EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

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1 EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS MICROBIOLÓGICAS Y EN LA RESISTENCIA MECÁNICA DE LOS CONOS DE GUTAPERCHA WENDY DANIELA CUY CALDERON ANGELICA VALERIA GALLEGO GARCIA YULLIET FIGUEROA GARCIA LINEA DE INVESTIGACION: PROSTODONTICA Y RECONSTRUCTIVA AREA DE INVESTIGACION: ENDODONCIA UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA DE ODONTOLOGIA VILLAVICENCIO META 2019

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EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS

MICROBIOLÓGICAS Y EN LA RESISTENCIA MECÁNICA DE LOS CONOS DE

GUTAPERCHA

WENDY DANIELA CUY CALDERON

ANGELICA VALERIA GALLEGO GARCIA

YULLIET FIGUEROA GARCIA

LINEA DE INVESTIGACION: PROSTODONTICA Y RECONSTRUCTIVA

AREA DE INVESTIGACION: ENDODONCIA

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ODONTOLOGIA

VILLAVICENCIO – META

2019

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EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS

MICROBIOLÓGICAS Y EN LA RESISTENCIA MECÁNICA DE LOS CONOS DE

GUTAPERCHA

WENDY DANIELA CUY CALDERON

ANGELICA VALERIA GALLEGO GARCIA

YULLIET FIGUEROA GARCIA

TRABAJO DE GRADO PARA OPTAR EL TITULO DE ODONTOLOGO

ASESOR TEMATICO:

DRA. DIANA CAROLINA ROZO ORTIZ

ASESORES METODOLOGICOS:

DRA.MARIA DEL PILAR ANGARITA DIAZ

ING. SAULO ANDRES OLARTE BURITICA

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ODONTOLOGIA

VILLAVICENCIO – META

2019

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AGRADECIMIENTOS

Damos gracias a Dios por permitirnos realizar nuestro trabajo de grado quien nos

dio la capacidad de realizarlo con inteligencia, sabiduría y con toda la entereza de

hacerlo excelentemente, el cual a su vez nos ayudó a perseverar aún en medio de

las dificultades que se nos presentaron durante la realización de este proyecto.

A nuestros padres por ser quienes nos han ayudado incansablemente en este

proyecto de vida, han sido ellos los que con mucho amor y sacrificio nos han

enseñado el valor de las cosas y la importancia de trabajar en ellas, la

responsabilidad de esforzarnos día a día por ser siempre la mejor versión de

nosotras y por los valores inculcados desde casa los cuales nos hacen ser

personas de bien para esta sociedad, han sido ellos los que nos brindan su apoyo

incondicional en cada uno de los momentos difíciles no solo afectivo sino

económicamente.

También agradecemos a cada una de las personas que hicieron parte de este

proyecto, nuestros asesores, los cuales a través de sus conocimientos nos

orientaron de manera efectiva en la realización de nuestro trabajo de grado, quienes

nos brindaron paciencia, tiempo y disponibilidad en el proceso y la realización de

este proyecto de grado.

Wendy Cuy Calderón

Angélica Gallego García

Yulliet Figueroa García

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TABLA DE CONTENIDO

Página

1. INTRODUCCIÓN ................................................................................................. 9

2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................ 11

3. JUSTIFICACIÓN. ............................................................................................... 15

4. MARCO TEÓRICO ............................................................................................ 17

4.1 ENDODONCIA: ............................................................................................ 17

4.2 TRATAMIENTO ENDODONTICO: ............................................................... 18

4.3 PROCESO DE DESINFECCION ENDODONTICA ...................................... 21

4.4 MATERIALES DE OBTURACION ENDODONTICA ..................................... 24

4.5 PROPIEDADES DE LOS CONOS DE GUTAPERCHA: ............................... 25

4.6 FRACASO ENDODONTICO: ....................................................................... 26

4.7 MICROBIOLOGIA DEL FRACASO ENDODONTICO: .................................. 27

4.8 BACTERIAS PRODUCTORAS DE ESPORAS USADAS COMO

INDICADORES BIOLÓGICOS PARA LA ESTERILIZACIÓN ............................. 30

5. MARCO REFERENCIAL.................................................................................... 31

6. OBJETIVOS ....................................................................................................... 36

6.1 OBJETIVO GENERAL: ................................................................................. 36

6.2 OBJETIVO ESPECÍFICOS: .......................................................................... 36

7. METODOLOGÍA ................................................................................................ 37

7.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL ESTUDIO ................................................ 37

7.2 DEFINICIÓN Y OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES ......................... 37

7.3 OBJETO DE ESTUDIO: ............................................................................... 39

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7.4 UNIVERSO DEL ESTUDIO .......................................................................... 39

7.5 TAMAÑO DE LA MUESTRA ........................................................................ 39

7.6 CRITERIOS DE INCLUSIÓN: ....................................................................... 39

7.7 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN: ..................................................................... 39

7.8 DISEÑO DE LA PRUEBA ............................................................................. 40

7.9 PROCEDIMIENTOS ESTADÍSTICOS .......................................................... 47

8. RESULTADOS ................................................................................................... 48

8.1 PRUEBAS MICROBIOLÓGICAS.................................................................. 48

8 .2 PRUEBA DE RESISTENCIA MECÁNICA ................................................... 53

8.3 COMPARACIÓN EFICACIA DE LOS TRATAMIENTO EN LA PRUEBA

MICROBIOLÓGICA Y DE RESISTENCIA MECÁNICA A TRACCIÓN ............... 59

9.DISCUSIÓN ........................................................................................................ 61

10.CONCLUSIONES ............................................................................................. 65

11. RECOMENDACIONES .................................................................................... 66

12. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................. 67

13 ANEXOS ........................................................................................................... 77

13.1 ANÁLISIS MORFOLÓGICO DE CONOS DE GUTAPERCHA DESPUÉS DE

LA DESINFECCIÓN ........................................................................................... 77

13.2 TEST DE RESISTENCIA MECÁNICA DE LOS CONOS 25 Y 40……….95

13.3 PRUEBA DE NORMALIDAD DE CADA UNO DE LOS TRATAMIENTOS

PARA LOS CONOS 25 Y 40………………………………………………………….96

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LISTA DE TABLAS

Página

Tabla 1. Ventajas y desventajas de los conos de gutapercha. .............................. 26

Tabla 2. Características microbiológicas de bacterias presentes en el fracaso

endodontico. .......................................................................................................... 28

Tabla 3. Variables cualitativas y cuantitativas. ....................................................... 37

Tabla 4: Efecto de los protocolos de desinfección en los conos contaminados con

Enterococcus faecalis. ........................................................................................... 49

Tabla 5: Frecuencia de desinfección de los conos contaminados artificialmente con

Enterococcus faecalis. ........................................................................................... 50

Tabla 6: Frecuencia de desinfección de los conos contaminados artificialmente con

Geobacillus stearothermophilus. ............................................................................ 50

Tabla 7 : Tabla de contingencia entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°25 ....... 51

Tabla 8 : Prueba de chi-cuadrado entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°25 .... 52

Tabla 9: Tabla de contingencia entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°40 ....... 52

Tabla 10 : Prueba de chi-cuadrado entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°40 .. 53

Tabla 11: Comparación de la carga máxima del test de resistencia mecánica del

primer y segundo cono (#25 y #40) con los tratamientos y la media entre el primer

y segundo cono para 25 y 40 con cada uno de los tratamientos. .......................... 54

Tabla 12. Datos tabulados de la carga máxima y el esfuerzo aplicado al cono 25

con cada tratamiento. ............................................................................................ 56

Tabla 13: Datos tabulados de la carga máxima aplicada al cono 40 con cada

tratamiento. ............................................................................................................ 57

Tabla 14: Recopilación de las cargas máximas al esfuerzo de la resistencia

mecánica a la tensión aplicadas en cada cono (25 y 40) para cada uno de los

tratamientos. .......................................................................................................... 58

Tabla 15.Cuadro comparativo de los tratamiento y control para cono 25 y 40: ..... 59

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1. Cuadro comparativo del proceso de contaminación artificial de los conos

con cada una de las bacterias. .............................................................................. 41

Figura 2. Cuadro comparativo del proceso de desinfección para los conos con las

sustancias desinfectantes establecidas. ................................................................ 43

Figura 3. Secuencia de las segundas fases para el test de resistencia mecánica a

la Tracción en los conos 25 y 40. ........................................................................... 46

Figura 4. Cuadro comparativo que analiza la eficacia de los tratamientos con cada

una de las sustancias en las bacterias y en el test de resistencia mecánica a la

tracción . ................................................................................................................ 60

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LISTA DE GRAFICAS

Grafica 1.Efecto de la carga máxima del Test de resistencia mecánica aplicada al

cono 25 con cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 2 el que mayor

resistencia tuvo al esfuerzo de tensionamiento. .................................................... 56

Grafica 2. Efecto de la carga máxima del Test de resistencia mecánica aplicada al

cono 40 con cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 1( Glutaraldehido

al 2% durante 15 minutos) el que más resistió a el esfuerzo de tensionamiento. .. 57

Grafica 3. Esfuerzo de resistencia mecánica a la tensión aplicada a cada uno de los

conos en cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 1 ( Glutaraldehido 2%

durante 15 minutos), el que presentó mayor resistencia a la tensión. ................... 58

Grafica 4. Cono 25, Tratamiento 1 (Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos). .... 86

Grafica 5. Cono 25, tratamiento 2 (Peróxido de hidrogeno al 6% durante 10 minutos).

............................................................................................................................... 87

Grafica 6. Cono 25, tratamiento 3 (Clorhexidina al 2% durante 1 minuto). ............ 88

Grafica 7 Cono 25, tratamiento 4 (Glutaraldehido al 2% 15 minutos + Clorhexidina

al 2% 1 minuto). ..................................................................................................... 89

Grafica 8. Cono 25, tratamiento 5 (Peróxido de hidrógeno al 6% 10 minutos +

Clorhexidina al 2% 1 minuto). ................................................................................ 90

Grafica 9. Cono 40, Tratamiento 1 (Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos). .... 91

Grafica 10.Cono 40, Tratamiento 2 ( Peróxido de Hidrogeno al 6% durante 10

minutos) ................................................................................................................. 92

Grafica 11. Cono 40, Tratamiento 3 (Clorhexidina al 2% durante 1 minuto) .......... 93

Grafica 12 Cono 40, Tratamiento 4 (Glutaraldehido al 2% 15 minutos + clorhexidina

al 2% durante 1 minuto) ......................................................................................... 94

Grafica 13 Cono 40, Tratamiento 5 (Peróxido de Hidrogeno al 6% 10 minutos +

clorhexidina al 2% durante 1 minuto) ..................................................................... 94

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1. INTRODUCCIÓN

Uno de los factores importantes en la cadena aséptica durante el tratamiento

endodóntico, se basa en la triada endodóntica: preparación biomecánica, control

microbiano y sistema de obturación de los conductos radiculares, este último en

todo el ancho y longitud, para aportar finalmente un correcto sellado.(1) Algunos

estudios han determinado que los conos de gutapercha, no están 100% estériles,

debido a que se contaminan durante la manipulación, almacenamiento e incluso

desde la fabricación. Ramos , et al 2015 encontró que el 8% de los conos de

gutapercha comercialmente disponibles se encuentran contaminados con

patógenos cuando se les extrae desde su envase. (2) Esto conlleva a la utilización

de conos contaminados durante el tratamiento, rompiendo así la cadena de asepsia

y pudiendo generar el fracaso del tratamiento.

El establecimiento de un protocolo apropiado de desinfección, además de eliminar

microorganismos que puedan establecerse en el conducto radicular, permitirá

conservar las características mecánicas de estos. Algunas de las características de

los conos de gutapercha son: dúctiles, sólidos y maleables, pero pueden volverse

quebradizos con el paso del tiempo y no se adhieren a nada, son susceptibles a

presentar sensibilidad al calor, a 25-30 ºC se reblandecen, a 60 ºC se vuelven más

acuosos pero ya a 100 ºC se deshacen, suelen ser incompatibles con el agua, pero

solubles en cloroformo, éter y xilol, presenta procesos de oxidación degenerativa

y se vuelven más frágil al paso del tiempo, luz y aire, por lo cual se debe controlar

la fecha de caducidad de cada recipiente que contenga este tipo de material así

como las condiciones de almacenaje, teniendo siempre los tubos donde vienen

empacados bien cerrados y sin exponer a la luz directa, ni a cambios de

temperatura. (3)

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La presente investigación tiene como objetivo establecer un protocolo de

desinfección que permita la eliminación de microorganismos y que no afecte las

características de resistencia mecánica a la tracción de los conos. Para cumplir los

objetivos, se va a trabajar con protocolos de desinfección previamente analizados

por la facultad de odontología de la sede de Envigado, los cuales no hayan afectado

la topografía de estos materiales.

