Educ Salud Hematologia

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19/04/2008 1 Máster en Ciencia, Tecnología y Uso Racional del Medicamento Programa Oficial de Posgrado: “Farmacia” EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN OFICINA DE FARMACIA OFICINA DE FARMACIA HEMATOLOGÍA HEMATOLOGÍA Dr. Alfonso Mate Dpto. Fisiología y Zoología Facultad de Farmacia. Universidad de Sevilla Máster CITURME POP Farmacia #Organización LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA Circuito de autoridad Circuito de material de trabajo Circuito de información #Laboratorios. Localización y estructura Á Área de trabajo Espacios secundarios Espacio de circulación

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Máster CITURME POP FarmaciaMáster en Ciencia, Tecnología yUso Racional del Medicamento

Programa Oficial de Posgrado: “Farmacia”

EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN EDUCACIÓN PARA LA SALUD EN OFICINA DE FARMACIAOFICINA DE FARMACIA

HEMATOLOGÍAHEMATOLOGÍA

Dr. Alfonso MateDpto. Fisiología y ZoologíaFacultad de Farmacia. Universidad de Sevilla

Máster CITURME POP Farmacia

#Organización

LABORATORIO DE HEMATOLOGÍALABORATORIO DE HEMATOLOGÍA

g•Circuito de autoridad

•Circuito de material de trabajo•Circuito de información

#Laboratorios. Localización y estructuraÁ•Área de trabajo

•Espacios secundarios

•Espacio de circulación

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MESAS MODULARES DE LABORATORIO

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1. Zona de espera

ó

EXTRACCIONES

2. Recepción

3. Áreas de extracción

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#Facultativos

J f i i

PERSONAL DEL LABORATORIO

•Jefe servicio

•Jefe sección

#Enfermería

•Supervisor DUE

•Enfermeros

•TEL

•Auxiliares de clínica

#Personal administrativo

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#Laboratorio de Urgencias

FORMAS DE TRABAJO EN DIFERENTES LABORATORIOS

g•Funciona las 24 h

•Número de pruebas limitado

•Respuesta lo más rápida posible

•Problemas de calibración, reproducibilidad

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FORMAS DE TRABAJO EN DIFERENTES LABORATORIOS

#Laboratorio Programadog

•Horario de recepción de muestras limitado

•Todo tipo de pruebas

•Tiempo estandarizado para cada prueba

•El control de calidad tiene mejores resultados

•Agrupa determinaciones menos frecuentes

•Resultados más fiables con mayor rendimientode trabajo y menor coste

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#Partes de un volante

VOLANTES

•Datos del paciente

•Peticionario

•Datos de la muestra

•Pruebas solicitadas

•Sección del laboratorio a la que va dirigidaSecc ó de a o a o o a a que a d g da

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#Características de un volante

VOLANTES

•Autocopiable o no

•Automatizable

•Números y etiquetas

#Tipos de volantes

•Blancos o abiertos•Blancos o abiertos

•Preestablecidos

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VOLANTES

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•Tipos

INFORMES

•Integrados

•Elaborados

•Archivos de informes

•Solicitud de copia de informes

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#Aparatos más comunes•Lavadora de material de vidrio, lavado de pipetas

APARATOS

•Baño de ultrasonidos•Estufa de secado, autoclaves

•Frigoríficos, cámara fría, congelador, máquina de hielo

•Relojes avisadores con o sin cronómetro•Baños con o sin termostatos

•Sistema purificadores de aguas: desionizador

•pH-metros•pH-metros

•Bombas de vacío

•Bombas peristálticas

•Ordenadores. Impresoras•Sistema de alimentación ininterrumpida (SAI)

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#Separación , manejo y preparación de muestras•Centrífugas

APARATOS

•Diluidores automáticos

•Agitadores

•Dispensadores o dosificadores•Procesadores de muestras automatizados

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CentrifugasBaños Reloj

Bombas de vacío

Desionizador

pH-metros

BalanzasCentrifugas

Bombaperistáltica

Termostato

AgitadoresDosificadores

Baño de limpiezade ultrasonido

EstufaMáquinahielo

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•Aparatos para la realización de técnicas ópticas

•Espectrofotómetros

APARATOS

•Espectrofotómetros

•Fluorómetros

•Fotómetros de llama

•Fotómetros de absorción atómica

•Nefelómetros (turbidímetros)

