Departament de Biologia Cel·lular, Fisiologia i Immunologia

Elaboració del Cariotip Humà

Professorat:

Dras. Carme Fuster i Cristina Templado

Tècnics de laboratori:

Àngels Niubó

Javier del Rey

Alumnes:

Cynthia Merino León

Erika van Veen Romero

Silvia Quintana Sánchez

Índex

1. Treball de laboratori

• Preparació de medis

• Cultiu de limfòcits i extracció del cultiu

• Obtenció d’extensions cromosòmiques i de bandes G

• Observació i captura de metafases al microscopi

2. Utilització del programa Karyolab per l’elaboració de cariotips

Preparació de medis

Medi base

Glutamina

Sèrum fetal

Antibiòtics

Heparina

Fitohemaglutinina

(estimula la divisió dels

limfòcits T)

Cultiu de limfòcits i extracció del cultiu

Extracció de sang

Cultiu a 37ºC durant 72h

Aturada de la divisió cel·lular en

metafase amb l’antimitòtic

Colcemid

Trencament de membranes

cel·lulars amb hipotònic

Fixació material cromosòmic amb

Carnoy (metanol i acètic, 3:1)

Obtenció d’extensions cromosòmiques

Centrifugació a 800 rpm

Dilució amb Carnoy

Obtenció preparacions, deixant

caure gotes sobre portaobjectes

Bandes G

Tractament amb 2xSSC a 65º C

durant 1-3 minuts

Rentar amb aigua i assecar a

temperatura ambient

Tinció amb solució de Wright

durant 1- 3 minuts

Esbandir i assecar

En cas de no observar-se bandes

cal tenyir 1 o 2 minuts més amb

solució de Wright

Observació i captura de metafases al microscopi

Utilització del programa Karyolab

Elaboració de cariotips

Diagnòstic de les trisomies més

freqüents en la població:

sindromes de Down, Patau,

Edward

Realització del cariotip

47,XX,+21

Valoracions

Apropament a l’educació

universitària

Accés a laboratoris universitaris

Oportunitat de centrar-nos molt

més en la pràctica que en la teoria

Personal docent molt proper i

professional

Oportunitat de formar-nos millor