En el presente proyecto de investigación se determinará la efectividad de protocolos

de desinfección de los conos de los gutapercha en esporas de una bacteria utilizada

como indicador de esterilización y en una bacteria causante del fracaso

endodóntico. Una vez determinado cuales protocolos eliminan las bacterias

estudiadas, se valorará la resistencia mecánica a la tracción de estos materiales.

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2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

El tratamiento endodóntico es el principal procedimiento a elegir en el momento de

querer preservar un órgano dental cuando existe patología pulpar y/o periapical. En

la mayoría de los casos estos tratamientos son exitosos, con un porcentaje de éxito

del 85% según un estudio realizado en un periodo de 10 años.(4)

Sin embargo, se han realizado estudios epidemiológicos que han determinado una

incidencia de fracaso del 25% y 40%. En las clínicas de nuestro programa de

odontología de la Universidad Cooperativa sede Villavicencio, aunque no hay un

dato exacto se detectan casos de fracaso endodóntico. Dentro de las causas más

comunes que pueden generar el fracaso endodóntico, está la filtración de

microorganismos por mal selle apical y coronal , deficiente irrigación en el conducto,

errores en las técnicas de instrumentación o aislamiento inadecuado, otras de las

causas podría ser la presencia de contaminación en los materiales utilizados

durante el procedimiento que permitan la reinfección en el sistema de conductos

radiculares además de la relación que puede tener con la compleja anatomía del

diente .(5)

Sin embargo es importante tener presente que dentro de la secuencia clínica de un

tratamiento endodontico además del conocimiento y la buena instrumentación por

parte del odontólogo, la asepsia cumple un papel fundamental para evitar el fracaso

endodóntico.

Al realizar la asepsia se requiere de diferentes pasos como: la técnica de lavado de

manos, la utilización de guantes estériles y gorro desechable, desinfección de la

unidad odontológica, esterilización (6) y desinfección del material odontológico

durante el procedimiento. Si no se cumple algunas de estas medidas, el conducto

puede contaminarse y generar la proliferación de bacterias anaerobias facultativas

y dar como resultado el fracaso en el tratamiento endodontico(1)

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Diferentes estudios han determinado que los conos de gutapercha, no están 100%

estériles, debido a que se contaminan durante la manipulación ya sea por aerosoles

y contacto físico (7), almacenamiento e incluso desde la fabricación(3)(2). De hecho

Lanzagorta y col, 2013. reveló que el 100% de los conos evaluados estaban

contaminados por bacterias aerobias. Esto conlleva a la utilización de conos

contaminados durante el tratamiento, rompiendo así la cadena de asepsia. (8)

En el programa de la facultad de Odontología de la Universidad Cooperativa de

Colombia Sede Villavicencio, se desarrolló un estudio que demostró que el 32% de

los conos de gutapercha utilizados por los estudiantes en la clínica presentaron

contaminación por bacterias anaerobias facultativas. Entre las bacterias

encontradas, predominaron los bacilos Gram positivos, seguidos por cocos Gram

positivos y bacilos formadores de esporas, sin existir una relación estadísticamente

significativa entre las características del cono y la presencia de contaminación por

bacterias anaerobias facultativas.(7) La ausencia en la influencia significativa de las

condiciones de los conos y la contaminación en estos, no sólo se ha observado en

el estudio realizado en nuestro programa(7),si no que otro estudio realizado por

Kayaoglu , G y col , 2009 , determinaron que los conos tomados desde su empaque

presetaban microorganismos en su su interior(9). Esto indica que es importante

siempre establecer protocolos de desinfección en los conos de gutapercha, ya que

esta contaminación es aleatoria. (7)

Los conos de gutapercha, son polímeros obtenidos por la solidificación del látex

producido por arboles de la familia de las Sapotaseae. (3)Su composición se divide

en 60-75% óxido de zinc , 20% gutapercha y los componentes restantes son sulfato

de bario , resinas y agentes colorantes, estos componentes mejoran las

propiedades fisicoquímicas, como la dureza, la radiopacidad, la flexibilidad y la

estabilidad dimensional facilitando su empleo en la obturación de conductos

radiculares, presentan una conicidad desde 0.02 % a 0.06%, lo que les permite

acceder con facilidad al conducto radicular y generar un buen selle apical. (10)

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Estos materiales son termolábiles y no pueden ser esterilizados por los medios

habituales de calor húmedo o seco, debido a que sus propiedades estructurales y

mecánicas se verían afectas, es por ello que diferentes compuestos químicos están

siendo utilizados para su desinfección, lo que permite buscar otras alternativas para

eliminar incluso las esporas de las bacterias y que no alteren las condiciones de los

conos(2). Entre las sustancias estudiadas que han demostrado ser efectivas, está

el hipoclorito de sodio al 3% y al 5,25% , clorhexidina al 2% ácido peracético al

1% y yodopovina al 10%, peróxido de hidrogeno al 6% y glutaraldehido al 2%

(11)(12)(13)(2). El estudio que realizaron Cardoso y col, determinaron que el

hipoclorito de sodio al 3%, la clorhexidina al 2%, el Peróxido de hidrogeno al 6% y

la yodopovina al 10% fueron eficaces en la descontaminación de los conos durante

10 minutos de exposición, también demostraron que el alcohol etílico al 70% no

descontaminó la superficie del cono tal como lo demuestra el estudio de Siquiera y

col,(14) el estudio que realizo Sabah y col, demostraron que la clorhexidina al 2%

fue efectiva en la desinfección de los conos para un tiempo de 5 minutos, con

respecto a la yodopovina al 10%.(15)

Además, se ha detectado que algunas de estas sustancias afectan la condiciones

mecánicas de los conos (estructura y resistencia), un estudio realizado por Pang y

col, 2007, utilizaron 3 sustancia desinfectantes: hipoclorito de sodio al 5,25%,

clorhexidina al 2% y ChloraPrep para la desinfección de los conos durante 1 minuto

y determinar si hubo alteraciones en la textura y propiedades físicas del cono, como

resultado se obtuvo que las 3 sustancias cambiaron la estructura del cono.(11) Por

medio de microfotografías se obtuvo que los conos sumergidos con hipoclorito de

sodio presentaba cristales cúbicos en la superficie del cono, la resistencia a la

tracción en los conos con clorhexidina e hipoclorito presentó variación y todos los

desinfectantes aumentaron significativamente la tasa de elongación de los conos,

especialmente el Chloraprep(11).

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Por otro lado, Valois y col, 2015, estudiaron el efecto de la clorhexidina al 2% y el

hipoclorito de sodio al 5,25% en los conos de gutapercha utilizando microscopia de

fuerza atómica, en este estudio sumergieron Clorhexidina al 2% e hipoclorito de

sodio al 5,25% durante 1, 5, 10, 20 y 30 min, como resultado obtuvieron que los

conos sumergidos en clorhexidina al 2% no presentaron cambios topográficos sino

hasta después de 10 minutos contrario al hipoclorito de sodio al 5,25% que

presentaron cambios topográficos y elásticos después de 1 minuto de inmersión

(16).

Por tal motivo es necesario realizar más estudios que determinen cual es la solución

ideal que elimine y desinfecte los conos de gutapercha sin afectar las condiciones

mecánicas de estos.

A partir de lo mencionado anteriormente, nos planteamos la siguiente pregunta:

PREGUNTA:

¿Cuál es el efecto de cinco protocolos de desinfección en pruebas microbiológicas

y en la resistencia mecánica de los conos de gutapercha?

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3. JUSTIFICACIÓN.

En todo proceso odontológico se debe buscar conservar la cadena de asepsia, la

cual cumple un papel importante en el éxito de todo tratamiento para evitar

infecciones. En la práctica clínica se tienen en cuenta muchos aspectos de esta

cadena de asepsia, pero no se toma en consideración las condiciones de algunos

materiales como los conos de gutapercha.

Una de las principales razones por las que se realizó este trabajo es que en un

estudio previo, se detectó en los conos de gutapercha utilizados por los estudiantes

de las clínicas de la Universidad Cooperativa de Colombia sede Villavicencio,

contaminación por bacterias anaerobias facultativas, entre estas formadoras de

esporas. Dichas bacterias sí llegasen a presentar una concentración adecuada , y

a poseer factores de virulencia que genere infección podrían establecerse en el

conducto obturado y generar el fracaso endodóntico. lo que hace necesario

establecer protocolos de desinfección que eliminen cualquier microorganismo

presente en estos materiales. Sin embargo, se debe tener presente que los

productos utilizados en la desinfección, pueden alterar las condiciones mecánicas

de los conos (estructura y resistencia), requiriendo por tanto protocolos que por un

lado eliminen los microorganismos y por otro, que no afecten las condiciones de los

conos.

Lo anterior indica la pertinencia del estudio, que busca mejorar la calidad de los

procedimientos endodonticos realizados en el programa de odontología de la

Universidad Cooperativa de Colombia sede Villavicencio. Así mismo aportará en la

formación de los estudiantes, que implementaran los protocolos de desinfección en

lo conos de gutapercha utilizados en el procedimiento endodontico, manteniendo

así la cadena de asepsia.

Este proyecto de investigación es viable ya que tenemos profesionales capacitados

y especializados en el área de microbiología y endodoncia, además de un

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laboratorio óptimo para realizar los estudios pertinentes para establecer los

protocolos de desinfección de los conos de gutapercha. Así mismo es importante

mencionar, que este trabajo se realizará en conjunto con el programa de

odontología de la Universidad Cooperativa de Colombia, sede Envigado, donde

determinarán el efecto de diferentes protocolos de desinfección en la estructura de

los conos de gutapercha. De esta forma los resultados nos servirán para estudiar

sólo los protocolos que no afecten la estructura de estos materiales.

.

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4. MARCO TEÓRICO

4.1 ENDODONCIA:

La endodoncia es la ciencia que estudia el funcionamiento y el estado del diente a

nivel de la cámara pulpar, conductos radiculares, la región apical y periapical. (1)

El endodonto está representado por la dentina, la cavidad pulpar , mientras que la

región apical y periapical está constituida por los tejidos de soporte del diente que

incluyen y rodean el ápice radicular como lo son : el cemento, el ligamento

periodontal y el hueso alveolar. (1)

Tal definición aun desde el punto embriológico, la dentina y la pulpa tienen su origen

en el folículo dentario, mientras que el cemento y la membrana periodontal se

diferencian a partir del saco embrionario (dental), entorno de los cuales se desarrolla

el hueso alveolar. De este modo, la dentina y la pulpa son consideradas semejantes

de un mismo tejido que mantienen entre si un vínculo histológico, fisiológico,

histopatológico y fisiopatológico, que caracteriza al llamado complejo dentino

pulpar.(1)(17)

La pulpa contiene un tejido vascular rico en vasos sanguíneos y nervios, lo que le

permite al diente tener vitalidad y actividades sensoriales, contiene nervios

autónomos eferentes de origen simpático y sensoriales aferentes del nervio

trigémino los cuales tienen la función de regular el flujo sanguíneo(18). La activación

de las fibras nerviosas simpáticas causan vasoconstricción activadas por receptores

α-adreno- y neuropéptidos definidos en 3 clases µ δ κ (19), los cuales son liberados

junto con la norepinefrina de las terminaciones nerviosas finales y las fibras´´ A´´

delta pierden la sensibilidad normal, así cualquier situación clínica que reduzca el

flujo sanguíneo reducirá la respuesta pulpar, pero si hay presencia de vasodilatación

el volumen de flujo sanguíneo aumenta generando la inflamación y edema de la

pulpa(19).

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La pulpa está expuesta también a cambios en el PH en diversas condiciones, como

la acidosis y la exposición a bacterias asociadas a caries, lo que conlleva al daño

pulpar, y por ende a lesiones endodonticas del diente, puede ir desde inflamación

de la pulpa hasta necrosis o muerte pulpar(20). Un tratamiento endodontico se

realiza cuando hay mortificación de la pulpa, sus células están destruidas y sus

estructuras están comprometidas de manera definitiva, se debe hacer un buen

diagnóstico de la lesión y posterior a eso emplear las técnicas más adecuadas para

cada diagnóstico(21).