•Autoanalizadores

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•Otros aparatos

•Lector de ELISA

APARATOS

•Lector de ELISA

•RIA, contadores radiaciones beta y gamma

•Electroforesis: fuente alimentación, cubetas, fotodensitómetro

•Analizadores electroquímicos: iones, gases

•Bilirrubinómetro

•Osmómetro

•Citómetro de flujo

•Cromatógrafos

•Termociclador

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FluorímetroEspectrofotómetros

Fotómetro de llama

Autoanalizador RIA

Electroforesis

EAACitómetro de flujoCromatógrafos

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#Fase preanalítica

•Solicitud de las pruebas

CONTROL Y GARANTÍA DE CALIDAD

•Solicitud de las pruebas

•Preparación del paciente

•Obtención de las muestras

•Transporte al laboratorio

•Calibración instrumental, preparación soluciones

#Fase analítica → Realización técnica de las pruebas#Fase analítica → Realización técnica de las pruebas

•Selección correcta de las técnicas

•Utilización de materiales de control

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#Fase postanalítica

CONTROL Y GARANTÍA DE CALIDAD

•Validación de los resultados

•Limpieza instrumentos, eliminación muestras

•Emisión del informe

Garantía de calidad integralCCICCIEECBPL

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RECOGIDA Y MANIPULACIÓN DE MUESTRASRECOGIDA Y MANIPULACIÓN DE MUESTRASCOLORANTES EN HEMATOLOGÍACOLORANTES EN HEMATOLOGÍA

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Composición

Clasificación•Albúminas (54%)Proteínas

•Globulinas α,β,γ (38%)

•Fibrinógeno (7%)

•Otras (1%)

Funciones

•Transporte

•Regulación pH sanguíneo

•Defensa inmunitaria

plasmáticas

•Hemostasia

•Nutritiva

•Viscosidad

•Presión oncótica =

= presión coloidosmótica

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#Punción venosa

•Región antecubital yugular o femoral en RN dorso de

NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

•Región antecubital, yugular o femoral en RN, dorso dela mano y pie en ancianos y obesos

•Punción limpia. Evitar coágulos

•En pacientes con terapia de anticoagulante se debepresionar la herida durante 10 min.

•Procedimiento

Brazo caliente y cinta elástica en el brazo

Cerrar el puño para ver las venas

Limpiar con solución desinfectante

Realizar punción limpia

Liberar el compresor

Abrir puño y extraer aguja. Presionar

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#Punción venosaTubos estériles al vacío con anticoagulante

NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

•Tubos estériles al vacío con anticoagulante

•En el caso de jeringa y aguja se llenan de sangre los tubos

(que llevan anticoagulante), quitando previamente la aguja y

resbalando la sangre por la pared de los tubos, y se mezcla por

inmersión

•Tubos bien identificados. Botón rojo muestras infecto-

contagiosas

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#Punción capilar

M t d ñ difi lt d

NORMAS PARA CORRECTA EXTRACCIÓN SANGUÍNEA

•Muestras de sangre pequeñas o dificultades pararealizar la venopunción

•Pulpejo del dedo, lóbulo oreja o talón del pie (RN)

•Lancetas estériles con un tope

•Técnica:

VasodilataciónVasodilatación

Desinfectar y secar

Pinchar con la lanceta, desechar las primeras gotas yllenar el capilar o pipetas

•Extensiones de sangre periférica, Hematocrito, Hb

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#Utilidades anticoagulantes

ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

•Obtener plasma o muestras de sangre total

•Estudiar características morfológicas

•Realizar recuentos celulares

#Propiedades anticoagulantes

•No alterar la morfología de los leucocitos

•No alterar el tamaño eritrocitario

•No producir hemólisis

•Impedir agregación plaquetaria

•Máximo tiempo de conservación de la muestra

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#EDTA

Ef t l t b l C

ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

•Efecto quelante sobre el Ca

•EDTA-Na2

•EDTA-K3. Para recuento celular en autoanalizador

#Heparina

•Impide el paso protrombina → trombina

•No modifica las características celulares de leucocitos y

eritrocitos, pero proporciona color azul en los frotis de

tinciones panópticas

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#Citrato sódico

I id i i ió d l C

ANTICOAGULANTES EN HEMATOLOGÍA

•Impide ionización del Ca

•Se utiliza en:

