Endotoxinas

Definiciones

• Pirógeno: • cualquier substancia que cause fiebre al ser

inyectada en la sangre o el líquido cefalorraquídeo

• Endotoxina:• toxina pirogénica que forma parte de la pared

celular de las bacterias gram-negativas.

• Lipopolisacárido (LPS):• endotoxina que ha sido químicamente purificada

Micro Organismos

• Bacterias• Algas• Hongos (mohos y levaduras)• Virus

Cortes Transversales de Una Bacteria

• Gram-negativa: membranas interna y externa• Gram-positiva: membrana interna solamente

gram negativa

gram positiva

Membranaexterna

Membrana interna

péptidoglucano (PG)

Ácidolipoteicoico

Estructura de la Endotoxina

Lípido ALípido A Región centralRegión central InternaInterna ExternaExterna

Antígeno OAntígeno O

unidad de repetición

LípidoLípido PolisacáridoPolisacárido

ácido graso

KDO

fosfato

(Rietschel and Brade, 1992, modificado)(Rietschel and Brade, 1992, modificado)

Cuál es el efecto de las endotoxinas?

• Las endotoxinas que penetran en la sangre o el líquido cefalorraquídeo causan una variedad de respuestas nocivas

• Concentraciones relativamente bajas causan una respuesta pirogénica

• Hipotensión

• Dolor de cabeza, mialgias, naúsea y vómito

Qué tan pirogénicas son las endotoxinas?

• La dosis pirogénica umbral para endotoxinas introducidas en la sangre es de 5 Unidades de Endotoxina/kg de peso/hora o 350 EU/persona adulta/hora

• La dosis pirogénica umbral para endotoxinas introducidas intratecalmente es de 0.2 EU/kg/hora o 14 EU/persona adulta/hora

Unidad de Endotoxina

• Una UE es una unidad de actividad. La UE está definida por la endotoxina de referencia y debe ser determinada para cualquier otra endotoxina.

• 5 UE corresponden aproximadamente a un nanogramo de endotoxina proveniente de patógenos gram-negativos comunes.

• 1 nanogramo = 10 –9 gramos

Algunos Límites de Endotoxinas

• Dispositivos Médicos• < 200 UE/unidad para el caso extremo, o < 20 UE/unidad si

los enjuagues del dispositivo se combinan para la prueba

• Parenterales de gran volumen (700 ml/persona/hora)• < 0.5 UE/ml

• Agua Para Inyección Farmacopea Americana (USP)• < 0.25 UE/ml

Reacciones Endotóxicas Generalizadas

• Pirogenicidad (dolor de cabeza, escalofríos, mialgia y náusea)

• Coagulación intravascular diseminada

• Activación del complemento sanguíneo

• Activación del sistema fibrinolítico

• Necrosis tumoral • Toxicidad pulmonar• Aborto• Muerte

Estándar Primario (EER)

• EC-6 (FDA), lote G (USP), 2o Estándar Internacional – US RSE y BRP-3 (FE) son todas designaciones para la preparación hecha por la FDA Americana, la USP (Farmacopea Americana) y la OMS

• Escherichia coli O113:H10:K• 10 000 Unidades de Endotoxina (UE/UI) por vial

• EC-6 está disponible únicamente para fabricantes autorizados de LAL para la estandarización de las sensibilidades de LAL

Estándares Secundarios o CEE

• Los fabricantes de LAL proporcionan preparaciones de endotoxina como estándares secundarios

• La actividad de un CEE debe ser comparada con la EER para cada lote de LAL

2006

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