4.2 TRATAMIENTO ENDODONTICO:

El objetivo principal del tratamiento endodontico consiste en la eliminación de la

pulpa dental que presenta algún tipo de lesión y el posterior selle tridimensional de

los conductos radiculares con material de obturación compatible con los tejidos

dentales(22).

Este procedimiento incluye varias etapas: diagnóstico de la lesión, la realización de

la forma de entrada a la cavidad eliminando tejido dentario a través de instrumento

rotatorio, el acceso a las cavidades dentarias pulpares de la corona y raíces por

medio de limas, determinación de la longitud de trabajo de los canales radiculares

(conductometría), instrumentación biomecánica y obturación radicular(22). Para

realizar un buen tratamiento endodontico se debe conocer la anatomía del diente

que está compuesto por: el esmalte, el cual es el tejido duro que recubre la corona

constituido por cristales de hidroxiapatita. Debajo de esta, está la dentina que es

un tejido más blando compuesto en su mayoría por componentes orgánicos como

el colágeno y luego esta la pulpa dental, la cual contiene vasos sanguíneos, nervios,

y tejido conectivo que alimenta al diente durante su formación y tiene como función

permitir la vitalidad del diente(21).

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Todo tratamiento endodontico debe de tener una preparación biomecánica, Schilder

en 2013 estableció que los conductos radiculares se deben preparar y limpiar de

forma adecuada para que puedan recibir una obturación tridimensional hermética

en todo el espacio del o los conductos(21).

Esta tiene como objetivo la limpieza, desinfección y conformación del conducto

radicular, respetando los cinco principios mecánicos: exploración y reconocimiento

del conducto y las raíces, La conductometria que determina la longitud del diente

desde el borde incisal hasta el ápice de la raíz, la limpieza que implica la remoción

del tejido pulpar contenido en el conducto dentinario, la instrumentación que tiene

por objetivo la creación de condiciones morfológicas y dimensionales para que el

conducto pueda obturarse de manera correcta y por último la obturación y selle

hermético de los conductos radiculares(23).

Es de gran importancia para toda preparación biomecánica, el correcto empleo de

los instrumentos manuales , como las limas que pueden ser tipo K, o tipo Hedstrom

y los ensanchadores, las limas se dividen en: limas de primera serie y de segunda

serie, las de primera serie van desde 15 hasta 40 y las de segunda serie de 45 a

80, y a su vez el conocer tanto las técnicas de instrumentación como las técnicas

de obturación(23). Así conociendo los diferentes tipos de instrumentos manuales,

sus beneficios y correcto uso, debemos conocer la manera correcta en que

debemos emplearlos, estos se resumen en dos técnicas mayormente empleada

como son la Técnica corono apical y la Técnica ápico coronal(23).

Existen dos técnicas de instrumentación: Corono apical se divide en: la técnica

convencional , la técnica escalonada o step back ; La técnica ápico coronal se

divide en: técnica stepdown ,la técnica de doble conicidad ,la técnica de fuerza

balanceada, y la técnica Crown down(24).

Page 20: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

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Las técnicas que actualmente son utilizadas para realizar la obturación del sistema

de conductos radiculares varía según la dirección de compactación de la gutapercha

(lateral o vertical) y la temperatura que debe aplicarse, fría o caliente (plastificada),

y son: Condensación vertical (gutapercha caliente), Gutapercha en frio (Gutta Flow),

Gutapercha termoplastificada inyectable, Compactación termomecánica o

termocompactación de la gutapercha(25).

Con respecto a los objetivos de las técnicas de obturación merece ser destacado

especialmente el mantenimiento de la desinfección obtenida durante la preparación

mecánica, debido a que después de su realización, el número de bacterias

presentes en el interior de los conductos disminuye considerablemente. En la

actualidad, la técnica de obturación más común y usada se basa en el uso de conos

semisólidos de gutapercha pero estos por si solos nos son capaces de producir un

selle hermético en el interior del conducto y por eso necesita ser completado por un

cemento endodontico que sea compatible con el organismo y preferiblemente que

tenga un efecto positivo en la cicatrización de la lesión(26).

Los selladores o cementos se dividen en diferentes grupos según su composición

química, como selladores a base de Óxido de Zinc Eugenol, de Hidróxido de Calcio,

de silicona, de Ionómero de vidrio, MTA, Biocerámicos a base de Fosfato-Silicato

de Calcio, y a base de resina Epóxica(27)(28).

Entre las propiedades para tener en cuenta para la selección del material de

obturación se encuentran:

1. Propiedades Biológicas: El material debe ser bien aceptado por el organismo

para no desarrollar ningún tipo de reacción (inflamación o alérgica). En caso

de que haya extravasación accidental del material este pueda permitir la

remoción, por parte del organismo, del agente agresor, ya sea físico o

químico de la región apical, estimular o permitir la reparación de la región

periapical, esta es una propiedad muy importante, ya que la sustancia a

Page 21: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

21

emplear no puede ser un agresor o que impida la reparación, así como debe

poseer una acción inflamatoria exagerada que retardará este proceso, en

este sentido los únicos que ayudan a la reparación apical, mediante la

inducción ósea son las virutas de dentina, acción bactericida o

bacteriostática(29).

2. Propiedades físico-químicas: Todo material de obturación debe presentar

ciertas características físico-quimicas: Radiopacidad, solubilidad y

fluidez(29).

- Radiopacidad; el material de relleno debe presentar suficiente radiopacidad

de modo que pueda distinguirse de las estructuras anatómicas adyacentes,

pero esta radiopacidad no debe de ser muy intensa porque puede ocultar

defectos de la obturación(29).

- Solubilidad, Se sugirió que el sellador del conducto radicular debe ser

insoluble o lo menos soluble posible cuando se expone a los tejidos

periapicales. Para prevenir la filtración bacteriana(29).

- Fluidez, Una fluidez adecuada es una característica importante de un

sellador de conductos radiculares para lograr sellar espacios entre el cono

de gutapercha y la pared de la dentina. Sin embargo, una fluidez excesiva

aumenta el riesgo de extrusión del sellador al tejido periodontal(29).

4.3 PROCESO DE DESINFECCION ENDODONTICA

En un proceso de desinfección no se eliminan en su totalidad las formas de vida

microbiana, pero si se eliminan agentes patógenos reconocidos, este término varia

debido a que existen diversos niveles de desinfección, algunos alcanzan una

esterilización química y otros una reducción mínima en los microorganismos

contaminantes. Algunos de los métodos más utilizados en un proceso de

desinfección son con agentes químicos y de radiación(29) .

Page 22: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

22

Agentes químicos.

Los agentes químicos son sustancias encargadas de la eliminación y permanencia

de microorganismos en una superficie o material, durante el tratamiento

endodontico ayudan a eliminar la estadía de microrganismos dentro de los

conductos radiculares que pueden generar el desarrollo de una nueva infección y,

en consecuencia, una patología periapical(30).

Las sustancias más comunes utilizadas en el proceso de desinfección son: el cloro,

compuestos fenólicos, alcoholes, yodo, agua oxigenada y jabones, estos cuentan

con un espectro amplio de desinfección, alteran la permeabilidad de la membrana

citoplasmática y permiten que se escapen algunos nutrientes vitales, como el

nitrógeno y el fósforo(30).

Hay ciertos factores que influyen en la acción de los desinfectantes como: el tiempo

de contacto, concentración e intensidad del agente químico, temperatura, numero

de organismos y el tipo de microorganismo(30).

- La clorhexidina : antiséptico, de bajo nivel de desinfección , actúa en la

permeabilidad de la pared celular permitiendo la perdida de los componentes

celulares. Se trata de un agente bactericida de potencia intermedia más

activo frente a microrganismo Gram positivos y Gram negativos(30).

- Hipoclorito : El hipoclorito de sodio es usado como agente desinfectante , con

más frecuencia en tratamientos endodonticos para la irrigación y

desinfección de los conos. La concentración se incrementa si es

directamente proporcional al efecto microbiano. Es un agente de gran

potencia y amplio espectro microbiano y actúa inhibiendo reacciones

enzimáticas y desnaturalizando proteínas; su acción aumenta acidificando la

solución, aumentando la temperatura y la concentración de esta

solución(30)(31).

Page 23: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

23

- Glutaraldehido: Se usa principalmente como desinfectante de alto nivel para

equipos médicos, superficies duras y como esterilizante químico. Es un

compuesto no corrosivo, la forma acuosa al 2% a un pH de 7,5 a 8,5 destruye

formas bacterianas en 2 minutos, micobacterias, hongos e inactiva virus en

menos de 20 minutos y elimina esporas de Clostridium y Bacillus en 3 horas,

adquieren su actividad máxima a un pH 7,5 a 8,5, después de activado tiene

una vida media de 32 días(30)(31).

- Peróxido de Hidrogeno: Es un compuesto que tiene actividad bactericida,

virucida, funguicida y esporicida, tiene muy bajo nivel de toxicidad, es un

compuesto esterilizante, su efectividad cuando se usa durante 10 minutos es

comparable a la del glutaraldehído al 2% durante 20 minutos, es corrosivo

del cobre, zinc y latón, cuando se usa a una concentración del 6% para

desinfección de alto nivel(30).

- Yodopovina: Tiene como objetivo principal prevenir efectos tóxicos del yodo

en concentraciones al 2% y al 10% ,realizan liberación lenta del yodo

provocando oxidación toxica y reacciones de susticion en el microorganismo

, es activa contra bacterias Gram positivos , Gram negativos , hongos , virus

y micro bacterias (30).

- Alcoholes: Son químicos solubles al agua, destruyen la membrana celular y

desnaturalizando las proteínas . Son bactericidas de potencia intermedia

frente a las bacterias gram positivas y gram negativas(32).

Agentes de radiación:

Son Productores de iones y radicales, modifican las bases de los ácidos nucleicos,

lipídicas ,estructuras proteicas y componentes esenciales para la viabilidad de los

microorganismos(29).

Page 24: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

24

Ultravioletas Afectan a las moléculas de ADN de los microorganismos, inducen un

error en la duplicación , por lo tanto la pérdida de la viabilidad de las células. Son

levemente penetrantes y son utilizan para superficies(29).

4.4 MATERIALES DE OBTURACION ENDODONTICA

Los materiales endodónticos utilizados para la obturación del conducto radicular, se

clasifican de acuerdo al estado en el que se encuentre:

- Materiales de estado sólido (conos de gutapercha, resilon y de plata)

- Materiales en estado plástico (cementos selladores). (33)

Materiales solidos:

Conos de Gutapercha: Es un material radiopaco, biocompatible, con buena

tolerancia tisular e insoluble a líquidos orgánicos. Posee estabilidad dimensional y

es un material de fácil desobturación, posee estabilidad física y química(25).

Conos de Plata: Jasper en 1941 introdujo los conos de plata, según sus estudios

proporcionaban la misma tasa de éxito que la gutapercha y eran más fáciles de

usar,proporcionaban rigidez, facilitaba la colocación y permitía controlar la

longitud(25)

Conos de Resilon: Es un poliuretano industrial de alto rendimiento que ha sido

adaptado para uso odontológico, recientemente ha sido a introducido a los sistemas

de obturación en base a resinas, es atóxico, no mutagénico y biocompatible, utiliza

un primer y un sellador este se une al cemento sellador de resina, que se adhiere a

la superficie y proporciona un mejor sellado(25).

Materiales en estado plástico:

Cementos Selladores: un cemento sellador debe ser homogéneo cuando se

manipula para presentar buena adhesividad entre el cemento y las paredes del

conducto una vez endurecido. Una de las características que debe reunir un material

de obturación es fluidez y baja tensión superficial para lograr humectar las

Page 25: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

25

superficies, producir un sellado hermético, debe ser radiopaco para poder ser

distinguido de las estructuras circundantes(33).

CONOS DE GUTAPERCHA: La gutapercha es un material proveniente del látex de

un árbol de las familias de sapotáceos, en su estado inicial se encuentra en una

fase beta la cual es sólida y maleable, pero puede volverse quebradiza, pero al

pasarla a temperaturas entre 42 °C – 49°C sufre un cambio y pasará a fase alfa

donde cambia su forma inicial y se vuelve más blanda, viscosa y poco maleable . A

este producto básico se le adiciona una serie de materiales, en diferentes

cantidades, de acuerdo con el fabricante: óxido de zinc, resinas vegetales y sulfato

de bario, para atribuir radiopacidad, además de otras resinas que pueden alterar las

propiedades mecánicas del mismo, así como alterar la coloración, la presencia del

óxido de zinc y de las resinas mejora las propiedades de dureza y de comprensión

del material. La gutapercha posee excelentes propiedades en el sellado de los

canales radiculares, por ejemplo, presenta una excelente biocompatibilidad, siendo

inerte a los tejidos periapicales y no susceptible al crecimiento y a la proliferación

bacteriana además de ser simple en la descontaminación. Los conos

confeccionados con este material llenan todos los requisitos biológicos, pero no

algunos requisitos físico-químicos, como la adhesividad, fluidez, viscosidad y

sellado(3).