Pruebas de hemostasia (1:9)

VSG (1:4)

#Oxalato sódico

•Pruebas de hemostasia (1:4)

#ACD (Ácido cítrico 0,9 g; Citrato sódico 2 g; Dextrosa 2 g;

H2O 120 mL)

•Bancos de sangre (1:4)

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Materiales: Portaobjetos esmerilados, limpios y libres de grasa

EXTENSIONES DE SANGRE

CubreobjetosMétodo de los dos portaobjetos:

Depositar una gota de sangre en un extremo del portaobjetos

Colocar otro portaobjetos sobre el anterior con la gota de sangre, con una inclinación de 45º

Desplazarlo hacia atrás hasta entrar en contacto con la gota y permitir que, por capilarización, la gota se extienda a lo largo del canto del portaobjetosdel canto del portaobjetos

Deslizar el segundo portaobjetos inclinado sobre el primero de manera suave y rápida, para permitir que la gota de sangre queda extendida

A mayor inclinación, extensión más gruesa. Menor inclinación = extensión más fina

Secado a temperatura ambiente

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Realización de un frotis

EXTENSIONES DE SANGRE

Máster CITURME POP Farmacia

Método de los dos cubreobjetosPartes de un frotis

EXTENSIONES DE SANGRE

Métodos de los dos cubreobjetos:

D b i li i Dos cubres sin grasa limpios y secos

Colocar en uno una pequeña gota de sangre

Sujetarlo por los vértices e invertirlo colocándolo sobre el otro rotándolo 45 º

Por capilaridad se extiende la gota

Secar

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#Para el laboratorio de hemostasia (citrato Na)

•PPP (1500 g 15 min ): TP TTPA fibrinógeno

PROCESAMIENTO DE MUESTRAS

•PPP (1500 g 15 min.): TP, TTPA, fibrinógeno

•PRP (<500 g 15 min.): Determinación de plaquetas

#Para el laboratorio de hematimetría (EDTA-K3)

•Recuentos celulares

•Recuento de reticulocitos

•Hb

•Hematocrito

•Índices eritrocitarios

•Índices plaquetarios

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#Tipos de colorantesBá i ( ió i ) b fili

COLORANTES EN HEMATOLOGÍA

•Básicos (catiónicos): basofilia

•Ácidos (aniónicos): acidofilia

•Neutros (aniónicos y catiónicos): acidofilia o basofilia

#Tipos de tinciones•Tinción pancromática: azul de metileno, eosina, Wright

i ió ó i•Tinción panóptica: May-Grünwald-Giemsa

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#Terminología•Acidofilia: A ide po colo antes ácidos (e g eosinófilos)

COLORANTES EN HEMATOLOGÍA

•Acidofilia: Avidez por colorantes ácidos (e.g. eosinófilos)

•Basofilia: Avidez por colorantes básicos (e.g. basófilos)

•Azurofilia: Coloración violácea-rojiza (y no azul)

•Hipocromía: Falta de intensidad en la coloración

(e.g. Anemia ferropénica)

•Hipercromía: Refuerzo de la tinciónHipercromía: Refuerzo de la tinción

•Anisocromía: Distintas intensidades de la coloración

en el mismo tipo de células

•Policromasia: Distinto color en el mismo tipo celular

Velocidad de sedimentación globular

(VSG): factores que influyen

ESTUDIO DE LOS ERITROCITOSESTUDIO DE LOS ERITROCITOS

•Físicos

•Químicos

•Biológicos: embarazo y menstruación

•Plasmáticos: albúmina ↓VSG / fibrinógeno y globulinas ↑VSG

Soporte pipetas Westergreen

Plasmáticos: albúmina ↓VSG / fibrinógeno y globulinas ↑VSG

•Eritrocitarios: carga eléctrica, número, tamaño y forma

•Factores ajenos a la sangreAnticoagulante, hemólisis, limpieza material

Inclinación tubo, burbujas de aire, vibraciones, Tª, diámetro tubo

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Resultados VSG:•En mm a la 1ª(a) y 2ª(b) hora•Índice de Katz: (a + b/2)/2Los valores normales de referencia son:

