“ESTANDARIZACIÓN ANALÍTICA DE LOS LABORATORIOS CLÍNICOS EN LA REGIÓN

LATINOAMERICANA: PROBLEMAS Y ESTRATEGIAS PARA RESOLVERLOS”

REUNION VIRTUAL – 10 de diciembre de 2008

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

Facultad de Farmacia y Bioquímica

Departamento de Bioquímica Clínica

Hospital de Clínicas “José de San Martín”

Profesor Titular Dr. Gustavo A. Negri

Estandarización

Ejecutar normas de uso uniforme en la práctica

uso de una metodología uniforme y aprobada

Comparar con un estándar de propiedades conocidas y definidas

uso de un mismo calibrador común para métodos diferentes

Armonización de mediciones interlaboratoriales

• Control de calidad externo

• Interpretación clínica por parte del médico

IFCC: 2 aproximaciones

• 1ª aproximación (década del ’70):

- Definir condiciones de método de referencia

- Instar a usar el mismo método

• Problemas:

- Adaptación a rutina, automatización, desarrollo tecnológico

- Recomendaciones de las sociedades nacionales

* Resultados EQA demuestran altos CV interlaboratorio

IFCC: 2 aproximaciones

• 2ª aproximación (actualidad):

Sistema de referencia

- Métodos de referencia

- Materiales de referencia

- Laboratorios de referencia

Concepto básico de esta aproximación es calibrar los métodos de rutina

- trazabilidad

- cuantificación de incertidumbres

- comparabilidad

El sistema de referencia provee:

Son necesarios para producir resultados útiles y confiables:

Establecer el comportamiento de los sistemas de medición.

Demostrar la comparabilidad de diferentes procedimientos utilizados en análisis de rutina destinados a medir la misma cantidad.

Asignar valores a materiales de referencia que se utilizarán para calibraciones o para control de procedimientos de mediciones de rutina.

Para las mediciones que realiza el laboratorio clínico es de vital importancia que los resultados reportados a los médicos y a los pacientes sean comparables, reproducibles y exactos.

ISO 15193

Sistemas de Referencia

TRAZABILIDAD

Propiedad del resultado de una medición o el valor de un estándar por la cual éste puede relacionarse a referencias establecidas (estándares nacionales o internacionales) a través de una cadena continua de calibraciones cada una con sus incertidumbres establecidas.

ISO 17511

Valor observado Valor verdadero

Cadena de trazabilidad

Definición de la unidad SI

Calibrador primario

Calibrador secundario

Muestra de rutina

Resultado

Procedimiento de medición primario de referencia

Procedimiento de medición secundario de referencia

ARML: Laboratorio de referencia acreditado ML: Laboratorio del productor

CGPM

BIPM

NMI ARML

Procedimiento de medición seleccionado por el fabricante

NMI ARML

MLCalibrador de trabajo del

fabricante

Procedimiento de rutina del usuario

Calibrador producido por el fabricante

Procedimiento de medición del fabricante

Los analitos medidos pueden ser clasificados

según la cadena de trazabilidad

Categoría A:

Aquellos para los cuales los resultados de medición son trazables a las unidades SI (p.ej. mol) Son compuestos químicos bien definidos, p.ej. glucosa, colesterol, urea, hormonas esteroides.

Categoría B:

Aquellos cuyos resultados no son trazables a las unidades SI,sino que solo lo son a estándares de mayor jerarquía en la cadena de calibración. se expresan en términos de unidades arbitrarias, como por ejemplo U.I.. Se basan en funciones biológicas, como ensayos de coagulación o actividad catalítica enzimática. También se basan en inmunoprocedimientos (Elisa) o en amplificación de ácidos nucleicos.

PROCEDIMIENTO DE MEDIDA

Etapa preanalítica o premetrológica.

Sistema de medida : - reactivos

- equipo de medida

El resultado de toda medición contiene un error, es decir una desviación sobre un valor “real” (verdadero) de la magnitud que se mide.

Cualquier resultado cuantitativo tiene más utilidad si se acompaña de algún tipo de estimación del error inherente a la medición (variación analítica)

Variación Analítica Variación Biológica

Error de medida y sus componentes

Error sistemático (ES)

Error sistemático Veracidad

Causas: a- Calibración incorrecta (afecta a todas las muestras)

b- Inespecificidad metrológica (afecta a las muestras que tienen magnitudes interferentes)

Cuando el equipo de medida está adecuadamente calibrado y el proceso de medida es suficientemente específico. ES 0

ERRORES SISTEMÁTICOS EN LOS PROCEDIMIENTOS ANALÍTICOS

Reviste gravedad en el sistema de salud:

- Diagnósticos inadecuados: falsos positivos o negativos.

- Interpretación errónea por parte del médico en control

evolutivo y terapéutico del paciente.

Una de las causas más importantes de la dispersión interlaboratorio

Con trazabilidad asegurada a sistemas de referencia establecidos.

Se transfiere la trazabilidad a las mediciones realizadas utilizando sistemas homogéneos.

Normas ISO relacionadas con medición de cantidades en muestras biológicas:- 17511: trazabilidad metrológica de los valores asignados a calibradores y materiales de control.- 18153: trazabilidad metrológica de los valores de concentración catalítica de enzimas asignados a calibradores y materiales de control.

Calibradores y controles utilizados en el DIV

Calibración exitosa de un método de rutina a Calibración exitosa de un método de rutina a partir de un método de referenciapartir de un método de referencia

•Relación entre ambos debe ser constante para todas las muestras

•Se demuestra cuanto más extenso es el muestreo

El concepto de una relación constante intermétodo para todas las muestras ha sido descripto por el término

conmutabilidad

La cadena de trazabilidad será válida

A- El método de referencia y los métodos de rutina deben tener igual especificidad para el analito.

B- Los distintos materiales involucrados deben tener conmutabilidad con el material humano

ConmutabilidadConmutabilidad

La conmutabilidad de los materiales de referencia con las muestras de pacientes debe ser testeada por uno o varios métodos (con especificidad analítica igual a la del método de referencia).Ésta depende de:

• Fuente

• Proceso de purificación

• Matriz (cofactores, efectores, aditivos, estabilizantes)

• Procesamiento del producto final

Cuestion esencial: las propiedades del calibrador enzimático deben ser tan similares como sea posible a aquellas de la enzima en su matriz natural.

• Heterogeneidad molecular

En la práctica la relación encontrada entre los métodos de rutina y de referencia para el calibrador debe ser la misma que la relación promedio encontrada para un gran número de muestras (normales y patológicas)