4.5 PROPIEDADES DE LOS CONOS DE GUTAPERCHA:

Los conos de Gutapercha pueden ser: viscoelasticos, ellos se deforman pero

tienden a recuperar su forma, impermeables al paso de fluidos, plastificable cuando

pasan por calor y solubles en cloroformo y xilol (34)( Tabla 1)

Page 26: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

26

Tabla 1. Ventajas y desventajas de los conos de gutapercha.

VENTAJAS DESVENTAJAS

Buena compactibilidad Falta de rigidez

Buena tolerancia tisular No presentan propiedades adhesivas

Buena plasticidad No se esterilizan en calor porque se deforman.

Visco elasticidad No se tiene una unidad longitudinal para controlar la

viscoelasticidad.

Radioopacidad Frágil al aire y luz.

Estabilidad estructural

Poder bacteriostático

Fuente de elaboración propia.

El material de Gutapercha cuando es expuesto a la luz y al aire mucho tiempo sufre

un proceso de oxidación progresivo lo que hace que este se vuelva quebradizo, por

lo tanto, es muy importante revisar las condiciones de su almacenaje, donde se

verifique que no sean expuestos a la luz directa o cambios de temperaturas fuertes,

mirar la fecha de caducidad y que se encuentren bien sellados dentro de su

empaque(35)

4.6 FRACASO ENDODONTICO:

A nivel clínico el éxito endodontico se considera después del tratamiento

endodontico, el diente y la estructuras involucradas se presentan sin fistulas,

exudado, movilidad, dolor , dolor a la percusión y a la palpación o lesión apical, de

esta forma, el órgano dental estará en capacidad de volver a ejercer sus funciones

biológicas y estéticas. Sin embargo, debemos considerar la importancia de la actitud

conductual en lo que se refiere a su relación con el paciente, en lo que respecta a

un tratamiento el operador deberá discutir las variables incidentes en el pronóstico

de la terapia. No se puede olvidar que el paciente es la razón de existencia del

profesional, y que se presenta con expectativas y ansiedades que constituyen un

Page 27: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

27

elemento aparte y que influenciara tanto física como emocionalmente en la

interpretación del éxito(36).

Por otro lado, el fracaso endodontico se debe a diferentes causas, algunas de ellas

es la permanencia de microorganismos circundantes a nivel de la dentina, la zona

radicular y de los tejidos periradiculares, la permanencia de estos puede ser

consecuencia de : una mala praxis del operador ya sea desde el inicio del

tratamiento o al final en la obturación del tratamiento endodontico permitiendo la

entrada de nuevos microorganismos , malos habitos de higiene del paciente , el

rompimiento de la cadena de asepsia tanto del operador como de los materiales, y

la resistencia de estos a las sustancias utilizadas para la desinfección de los

conductos(37). Estos microorganismos pueden estar presentes en los túbulos

dentinales, a nivel radicular en los forámenes apicales y en el cemento radicular lo

que puede desarrollar lesiones periapicales que en etapas muy avanzada pueden

lesionar el hueso(38)

4.7 MICROBIOLOGIA DEL FRACASO ENDODONTICO:

La mayoría de autores hasta 1970 decían que los Estreptococos del grupo viridans

eran las especies más prevalentes en la infección pulpar después de

Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus aureus, tiempo después

desarrollaron técnicas en bacteriología anaerobia y comenzaron a descubrir más

especies anaerobias. En 1981 Bystron y Sundqvist investigaron más especies y

determinaron que pertenecían al género Fusobacterium, Bacteroides y

Peptostreptococcus, y más del 90% eran anaerobias de las cepas aisladas(38).

Estudios han revelado que la microbiota de los dientes con fracasos endodónticos

son distintas en los conductos de los dientes vitales. La( tabla 2) presenta algunos

de los microorganismos asociados con el fracaso endodontico y sus caracteristicas.

Page 28: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

28

Tabla 2. Características microbiológicas de bacterias presentes en el fracaso endodontico.

MICROORGANISMO CARACTERISTICA

STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS Es una especie bacteriana del

género Staphylococcus que

consistente en cocos Gram-

positivos. Se presenta

frecuentemente en la piel de

humanos y de animales y en

mucosas(39).

STAPHYLOCOCCUS AUREUS Es una bacteria anaerobia

facultativa, Gram positiva es

inmóvil y no esporulada que se

encuentra ampliamente

distribuida en la tierra.

Puede producir enfermedades

infecciosa hasta enfermedades

virales tales como: conjuntivitis,

meningitis, neumonia, abscesos,

celulitis y sepsis(40).

FUSOBACTERIUM Es un género de bacterias del filo

Fusobacteria, son bacterias Gram

negativas, anaerobias y de

aspecto filamentoso.

Los microorganismos del género

Fusobacterium producen

infecciones poli microbianas,

Page 29: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

29

enfermedades periodontales,

orofaringitis y ulcera(41)

BACTEROIDES Es un género de bacterias

anaerobias, Gram-negativas con

forma de bacilo, no

forman endosporas y pueden ser

móviles o inmóviles, dependiendo

de la especie.

Su hábitat: la orofaringe, el tracto

gastrointestinal o la región

genital.

Suelen encontrarse en

infecciones de los senos

paranasales y el oído medio(42)

PEPTOSTREPTOCOCCUS Es un género de bacterias

anaerobias, su morfología es

cocoide, Gram positivas y no

forman esporas, estos pueden

encontrarse en cadenas cortas,

en parejas o individualmente, son

de lento crecimiento y resistentes

a fármacos antimicrobianos.

Viven en la boca, la piel,

el aparato digestivo y el excretor,

y se encuentran en la flora

intestinal(43).

ENTEROCOCCUS FAECALIS

La transmisión de persona a

persona, en forma directa o por

Page 30: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

30

equipo médico contaminado,

permite la diseminación

nosocomial y la colonización por

cepas resistentes a múltiples

fármacos. Una vez colonizados,

los pacientes comprometidos

corren riesgos de desarrollar

infecciones por cepas resistentes.

Su hábitat se encuentra en la

tierra, los alimentos, el agua y

como flora normal de los seres

humanos y algunos animales.

Esta bacteria es considerada

como uno de los principales

agentes etiológicos causantes del

fracaso endodóntico(44).

4.8 Bacterias productoras de esporas usadas como indicadores biológicos

para la esterilización

Geobacillus stearothermophilus: Es una bacteria Gram positiva, formadora de

esporas, que presenta forma de bacilo, alcanza una temperatura máxima de

crecimiento entre 65 ºC -75 ºC y su temperatura mínima a 40 ºC, no crece a 37 ºC,

y su temperatura óptima es de 55 ºC , tiene una tolerancia limitada a la acidez,

teniendo como pH mínimo para su crecimiento de 5,2. Es una de las principales

bacterias que contribuyen en la descomposición de alimentos (45).

Page 31: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

31

5. MARCO REFERENCIAL

Guerreiro y colaboradores, 2006, realizaron un estudio en Araraquara, Brasil

donde evaluaron la actividad antimicrobiana de conos de gutapercha que contenía

hidróxido de calcio, conos de gutapercha con clorhexidina, conos de gutapercha

convencionales y dos pastas de hidróxido de calcio. Este test incluía 5 clases de

bacterias como Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus, Staphylococcus

epidermidis, Escherichia coli y Pseudomona auroginosa. Los resultados mostraron

que todas las especias microbianas evaluadas fueron inhibidas por los conos de

gutapercha que contenía clorhexidina y las pastas de hidróxido de calcio(46).

Kidiyoor y colaboradores en el año 2007, compararon en el efecto de 5

soluciones (yodopovidone al 5%, hipoclorito de sodio al 5%, alcohol etílico 95%,

peróxido de hidrógeno al 3%, clorhexidina al 1,5% y cetrimide al 15%) para

desinfectar los conos de gutapercha. Los tiempos utilizados fueron 1, 3, 5, 7 y 10

minutos. Después de la desinfección los conos se cultivaban en caldo de

trioglicolato para determinar sí se presentaba turbidez en el medio de cultivo como

indicador de contaminación. Los resultados mostraron que el hipoclorito de sodio al

5% y una combinación de clorhexidina (1,5%) y cetrimide (15%) durante un minuto,

fueron encontrados como los más efectivos (47)

Pang y colaboradores,2007 en Seúl Corea, además de identificar los

microorganismos presentes en los conos de gutapercha, evaluaron el efecto de la

desinfección con hipoclorito de sodio al 5,25%, clorhexidina al 2% y ChloraPrep,

sobre las bacterias identificadas. Se determinó el efecto de la topografía

(microscopio electrónico) en las propiedades mecánicas de los conos (resistencia a

la tracción y tasa de elongación). Después de la inoculación con los

microorganismos, seguido por un secado durante un día, los conos fueron

sometidos a los diferentes tratamientos. Los efectos de la desinfección fueron

Page 32: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

32

medidos mediante la detección de turbidez y subcultivo. En el estudio los autores

encontraron que todos los desinfectantes fueron efectivos frente a Staphylococcus

sp (bacteria identificada en el estudio), durante la inmersión de los conos por 1

minuto. Todos los desinfectantes incrementaron la tasa de elongación de los conos

comparados con los controles y las microfotografías detectaron la formación de

cristales en los conos tratados con hipoclorito de sodio(11).

Salvia AC y colaboradores en el año 2011, evaluaron la efectividad del ácido

peracético al 2% para la desinfección de conos de gutapercha contaminados in vitro

con Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Candida

albicans y esporas de Bacillus subtilis. Para este estudio evaluaron 225 conos los

cuales fueron contaminados con las diferentes bacterias y distribuidos para

desinfectar en diferentes tiempos (1 o 2.5 minutos). Los conos fueron transferidos a

una solución de tiosulfato de sodio al 10% con el fin de neutralizar el desinfectante.

Las biopelículas adheridas se desvanecían con una agitación. Después de 2.5

minutos de exposición con ácido paracético, el 100% de los microorganismos eran

eliminados, así que los autores concluyeron que esta solución es efectiva para

eliminar las biopelículas de los microorganismos estudiados (48)

Topuz y colaboradores, 2011 en Ankara, Tuquía, evaluaron el efecto del

hipoclorito de sodio al 6% en los conos de gutapercha y resilón. Los conos eran

tratados con esta solución durante 1, 5, 10, 20 y 30 minutos, para después lavarlos

con agua estéril y secarlos con papel filtro. Luego los autores analizaron la

topografía de la superficie de los conos, mediante microscopia de fuerza atómica y

microscopia electrónica acoplado a la espectroscopia de energía de dispersión de

rayos X. Los resultados mostraron que la solución puede ser usada para la

desinfección de los conos de GP, ya que no se detectaron alteraciones (12)

Page 33: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

33

Shnaydman y colaboradores, 2011 en Universuty of Connecticut, Estados Unidos,

determinaron la importancia de la desinfección de los conos de gutapercha con una

solución de hipoclorito de sodio al 0,5% y al 5,25%. Como resultado del estudio se

pudo determinar, que con ambas concentraciones de hipoclorito de sodio se puede

eliminar E Faecalis de los conos de gutapercha después de 1 minuto de contacto.

Ambos grupos fueron eficaces para la desinfección de los conos de gutapercha(49)

Sabah A y colaboradores en el año 2012, en Mosul, Irak, investigaron el efecto

del Hipoclorito de sodio (SH) y solución desinfectante de clorhexidina (CH) sobre la

textura superficial y las propiedades mecánicas de los conos de gutapercha a

diferentes concentraciones e intervalos de tiempo. En este estudio, se utilizaron 190

conos de gutapercha de tamaño 100. Las soluciones usadas son hipoclorito de

sodio en unas concentraciones de 1%, 2.5%, 5.5%, y clorhexidina en una

concentración de 1%, 1.5%,2% a diferentes intervalos de tiempo (10-15 y 20

minutos). Diez conos fueron seleccionados para cada solución y probardos en cada

intervalo de tiempo, los otros 10 conos permanecieron sin desinfección. Como

resultado se pudo observar que con el hipoclorito de sodio (2,5 y 5,25%) quedaron

partículas sobre la superficie del cono, después de 10 minutos de contacto. Mientras

que con el hipoclorito de sodio al 1% y la clorhexidina (1%, 1.5%, 2%) no cambiaron

la superficie de los conos después de 20 minutos de inmersión. El hipoclorito al

(2,5% y 5.25%) aumentó el módulo de Elasticidad, disminuyó la resistencia a la

tracción y disminuyó el porcentaje de alargamiento de los conos de gutapercha

después (10, 15, 20) minutos(15).