Velocidad de sedimentación globular

•Recién nacidos: de 0 a 2 mm/h.•Lactantes: hasta 10 mm/h.•Hasta la pubertad: hasta 11mm/h.•Hombres jóvenes: hasta 10 mm/h.•Hombres adultos: hasta 12 mm/h.•Hombres mayores: hasta 14 mm/h.•Mujeres jóvenes: hasta 12mm/h.•Mujeres adultas: hasta 19 mm/h.•Mujeres mayores: hasta 20 mm/h

•VSG aceleradaSoporte pipetas Westergreen

VSG acelerada•Embarazo, puerperio, lactante y senectud•Anemia intensa•Procesos inflamatorios infecciosos: Infecciones agudas y crónicas•Inflamaciones y disproteinemias no infecciosas: gota, neoplasias, infartos, traumatismos

•VSG retardadaRecién nacidosHipoproteinemia por dilución plasmática sin anemia

HEMOGRAMA

•Parámetros cualitativos

OTROS MÉTODOS PARA EL ESTUDIO DE OTROS MÉTODOS PARA EL ESTUDIO DE LOS ERITROCITOSLOS ERITROCITOS

Morfología celularFórmula leucocitaria

•Parámetros cuantitativosHemoglobinaHematocrito

Recuentos celularesRecuentos celularesÍndices eritrocitarios: VCM, HCM, CHCMRecuento de reticulocitos

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Anisocitosis (tamaño)•Macrocitosis•Microcitosis

Alteraciones morfológicas de los eritrocitos

Poiquilocitosis (forma)•Esferocitosis

•EliptocitosisD epanocitosis

•Esquistocitosis•Megalocitosis•Microesferocitosis

•Drepanocitosis•Dianocitosis•Equinocitosis•Estomatocitosis•Dacriocito•Acantocito

Alteraciones morfológicas de los eritrocitos

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Alteraciones morfológicas de los eritrocitos

Anisocromía (coloración)•Hipocromía

Alteraciones morfológicas de los eritrocitos

Inclusiones eritrocitarias•Punteado basófilo•Anillos de Cabot

•Hipercromía•Policromasia

•Anillos de Cabot•Cuerpos de Howell-Jolly•Parásitos (Plasmodium)

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Alteraciones morfológicas de los eritrocitos

Hemograma: Parámetros cuantitativos

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Cifra total de leucocitos

Valores normales5 10 x 109/L

Hemograma: Parámetros cuantitativos

10.02 ×109/L LEU5 – 10 x 109/L

89.7 NEU 8.986.0 LINF .601.9 MONO .191.2 EOS .12

.5 BASO .05

% ×109/L

Fórmula leucocitaria

Rango de normalidad:Neutrófilos: 60-70%Linfocitos: 20-40%Monocitos: <10%Eosinófilos <5%Basófilos <1-3%

Parámetros eritroides

Hemograma: Parámetros cuantitativos

Número de hematíes:• Mujeres: 3.5-5.0 ×1012/L• Hombres: 4.0-5.5 ×1012/L

Hemoglobina:

3.96 ×1012/L HEM13.4 g/dL Hb44.1 % Hct111.4 fL VCM33.7 pg HCM30.3 g/dL CHCM20.4 % RDW

Hemoglobina:• Mujeres: 12-15 g/dL• Hombres: 14-17 g/dL

Hematocrito:• Mujeres: 36-46 %• Hombres: 42-52 %

Volumen corpuscular medio:• Normocíticos: 80-95 fL

Mi i i 80 fL• Microcitosis: < 80 fL• Macrocitosis: > 95 fL

Hemoglobina corpuscular media:• Valor normal: 27-31 pg

Concentración corpuscular media de hemoglobina:• Valor normal: 32-36%

Número de plaquetas:• V.N.: 150-400 ×109/LVolumen plaquetario:• V.N.: 7,5-9,5 fL

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Automático: Autoanalizadores // Manual: Cámara de Neubauer

Recuento manual (cámara de Neubauer)

•Dilución muestra

Métodos de recuento celular sanguíneo

GR: Líquido de Hayem o s.s. (dilución: 1:100)

GB: Líquido de Türk (dilución 1:10)

Plaquetas: solución oxalato (dilución 1:100)

•Recuento al microscopio

•Cálculos•Cálculos

Métodos de recuento celular sanguíneo

Cámara Neubauer

Retícula cámara NeubauerAutoanalizador

Mide los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio, desplazando su propio volumen de electrolito. Este es medido como un pulso de voltaje. La altura de cada pulso es proporcional al volumen de la partícula. Controlando la cantidad de suspensiónque circula a través del orificio es posible contar y medir el tamaño de las partículas.

