digested DNA fragments and ligated d) Selective amplification. 4.- Then proceed to make a vertical gel electrophoresis in 6% polyacrylamide which an amplification profile where each genotype have bands in common and other exclusive be displayed.5.- These exclusive bands will be extracted from the polyacrylamide gel to be re amplified PCR, which will be displayed and recovered from agarose gel to command sequence with that specific information be designed first.5.- This will allow us molecular easy identification of genotypes

Molecular characterization of DNA Uncaria.

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Establecer prototipos de sistemas agrícolas para el aprovechamiento de las hojas de Uncaria.

• Esta área de trabajo tiene 7 Componentes:

• Mantenimiento de los Jardines: De Colecta y Clonales.• Colectas de Yemas, y micro propagación, según la demanda

de los agricultores.• Micro propagación de las plantas selectas• Establecimiento del sistema de Enraizamiento de plántulas

clonadas.• Viverización de Plantines enraizados.• Entrega a los agricultores de Plantones para su siembra.• Tener áreas sembradas de Clones de alta calidad para la

comercialización de Hojas.

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This workspace has 7 components: Maintenance Gardens: Collection and Clone. Bud collections and micro propagation, as demand from farmers. Micro propagation of selected plants Rooting establishment of the system of cloned seedlings. Viverización rooted seedlings. Delivery seedlings to farmers for planting. Having planted with high quality clones for? Leaves marketing areas.

Establish prototype systems for agricultural use  Uncaria leaves.

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Logros actuales con avance del proyectoSe tiene sembrado en Jardín de Colecta 69 accesiones de plantas de UDG. Perfectamente Identificadas en su procedencia con sus coordenadas geográficas. Y se tiene ubicados los rodales de las plantas que no prosperaron en el Jardín de colecta.

Se tiene el protocolo de enraizamiento de yemas de UDG.

Se tiene el protocolo de extracción de ADN de muestras frescas de UDG.

Se tiene 120 muestras de UDG, en análisis de HPLC NMR, en 2 laboratorios para determinar los individuos elite para micropropagarSe tiene preparado terrenos para el Jardín de clones y el sistema riego para

producir yemas y hojas, de UDG, en época de estío en el Km. 19 de Pucallpa.

Se tiene el proyecto de tesis para estudiar el comparativo de micro nutrientes del suelo, para conocerlo y reproducirlo en cada lugar de siembra con fertilización de microelementos.

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Current progress with project implementation

It is sown in Garden Collection 69 accessions Uncaria plants. Perfectly identified in their origin with their geographical coordinates. And he has placed the stands of plants that did not prosper in the Garden collection.

Rooting protocol buds Uncaria have.

The DNA extraction protocol of fresh samples UDG have.

120 samples have Uncaria, analysis of HPLC NMR in 2 laboratories for elite individuals micropropagate

Have prepared land for the Garden of clones and irrigation system to produce buds and leaves, UDG, in summer season at Km. 19 Pucallpa

The thesis project has to study the comparative soil micronutrients to meet and play in each planting site with micronutrients fertilization.

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Actividades que faltan realizarse en el Proyecto.

1) Recepción de los análisis HPLC de los laboratorios, identificando a las Uncarias élite.2) Creación del protocolo de micro propagación de Uncaria élite, para convertirse en semilla de los cultivos

agrícolas de hojas de Uncaria. Esta actividad requiere el informe de la Dra. Iwona Wawer, designando a las planta élite.

3) Identificación con ADN de las plantas élite, para certificaciones de autenticidad en siembras de grandes extensiones agrícolas.

4) Creación del Jardín Clonal. Con las plantas élite ya seleccionadas. Que será el almacén de germoplasma para proveer yemas de Uncarias élite, para la micro propagación y entrega de semillas.

5) Creación de Jardines clonales, en cada zona de producción. Permitirá identificar el clon que más se adapte a la zona y además permitirá la disponibilidad de semillas para los agricultores de la zona.

6) Creación de campos productores de semilla, para tener disponibilidad para pequeños agricultores. Para grandes cultivos, la semilla deberá provenir de laboratorios de micro propagación.

7) Establecer campos de siembra agrícola de Uncaria con 3 características:a. Compra de terrenos, con suelos especiales para el cultivo, para la siembra de productos de propiedad del

proyecto b. Contratación y alquiler de terrenos con la mano de obra de sus propietarios para la siembra de Uncaria

de propiedad del proyecto.c. Captación de agricultores para que siembren Uncaria. La producción sería de propiedad del agricultor. Se

le tiene que financiar la siembra y el mantenimiento del cultivo hasta que inicie su producción. Se les garantiza la compra de su producto.

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Activities performed in the project.1. Reception of the HPLC analysis laboratories, identifying the Elite Uncarias.

2. Creating micropropagation protocol of Uncaria elite, to become seeds for agricultural crops Uncaria leaves. This activity requires the report of Dr. Iwona Wawer, appointing the elite level.

3. DNA identification of elite plants, for certificates of authenticity in planting large agricultural areas.

4. Clonal Garden creation. With elite and selected plants. Which will store germplasm to provide Uncarias yolks elite for micro propagation and seed delivery.

5. Creation of clonal gardens in each production area. It will identify the clone that best suits the area and also allow the availability of seeds to farmers in the area.

6. Creating seed production fields to be available to small farmers. For arable crops, the seed should come micropropagation laboratories.

7. Set seeding agricultural fields Uncaria 3 features:

1. Purchase of land, with special soil for cultivation, for planting project ownership products.

2. Hiring and rental of land with the labor of their owners for planting project Uncaria property.Attracting farmers to plant Uncaria.

3. Production would be owned by the farmer. You will have to finance the planting and maintenance of cultivation until production starts. They are guaranteed the purchase of your product.