Spoleti y colaboradores, 2013,verificaron la condición de los conos de gutapercha

en sus envases, y su posible contaminación una vez abiertos durante la

manipulación y almacenamiento de los mismos. Los autores además evaluaron si

la desinfección con hipoclorito de sodio de los conos de gutapercha afecta el ajuste

apical; y, determinaron si un enjuague en alcohol etílico modificaba los resultados.

Page 34: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

34

Se evaluaron 30 conos de gutapercha divididos según su origen en dos grupos:

grupo 1(n =15) elegidos al azar de cinco tubos de cajas sin abrir; grupo 2 (n=15)

conos recolectados de tubos en uso por 15 profesionales asistentes a cursos de

postgrados. Los resultados demostraron que ninguno de los conos tomados de las

cajas nuevas estaban contaminados, mientras que los que estaban expuestos en

las clínicas si (20% de contaminación). Respecto a la desinfección se detectó que

los conos expuestos a hipoclorito de sodio al 5,25% durante un minuto no afectaron

el ajuste apical, el cual si era modificado al enjuagar los conos con alcohol etílico

(3).

Jiménez-Badilla y Colaboradores, 2014, determinaron el protocolo de

desinfección más eficiente para S. Aureus y E. Faecalis donde realizaron un estudio

experimental cuyos tratamientos consistían en Hipoclorito de sodio al 3,7% y 5,8%

durante 1 y 3 minutos. En el estudio encontraron que todos los protocolos resultaron

efectivos contra los microorganismos estudiados, por lo que los protocolos de 1

minuto de exposición al agente desinfectante, resultaron ser los más eficientes(50).

Arias y colaboradores, 2016, en Villavicencio, Colombia determinaron la

presencia y cuantificación de bacterias anaerobias facultativas en conos de

gutapercha utilizados por estudiantes de odontología. Los conos fueron colocados

en solución salina para realizar la siembra en agar sangre y se incubaron en

anaerobiosis durante 5 días. Se determinó, cuantificó e identificó la presencia y tipos

de bacterias presentes. Finalmente, se determinó sí existía diferencias significativas

en la presencia y cuantificación de bacterias, entre los grupos definidos por

características del cono. Como resultado se encontró que el 32,1% (n=26) de los

conos, presentaban contaminación por bacterias anaerobias facultativas, con un

promedio de 9,8 UFC/ml. Los tipos de microorganismos más observados fueron

bacilos Gram positivos, seguidos por cocos Gram positivos, entre los

microorganismos identificados estaba Staphylococcus epidermidis y Streptococcus

mitis. (7)

Page 35: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

35

Prado y colaboradores, 2016 en Rio de Janeiro, Brasil, realizaron un estudio para

determinar el efecto del plasma de oxígeno y argón en la superficie de los conos de

gutapercha. Las muestras fueron evaluadas topográficamente por microscopia

electrónica y con un microscopio de fuerza atómica, y químicamente fueron

evaluados por espectroscopia infrarroja transformada de Fourier. Los autores

detectaron que el plasma de argón no cambiaba la topografía de los conos, mientras

que el plasma de oxígeno sí, además ambos tratamientos modificaron

químicamente la superficie de los conos. Aunque este estudio fue más para mejorar

las características adhesivas de los conos, estos tipos de plasmas son usados para

eliminar biopelículas por microorganismos (51)

Page 36: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

36

6. OBJETIVOS

6.1 OBJETIVO GENERAL:

Determinar el efecto de protocolos de desinfección en las condiciones

microbiológicas y en la resistencia de los conos de gutapercha.

6.2 OBJETIVO ESPECÍFICOS:

-Analizar el efecto de protocolos de desinfección en conos de gutapercha

contaminados por Enterococcus faecalis.

-Analizar el efecto de protocolos de desinfección en conos de gutapercha

contaminados por Geobacillus stearothermophilus.

-Evaluar la resistencia mecánica, tensión de los conos de gutapercha después de

aplicar protocolos de desinfección.

Page 37: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

37

7. METODOLOGÍA

7.1 TIPO Y DISEÑO GENERAL DEL ESTUDIO

Se realizó un estudio experimental, para determinar el efecto de diferentes

protocolos de desinfección en conos de gutapercha, teniendo como medidas la

capacidad para desinfectar conos contaminados de forma artificial y el efecto en la

resistencia de estos materiales.

7.2 DEFINICIÓN Y OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES

Se utilizó variables cualitativas y cuantitativas.

Tabla 3. Variables cualitativas y cuantitativas.

VARIABLE ESCALA

DE

MEDICION

VALORES A

TOMAR

TIPO DE

VARIABLE

INSTRUMEN

TO DE

MEDICIÓN

Protocolos de

desinfección de

acuerdo a los

resultados en

Envigado.

Cualitativa 1. Glutaraldheido

al 2% durante 15

minutos.

2. Peróxido de

hidrogeno al 6%

durante 10

minutos.

3. Peróxido de

hidrogeno al 6%

durante 15

minutos.

Independient

e

Formato de

registro de

información

Page 38: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

38

4. Clorhexidina al

2% durante 1

minuto.

5. Clorhexidina al

2% durante 5

minuto.

Número del

cono

Cuantitativa 25

40

Dependiente Formato de

registro de

información

Bacterias

indicadoras

Cualitativa Geobacillus

stearothermophilu

s.

Enterococcus

faecalis

Dependiente Formato

registro de

información

Contaminación Cualitativa Ausencia (+)

Presencia (-)

Dependiente Formato

registro de

información

Conos

desinfectados

Cuantitativa Número de conos

desinfectados

Dependiente Formato

registro de

información

Test de

resistencia

mecánica a la

tracción

Cuantitativa Medida fuerza de

tracción

Dependiente Formato

registro de

información

Page 39: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

39

7.3 OBJETO DE ESTUDIO:

Conos de gutapercha procedentes de cajas nuevas de la marca Dentsply.

7.4 UNIVERSO DEL ESTUDIO

Todos los conos de gutapercha disponibles en el mercado de Colombia y el

mundo.

7.5 TAMAÑO DE LA MUESTRA

Para el estudio microbiológico, se decidió estudiar un número de conos teniendo

como base la literatura científica (Nabeshima y colaboradores, 2011)(52) y por ser

un número razonable por tema de costos. Se utilizaron 5 conos del No. 25 y 5 conos

del No. 40, para cada uno de los tratamientos de desinfección estudiados. Además,

se utilizaron 5 conos como control para la contaminación artificial y 5 conos como

control para verificar que los conos utilizados no estuvieran contaminados.

Para el estudio de resistencia y compresión, se utilizaron 2 conos por número de

cono y por tratamiento al proceso de desinfección respectivo. Como controles se

utilizaron 5 conos que no fueron sometidos a ningún procedimiento.

7.6 CRITERIOS DE INCLUSIÓN:

Conos de gutapercha nuevos de la marca Maillefer Dentsply.

Conos de los tamaños 25 y 40

7.7 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN:

Conos vencidos y que ya estén destapados.

Page 40: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

40

7.8 DISEÑO DE LA PRUEBA

PRIMERA FASE: Prueba microbiológica

Las pruebas microbiológicas se realizaron bajo condiciones de asepsia,

esterilizando los materiales y utilizando una cabina de flujo laminar. Estas pruebas

se repitieron durante dos días distintos, donde primero se realizaba el proceso de

contaminación artificial con la bacteria E. faecalis y esporas de G. stearotermophilus

(Fig1) para posteriormente aplicar los protocolos de desinfección (Fig 2). Previo al

proceso de contaminación artificial los conos fueron sometidos a luz ultravioleta

durante 15 minutos en la cámara de flujo laminar.

PROCESO DE CONTAMINACIÓN ARTIFICIAL:

- Enterococcus faecalis.

Se utilizó la bacteria E. faecalis ATCC inoculada en caldo BHI en una concentración

de 108 CFU/ml (DO800=800) según protocolo de Koo et al(53). Se colocaron los

conos de gutapercha de cada uno de los tamaños seleccionados para el estudio (25

y 40) en contacto con la bacteria, durante 20 minutos según protocolo de Cardoso,

2000(14). Los conos posteriormente fueron transferidos en papel filtro estéril y se

dejaron secar en cámara de flujo laminar, durante 10 minutos. (Fig. 1).

- Geobacillus stearothermophilus.

Para este objetivo se utilizó el bioindicador (Bionova) que contiene el Geobacillus

stearothermophilus ATCC 7953, en una concentración de 1x107 por unidad. Se

colocaron los conos de gutapercha en contacto con las esporas del bioindicador,

durante 20 minutos según protocolo de Cardoso, 2000. Los conos luego se

transfirieron en papel filtro estéril y se dejaron secar en cámara de flujo laminar,

durante 10 minutos. (Fig. 1).(14)

Page 41: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

41

Figura 1. Cuadro comparativo del proceso de contaminación artificial de los

conos con cada una de las Bacterias.

Fuente de elaboración propia.

Page 42: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

42

DESINFECCIÓN DE LOS CONOS DE GUTAPERCHA:

Para la prueba de desinfección se utilizaron los protocolos seleccionados en el

estudio realizado en la facultad de Odontología, campus Envigado (Anexo 1), los

cuales no afectaron la topografía del cono. Entre los protocolos analizados estaban:

1. Glutaraldheido al 2% (Prodont) durante 15 minutos.

2. Peróxido de hidrogeno al 6% (bobsBest) durante 10 minutos.

3. Peróxido de hidrogeno al 6% (bobsBest) durante 15 minutos.

4. Clorhexidina al 2% (Farpag) durante 1 minuto.

5. Clorhexidina al 2% (Farpag) durante 5 minuto.

Los conos se colocaban en tubos eppedorf con 1,5 ml del agente desinfectante con

la concentración y tiempo mencionado anteriormente. Posteriormente, se

trasladaron los conos desinfectados a tubos con agua destilada estéril, y se les

realizó un pequeño enjuague durante un minuto. Finalmente, los conos eran

transferidos a los tubos con caldo BHI, y se incubaron en condiciones aeróbicas

durante 3 días a 37°C para Enterococcus. faecalis y durante 7 días a 60°C para

Geobacillus stearothermophilus. Además, se dejaron 5 días más para confirmar sí

se presentaba crecimiento de la bacteria (contaminación). Los tubos que

presentaron turbidez se les realizó coloración de Gram para confirmar la

contaminación. Como controles, se inocularon 5 conos con el bioindicador y en

lugar de sumergirlos en desinfectante, el proceso se realizó sólo con agua destilada

estéril. También se utilizaron otros 5 conos para confirmar que estos materiales

utilizados en la prueba no estuvieran contaminados. (Fig. 2).

Page 43: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

43

Figura 2. Cuadro comparativo del proceso de desinfección para los conos

con las sustancias desinfectantes establecidas.

Fuente de elaboración propia.

Page 44: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

44

SEGUNDA FASE: Análisis de los protocolos para prueba de resistencia mecánica

a la tracción.

Se realizó la caracterización geométrica con el fin de obtener los diámetros,

longitudes y las áreas aferentes de la sección transversal de cada uno de los conos

de gutapercha definidos por numeración 25 y 40 . Se evaluaron las resistencias

mecánicas a la tracción de los conos de gutapercha después de aplicar protocolos

de desinfección, los cuales están caracterizados como se muestra en el cuadro

comparativo ( Fig 2) . Estos protocolos se seleccionaron en base a la efectividad en

la desinfección de los microorganismos estudiados y en el tiempo mínimo que se

requiere para la desinfección. Además se agregan dos protocolos mas, asociados

al resultado obtenido en la prueba microbiológica como fueron el Glutaraldehido 2%

durante 15 minutos+ Clorhexidina 2% durante 1 minuto y Peróxido de Hidrogeno

6% durante 10 minutos+ Clorhexidina 2% durante 1 minuto. Estos conos se dejaron

secar a temperatura ambiente durante 5-10 minutos y se gurdaron en microtubos

debidamente marcados. Estos conos fueron transportados hasta el laboratorio de

ingenierías de la Pontificia Universidad Javeriana, donde se realizan las pruebas de

resistencia mecánica a la tracción, según lo estipulado en la norma ASTM A615,

INVE 901,utilizando el equipo INSTRON Cat #2716-020 con la cual se obtiene cada

uno de los resultados de laboratorio .

