EVIDENCIAS FOTOGRAFICAS.Laboratorio de caracterización de

proteínas en la sangre.

IVY ALEXANDRA CASTILLO.ERIKA NATALIA MONTENEGRO.NUBIA MARGARITA SUAREZ .

KATHERIN SANCHEZ.

UNIVERSIDAD COOPERATIVA SEDE VILLAVICENCIO.FACULTAD DE MEDICINA.

2014.

PROCEDIMIENTOS.

• Se tomo 1 mL de solución de gelatina sin sabor y se adiciono 1 mL de NaOH al 10% y luego se agrego reactivo de Biuret hasta que tomo una coloración violeta.

• Se obtuvo una muestra de sangre de uno de los integrantes del grupo, se llevo a centrifugado por 10 minutos para separar el plasma y los componentes celulares.

Se separo el plasma de los componentes celulares y se adiciono cada uno en un tubo de centrifugado.

• Se tomo 1 mL de componentes celulares y se pusieron en un tubo de centrifuga, posteriormente se le adiciono 9 mL de agua destilada.

• Se tomo 2 tubos de centrifuga, n uno se adiciono 5 mL de plasma y en l otro 5 mL de solución de hemoglobina y a cada uno se adiciono porciones pequeñas de 0.88 gr de sulfato de amonio. Esto correspondió a un 30% de saturación.

Luego de centrifugar se saco el sobrenadante y se puso en otro tubo de centrifuga y se añadió 1.48 gr de sulfato de amonio, correspondiente a 70% de saturación.

• Luego se juntaron el 30% y 70% de la saturación y se les adiciono agua destilada a cada uno de los dos tubos (uno componentes celulares y el otro componentes del plasma)

Luego se mezclo los componentes celulares y el plasma y logramos obtener nuevamente nuestra sangre casi en su misma consistencia.

• se tomaron 2 mL de plasma y 2 de componentes celulares y se llevo cada uno a un tubo de centrifuga, se adiciono 0.5 ml de acido tricloroacetico a cada tubo, se mezclo y se llevo a centrifugar.

Al agregar agua destilada e intentar mezclar nos dimos cuenta estas sufrieron una disrupción de su estructura nativa (desnaturalización).

CONCLUSIONES.La reacción de Biuret nos sirve para

encontrar enlaces peptídicos, por tanto, proteínas.

En el proceso de salting out se da una insolubilización reversible de las proteínas pero estas no sufren una desnaturalización, por este hecho, la estructura puede volver a formarse casi con las mismas características como sucedió con la sangre.

Las proteínas sufren desnaturalización ante cambios de temperatura, pH como sucedió al adicionar acido tricloroacetico a las proteínas, la estructura al querer unirla no fue igual.