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Histogramas de distribución de volumen•Amplitud distribución eritrocitaria ADE 11.5-14.5 %

•Amplitud distribución plaquetaria ADP

Amplitud de distribución eritrocitaria y plaquetaria

VCM bajo VCM normal VCM altoADE normal Microcítica pura: Normocítica Macrocítica pura:

α,β talasemia Aplasia

Amplitud de distribución eritrocitaria. Reticulocitos

ADE aumentado Microcítica A: Normocítica A: Macrocítica A:A. ferropénica A. inflamatoria A. megaloblásticaβ talasemia

Recuento de reticulocitos

ANISOCITOSIS

Recuento de reticulocitos•Sangre y azul cresilo brillante•Extensión de sangre•Número: 5-15 reticulocitos/1000 GR

Disminución reticulocitos : Anemia arregenerativaAumento de reticulocitos: Anemia regenerativa

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El hierro en el organismoDe transporteDe depósito

ANEMIAS MICROCÍTICASANEMIAS MICROCÍTICAS

pFuncional

El hierro de transporte• Índice de saturación de la transferrina (IST)• Capacidad total de saturación de la transferrina (CTST)

El hierro de depósitoF iti• Ferritina

• Hemosiderina

Anemia ferropénica: métodos de estudioEtapas de la deficiencia férricaDatos de laboratorio

TF-Fe 3+ PRECIPITACIÓN TF + Fe 2+

REDUCCIÓN

Fe 2+ + Cromógeno Compuesto coloreado

Determinación de la sideremia

Anemia ferropénicaSIDEREMIA A. enfermedades crónicas

Anemia inflamatoria

Valores normales: hombres = 80-150 μg/dL; mujeres = 60-140 μg/dL

Hemocromatosis

Talasemias

SIDEREMIA A. sideroblástica

Alcohol (hepatitis agudas y crónicas)

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Capacidad total e índice saturación transferrina

CTST : Medida indirecta de TF (todo el Fe está unido a la TF)

Suero problema + exceso de Fe satura la TF

Determinación de sideremia después de eliminar exceso de Fe libre

Valores normales: 2,5-4 g/L

IST (33%): depende de la sideremia

A mayor sideremia, mayor IST y viceversaSi disminuye la ferritina, aumenta la CTST

Anemia ferropénica:Di i id i•Disminuye sideremia

•Disminuye IST•Disminuye ferritina•Aumenta CTST

Trastornos utilización de Fe por bloqueo de los depósitos:•Disminuye sideremia•Disminuye IST•Ferritina y CTST valores normales

Determinación de la ferritinemia

Ferritina: compuesto hidrosoluble de Fe3+ unido a una proteína (apoferritina). Fe depósito en hígado, médula ósea, bazo

Determinación por radioinmunoanálisis (RIA) o inmunorradiométrica (IRMA)

IRMA:Muestra + antiferritina humana – fase sólida Incubación, lavado

Extracción Ab marcado no unido

Radioactividad unida proporcional a la ferritina en la muestra

Valores medios normales: 123 µg/L (hombres) / 56 µg/L (mujeres)

Anemia ferropénica: Disminuye ferritina

Sobrecarga férrica: Aumento ferritina

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Hemosiderina: Fe de depósito (insoluble). Fe2+ + apoferritina. Es el hierro no hemínico de los eritroblastos; abundante en las células macrofágicas (SMF)

Eritroblastos con hemosiderina = sideroblastos

Fundamento:

Tinción de Perls del aspirado de médula ósea

Fe2+-apoferritina ClH apoferritina + Fe2+

Fe2+ + Ferrocianuro potásico Ferrocianuro férrico (azul verdoso)

TP: Presencia de hemosiderina en el citoplasma de cualquier tipo de células, de una extensión de sangre o de médula

Método:

1 Fijar con alcohol metílico1. Fijar con alcohol metílico2. Introducir la extensión fijada en solución clorhídrica de ferrocianuro a Tª ambiente3. Lavar4. Contrateñir con hematoxilina de Harris5. Lavar con agua y con etanol, lavar, secar y observar gránulos intensos color azul-

verdoso que se observan en la zona de macrófagos

Utilidad:

Estudio del Fe medular para conocer las reservas de Fe

V l l F h í i d l it l d l it bl t

Tinción de Perls del aspirado de médula ósea

Valora el Fe no hemínico del citoplasma de los eritroblastos

Determinar el número de precipitados de hemosiderina (sideroblastos):Grado 0: Ausente Grado I: DisminuidoGrado II: Normal Grado III: Aumentado

Ferropenia: 0-ISobrecarga: II-III

Tinción de Perls

Sobrecarga: II III

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Sideremia IST CTST Ferritina Sideroblastos EritropoyesisIneficaz

Diagnóstico diferencial anemias microcíticas

Anemia ferropénica NO

A. enfermedades = NOcrónicas

A. sideroblásticas SI

(en anillos)(en anillos)

β Talasemia minor SI

Anemia ferropénica A. sideroblástica

Diagnóstico diferencial anemias microcíticas

ß Talasemia minor Tinción de Perls

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Megaloblastosis y anemias megaloblásticas: métodos de estudioVCM >100 fL

95% Anemias megaloblásticas

ANEMIAS MACROCÍTICASANEMIAS MACROCÍTICAS

95% Anemias megaloblásticas

5% Anemias macrocíticas no megaloblásticas•Alcoholismo•Aplasia medular•Embarazo•Enfermedad hepática crónica•Ictericia obstructiva•NeoplasiasNeoplasias

Causa: alteración síntesis de DNA: piel, boca, intestino•Serie eritropoyética•Serie granulopoyética •Serie megacariocítica•Disminución reticulocitos

Anemias megaloblásticas pordéficit de ácido fólico•Dieta inadecuada

Ácido fólico y vitamina B12 en la maduración celular

Anemias megaloblásticas pordéficit de vitamina B12

•Dieta inadecuada (vegetarianos)•Aumento necesidades

•Síndrome malabsorción

•Interferencia metabólica de losfolatos: alcohol, medicamentos

•Malabsorción de vitamina B12

(anemia perniciosa)

Médula ósea Sangre periférica

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Indicador de función ileal y de disponibilidad de factor intrínseco (FI) gástrico 1. 1 mg B12 v.p. + 1 mg 57Co-B12 v.o.2. Determinar eliminación urinaria de B12 (normal = 10%)

Absorción intestinal de B12: Prueba de Schilling

Si no hay radioactividad en orina, no ha sido absorbida (se elimina por heces)

3. Si existe un trastorno de absorción, el resultado será inferior al 10%,realizándose la 2ª fase (adición de FI a la cobalamina administrada v.o.)

Si se normaliza la eliminación urinaria en la 2ª fase → anemia perniciosa

Anemia perniciosa

• Anemia macrocítica normocroma

• Leucopenia

• Trombopenia

• MO: Megaloblastosis en la serie roja

Anemias hemolíticas

• Hemólisis intravascular

ANEMIAS NORMOCÍTICASANEMIAS NORMOCÍTICAS

• Hemólisis extravascularHemoglobinemiaHemoglobinuria↓ haptoglobina↑ LDH

BilirrubinemiaEsplenomegalia↓ haptoglobina↑ LDH

• Intracorpusculares • ExtracorpuscularesMEMBRANOPATIAS

ENZIMOPATIAS

HEMOGLOBINOPATIAS

INMUNITARIAS

NO INMUNITARIAS

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Valores de referencia: 120 ± 15 díasValores inferiores → proceso hemolítico

Supervivencia eritrocitaria

Hemoglobinopatías estructurales: Hb S (anemia de células falciformes)

A. hemolíticas intracorpusculares: hemoglobinopatías

Hb A1: 95-98% Hb A2: 2-3% Hb F: 0,8-2%

Hemoglobinopatías estructurales: Hb S (anemia de células falciformes)

•Hb S produce manifestaciones en Hb S/S (homocigotos) y en desoxigenación

•Hb S se demuestra por:

Electroforesis de Hb en acetato de celulosa (pH = 8,6)

Técnica de falciformación: sangre en medio pobre en oxígeno → drepano-

citos → A. falciforme

Método falciformación

Gota sangre diluida en un portaobjetos. Cubreobjetos cuyos bordes son sellados.Después incubación 37 ºC 1 h eritrocitos falciformes

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Talasemias

Talasemia menor

A. hemolíticas intracorpusculares: hemoglobinopatías

Talasemia mayor(A. de Cooley)

Estudio de las anemias hemolíticas inmunitariasPrueba de Coombs indirecta o antiglobulina indirecta (PAI)- Especificidad de un Ac incompleto que al unirse al Ag in vitro, NO es capaz de aglutinarlo. Se necesita antiglobulina humana para conseguir la aglutinación y comprobar la existencia del Ac.