Posteriormente, se realizó una caracterización de cada uno de los conos de

gutapercha, en la cual se define una medida de longitud y tres medidas de diámetro,

seguido a esto se colocaron cada uno de los especímenes en el equipo de

tensionamiento, con lo cual se obtuvo la fuerza uniaxial máxima, en la cual al ser

distribuida en un área expresada mediante la siguiente ecuación del esfuerzo

unitario a la tensión:

𝜎 =𝑃

𝐴

Page 45: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

45

Dónde: P es la fuerza uniaxial, A es el área de la sección transversal del cono de

gutapercha y σ es el esfuerzo a la tensión.

Cada uno de los ensayos de los conos de gutapercha se compararon con una

muestra patrón, la cual no posee ningún tipo de tratamiento. Se determinaron por

separado las resistencias mecánicas al esfuerzo de tensionamiento de los conos de

gutapercha y la capacidad del módulo de elasticidad contenido en la evaluación de

la resistencia de materiales expresada a través del módulo de Young:

𝐸 =𝜎

𝜖

Donde, E es el módulo de Young, σ es el esfuerzo a la tensión y 𝜖 es la deformación

unitaria.

Se realizó un ensayo de tracción para cada uno de los conos de gutapercha, en el

cual se identifican las características físicas y mecánicas del sujeto objeto de

estudio, para tal fin se utiliza un equipo de tensión mecánica, para generar una

elongación en los conos de gutapercha al aplicar dos fuerzas de la misma magnitud

actuando en sentido opuesto. Se procede a calcular las propiedades mecánicas del

material con base a las gráficas de carga vs. Elongación y de Esfuerzo vs.

Deformación, haciendo un respectivo análisis de los momentos del comportamiento

del material hasta su rotura con el fin de determinar si este cumple con las

especificaciones de resistencia requeridas para su uso, siguiendo los parámetros

establecidos por las normas de referencia ASTM A370, NTC 2289, NTC 3353, como

se observa en el Anexo 2.

Se genera los respectivos gráficos que permiten apreciar la variación de los

resultados del esfuerzo de tensionamiento de cada uno de los conos de gutapercha

sometidos a tratamientos de glutaraldehido al 2% durante 15 minutos , peróxido de

hidrogeno al 6% durante 10 minutos , clorhexidina al 2% durante 1 minuto,

glutaraldehido al 2% durante 15 minutos + clorhexidina al 2% durante 1 minuto y

Page 46: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

46

peróxido de hidrogeno al 6% durante 10 minutos + clorhexidina al 2% durante 1

minuto.( Anexo 2).

Figura 3. Secuencia de las segundas fases para el test de resistencia

mecánica a la Tracción en los conos 25 y 40.

Fuente de elaboración propia.

Page 47: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

47

7.9 PROCEDIMIENTOS ESTADÍSTICOS

Mediante el programa SPSS 25.0 se sacaron las frecuencias de los conos

desinfectados y se realizó la prueba de Chi cuadrado para comparar el efecto de

dos tratamientos cuyos resultados variaron en la desinfección de los conos de

gutapercha. Además en la prueba de resistencia mecánica de los conos y de

acuerdo a la normalidad de los datos y homogeneidad de las varianzas, se realizó

la prueba T-student para comparar el efecto de los tratamientos respecto al control.

Page 48: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

48

8. RESULTADOS

8.1 PRUEBAS MICROBIOLÓGICAS

Entre los resultados encontrados en este estudio se detectó que la desinfección con

Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos y peróxido de hidrógeno al 6% durante 10

y 15 minutos, fueron efectivas para controlar la bacteria E. faecalis presente en

todos los conos contaminados artificialmente. Es decir el 100% (n=20) de los conos

analizados fueron desinfectados. Mientras que la clorhexidina al 2% durante 1

minuto desinfectaron el 30% (n=3) de los conos No 25 y el 20% (n=2) de los conos

No 40. Respecto a la clorhexidina al 2% durante 5 minutos desinfectaron el 20%

(n=2) de los conos No. 25 y el 30% (n=3) de los conos No.40 contaminados con E.

faecalis (Tabla 4, Tabla 6), sin detectarse diferencias significativas entre estos

tratamientos (p>0,05) (Tabla 6 ,8, 9 ,10 y 11).

Mientras que los protocolos con clorhexidina al 2% durante 1 y 5 minutos fueron

efectivos para controlar la germinación de las esporas de G. stearothermophilus,

presentes en todos los conos contaminados (100%) (n=20). El glutaraldehido al 2%

durante 15 minutos y peróxido al 6% durante 10 y 15 minutos no desinfectaron

ninguno de los conos de gutapercha (0%) contaminados con G.

stearothermophilus (Tabla 5, Tabla 7).

Page 49: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

49

Tabla 4: Efecto de los protocolos de desinfección en los conos contaminados con Enterococcus faecalis.

#

CO

NO

GLUTARALDHEIDO 2%

(15min) PEROXIDO 6% (10min)

PEROXIDO 6% CLORHEXIDINA 2% CLORHEXIDINA 2%

(15min) (1min) (5min)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

25 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - - - + + + - - - - - + + - - -

40 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + - - - - - + + - - - - - + + + - - - - -

El signo + indica que la desinfección fue efectiva. El signo – indica que la desinfección no funciono

Tabla 5: Efecto de los protocolos de desinfección en los conos contaminados con Geobacillus stearothermophilus.

#

CONO

GLUTARALDHEIDO 2%

(15min) PEROXIDO 6% (10min)

PEROXIDO 6% CLORHEXIDINA 2% CLORHEXIDINA 2%

(15min) (1min) (5min)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

25 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

40 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + +

El signo + indica que la desinfección fue efectiva. El signo – indica que la desinfección no funciono

Page 50: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

50

Tabla 5: Frecuencia de desinfección de los conos contaminados artificialmente

con Enterococcus faecalis.

Tratamiento Número de cono

Desinfectado (N°)

Frecuencia (%)

Sin desinfectar

(N°)

Frecuencia ( % )

1 25 10 100% 0 0%

1 40 10 100% 0 0%

2 25 10 100% 0 0%

2 40 10 100% 0 0%

3 25 10 100% 0 0%

3 40 10 100% 0 0%

4 25 3 30% 7 70%

4 40 2 20% 8 80%

5 25 2 20% 8 80%

5 40 3 30% 7 70%

Tabla 6: Frecuencia de desinfección de los conos contaminados artificialmente

con Geobacillus stearothermophilus.

Tratamiento Número de cono

Desinfectado (N°)

Frecuencia ( % )

Sin desinfectar

(N°)

Frecuencia ( % )

1 25 0 0% 10 100%

1 40 0 0% 10 100%

2 25 0 0% 10 100%

2 40 0 0% 10 100%

3 25 0 0% 10 100%

3 40 0 0% 10 100%

4 25 10 100% 0 0%

4 40 10 100% 0 0%

5 25 10 100% 0 0%

5 40 10 100% 0 0%

Page 51: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

51

Tabla 7 : Tabla de contingencia entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°25

Tratamiento 5

Clorhexidina 5 minutos

Sin

desinfectar Desinfectado Total

Tratamiento

4

Clorhexidina

1 minuto

Sin desinfectar Recuento 5 2 7

Porcentaje

dentro del

tratamiento

71,4% 28,6% 100%

Porcentaje

del total

50% 20% 70%

Desinfectado Recuento 3 0 3

Porcentaje

dentro del

tratamiento

100% 0% 100%

Porcentaje

del total

30% 0% 30%

Total Recuento 8 2 10

Porcentaje

dentro del

tratamiento

80% 20% 100%

Page 52: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

52

Tabla 8 : Prueba de chi-cuadrado entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°25

Valor Gl

Sig. asintótica

(bilateral)

Chi-cuadrado de Pearson 1,071 1 0,3

Razón de verosimilitudes 1,632 1 0,201

Asociación lineal por lineal 0,964 1 0,326

N de casos válidos 10

a. 3 casillas (75,0%) han esperado un recuento menor que 5. El recuento mínimo

esperado es ,60.

Tabla 9: Tabla de contingencia entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°40

Tratamiento 5

Clorhexidina 5 minutos

Tratamiento

4

Clorhexidina

1 minuto

Sin

desinfección

Recuento 5 3 8

Porcentaje

dentro del

tratamiento

71,4% 100% 80%

Porcentaje total 50% 30% 80%

Desinfección Recuento 2 0 2

Porcentaje

dentro del

tratamiento

20,0% 0.0% 20,0%

Porcentaje total 100% 100% 100%

Page 53: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

53

Total Recuento 7 3 10

Porcentaje

dentro del

tratamiento

70% 30% 100%

Tabla 10 : Prueba de chi-cuadrado entre tratamiento 4 y 5 para los conos N°40

Valor Gl

Sig. asintótica

(bilateral)

Chi-cuadrado de Pearson 1,071 1 0,3

Razón de verosimilitudes 1,632 1 0,201

Asociación lineal por lineal 0,964 1 0,326

N de casos válidos 10

a. 3 casillas (75,0%) han esperado un recuento menor que 5. El recuento mínimo

esperado es ,60.

Por tanto se identifica la efectividad del Peróxido y Glutaraldehido para la

desinfección de E. faecalis (Tabla 4 y 6), y de la Clorhexidina para eliminar esporas

de bioindicador G. stearothermophilus (Tabla 5 y 7 ).

8 .2 PRUEBA DE RESISTENCIA MECÁNICA

Como se mencionó en metodología, se realizó la prueba de test de resistencia en

conos sometidos a los protocolos de desinfección que fueron efectivos para el

control de la contaminación de los microorganismos estudiados y el tiempo mínimo

requerido. Debido a que ambos tipos de microorganismos no fueron controlados por

los mismos desinfectantes, se decidió estudiar el efecto de la combinación de

ambos desinfectantes en la resistencia mecánica de los conos.

Page 54: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

54

De acuerdo al test de resistencia mecánica se encontró que el tratamiento 1 con

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos, el tratamiento 2 con peróxido de hidrogeno

al 6% durante 10 minutos, el tratamiento 3 Clorhexidina 2% durante 1 minuto y el

tratamiento 4 Glutaraldehido al 2% durante 10 minutos + clorhexidina 2% durante

1 minuto no alteran la resistencia de los conos 25 y 40 en comparación con el control

(Tabla 9, 10, 11, Figura 8 y 9, Anexo 2 ). Mientras que el tratamiento 5 con peróxido

de hidrogeno al 6% durante 15 minutos + clorhexidina al 2% durante 1 minuto alteró

la resistencia de los conos 25 y 40 (Tabla 9, tabla 10, tabla 11, tabla 12, Figura 8 y

9, Anexo 2) aunque sin diferencias estadísticamente significativas, en comparación

con el control (p>0,05) (Tabla 13).

Tabla 11: Comparación de la carga máxima del test de resistencia mecánica del

primer y segundo cono (#25 y #40) con los tratamientos y la media entre el primer

y segundo cono para 25 y 40 con cada uno de los tratamientos.

Tratamiento Cono carga Max (N) Media SD

Glutaraldehido 2%

durante 15 minutos.

25 7,07 7,20

0,13

25 7,33

Glutaraldehido 2%

durante 15 minutos.

40 9,86

10,62

0,825

40 11,51

Peróxido de hidrogeno

6% durante 10 minutos

25 7,15

7,93

0,875

25 8,90

Peróxido de hidrogeno

6% durante 10 minutos.

40 8,43

9,14

0,775

40 9,98

Clorhexidina 2%

durante 1 minuto.

25 7,80

7,81

0,01

25 7,82

Page 55: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

55

Clorhexidina 2%

durante 1 minuto.

40 8,27

8,44

0,175

40 8,62

Glutaraldehido+

Clorhexidina

25 5,76

7,28

2,065

25 9,89

Glutaraldehido+

clorhexidina

40 9,04

8,923

0,115

40 8,81

Peróxido de hidrogeno

+clorhexidina

25 3,34

3,86

0,615

25 4,57

Peróxido de hidrogeno

+clorhexidina

40 3,48

4,09

0,745

40 4,97

Control

25 5,80

6,07

0,29

25 6,38

Control 40 4,70

6,23

2,28

40 9,26

Page 56: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

56

Tabla 12. Datos tabulados de la carga máxima y el esfuerzo aplicado al cono 25

con cada tratamiento.

