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UNIVERSIDAD TECNICA DE MANA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALESCUELA DE LABORATORIO CLINICO
CATEDRA DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULA
Docente: Dra. Mayra Parraa
N!"e# II $ara#e#o C $er!o% aca%. Oct. &'()* Fe+. &'(,
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TEMA:GENERACIN DE MOLCULAS DE ADNRECOMBINANTES.VESTORES PAR ADN RECOMBINANTE
GRUPO:N2
TRABA-O PRESENTADOPOR:o P!co P!noarote An!eo More!ra Ort! Va#er!oo S/nc0e Canto1 Me#anyo Or2aa Loor No0e#!ao Garc3a Mera -a23no Ro1a#e1 De2era L!11o C0/"e -ean Car#o1
BIOLOCELULA
MOLECU
PARALELOA
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PALABRAS CLAVES
Molcula Recombinante Vector Plsmidos Endonucleasas Fago Bacterifago
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GLOSARIO
Plsmidos: Son pequeas molculas circulares de !"# que puedenindependientemente$
Endonucleasas: %as endonucleasasson en'imas que catali'an la ruptura fosfodister en diferentes regiones ubicadas en el interior de una cadena polinEsto las diferencia de las e)onucleasas* que catali'an la escisin de enlaces foslos e)tremos de las cadenas$
Intrones.- +n intrn es una regin del !"# que debe ser eliminada de la tprimaria de !R#$
Splicing.- ,orte o empalme Bacterifagos$- son .irus que infectan e)clusi.amente a las bacterias$ Fago$- es un .irus bacterifago que infecta a la bacteria Esc/eric/ia coli$
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Los !"s#$%os &'(o#)$*+*,'s -' o&,+* $*s'&'%'* s'& $*,&o%($%os '* E. Co!$ 0 %o*%' &')+(,'&$+s +&+ %+& !+& + #$!!o*'s %' (o$+s %
's,os !"s#$%os '%' +$s!+&s' 0 o),'*$3*%os' %' #o!3(!+s &'(o#)$*+*,'s -' (o*,$'*'* *ADN /#+*o
GENERACI4N DEMOL5CULAS DE ADN
RECOMBINANTE
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%os fragmentos de !"# que pueden ser
clonados no se limitan a aquellos queterminan en sitios de cortes de en'imas derestriccion$ Es posible aadir a lose)tremos de cualquier fragmento de !"#sea ligado a un .ector 0 aislado como unclon molecular$
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S!ntet!ar 6na co$!a %e ADNa $art!r %e# ARN
ADN co$!a o ADNco2$#e2entar!o
Lo1 ene1
e6car!ot!co1 e1t/n!nterr62$!%o1 $or1ec6enc!a1 noco%!7cante1 o
!ntrone1.
S$#!c!n
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CLONACI4N DEADN
COMPLEMENTAR
O
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VECTORES PARA ADN RECOMBINANTE
%os plsmidos
1eneralmente se usan
Para clonar insertos de !"#c de un tamareducido* con pocas 2b
E)iste un sitio de origen* la cual sir.e pa
seali'ar al !"# polimerasa 0 marque el de clonacin dentro de la clula /ospeda
Estos .ectores portan un sitio de resisteun e3emplo es poner unantibitico4 ampicilina5 para crear una
resistencia en una bacteria
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E3emplo$- vectores pl
una pequecontiene un un gen queampicilina4!
restriccin4Epara insertapasa3ero4!".ector 0 los son usados %as bacteriaque contien;nicamente bacterias quson resisten
colonia de plsmido pu/acerse crecpara aisrecombinant
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+n grupo de fragmentos de !"# son ligados
plsmido de !"# pre.iamente dirigido med
una endonucleasa de restriccin$ %as molcu
!"# recombinantes resultantes se empleacontinuacin para transformar E$ coli$
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%as colonias resistentes a antibiticos* que contiene el !"# plasmidico*
son seleccionadas$ Puesto que cada plsmido recombinante da lugar q
una sola colonia resistente a antibiticos* las bacterias presentes en unacualquiera de estas colonias contendrn su ;nico inserto de !"#c$
%as bacterias que contengan el plsmido de inters pueden
grandes cantidades 0 e)tr
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En determinados estudios de anlisis de !"# genmico es preciso clonar fragme!"# ma0ores de lo que un fago puede portar$ E)isten < tipos principales de .
empleados con este fin:
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