A. hemolíticas extracorpusculares

1. Ac anti D libres en el plasma de embarazada Rh (–)

2. Ag Du

Prueba de Coombs directa (PAD)

- Reconoce Ac unidos a la membrana de los GR

- Antiglobulina + eritrocitos recubiertos de Ac. Aglutinación → hemólisis in vivo

1. Anemia hemolítica autoinmune

2. Anemia hemolítica recién nacido

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Test deCoombs

A. hemolíticas extracorpusculares

LEUCOCITOSLEUCOCITOSMÉTODOS GENERALES DE ESTUDIOMÉTODOS GENERALES DE ESTUDIO

en banda

en banda e ba da

en banda

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Leucocitos. Métodos generales de estudio

Leucocitos. Métodos generales de estudio

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Método visual (manual)•100-200 leucocitos

•Calidad extensión

Recuento diferencial de leucocitos (RDL)

Zona de recuentoTinciónExperiencia

Método automático•10.000-30.000 leucocitos

•Medida volumen + análisis citoquímico

Recuento diferencial de leucocitos (RDL)

q

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Valores de referencia del RDL

Absoluto (x 109/L) Relativo (%)

Alteraciones cuantitativas

ALTERACIONES EN EL RDL

•Aumento de una subpoblación

•Disminución de una subpoblación

•Presencia de blastos (células inmaduras)

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(> 7,5 x109/L)

Alterac. cuantitativas: Aumento de una subpoblación

(> 0,5 x109/L)

(> 0,15 x109/L)

Alterac. cuantitativas: Aumento de una subpoblación

(> 4 x109/L)

(> 0,8 x109/L)

, mononucleosis infec.

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(< 1,8 x109/L)

Alterac. cuantitativas: Disminución de una subpoblación

(< 1,5 x109/L)

Mielemia

Alterac. cuantitativas: Presencia de blastos

• Asociada a leucocitosis y neutrofilia

• Mielocitos + metamielocitos + promielocitos +

neutrófilos en banda

• Patologías

Reacción leucemoide (infecciones inflamación)Reacción leucemoide (infecciones, inflamación)

SMPC: LMC, policitemia vera, trombocitemia esencial

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Eritroblastosis

• Eritroblastos + proeritroblastos

Alterac. cuantitativas: Presencia de blastos

• Patologías

Extramedulares: erit. fetal, anemias

Medulares: diseritropoyesis, eritremias

Presencia de blastos• Blastos en generalg

• Patologías

Leucemias agudas

Linfoma leucemizado

Alteraciones nucleares

Alteraciones cualitativas en neutrófilos

AnomalíaPelger-Hüet

(SMD, SMPC, LMA)

Núcleoen anillo

(SMD, SMPC)

Núcleohipersegmentado

(SMD, LMC)

Palillos de tambor(drum stick)

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Alteraciones citoplasmáticas

Alteraciones cualitativas en neutrófilos

Hipogranulación(SMD, SMPC, LMA, LMMC)

(normal) Hipergranulación(infecciones, quemaduras)

GranulaciónAlder-Reilly

Alteraciones citoplasmáticas

Alteraciones cualitativas en neutrófilos

Cuerpos de Döhle(infecciones, quemaduras,

SMD, SMP)

Bastones de Auer(LMA, Leucemia

promielocítica)

Astillas(Leucemia

promielocítica)

AnomalíaChediak

(LMA)

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Alteraciones nucleares

Alteraciones cualitativas en linfocitos

Cromatina hipercon-densada (grumelèe)

(LLC)

Linfocito bilobulado

Linfocitocon nucleolo

Alteraciones citoplasmáticas

Alteraciones cualitativas en linfocitos

Tricoleucocito(tricoleucemia)

Linfocito velloso(linfoma esplénico)

Linfocito urópodo