Tratamientos

Cono

(#25)

carga

Max (N)

Esfuerzo

(MPa)

Control 25 6,09 25,84

Glutaraldehido 2%

durante 15minutos 25 7,20 30,55

Peróxido de Hidrogeno

6% durante 10 minutos 25 8,03 34,08

Clorhexidina 2% durante

1 minuto 25 7,81 33,15

glutaraldehido +

Clorhexidina 25 7,82 33,21

Peróxido + Clorhexidina 25 3,96 16,80

Grafica 1.Efecto de la carga máxima del Test de resistencia mecánica aplicada al

cono 25 con cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 2 el que mayor

resistencia tuvo al esfuerzo de tensionamiento.

0,00

1,00

2,00

3,00

4,00

5,00

6,00

7,00

8,00

9,00

0-25 1-25 2-25 3-25 4-25 5-25

Car

ga M

Axi

ma

en N

ewto

ns

Tratamiento

Cono Gutapercha 25

Page 57: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

57

Tabla 13: Datos tabulados de la carga máxima aplicada al cono 40 con cada

tratamiento.

Tratamientos

Cono

(#40)

carga Max

(N) Esfuerzo (MPa)

Control 40 6,98 24,68

Glutaraldehido 2% durante 15

minutos 40 10,69 37,80

Peróxido de hidrogeno 6%

durante 10 minutos 40 9,20 32,56

Clorhexidina 2% durante 1

minuto 40 8,45 29,89

glutaraldehido+Clorhexidina 40 8,93 31,57

Peróxido + Clorhexidina 40 4,23 14,95

Grafica 2. Efecto de la carga máxima del Test de resistencia mecánica aplicada al

cono 40 con cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 1( Glutaraldehido

al 2% durante 15 minutos) el que más resistió a el esfuerzo de tensionamiento.

0,00

2,00

4,00

6,00

8,00

10,00

12,00

0-40 1-40 2-40 3-40 4-40 5-40

Car

ga M

Axi

ma

en N

ewto

ns

Tratamiento

Cono Gutapercha 40

Page 58: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

58

Tabla 14: Recopilación de las cargas máximas al esfuerzo de la resistencia

mecánica a la tensión aplicadas en cada cono (25 y 40) para cada uno de los

tratamientos.

Grafica 3. Esfuerzo de resistencia mecánica a la tensión aplicada a cada uno de los

conos en cada uno de los tratamientos, siendo el tratamiento 1 ( Glutaraldehido 2%

durante 15 minutos), el que presentó mayor resistencia a la tensión.

0,00

5,00

10,00

15,00

20,00

25,00

30,00

35,00

40,00

SinTratamiento

Glutaraldehido Peroxido Clorhexidina glutaraldehido+ Clorhexidina

Peroxido +Clorhexidina

Esfu

erz

o e

n M

Pa

Resistencia Mecánica a la tension

Tratamiento

Esfuerzo

(MPa)

Control 25,26

Glutaraldehido 34,17

Peróxido 33,32

Clorhexidina 31,52

Glutaraldehido +

Clorhexidina 32,39

Peróxido + Clorhexidina 15,88

Page 59: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

59

Tabla 15.Cuadro comparativo de los tratamiento y control para cono 25 y 40:

Tratamiento Media

carga

Max

Desviación

estándar

Valor

p

Control 6,53 1,95 0,15

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos 8,94 2,12

Control 6,53 1,94 0,12

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10 minutos 8,61 1,17

Control 6,53 1,94 0,16

Clorhexidina 2% durante 1 minuto 8,13 0,40

Control 6,53 1,94 0,22

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos +

Clorhexidina 2% durante 1 minuto

8,37 1,80

Control 6,53 1,94 0,06

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10 minutos +

Clorhexidina 2% durante 1 minuto

4,09 0,80

Comparación de media con la prueba T student. Esta prueba paramétrica se

realiza de acuerdo a la normalidad de los datos realizada con el test Shapiro Wilk,

donde los datos fueron normales (p>0,05) y en la prueba de homogeneidad de

varianzas con el estadístico de Levene se detecta igualdad de varianzas (p<0,05).

(Anexo 3)

8.3 Comparación eficacia de los tratamiento en la prueba microbiológica y de

resistencia mecánica a tracción

De acuerdo a los resultados microbiológicos, se encontró que el peróxido de

hidrógeno y glutaraldehído en los tiempos estudiados, son efectivos para el control

de E. faecalis pero no para G. stearothermophilus. Mientras que la clorhexidina fue

Page 60: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

60

efectiva para G. stearothermophilus pero no para E.faecalis (Tabla 10). Referente

al test de resistencia mecánica, la combinación del Glutaraldehido 2% durante 15

minutos + clorhexidina 2% durante 1 minuto no altera la resistencia de los conos

No.25 y No.40.

Figura 4. Cuadro comparativo que analiza la eficacia de los tratamientos con cada

una de las sustancias en las bacterias y en el test de resistencia mecánica a la

tracción .

Signo + = Corresponde a un resultado eficaz.

Signo - = No efectivo.

N/A = Resultado que no aplica

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61

9.DISCUSIÓN

La asepsia y la desinfección de los conos de gutapercha tienen importancia durante

el proceso del tratamiento endodóntico para evitar el fracaso endodóntico. En el

estudio realizado en las clínicas del programa de odontología de la Universidad

Cooperativa de Colombia campus Villavicencio, se encontró que los conos de

gutapercha estaban contaminados por bacterias anaeróbicas facultativas, donde el

35,5% estaban contaminados con Bacillus Gram positivos, el 32,3% eran Cocos

Gram positivos, el 16,1% con Bacillus Gram negativos y Bacillus Gram positivos con

esporas(7). Por tanto, se decidió realizar este estudio con el fin de definir protocolos

que permitan la desinfección de los conos, sin afectar su topografía y resistencia

mecánica.

En este estudio se presentó el efecto de la desinfección de diferentes protocolos

como el del glutaraldehido al 2% durante 15 minutos, el Peróxido de hidrogeno al

6% durante 10 y 15 minutos y clorhexidina al 2% durante 1 y 5 minutos, para la

desinfección de conos contaminados con E. faecalis y esporas de G.

stearothermophilus. Entre los resultados encontrados, se detectó que el

Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos, el Peróxido de hidrogeno al 6% durante

10 y 15 minutos fueron efectivos para la desinfección del 100% de los conos de

gutapercha contaminados con E. faecalis(56). Este resultado también fue

encontrado en estudios donde determinaron que el peróxido de hidrogeno al 3%

tiene una amplia acción en bacterias Gram positivas y Gram negativas(2). En el

estudio de Cardoso y col, 2016; demostraron también que el Peróxido de hidrogeno

al 6% descontamina los conos de gutapercha contaminados con E. faecalis en un

tiempo de exposición de 10 minutos(14). La clorhexidina no presentó un efecto

adecuado para desinfectar conos contaminados con E. faecalis, ya que sólo el 30%

de los conos N°25 y el 20% de los conos N°40 fueron desinfectados. Estos

resultados son diferentes a lo encontrado en el estudio que realizo Redmerski y col,

2017, donde demostraron la eficacia de la clorhexidina al 2 % durante un minuto

para eliminar las bacterias de S. aureus, E. faecalis y C. albicans y 5 minutos para

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eliminar esporas de Bacillus subtilis(56). Al igual que al estudio realizado por

Guzmán et al, 2012, demostraron que la clorhexidina en un porcentaje muy bajo

tiene la misma eficacia que el hipoclorito al 6% durante 1 minuto en contacto con

las bacteria y sin los efectos tóxicos que este presenta, mientras que el peróxido de

hidrogeno y el glutaraldheido necesita un tiempo más prolongado para lograr la

acción antimicrobiana.

Para la desinfección de los conos de gutapercha con esporas de G.

stearothermophilus se determinó que la clorhexidina al 2% durante 1 minuto y 5

minutos fueron efectivas en la eliminación del 100% de los conos (N°25 y 40)

contaminados con esporas de G. stearothermophilus. Este resultado también fue

encontrado en algunos estudios donde analizaron sí la clorhexidina era capaz de

eliminar esporas de diferentes bacterias. En el estudio realizado por Lanzagorta y

col,2006, concluyeron que la clorhexidina a una concentración mínima de 0,12%

funciona igual que el hipoclorito de sodio al 6% durante 1 minuto para eliminar

esporas de Bacillus subtillus(55). En otro estudio, Cardoso et al, 2015, evaluaron la

desinfección de conos contaminados con Escherichia coli y esporas de Bacillus.

Como desinfectantes analizaron la clorhexidina al 2%, el peróxido al 6% y

glutaraldehido al 2% por un periodo de 1,5,10, y 15 minutos, determinando la

efectividad en la desinfección de esporas de Bacillus con la clorhexidina al 2%

durante 1 minuto (14).

Por otro lado, en este estudio se encontró que el glutaraldehido al 2% y el peróxido

de hidrogeno al 6% no presentaron efectividad en la desinfección de G.

stearothermophilus con resultados similares a los encontrados en un estudio

realizado en la Universidad de Ankara Turquía donde determinaron la falencia del

glutaraldehido al 2% en la eliminación de esporas. Los investigadores analizaron la

desinfección de esporas de Bacillus subtillis, con sustancias desinfectantes como el

hipoclorito de sodio al 2,5% y glutaraldehido al 2% en 5, 10 y 15 minutos,

encontrando que el glutaraldehido no fue capaz de eliminar las esporas, incluso a

los 15 minutos de contacto(12). Sin embargo, hay estudios como el de Figuereido y

col, 2017, donde estudiaron la eficacia del glutaraldehido al 2,2% y el hipoclorito al

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63

2,6% durante 5,10 y 15 minutos, como agentes desinfectantes de conos

contaminados con bacilos, encontrando como resultado la efectividad inmediata del

glutaraldehido.(57)

También es de gran importancia determinar si los conos al aplicarles este tipo de

protocolos con agentes químicos desinfectantes no afectan su topografía , ni su

resistencia mecánica. En este estudio se determinó el efecto de 5 protocolos que

fueron efectivos para desinfectar E. faecalis y esporas de Geobacillus

stearotermophillus en la resistencia mecánica de los conos. De los cinco protocolos,

el conformado por Peroxido de hidrogeno al 6% durante 10 minutos +Clorhexidina

al 2 % por 1 minuto afectó notablemente esta característica. Por el contrario en el

estudio realizado por Pang y col, 2007, encontraron que los 3 protocolos analizados

como eran el Hipoclorito de Sodio al 5,25%, Clorhexidina al 2% y ChloraPrep

durante 5 minutos, afectaban significativamente la resistencia mecánica de los

conos analizados respecto al control (11).

Mondragon y col, 2002, determinaron que la mayoría de los conos analizados

presentaban una morfología regular sin porosidades, y a su vez determinaron

ciertos componentes en su parte interna y externa, en su capa externa 9 elementos

(zinc, oxígeno, bromo, sodio, bario, fierro, azufre, plomo y titanio) y en su capa

interna 11 elementos, los principales son el (zinc, sodio, oxígeno, bario y trazas de

azufre, bromo, titanio, fierro, plomo, indio y silicio, siendo estos dos últimos

exclusivos de la estructura interna) pero tiene variación en su composición de

acuerdo al calibre del cono, lo que conlleva a pensar que la variación de su

topografía y por ende alteraciones en la resistencia mecánica de estos se debe a

reacciones de ciertas sustancias que se ponen en contacto con el cono. (58)

Las variaciones en las resistencias deben estar asociadas a un cambio en la

estructura del cono al estar sometido a cada uno de los tratamientos, por tanto, una

de las limitaciones de esta investigación fue no contar con un estudio de

microscopia electrónica de barrido que puediera determinar la morfología interna de

la masa de cada uno de los conos sometidos a cada uno de los tratamientos y

posterior a ello incluir imágenes de este estudio y determinar si efectivamente

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alguna de estas sustancia afectaban la estructura interna del cono. De esta forma

se estaría remediando una de las limitaciones de este estudio, cuya fortaleza estuvo

centrada en el análisis de 5 protocolos de desinfección, en conos contaminados con

dos tipos de bacterias (una en estado vegetativo, y otra en estado de esporas), y en

la resistencia mecánica de los conos mediante una prueba piloto que determinó el

efecto que pueden tener las sustancias desinfectantes en estos materiales.

