Ejemplo
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Ejemplo: Un disacaridasa de la levadura pude hidrolizar sacarosa y maltosa, de acuerdo a la siguiente tabla: Sacarosa (Mm) Glucosa liberada (µmoles/10min) Maltosa (mM) Glucosa liberada (µmoles/10min) 5 40 5 48 10 60 10 80 20 80 20 120 50 100 50 172 100 109 100 200 Utilizar todos los métodos cinética de Michaelis Menten para calcular Km respectivos y las velocidades máximas, para cada sustrato, en las condiciones del experimento. Las reacciones catalizadas por el enzima serán: La velocidad habrá que medirla contabilizando moles de sustrato transformado, en vez de moles de glucosa liberada. En el primer caso ambos valores coincide; en el segundo, no. Se calcula la tabla de inversos (1/ [S]) Y (1/V), en mili moles de sustrato hidrolizado en 10 min. A.- SUSTRATO : SACAROSA La velocidad usamos el sustrato trasformado Glucosa liberada=sacarosa consumida Sacaros a inicial (mM) glucosa liberada (mmoles/10 min) v = sacarosa consumida (mmoles/10 min) 1/S 1/v v/s s/v 5 0,04 0,04 0,20 25,00 0,008 125,00 10 0,06 0,06 0,10 16,67 0,006 166,67 20 0,08 0,08 0,05 12,50 0,004 250,00 50 0,1 0,10 0,02 10,00 0,002 500,00 100 0,109 0,109 0,01 9,17 0,001 917,43 Sacarosa+ Agua Glucosa + Fructuosa
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Ejemplo: Un disacaridasa de la levadura pude hidrolizar sacarosa y maltosa, de acuerdo a la siguiente tabla:Sacarosa(Mm)Glucosa liberada(moles/10min)Maltosa(mM)Glucosa liberada(moles/10min)
540548
10601080
208020120
5010050172
100109100200
Utilizar todos los mtodos cintica de Michaelis Menten para calcular Km respectivos y las velocidades mximas, para cada sustrato, en las condiciones del experimento.Las reacciones catalizadas por el enzima sern:Sacarosa+ Agua Glucosa + Fructuosa Maltosa+ Agua 2 Glucosa
La velocidad habr que medirla contabilizando moles de sustrato transformado, en vez de moles de glucosa liberada. En el primer caso ambos valores coincide; en el segundo, no.Se calcula la tabla de inversos (1/ [S]) Y (1/V), en mili moles de sustrato hidrolizado en 10 min. A.- SUSTRATO : SACAROSALa velocidad usamos el sustrato trasformadoGlucosa liberada=sacarosa consumida Sacarosa inicial (mM)glucosa liberada (mmoles/10 min)v = sacarosa consumida (mmoles/10 min)1/S1/vv/ss/v
50,040,040,2025,000,008125,00
100,060,060,1016,670,006166,67
200,080,080,0512,500,004250,00
500,10,100,0210,000,002500,00
1000,1090,1090,019,170,001917,43
A.1.- MICHAELIS MENTEN:
Vmax (aproximado)0,113mmol/min
Km (aproximado)10 mM
A.2.- LINEAWEAVER
A.3.- EODI-HOFTEE
A.4.- LAGMUIR
B.-SUSTRATO: MALTOSAGlucosa/Maltosa = 2/1
Maltosa inicial (mM)Glucosa Liberada (mmoles/10 min)v = Maltosa consumida (mmoles/10 min)1/S1/vv/ss/v
50,0480,0240,2041,670,0048208,33
100,080,040,1025,000,0040250,00
200,120,060,0516,670,0030333,33
500,1720,0860,0211,630,0017581,39
1000,20,10,0110,000,00101000,00
B.1.- MICHAELIS MENTEN:
Vmax (aproximado)0,102 mmol/min
Km (aproximado)15mM
B.2.- LINEAWEAVER
A.3.- EODI-HOFTEE
B.4.- LAGMUIR