Se recomienda que no se utilice el tratamiento 5 (Peróxido 10 minutos +

Clorhexidina 1 minuto) para el proceso de desinfexión de los conos de gutapercha,

debido a las alteraciones en las propiedades mecánicas de tensionamiento, las

cuales no se ajustan a los requerimientos de comportamiento estructural de un

material usado en tratamientos dentales.

Dentro de la curva característica del ensayo de tensionamiento se observa que,

dentro de las bondades de la materia, aunque no se tenga una homogeneidad en

la resistencia, si se aprecia que posee solo dos partes del grafico típico de

tensionamiento, la zona elástica y la zona de cedencia, no se evidencia una zona

de rotura, esto es característico de ensayos de tensionamiento de materiales

elásticos y homogéneos.

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10.CONCLUSIONES

En este estudio se analizó el efecto de protocolos de desinfección en conos

de gutapercha contaminados por Enterococcus faecalis y se determinó que

los tratamiento eficaces fueron el Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos y

peróxido de hidrógeno al 6% durante 10 y 15 minutos, para controlar la

bacteria E. faecalis en los conos 25 y 40.

Se analizó además, el efecto de protocolos de desinfección en conos de

gutapercha contaminados con esporas de Geobacillus

stearothermophilus, y se determinó que el tratamiento con clorhexidina al

2% durante 1 y 5 minutos fueron efectivos para controlar la germinación de

las esporas de G. stearothermophilus.

Se evaluó la resistencia mecánica a la tensión de los conos de gutapercha

después de aplicar protocolos de desinfección y se determinó que el

Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos y el peróxido de hidrogeno al 6%

durante 15 minutos no afectaron la topografía del cono y fueron más

resistentes a la tasa de deformación y elongación en comparación con los

demás tratamientos y sustancias utilizadas.

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11. RECOMENDACIONES

Se recomienda realizar mas estudios que verifiquen sí los procesos de

desinfección alteran la topografía y la resistencia mecánica de los conos.

Para esto se debe utilizar un mayor número de conos y realizar el proceso

de medición inmediatamente después de la implementación de los protocolos

de desinfección. Así mismo, es importante incluir imágenes por microscopia

electrónica de barrido para determinar la morfología de los conos sometidos

a los respectivos tratamientos de desinfección.

Para la desinfección de los conos, se recomienda no utilizar la combinación

de los desinfectantes peróxido de hidrogeno al 6% durante 10minutos+

clorhexidina al 2% durante 1 minuto, debido a que afecta la resistencia

mecánica a la tracción de los conos.

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Page 77: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

77

13 ANEXOS

13.1 ANÁLISIS MORFOLÓGICO DE CONOS DE GUTTA PERCHA DESPUÉS DE LA DESINFECCIÓN

La facultad de odontología de la Universidad Cooperativa de Colombia, campus

Medellín, realizó el análisis morfológico de conos de gutta percha después de

someterlos a diferentes protocolos de desinfección. Para la selección de los

protocolos de desinfección se basaron de la literatura identificando las sustancias

antimicrobianas, las concentraciones y los tiempos más usados en odontología.

Entre estos protocolos estaban:

1. Hipoclorito de sodio 5,25 % durante 1 minuto

2. Hipoclorito de sodio 5,25 % durante 5 minutos

3. Clorhexidina 0.2 % durante 1 minuto

4. Clorhexidina 0.2 % durante 5 minutos

5. Glutaraldehído al 2 % durante 15 minutos

6. Peróxido de hidrogeno 6 % durante 10 minutos

7. Peróxido de hidrogeno 6 % durante 15 minutos

Para el análisis utilizaron 5 conos por cada tratamiento, y 5 conos como controles

representados por conos sin tratar. Después de realizar los procesos de

desinfección los conos fueron sumergidos en agua destilada durante 1 minuto.

Finalmente, mediante la utilización de un microscopio de barrido (SEM), visualizaron

la presencia o ausencia de cambios en la morfología de los conos.

Entre los resultados encontrados en el estudio, estuvo el efecto negativo del

hipoclorito de sodio al 5,25% en los dos tiempos analizados, ya que generó cambios

morfológicos importantes en el cono. Así mismo, la clorhexidina al 0,2%, tuvo un

efecto cuando se utilizaba durante 5 minutos, aunque menos severo que el

hipoclorito. El glutaraldehído al 2% y el Peróxido de hidrógeno al 6% fueron los

desinfectantes que menos generaron cambios morfológicos en los conos.

Page 78: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

78

A partir de estos resultados y de una conversación con los asesores del trabajo

realizado en el campus Medellín, se definió para este estudio los siguientes

protocolos:

1. Glutaraldehído al 2 % durante 15 minutos

2. Peróxido de hidrogeno 6 % durante 10 minutos

3. Peróxido de hidrogeno 6 % durante 15 minutos

4. Clorhexidina 0.2 % durante 1 minuto

5. Clorhexidina 0.2 % durante 5 minutos

Enterococcus faecalis

1. Los conos se dejaron 15 minutos en la cámara de flujo laminar, en contacto con

radiación UV

2. Se dejaron los conos en contacto con la bacteria (108) durante 20 minutos.

Page 79: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

79

3. Los conos se pusieron a secar en compresas estériles durante 10 min.

4. Se inició con el proceso de desinfección, colocando los conos en tubos que

contenían los diferentes desinfectantes y durante el tiempo asociado al tratamiento.

Tratamientos:

1. glutaraldehido al 2% por 15 minutos

2. peróxido de hidrogeno 6% por 10 minutos

3. peróxido de hidrogeno 6% por 15 minutos

4. clorhexidina al 2% por 1 minuto

Page 80: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

80

5 clorhexidina al 2% por 5 minutos

5. Los conos se enjuagaron en agua destilada durante 1 min y posteriormente los

conos se transfirieron a caldo BHI y se incubaron a 37 grados y se observó cada 24

horas.

6. Los tubos que presentaron turbidez se le realizó coloración de Gram para

confirmar la contaminación

Page 81: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

81

Page 82: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

82

9 Se realizo una prueba en agar – sangre para confirmar la contaminación

Geobacillus stearothermophilus.

1. Los conos se dejaron durante 15 minutos en la cámara de flujo laminar con

radiación UV

3. Se extraen las tirillas que contienen las esporas, se colocan en solución

salina y se realiza agitación en vortex durante 1 minuto.

Page 83: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

83

Page 84: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

84

3. Se dejaron los conos en contacto con la bacteria durante 20 minutos y se pusieron

a secar en compresas estériles durante 10 min.

8. Se colocaron los conos en micro tubos en contacto con 2ml de agente

desinfectante y se enjuagaron con agua destilada durante 1 minuto. Para

posteriormente sembrar en caldo BHI.

Page 85: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

85

10. Se incubaron en condiciones aerobias durante 7 días a 55 grados y se realizaron

observaciones cada 24

Page 86: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

86

13.2 . TEST DE RESISTENCIA MECÁNICA DE LOS CONOS 25 Y 40.

Grafica 4. Cono 25, Tratamiento 1 (Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos).

: Medida del test de resistencia Control cono 25

Valor máximo: 4,1816691

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 25 con el tratamiento 1 es de 4,1816691

-0,5

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

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12

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29

55

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60

16

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)

Tiempo (segundos)

Gluraldehido 15 min -Cono 25 Carga Vs Tiempo

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87

Grafica 5. Cono 25, tratamiento 2 (Peróxido de hidrogeno al 6% durante 10

minutos).

Medida del test de resistencia Control cono 25

Valor máximo: 4,2240604

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 25 con el tratamiento 2 es de 4,2240604.

-0,5

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

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12

54

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39

71

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14

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69

19

32

17

24

12

65

28

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13

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09

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34

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48

15

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52

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53

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01

62

5

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Tiempo (segundos)

2-25 Carga Vs Tiempo

Page 88: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

88

Grafica 6. Cono 25, tratamiento 3 (Clorhexidina al 2% durante 1 minuto).

Medida del test de resistencia Control cono 25

Valor máximo: 4,14662766

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 25 con el tratamiento 3 es de 4,14662766.

-0,5

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

12

54

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39

71

21

14

51

69

19

32

17

24

12

65

28

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13

33

73

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38

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09

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48

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52

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53

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76

01

62

5

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)

Tiempo (segundos)

3-25 Carga Vs Tiempo

Page 89: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

89

Grafica 7 Cono 25, tratamiento 4 (Glutaraldehido al 2% 15 minutos + Clorhexidina

al 2% 1 minuto).

Medida del test de resistencia Control cono 25

Valor máximo: 4,07258208

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 25 con el tratamiento 4 es de 4,07258208.

-0,5

0

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1

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2

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3

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4

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55

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16

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)

Tiempo (segundos)

4-25 Carga Vs Tiempo

Page 90: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

90

Grafica 8. Cono 25, tratamiento 5 (Peróxido de hidrógeno al 6% 10 minutos +

Clorhexidina al 2% 1 minuto).

: Medida del test de resistencia Control cono 25

Valor máximo: 4,10993184

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 25 con el tratamiento 5 es de 4,10993184.

-0,5

0

0,5

1

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2

2,5

3

3,5

4

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12

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21

14

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17

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73

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38

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Tiempo (segundos)

5-25 Carga Vs Tiempo

Page 91: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

91

Grafica 9. Cono 40, Tratamiento 1 (Glutaraldehido al 2% durante 15 minutos).

Medida del test de resistencia Control cono 40

Valor máximo: 6,22188

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 40 con el tratamiento 1 es de 6,22188.

-1

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1

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25

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28

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1

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1

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Tiempo (segundos)

1-40 Carga Vs Tiempo

Page 92: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

92

Grafica 10.Cono 40, Tratamiento 2 ( Peróxido de Hidrogeno al 6% durante 10

minutos)

Medida del test de resistencia Control cono 40

Valor máximo: 6,01312

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 40 con el tratamiento 2 es de 6,01312.

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1

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1

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Tiempo (segundos)

2-40 Carga Vs Tiempo

Page 93: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

93

Grafica 11. Cono 40, Tratamiento 3 (Clorhexidina al 2% durante 1 minuto)

: Medida del test de resistencia Control cono 40

Valor máximo: 6,037572

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 40 con el tratamiento 3 es de 6,037572.

-1

0

1

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25

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1

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3

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1

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Tiempo (segundos)

3-40 Carga Vs Tiempo

Page 94: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

94

Grafica 12 Cono 40, Tratamiento 4 (Glutaraldehido al 2% 15 minutos + clorhexidina

al 2% durante 1 minuto)

: Medida del test de resistencia Control cono 40

Valor máximo: 5,8290024

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 40 con el tratamiento 4 es de 5,8290024.

Grafica 13 Cono 40, Tratamiento 5 (Peróxido de Hidrogeno al 6% 10 minutos +

clorhexidina al 2% durante 1 minuto)

-1

0

1

2

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73

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12

1

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19

3

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1

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43

3

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1

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Tiempo (segundos)

4-40 Carga Vs Tiempo

Page 95: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

95

Medida del test de resistencia Control cono 40

Valor máximo: 6,1128158

En el grafico se aprecia un diagrama de fuerza vs tiempo en donde la fuerza que

soporta el cono 40 con el tratamiento 5 es de 6,1128158.

13.3 PRUEBA DE NORMALIDAD DE CADA UNO DE LOS TRATAMIENTOS PARA LOS

CONOS 25 Y 40

Prueba de normalidad Shapiro-Wilk

Tratamientos Valor

Control 0,53

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos 0,38

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos

0,97

Clorhexidina 2% durante 1 minuto 0,32

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos +

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos

0,22

-1

0

1

2

3

4

5

6

7

1

25

49

73

97

12

1

14

5

16

9

19

3

21

7

24

1

26

5

28

9

31

3

33

7

36

1

38

5

40

9

43

3

45

7

48

1

50

5

52

9

55

3

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7

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1

62

5

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Tiempo (segundos)

5-40 Carga Vs Tiempo

Page 96: EFECTO DE PROTOCOLOS DE DESINFECCIÓN EN PRUEBAS ...

96

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos + Clorhexidina 2% durante 1

minuto

0,31

Prueba de Leven

Tratamientos Valor

Control 0,60

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos 0,58

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos

0,45

Clorhexidina 2% durante 1 minuto 0,12

Glutaraldehido 2% durante 15 minutos +

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos

0,94

Peróxido de hidrogeno 6% durante 10

minutos + Clorhexidina 2% durante 1

minuto

0,28